孙瑜;许永志;林月云
目的 首次建立同时对腐乳中的6种黄曲霉毒素进行定性和定量分析的超高效液相色谱三重四极杆质谱确证方法.方法 样品用84/16的乙腈/水混合匀桨超声提取3min,上清液过免疫亲和柱净化富集,经过Agilent ZORBAXSB C-18色谱柱分离,以乙腈和10 mmol乙酸铵溶液为流动相,梯度洗脱,进行UHPLC/MS/MS分析.质谱采用正离子扫描模式,离子源为ESI(+),定量检测方式为多反应监测(MRM)方式,利用保留时间和碎片信号比值判定定性结果.结果 标准曲线的线性范围分别是:AFTB1:0.1μg/kg~10.0 μg/kg,AFT B2:0.1 μg/kg ~ 20.0 μg/kg,AFT G1:1.0 μg/kg ~ 10 μg/kg,AFT G2:1.0 μg/kg ~ 10.0 μg/kg,AFT M1:0.1μg/kg~10.0 μg/kg,AFT M2:1.0 μg/kg ~10.0μg/kg.6种黄曲霉毒素的加样平均回收率为:80.1% ~ 85.3%,相对标准偏差为2.3% ~9.5%.结论 本实验方法专属性强,灵敏度高,操作简单,快捷,可做腐乳中黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2、M1、M2)的检测方法.
作者:高何刚;陈理;王若燕;杜赛;任一平 刊期: 2014年第05期
目的 建立祛痘除螨以及抗粉刺类化妆品中林可霉素和克林霉素的测定方法.方法 样品用甲醇+0.1 mol/L盐酸=1+1的混合溶液超声提取,石油醚(30℃~60℃)萃取,下层溶液离心过滤后,滤液用高效液相色谱-二极管阵列检测器进行分离,外标法进行定量,阳性样品用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱进行确证.采用Agilent ZorbaxSB-C18色谱柱(25 cm ×0.46 cm,5μm),流动相A为乙腈,流动相B为0.2%磷酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长为210 nm,柱温30℃.结果 林可霉素和克林霉素在1μg/ml~50 μg/ml浓度范围内线性关系良好,r>0.999.平均加样回收率分别为99.1%和97.8%,低检出浓度分别为20 μg/g和10μg/g.结论 该方法快速简便、可用于化妆品中违法添加林可霉素和克林霉素的快速检查,为化妆品的安全监督提供技术服务.
作者:郑荣;王柯 刊期: 2014年第05期
目的 探讨常规血液检测中红细胞和血小板参数的变化在恶性疟疾感染疾病诊断中的应用价值.方法 用ABX micros 60血细胞分析仪检测160例恶性疟疾确诊患者和160名健康对照者的RBC、Hb、HCT、PLT、MPV等红细胞和血小板的11项参数,并进行对比分析.结果 恶性疟组RBC、Hb、HCT、MCV、PLT、PCT和PDW等7个参数值均低于健康对照组,差异具有统计学意义(P<0.01),两组MCH、MCHC、RDW以及MPV 4项指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 将RBC、Hb下降以及PLT计数下降作为恶性疟疾感染诊断的辅助指标,将为疟原虫感染的诊断提供有价值的参考.
作者:徐正才;祝进;陈水芳 刊期: 2014年第05期
目的 了解EV71病毒传代稳定性,为手足口病的疫苗研究及预防提供参考依据.方法 将TZ35号EV71病毒株在Vero细胞连续传20代,对第1代、第20代毒株致细胞病变、感染细胞免疫荧光染色、病毒感染力、VP1基因核苷酸序列及氨基酸序列进行比对分析.结果 TZ35号EV71病毒在Vero细胞中连续传20代,其致细胞病变特点、感染细胞免疫荧光染色特点没有明显改变;VP1基因核苷酸序列没有改变;第1代、第20代CCID50/ml分别为5.5、7.25.结论 EV71病毒在Vero细胞中连续传20代,其生物学特性没有明显改变,VP1区基因序列没有改变,提示同一病毒株的遗传是相对稳定的.
