学术投稿

2型单纯疱疹病毒糖蛋白G基因片段的表达及其抗原性分析

刘涛;刘继峰;斯国静;俞骅;胡俊;李钧

关键词:单纯疱疹病毒2型, 糖蛋白G, Bac-to-Bac杆状病毒表达系统, 酶联免疫吸附
摘要:目的 获得单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G(gG2)免疫优势片段gG321-580并初步研究其抗原性.方法 PCR扩增gG321-580基因,利用Bac-to-Bac表达系统表达gG321-580His融合蛋白,Western blot和间接ELISA鉴定蛋白活性.结果 在Sf9细胞中成功表达HSV-2 gG321-580His蛋白,gG321-580His能与小鼠抗HSV-2 gG2单抗结合,在60 KDa附近出现特异性结合条带,ELISA分析初步证实gG321-580His能够与HSV-2阳性血清反应,而不与HSV-1阳性血清和正常人血清反应.结论 gG321-580His蛋白获得成功表达,ELISA检测显示其具有良好的抗原性,为研究以gG321-580蛋白作为靶区域的HSV-2型特异性诊断试剂盒打下实验基础.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 血清CA125和HE4在妇科肿瘤中的诊断价值

    目的 回顾性分析血清CA125和HE4在妇科肿瘤中的表达情况,为临床诊治提供参考依据.方法 统计分析2011年1月-6月在本院手术治疗的98例妇科肿瘤患者血清的CA125和HE4检测结果,其中卵巢癌52例,宫颈癌12例,子宫内膜癌24例,良性肿瘤8例,计算CA125和HE4在不同类型的妇科肿瘤中的阳性率.结果 CA125和HE4在卵巢癌组的阳性率分别为48.1%和26.9%、在宫颈癌组为6%和0%、在子宫内膜癌组为25.0%和16.7%、在良性肿瘤组为50%和0%.结论 CA125和HE4在不同类型的妇科肿瘤中表达不同,卵巢癌中表达高,子宫内膜癌次之,在宫颈癌中表达低;CA125在妇科恶性肿瘤中表达的阳性率高于HE4,在妇科良性肿瘤中的阳性率也高于HE4.

    作者:贾晓娟;韩军;文倩;柳瑛;袁彬;施常备 刊期: 2013年第12期

  • 动物源产品中β-兴奋剂残留状况与防控分析

    目的 动物源产品中β-兴奋剂残留状况与防控分析.方法 应用气质联用法对生猪尿液、毛发和肝脏中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、西马特罗和特步它林等5种常见β-兴奋剂进行定性定量分析,从残留结果分析β-兴奋剂的使用状况.结果 在215份检测样品中,检出克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺等3种β-兴奋剂,未检出西马特罗、特步它林,阳性率为16.7%,尿样、肝脏和毛发中阳性率分别为16.3%、17.4%和16.7%,存在克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇混合使用、用量和用期混乱现象.结论 违法使用现象屡禁不止,建立完善的兽药残留监控体系,对动物源产品进行全程监控,确实遏制β-兴奋剂的使用,保障食品安全.

    作者:郭萍;陈建安;张景平;谢恺 刊期: 2013年第12期

  • 多种肠球菌污染引起的肠球菌性食物中毒的实验室调查分析

    目的 近年来国内肠球菌性食物中毒事件少见报道,为加强对其的认知程度,预防食源性疾病的发生,本文对一起引发169人发病的食物中毒事件及其病原菌进行调查分析.方法 结合流行病学调查资料,对重症病人肛拭和可疑食物进行实验室检验.结果 肠球菌在重症病人肛拭和可疑食物中均表现为优势菌且未检出其他常见致病菌,通过进一步鉴定,在重症病人肛拭和可疑食物中均检出相同种的屎肠球菌和鹑鸡肠球菌,重症病人肛拭还检出铅黄肠球菌.结论 为保障食品安全,肠球菌污染食品以及肠球菌性食物中毒暴发应予以重视.

