钱国英;李纲
目的:建立一种特异、敏感的临床C肽的化学发光免疫分析诊断方法并应用于临床.方法:采用特异性的两株C-P单克隆抗体,辣根过氧化物鲁米诺酶促增敏化学发光体系,利用双抗体夹心法检测.结果:敏感度为0.02 μg/L;检测线性范围为0.02~20 μg/L;多人次检测证实试剂盒批内变异均小于10%,分析间变异小于15%;与18 μg/L人胰岛素原、2 000 mIU/L的人胰岛素无显著交叉反应.结论:该方法灵敏度高,特异性好,稳定性强,检测范围宽,有良好的准确性和重复性,适合应用于临床.
作者:钮心怡;路晟;孙旭东;江振友 刊期: 2007年第02期
目的:为快速、简便、灵敏地检测牛奶中土霉素、四环素、金霉素残留量,建立固相萃取(SPE)-高效液相色谱(HPLC)分析法.方法:样品用Mcllvaine缓冲液提取,硫酸锌-亚铁氰化钾体系沉淀蛋白质后,再经超声波提取,固相萃取,高效液相色谱法同时测定3种抗生素.固相萃取小柱为Waters Sep-Pak C18 Cart,洗脱液为甲醇柠檬酸溶液;色谱柱为Kromasil C18柱(5 μm,150 mm ×4.6 mm),流动相为乙腈:0.01 mol/L柠檬酸溶液=25:75(v/v,pH=2.5),流速0.4~0.8 ml/min,检测波长为355 nm.结果:本方法的低检出浓度分别为:土霉素(0.009 μg/ml)、四环素(0.007 μg/ml)、金霉素(0.034 μg/ml),标准曲线线性良好,其回归方程及相关系数r分别为:土霉素:Y=490379X-13947,r=0.9998;四环素:Y=454806X-17029,r=0.9995;金霉素:Y=156256X-20479,r=0.9996,回收率在86.5%~95.0%之间,相对标准偏差(n=6)小于3%.结论:该方法简单、快速、灵敏度高,适用于牛奶中四环素类抗生素残留量检测.
作者:蔡志斌;张英;刘丽 刊期: 2007年第02期
目的:建立特异、快速、灵敏的荧光定量RT-PCR方法用于副流感3型病毒核酸检测.方法:对副流感3型病毒的N基因应用ClustalW软件进行序列同源性比对,在保守区设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,并对荧光RT-PCR反应条件进行优化,验证方法的特异性,敏感性和稳定性,同时应用于疑似患者临床标本检测.结果:该方法对副流感3型病毒核酸检测有高度特异性,与副流感1、2、4型,甲型、乙型流感病毒,麻疹病毒,风疹病毒,腮腺炎病毒,呼吸道合胞病毒和腺病毒等均无交叉反应.检测的灵敏度达0.1TCID50,可从疑似患者含漱液标本中直接检出,从病毒核酸提取至完成检测仅需3 h左右.结论:本研究建立的TaqMan荧光定量RT-PCR是一种快速检测副流感3型病毒特异、敏感的方法,适用于临床早期诊断.
作者:徐昌平;严菊英;卢亦愚;史雯;茅海燕;陈小芳 刊期: 2007年第02期
目的:为了掌握副溶血性弧菌在海水产品中污染情况,以不同季节,定量检测副溶血性弧菌在海水产品中污染程度的动态变化,提出有效的控制措施,减少食物中毒的发生.方法:根据不同季节,从不同的农贸市场采取鱼类、虾类标本;采用MPN法进行副溶血性弧菌定量检测;并完成分离菌株血清型和毒力基因的检测.结果:副溶血性弧菌在海水产品中的污染有明显的季节性,并且与我省的细菌性食物中毒的发生季节基本一致;副溶血性弧菌的血清型分布以O4/O5/O1/O11血清型为主;海产品分离株,其携带TDH基因明显低于食物中毒标本中分离株.结论:通过检测分析,得出副溶菌在鱼虾等海产品中的污染具有明显的季节性,虾和鱼的污染密度也有差别(x2=12.40;P<0.05).而且检测的两类海产品中,高污染量的副溶菌对食品安全存在高风险.加强对TDH阳性副溶菌的检测,是控制副溶菌食物中毒发生的重要方面.
作者:程苏云;张俊彦;王赞信;童贵忠;孟真 刊期: 2007年第02期
目的:测定土壤、蔬菜和水果中5种硫丹类农药残留.方法:应用毛细管气相色谱法,程序升温,μ-ECD检测器,外标法定量.结果:该法线性范围为0.001~0.1 μg/ml,在此浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,方法的检出限为0.394~1.330 μg/kg,测定的回收率为64%~106%,相对标准偏差<14%.结论:所建立的方法简便、快速、灵敏度高,并具有良好的精密度与准确度.
作者:刘文杰;晋玉霞;马玲;庞新安;张利莉 刊期: 2007年第02期
目的:研制禽流感H7亚型检测的压电免疫蛋白芯片.方法:采用聚乙烯亚胺(PEI)粘附、戊二醛(Glu)交联的方法,将禽流感H9抗原固定于石英晶体的金电极表面.研究了敏感材料的浓度、pH值对其固定的影响.结果:该芯片用于检测浓度范围为0.123~1.23 mg/ml的禽流感H9血清时,呈线性相关,相关系数0.9854.结论:检测阳性样品的响应值与阴性样品的噪声值之比大于2,可用于定性定量检测.