作者:郑官增;李桂霞;裘丹红;沈伟伟;王金富;郑翔 刊期: 2014年第05期
目的 了解重症监护室(ICU)鲍曼不动杆菌(ABA)感染的临床分布及其耐药变迁,为临床ICU治疗及预防鲍曼不动杆菌感染提供依据.方法 回顾分析本院2008年-2011年ICU所分离出的鲍曼不动杆菌的耐药率及变化趋势.结果 2008年-2011年ICU鲍曼不动杆菌分离率有逐年增多趋势,该菌大多来自痰及咽拭子标本.该菌2008年-2011年耐药率总体呈上升趋势,耐药率上升明显的是头孢曲松,从60.51%上升到98.72%,至2011年除阿米卡星,米诺环素和头孢哌酮(舒巴坦)3种抗菌药物外,耐药率均大于50%.结论 ICU内鲍曼不动杆菌耐药现象呈明显上升趋势,多重耐药鲍曼不动杆菌逐年增多,应重视多重耐药菌的预防隔离工作,防止交叉感染的发生,参照药敏结果合理选择使用抗菌药物.
作者:王冬莲;阮奕;金敏雅;何小帆;余素飞 刊期: 2014年第05期
能力验证(PT)是指利用实验室间比对来确定实验室检测/校准能力的活动,是实验室检测结果外部质量控制的一种手段,通常用Z比分数对实验室检测结果进行评价.为保证食品风险监测结果的可靠性,向社会证实本单位的检测能力和识别检测结果中可能存在的问题,本单位近几年数次参加PT活动.但却发现了一个问题:一个测定结果满足方法学质量要求而用Z比分数评价则为“不满意”.就此事件,利用本单位近期参加CNAS授权的某单位组织的一些检测项目的能力验证活动资料,作了资料整理、分析工作;用两种评价方法评价测量结果,探讨“不满意”的成因.
作者:胡建英;李倩;高贵桃;赵玉婷 刊期: 2014年第05期
目的 分析广州市海珠区2008年-2012年手足口病流行病学特征,为手足口病防治工作提供科学依据.方法 运用描述性流行病学方法,对海珠区2008年-2012年网络直报的手足口病人流行病学资料进行分析.结果 2008年-2012年全区共报告手足口病例15051例,年平均发病率198.21/10万,发病时间主要集中在4月-7月,男性病例多于女性,发病年龄段主要集中在5岁以内,以散居儿童居多.海珠区2008年-2012年手足口病病毒以其它肠道病毒居多,占42.01%,其次是Cox A16,占34.20%,后是EV71型,占23.79%.各年份间的病原构成差异统计学意义.结论 手足口病有明显的年龄、性别、季节差异.
作者:王国玲;谭锦花;刘青连;甘标;陆家海 刊期: 2014年第05期
目的 观察血常规与超敏C反应蛋白(CRP)联合检测对小儿支原体肺炎患者的临床意义,为临床治疗提供科学依据.方法 采用回顾性分析方法,选择321例已确诊的小儿支原体肺炎患者作为观察组,同期另选300例健康儿童作为对照组;采用全自动血液分析仪检测血常规;免疫散射比浊法检测超敏CRP水平;并进行统计学分析.结果 观察组患者中性粒细胞比例、中性粒细胞绝对值、单核细胞比例、单核细胞绝对值、超敏CRP水平显著高于对照组;淋巴细胞比例、淋巴细胞绝对值低于对照组;差异均有统计学意义(P <0.05或P<0.01);联合检测血常规与超敏CRP阳性率显著高于单项检测,差异均有统计学意义(P<0.01).结论 血清超敏CRP指标对小儿支原体肺炎患者有较好的临床诊断价值,联合检测血常规与超敏CRP水平变化对小儿支原体肺炎患者可以提高其诊断的阳性率及准确率,对病情监测具有现实意义.