    作者:杨毓环;马群飞;洪锦春 刊期: 2013年第12期

  • 蒙古扁桃叶片和柄扁桃叶片中微量元素分析研究

    目的 测定并比较蒙古扁桃叶片和柄扁桃叶片中Ca,Mg,Fe,Mn,Cu和Zn 6种微量元素含量.方法 湿法消解样品,采用火焰原子吸收分光光谱法(FAAS)测定,应用SPSS15.0软件对所得数据统计分析.结果 6种元素线性关系良好,相关系数均大于0.999,相对标准偏差为:0.43% ~ 1.75%,加标回收率为94% ~107%.元素含量为蒙古扁桃叶片Ca> Mg> Fe> Zn> Mn> Cu,柄扁桃叶片Ca> Mg >Fe> Mn >Zn> Cu;统计学分析表明,蒙古扁桃叶片和柄扁桃叶片中6种元素含量均存在显著性差异(P<0.05),其中蒙古扁桃叶片中Ca、Mg、Zn、Cu的含量高于柄扁桃叶片.结论 该方法快速、简便、数据准确可靠,为蒙古扁桃和柄扁桃的综合开发利用提供科学依据.

    作者:钮树芳;石松利;张桂莲;周红兵;白迎春 刊期: 2013年第12期

  • 成都市在园儿童手足口病病原携带情况调查

    目的 了解成都市不同托幼机构在园儿童手足口病常见病原携带情况,为分析手足口病发病规律、科学防控提供基础数据和科学依据.方法 采用分层随机抽样,采集不同经济圈层、不同季节、城镇与农村托幼机构健康在园儿童549份咽拭子,以荧光PCR检测手足口病相关病毒:肠道病毒通用(EV)、柯萨奇病毒A16型(CA16)、肠道病毒71型(EV71).结果 核酸结果显示,549份样品中检出EV71阳性9份(阳性率1.63%),其他肠道病毒27份(阳性率4.92%),未检出CA16,总阳性率6.6%.统计学分析结果显示,城镇与农村差异不显著(x2=0.080,P =0.777>0.05),性别差异不显著(x2 =0.097,P =0.756>0.05),但经济圈层和流行季节有差异(前者x2=4.497,P=0.034<0.05;后者x 2 =5.925,P =0.0.015< 0.05).结论 成都市在园儿童手足口病病原携带率在不同经济圈层和不同季节有所差异,可能与发病有关,应有针对性的开展防控工作.

    作者:陈恒;黄薇;杨才彬;张晓春;谭柯;孟建彤 刊期: 2013年第12期

  • 杭白菊与阿克拉霉素联合应用增强白血病细胞凋亡及机制研究

    目的 探讨杭白菊与阿克拉霉素联合应用对白血病HL-60细胞诱导凋亡作用及机制.方法 实验分组:(1)空白对照组,(2-4)不同浓度阿克拉霉素(0.05μg/ml、0.10μg/ml、0.25 μg/ml)处理HL-60;(5)高浓度(500 μM)的杭白菊处理;(6-8)不同浓度的杭白菊(10μM、100 μM、500 μM)与阿克拉霉素(0.1 g/ml)联合处理.20h后流式细胞技术检测凋亡率,用Western blot分析COX-2、caspase 3、caspase 9和NF-KB蛋白表达.结果 不同浓度阿克拉霉素诱导的凋亡率与空白组相似(P>0.05);不同浓度的杭白菊与阿克拉霉素联合处理,凋亡率明显增加(P<0.01).杭白菊联合阿克拉霉素时caspase 3、caspase 9的表达明显升高,Cox-2和NF-κB的活性明显被抑制,与杭白菊浓度成正比(P<0.01).结论 杭白菊增强阿克拉霉素对HL-60细胞的诱导凋亡作用,以及抑制COX-2和增强caspase 3、caspase 9的表达,这是通过杭白菊增强对NF-κB活性的抑制作用而实现的.

    作者:陈刚;王剑超;赵洪灿;姚航平;范剑;童向民 刊期: 2013年第12期

  • 实时荧光定量PCR法测定has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p在不同HPV感染的宫颈癌细胞中的表达

    目的 探讨has-miR-429、has-miR-127-3 p及has-miR127-5 p在不同宫颈癌细胞中的表达水平.方法 用SiHa、Hela和C33A三种宫颈癌细胞株,提取和纯化mRNA,逆转录成cDNA,在测定佳反应条件后,采用实时荧光定量PCR技术测定has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p的表达情况,结合内参U6进行相对定量分析.结果 miR-429、miR-127-3p及miR127-5p在SiHa细胞相对于Hela细胞表达为(0.0031 ±0.0002),(59.3786 ±3.7024)和(0.0524±0.0148),相对于C33A细胞表达为(0.0059±0.0005),(15.5625±1.2780)和(0.0334±0.0103).结论 has-miR-429、has-miR-127-3p及has-miR127-5p可能与宫颈癌的HPV感染相关.

    作者:姚婷婷;刘秀婷;张定梅;禹夜;林仲秋 刊期: 2013年第12期

  • 我国茶叶中稀土元素检测技术的研究进展

    茶叶是全球三大天然饮料之一,富含茶多酚、生物碱和多种微量元素[1],具有诸多的保健功能,又富有深厚的文化内涵.正是因为茶叶产品的独特性,使之成为消费者和媒体关注的对象,尤其是茶叶的安全质量已成为焦点.由于稀土之特殊的理化性质使其在茶叶生产中得到越来越多的应用,人们在关注茶叶中农残、重金属残留的同时,也越来越关注茶叶中稀土的检测及标准限量问题,这在一定程度上也推动了稀土中各种新型检测技术的应用和普及.本文就近年来茶叶中稀土分析方法的研究发展进行综述.

    作者:骆和东;王文伟;王婷婷 刊期: 2013年第12期

  • HPLC法同时测定尿样中苯、甲苯的4种代谢产物

    目的 建立高效液相色谱/二极管阵列检测法同时测定尿样中马尿酸、(邻,间,对)-甲基马尿酸含量的方法.方法 以0.5ml乙酸乙酯为萃取溶剂,样品用量0.5 ml,NaCl加入量75 mg,萃取时间3 min,以1000 r/min速度离心5 min,取0.4 ml萃取剂于具塞试管在低于70℃水浴中挥发至干,用1.0ml流动相溶解残留物,分析条件:柱温35℃,流动相(甲醇∶水∶冰乙酸=30∶70∶0.1)波长235 nm,实现了4种代谢物的有效分离.结果 在优化条件下,4种待测组分在20 mg/L~ 500 mg/L范围内呈线性,相关系数(r)均不低于0.9997,检出限(S/N=3)为21 μg/L~200 μg/L;样品的平均加标回收率为97% ~ 104%,相对标准偏差(RSD)小于5%.结论 该方法确定了佳样品预处理条件,优化了色谱分离及检测条件,灵敏、准确,能够满足有害物质代谢产物的监测要求.

    作者:肖润梅;孙敬智;梅勇;刘婕;陈勇 刊期: 2013年第12期

  • 2型单纯疱疹病毒糖蛋白G基因片段的表达及其抗原性分析

    目的 获得单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G(gG2)免疫优势片段gG321-580并初步研究其抗原性.方法 PCR扩增gG321-580基因,利用Bac-to-Bac表达系统表达gG321-580His融合蛋白,Western blot和间接ELISA鉴定蛋白活性.结果 在Sf9细胞中成功表达HSV-2 gG321-580His蛋白,gG321-580His能与小鼠抗HSV-2 gG2单抗结合,在60 KDa附近出现特异性结合条带,ELISA分析初步证实gG321-580His能够与HSV-2阳性血清反应,而不与HSV-1阳性血清和正常人血清反应.结论 gG321-580His蛋白获得成功表达,ELISA检测显示其具有良好的抗原性,为研究以gG321-580蛋白作为靶区域的HSV-2型特异性诊断试剂盒打下实验基础.

    作者:刘涛;刘继峰;斯国静;俞骅;胡俊;李钧 刊期: 2013年第12期

  • 江苏省2012年健康人群麻疹-风疹-腮腺炎IgG抗体水平监测分析

    目的 了解和掌握江苏省不同年龄组健康人群的麻疹、风疹、腮腺炎免疫现状,对其抗体水平进行监测,并结合当年麻疹、风疹、腮腺炎发病率,为麻疹、风疹、腮腺炎控制提供依据.方法 选择江苏省3个市健康人群,按年龄分为0月龄~7月龄,8月龄~ 17月龄,1.5岁~2岁,3岁~4岁,5岁~6岁,7岁~9岁,10岁~14岁,15岁~19岁,20岁以上,流动人口20岁以上,共10个年龄段.使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测麻疹、风疹、腮腺炎IgG抗体并计算其抗体阳性率、几何平均浓度(Geometric Mean Concentration,GMC).结果 检测标本1502例,每例完成麻疹、风疹、腮腺炎IgG三个项目的检测,各年龄组之间麻疹、风疹、腮腺炎抗体阳性率差异有统计学意义.各年龄组之间麻疹、风疹、腮腺炎抗体GMC差异有统计学意义.结论 江苏省健康人群的麻疹、风疹抗体阳性率较高,发生大范围的暴发或流行的风险较低,但个别地区的个别年龄组阳性率较低,需加强免疫;腮腺炎抗体阳性率较低,在个别年龄组需要加强免疫,或调整现有免疫策略.