作者:方芳;余本芳;孙兴龙 刊期: 2014年第05期
目的 研究实时荧光定量反转录-聚合酶链(Real-timeRT-PCR)检测新型布尼亚病毒的方法,用于新布尼亚病毒的核酸检测,为发热伴血小板减少综合征(SFTS)的早期诊断提供科学依据.方法 以新布尼亚病毒L基因为靶基因设计引物以及TaqMan探针,建立Real-timeRT-PCR方法,并对岱山县72份临床疑似病人血清、血浆、30份正常人群血清进行了检测鉴定,并验证了方法的特异性、敏感性和重复性.结果 建立的Real-time RT-PCR具有良好的特异性和敏感性,CV< 1.0%.在102份检测标本中,72份临床疑似病人血清、血浆,阳性48份,30份正常人群血清阴性.结论 本研究建立的Real-time RT-PCR方法具有较高的特异性、敏感性和重复性,可用于新布尼亚病毒核酸的快速检测、在发热伴血小板减少综合征的早期诊断上具有重要意义.
作者:虞吉寅;王忠发;任宜;毛和英 刊期: 2014年第05期
目的 探讨CRP、LACT、GLU在不同类型损伤中的应用.方法 收集118例颅脑外伤(轻度32、中度30、重度31、特重度25)、45例骨折、93例肺炎(轻型42例、中型30例、重型21例)、38例急性心梗及50例健康者全血和血清,检测血C反应蛋白(CRP)、乳酸(LACT)和葡萄糖(GLU).结果 (1)CRP、LACT、GLU水平:与对照组相比,除肺炎组GLU水平差异无统计学意义(P>0.05)外,各实验组明显高于对照组(P<0.05),以颅脑损伤组为明显.(2)颅脑损伤组CRP、LACT、GLU水平与病情成正相关,特重型组患者血CRP、LACT、GLU升高幅度大.(3)中、重型肺炎组CRP、LACT水平明显高于轻型肺炎组(P<0.05),重型肺炎组CRP、LACT水平高于中型肺炎组(P<0.05),而GLU水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 血CRP、LACT、GLU可作为机体损伤和严重程度的指标.
作者:孙瑜;许永志;林月云 刊期: 2014年第05期
盐酸克伦特罗是一种β2-肾上腺素受体激动剂,商品名为氨哮素、克喘素,是儿茶酚胺的一种衍生物,俗称“瘦肉精”[1].随着盐酸克伦特罗在畜牧生产中的应用,人们发现能在动物体内蓄积残留,导致食物中毒[2].1989年,西班牙先发生盐酸克伦特罗中毒事件,此次中毒事件是由于食用的牛肝中盐酸克伦特罗含量达160 μg/kg~291 μg/kg.2001年11月7日广东河源690多名市民食用猪肉后发生盐酸克伦特罗中毒,这是国内同类事件中中毒人数多的一起.到目前为止,全国多个地区都有过盐酸克伦特罗中毒事件的报道[3].
作者:刘达雄 刊期: 2014年第05期
目的 建立以毛细管气相色谱法测定生活饮用水中痕量有机磷农药残留.方法 采用2次液液萃取,氮吹浓缩后,以毛细管柱气相色谱法-火焰光度检测器(CGC/FPD)定性,外标法定量分析测定了生活饮用水中的7种痕量有机磷农药残留.结果 研究了7种有机磷农药的气相色谱法(CGC-FPD)的分析条件;结果表明,以二氯甲烷为萃取剂,在0.04 μg/ml ~2.00 μg/ml线性范围内,线性系数r大于0.999,平均加标回收率的范围为72.8%~111.3%,其相对标准偏差(RSD)为1.429%~5.894%,方法的低检测限为0.25 μg/L~ 2.50 μg/L(以100 ml水样计).结论 建立2次溶液萃取,毛细管柱气相色谱法-火焰光度检测器(CGC/FPD)测定生活饮用水中的有机磷农药残留,选择性好,回收率高,定量分析结果准确.