    作者:胡莹;陆培善;邓秀英;刘元宝;冷红英;吴昀 刊期: 2013年第12期

  • 化学原子化-原子吸收光谱法测定香菇中镉的检测条件研究

    目的 探讨化学原子化-原子吸收光谱法测定食品香菇中镉元素的检测条件.方法 采用PE-AA400原子吸收分光光度计,MCA-201微型化学原子化器,波长228.8 nm,狭缝2.7 mm/1.35 mm,灯电流4mA,载气氩气的流速1.1 L/min;采用均匀试验法,考察盐酸浓度、硼氢化钠溶液浓度、氢氧化钠溶液浓度、镉增敏试剂量对检测结果的影响.结果 影响大小:盐酸浓度>氢氧化钠溶液浓度.结论 佳检测条件:盐酸浓度:4%、氢氧化钠溶液浓度:0.4%.

    作者:罗亚虹;唐燏峰;刘利敏;李琦;龚治湘 刊期: 2013年第12期

  • 2007年-2011年甘肃省即食食品中金黄色葡萄球菌监测分析

    目的 对食源性致病菌金黄色葡萄球菌进行监测,了解甘肃省即食食品中金黄色葡萄球菌的污染状况及分布,并确定高危即食食品的种类.方法 中国疾病预防控制中心营养与食品安全所建立的全国食品污染物监测网的食源性致病菌监测部分,2007年-2011年从甘肃省十四个市州农贸市场、超市及酒店餐馆采样并监测九大类食品,共计4634份.结果 4634份9类产品中共检出金黄色葡萄球菌304株,总出率为6.56%,检出率在3.00% ~ 9.04%之间;不同食品均有检出;不同季节无显著性差异;全省14个市州,检出率在3.11%~13.44%.结论 甘肃省即食食品中金黄色葡萄球菌的污染严重,十四个地市中武威、白银、陇南检出率较高,九大类食中冰激凌、凉拌菜、地方特色米面污染金黄色葡萄球菌严重,是重要的危险食品.

    作者:胡晓宁;苏诚玉;权玉玲 刊期: 2013年第12期

  • 清远市钩端螺旋体病血清学监测结果分析

    目的 了解清远市钩端螺旋体病抗体(钩体抗体)在健康人群及宿主动物血清中的水平及菌群分布情况,为制定钩端螺旋体病防治措施提供科学依据.方法 采用显微镜凝集试验(MAT)对采集的健康人血清和动物血清进行检测.结果 2007年-2011年采集健康人血清、宿主动物中鼠类、鸭、犬血清,钩体抗体平均阳性率分别为16.53%、23.95%、4.98%、12.15%;血清菌群分布:健康人群以秋季热为主、鼠类以拜伦群为主、鸭以七日热群为主、犬以秋季热群为主,鼠密度为8.66%,鼠种以褐家鼠为主.结论 清远市健康人群及鼠类血清钩体抗体水平有所下降;监测的三种宿主动物中,鼠类血清钩体抗体阳性率高,鼠类仍然是传播钩体病的主要传染源和重点监测对象;清远市鼠密度高,存在钩体病流行的风险.

    作者:邓远玲;孙小康;陈文青;罗文玲;李桂杭;朱劲涛 刊期: 2013年第12期

  • 4666例急性农药中毒流行病学分析

    目的 分析4666例急性农药中毒情况,为制定防治对策提供科学依据.方法 通过中国疾病预防控制信息报告网络平台,收集杭州市15个区、县(市)2006年-2011年农药中毒报告卡,采用SPSS 17.0软件进行统计分析.结果 ①2006年-2011年杭州市累计上报农药中毒总数4666例,死亡332例,病死率7.12%,其中非生产性农药中毒4067例,占中毒比例87.16%.②生产性农药中毒男性高于女性,男、女性别比例1∶0.34;非生产性农药中毒女性高于男性,男、女性比例1∶1.30.③杀虫剂是引起农药中毒的主要毒物,中毒例数为3818例,占总中毒例数的81.83%,其中又以有机磷农药中毒为主.④中毒地区以郊县农村为主,中毒4343例,占总数的93.08%.⑤生产性农药中毒季节性明显,以三季度高,占68.28%.结论 杭州市非生产性农药中毒情况严重,应积极采取并落实有效的控制措施.

    作者:郝莉;陈建春;张磊;周紫鸿;虞龙;沈卫星 刊期: 2013年第12期

  • 微波消解-原子荧光光谱法测定发中砷

    目的 建立发中砷的微波消解-原子荧光光谱测定法.方法 样品经微波消解后,原子荧光光谱法测定.结果:本法标准曲线相关系数为0.9995,相对标准偏差为1.78%~ 3.33%,回收率范围为94.7%~ 98.3%.结论:该法准确度、精密度良好、灵敏度高,是简便、快速、实用的测定发中砷的方法.

    作者:陈宇鸿;沈仁富 刊期: 2013年第12期

  • 留置尿管相关尿路感染病原菌分布和耐药性分析

    目的 调查和分析导尿管相关尿路感染(CAUTI)的病原菌分布及耐药性,为临床用药提供依据.方法 采用回顾性调查方法,利用WHONET 5.6对浙江萧山医院2011年1月-2012年12月住院期间接受留置导尿患者的尿路感染发生情况进行分析.结果 分离病原菌共309株(39种),其中革兰阴性菌174株(56.3%),革兰阳性菌64株(20.7%),真菌71株(23.0%);列前三位的是大肠埃希菌88株(28.5%)、肺炎克雷伯菌34株(11.0%)和白色念珠菌31株(10.0%).大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检出率分别为81.8% (72/88)和55.8%(19/34).亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星对大肠埃希菌显示较高抗菌活性(耐药率≤8.0%);5-氟胞嘧啶、伏立康唑和两性霉素B对念珠菌有较高的敏感率(≥98.6%).结论 CAUTI病原菌以革兰阴性杆菌尤其是大肠埃希菌为主,含酶抑制剂抗生素适合作为经验用药;应严格无菌操作和加强护理管理,缩短导尿管留置时间并合理使用抗生素.

    作者:董华丽;毛剑锋;沈利蒙;楚旭;张传领;郭远瑜 刊期: 2013年第12期

  • 氢化物原子荧光法测定饮用水中的锌

    目的 建立简便、灵敏、准确的饮用水中锌的测定方法.方法 采用氢化物原子荧光法测定饮用水中的锌.结果 方法的线性范围为0.0 μg/L ~ 800.0 μg/L,相关系数为0.9994,检出限为0.58 μg/L,相对标准偏差均小于2.0%,回收率在88.9% ~ 110.1%之间.结论 采用氢化物原子荧光法测定饮用水中的锌是可行的.

    作者:管克;陈建业;詹珍洁 刊期: 2013年第12期

  • 固相萃取-反相高效液相色谱法同时测定葡萄酒中7种合成色素

    目的 建立一种快速、高效、准确的同时测定葡萄酒中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红等7种合成色素的固相萃取-反相高效液相色谱(SPE-RP-HPLC)方法.方法 样品采用HLB固相萃取小柱进行净化、富集,在Kromasil C18柱(250 mm ×4.6 mm ×5 μm)色谱柱上以甲醇-乙酸铵水溶液(20.0 mmol/L)为流动相实现基线分离,采用多波长紫外检测.结果 7种合成色素在0.5 mg/L~ 50.0 mg/L范围内具有良好的线性(r2 >0.9995),检出限为0.04 mg/L~0.11 mg/L,低定量限为0.12 mg/L ~0.45 mg/L,RSDs为2.6%~8.2%;在加标水平为1.0 mg/L、5.0 mg/L与20.0 mg/L时,7种合成色素在葡萄酒样品中的加标回收率分别为90.2% ~ 99.6%、88.6% ~ 105.2%和89.6%~96.8%.结论 本法可用于葡萄酒中柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝、赤藓红等7种合成色素的测定.

    作者:李小平;赵永纲;陈晓红;潘胜东;姚珊珊;金米聪 刊期: 2013年第12期

  • 北京市HIV抗体检测室间比对发现问题分析

    目的 了解北京市所辖艾滋病筛查实验室室间比对HIV抗体检测能力差异.方法 制备不同浓度梯度的HIV抗体随机盲样,发放给各筛查实验室按要求进行HIV抗体检测.用SPSS 18.0软件计算离散指数.结果 98.8%以上的筛查实验室检测结果正确,并提供较完备和准确的检测原始记录、实验结果和复检化验单等记录文件.部分实验室在临界值计算或设置、质控图制作和弱阳性样本检测等方面存在问题和不足之处.结论 随机盲样HIV抗体检测室间比对表明北京市HIV抗体检测队伍过硬、检测结果准确可靠.考评中发现的问题和不规范操作有待于继续加强专业技术培训和实验室督导管理.

    作者:辛若雷;孙伟东;李佳;赵伟;苏雪丽;卢红艳 刊期: 2013年第12期

中国卫生检验杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会