作者:刘兰侠;张燕;陈翔;倪蓉 刊期: 2014年第05期
目的 建立高分辨率熔解(HRM)技术检测人类白细胞抗原G(HLA-G) 14 bp插入/缺失突变的方法,并初步探讨其临床应用价值.方法 对HRM进行方法学评价.对100例EV71感染重症手足口病(HFMD)患儿、80例EBV感染传染性单核细胞增多症(IM)患儿和100例对照组进行HLA-G 14 bp插入/缺失突变的检测;用聚合酶链反应结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PCR-PAGE)法和产物测序法验证HRM分型.结果 不同基因型HRM检测的批内、批间熔解温度(Tm)值的变异系数(CV)均<0.1%;HRM与PAGE及直接测序所得基因型相符.100份EV71感染HFMD患儿DNA样本经检测,10份为14 bp+/+纯合子基因型,42份为14 bp+/-杂合子基因型,48份为14 bp-/-纯合子基因型,与对照组比较差别有统计学意义(x2=6.181,P<0.05),80份EBV感染IM患儿DNA样本与对照组比较差别亦有统计学意义(x2=8.531,P<0.05).结论 本研究建立的HRM技术可用于HLA-G 14 bp插入/缺失基因突变的检测.
作者:陈晓晴;余玲玲;王慧燕;田可港;郑晓群 刊期: 2014年第05期
目的 旨在加强宁波口岸新发或再发蚊媒传染病及其媒介生物监测与预防控制工作,为国际卫生港的创建奠定坚实的基础.方法 利用SQLite Expert Professional 2.3等工具开发出智能EMS-MDV应急管理系统.结果 通过本系统实时浏览宁波口岸2006年-2012年蚊媒传染病登革热、疟疾、流行性乙型脑炎历史资料,充分掌握当地蚊种组成、空间动态分布、带毒率概况、典型分类识别等信息.结论 通过EMS-MDV管理系统及时探究当地蚊媒传染病暴发流行与媒介生物致病机制以及内在沟联,从而增强该地区新发或再发蚊媒传染病预警预测能力,开创宁波口岸蚊媒传染病及其传播媒介应急防控新局面.
作者:杨天赐;张晓斌;董善定;张升;荣德福;吴薇 刊期: 2014年第05期
目的 建立了一种用于淀粉制品中顺丁烯二酸含量的气相色谱-质谱联用检测方法.方法 采用乙醇提取样品,超声萃取,高速离心后吸取上层清液,上层清液用三氟化硼乙醚溶液乙酯化处理,冷却后用正己烷萃取,气质联用选择离子方式(GC-MS-SIM)检测样品提取物中的顺丁烯二酸.结果 该方法在淀粉、贡丸、米线、QQ糖等几类淀粉制品中顺丁烯二酸的加标回收率在89%~ 99%之间,相对标准偏差(RSD)<10%,按取样2.0g计算,低检测限达到1.0 mg/kg.结论 方法净化效果好,检测灵敏度、准确度均满足检测要求,具有操作简单、干扰少、快速、准确可靠等特点,可作为淀粉制品中顺丁烯二酸含量检测的确证方法.为市场监管提供良好的基础数据.
作者:王立媛;吴平谷;张晶;汤鋆;赵永信;沈向红 刊期: 2014年第05期
目的 建立气相色谱-质谱联用法(GC-MS)同时测定生姜中15种有机氯及氨基甲酸酯类农药残留量的检测方法.方法 将生姜粉碎匀浆,称取一定量的试样,经过超声提取、离心取上清液、浓缩、净化、定容后,用GC-MS的选择离子检测(sim)方式进样测定.结果 DB-1701毛细管柱对10种有机氯及5种氨基甲酸酯类农药能达到很好的分离效果,均能达到基线分离.而DB-5分离效果不理想,仲丁威和残杀威、P,P'-DDD和O,P'-DDT无法达到基线分离,甲萘威和七氯色谱峰完全重合.用DB-1701毛细管柱进行检测时方法低检出浓度为0.003 mg/kg ~0.006 mg/kg(取样量为10.000 g计算),回收率为79.3%~ 117%,精密度范围为3.02%~5.2%.结论 该方法快速,简便,能获得满意的分离效果,各方面均满足方法学要求,完全适合于生姜中多种有机氯及氨基甲酸酯类农药残留的同时测定.
作者:孙卫明;王权帅 刊期: 2014年第05期
目的 研究耐碳青霉烯类抗生素产气肠杆菌的耐药情况及产碳青霉烯酶基因型.方法 对临床分离的25株碳青霉烯类产气肠杆菌,采用Hodge试验筛选产碳青霉烯酶菌株,PCR扩增分析其基因型,用肠杆菌基因间重复一致序列.聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行基因分型.结果 药敏试验显示25株产气肠杆菌具有对第三、四代头孢菌素、碳青霉烯类、氟喹诺酮类等多重耐药.其中有16株Hodge试验阳性,PCR结果8株产气肠杆菌携带blaKPC,未扩出blaIMP、blaVIM、blaGIM、blaSIM基因条带.25株菌株分为18个谱型,其中6株属同一谱型的产气肠杆菌均来源于ICU.结论 本次筛检的25株碳青霉烯类耐药的产气肠杆菌主要型别是KPC,是引起其对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,且在ICU局部流行.
作者:厉世笑;周鹏;陈千千;余素飞;沈波 刊期: 2014年第05期
目的 通过对空气净化器除菌性能检测中液体撞击式和固体撞击式采样法的分析和比较,探讨合理的采样方法.方法 分别用两种采样方法采集30立方米负压气雾室的空气中自然菌和白色葡萄球菌气溶胶,对采样结果进行统计分析.结果 两种采样方法对空气自然菌的采样结果的差异性不显著;两种采样方法对人为释放的微生物气溶胶的采样结果存在显著性差异,平板采样法的敏感度较高,其中在初始浓度的气溶胶采集中,两组结果具有显著的相关性,线性回归关系极显著.结论 人工微生物气溶胶的环境稳定性差,在液体采样过程中消亡率高;在空气净化器除菌性能检测中,可用液体撞击式采样法采集气雾室0h微生物气溶胶.
作者:杨础华 刊期: 2014年第05期
目的 调查医院肺炎链球菌及多重耐药菌株的临床分离和分布及耐药情况,为临床用药提供依据.方法 对2008年1月-2012年12月浙江萧山医院临床分离的肺炎链球菌,用ATB药敏板条测定抗菌药物的敏感性,所有数据用WHONET 5.6软件进行回顾性分析.结果 共检出肺炎链球菌113株,红霉素耐药率高,达89.4%、四环素87.4%、克林霉素82.4%,复方新诺明56.3%,未检出万古霉素耐药株;多重耐药株占78.8%;儿童感染菌株中的耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)占47.8%,高于成人(21.2%);PRSP和青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP)菌株耐药率比较:青霉素、阿莫西林等药物间差异有统计学意义(P<0.05);儿童与成人耐药率比较,青霉素、阿莫西林、头孢噻肟、复方新诺明和克林霉素间差异有统计学意义(P<0.05).结论 红霉素、四环素和克林霉素耐药率高而不宜用于肺炎链球菌感染的治疗,复方新诺明应慎重用于经验治疗;MDR比例较高,青霉素类和头孢类抗生素耐药率总体呈现上升趋势,临床应重视细菌培养,根据药敏合理使用抗菌药物,防止耐药菌株的播散和流行.
作者:郭远瑜;王红旗;窦琳琳;杨国绘;管洁颖 刊期: 2014年第05期
目的 观察L型变异对结核分枝杆菌耐药性的影响.方法 将结核分枝杆菌H37Rv细菌型诱导为L型菌株;分离临床标本中的结核分枝杆菌L型菌株.观察结核分枝杆菌L型对一线抗结核药物的敏感性;提取诱导和临床分离的结核分枝杆菌L型菌株的DNA,进行耐药相关基因测序,分析其与结核分枝杆菌L型表型变异的关系.结果 诱导结核分枝杆菌标准菌株H37Rv形成的L型对异烟肼、利福平、乙胺丁醇和链霉素均耐药.诱导的L型的基因型与结核分枝杆菌标准菌株H37Rv一致,没有发生改变.临床分离株表现出更为复杂的耐药性.结论 结核分枝杆菌L型的表型变异可以造成结核分枝杆菌的耐药性增加,结核分枝杆菌L型的表型变异与其耐药性相关.
作者:朱明利;朱丽;柳正卫;何海波;张艳;刘寿荣 刊期: 2014年第05期