作者:刘毅新;刘仲明;王弘;孙远明 刊期: 2007年第02期
目的:探讨铬天青S作显色剂利用分光光度法测定油条中铝的含量.方法:在pH 6.7~7.0近中性的体系中,铝在聚乙二醇辛基苯醚(OP)和溴代十六烷吡啶的存在下与铬天青S形成稳定的蓝色四元混合胶束,其吸光度与铝含量在一定浓度范围内成正比.结果:铝含量在0.5~8.0 μg/25 ml呈良好的线性关系,相关系数r=O.9996,回收率在90%~110%之间.结论:该方法操作简单,显色灵敏、稳定,可用于油条中铝的测定.
作者:徐明敏;陈波;陈武明 刊期: 2007年第02期
测定尿铅的方法有双硫腙分光光度法、电位溶出仪法、火焰原子吸收法、石墨炉原子吸收法.双硫腙分光光度法需要硝酸-高氯酸消化,在操作过程中,酸雾、有机溶剂、氰化钾等影响着操作人员的健康,而所用的玻璃仪器较多,用硝酸浸泡后,驱铅是否干净还是个未知数,试剂中铅的含量也严重影响着测定结果.电位溶出仪法有时由于电极的原因结果相对不是很稳定.而本文采用了加入基体改进剂,将尿液进行适当的稀释后,直接用石墨炉原子吸收光谱仪来测定,样品用量少,操作简单,灵敏度高,结果准确,并大大地提高了工作效率.
作者:钱国英;李纲 刊期: 2007年第02期
目的:研究慢性前列腺炎的病原学分布及对临床常用药物的耐药性.方法:对341例慢性前列腺炎患者的前列腺液进行细菌培养和药敏试验,同时检测解脲脲原体、人支原体和沙眼衣原体.结果:341例慢性前列腺炎患者中201例(58.9%)常规细菌培养阳性,共分离出细菌18种共204株,阳性球菌占82.4%,阴性杆菌占17.6%,又以溶血葡萄球菌为主(46.6%);154株葡萄球菌中MRS139株(90.3%),对β-内酰胺酶类抗菌药物的耐药率与MRS检出率一致,对庆大霉素、红霉素、环丙沙星、左氧氟沙星和四环素等均表现出50%~90.9%的高耐药率,对呋喃妥因和利福平较敏感.12株粪肠球菌中,万古霉素耐药(VRE)3株(25%);高浓度链霉素耐药(HLSR)5株(41.7%);高浓度庆大霉素耐药(HLGR)7株(58.3%);对红霉素、环丙沙星、四环素、利福平耐药率较高(58.3%~100.0%).14株大肠埃希菌中8株ESBLs阳性(57.1%),除对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南和阿米卡星较敏感外,对其他常用药物的耐药率均在40%以上.支原体或(和)衣原体检测阳性50例(14.7%),在140例细菌培养阴性和201例细菌培养阳性病例中,支原体或(和)衣原体感染检出率分别为20例(14.3%)和30例(14.9%)(x2=0.03,P>0.05).结论:慢性前列腺炎病原菌以细菌感染占主导地位,分离菌株对常用药物耐药严重.支原体、衣原体感染也应加以重视.适时监测前列腺液病原菌及药敏试验对临床诊断和治疗慢性前列腺炎具有重要意义.
作者:马红松;沈忠海;夏邦世;林奇龙;梁博卿 刊期: 2007年第02期
蓖麻毒素(ricin toxin,RT)是一种从蓖麻种子的胚乳中提取的植物蛋白毒素.一个多世纪以来,RT因其具有强毒性而引起人们的兴趣.由于RT来源广泛,毒性较高,已被外军作为武器化的一种毒素加以研究[1].禁止化学和生物武器公约把RT列为为严格的控制对象之一,本身就反映了人们对RT军事价值的关注.
作者:王俊虹;康琳;高姗;贾杨;王景林 刊期: 2007年第02期
目的:自来水厂消毒工艺过程中产生的氯仿、四氯化碳对人的健康有严重的危害,需建立灵敏度高的检测方法监测饮用水中的氯仿和四氯化碳.方法:建立了顶空采样用质谱作为检测器并采用选择离子监测的方法检测饮用水中的氯仿和四氯化碳.结果:氯仿和四氯化碳浓度在0~80 μg/L范围内,线性较好,相关系数分别为0.9993和0.9991;氯仿的低检出浓度为0.05 μg/L,四氯化碳的低检出浓度为0.03 μg/L,跟国标方法相比降低了两个数量级,灵敏度大大提高.结论:实验表明本方法操作简单,准确度和精密度较高均符合检测要求,回收率范围93.6%~106.4%,RSD为5.0%~7.5%之间.
作者:任红波 刊期: 2007年第02期
目的:建立离子色谱法测定水中亚硝酸盐氮的检测方法.方法:通过对淋洗液的选择,以Na2CO3-NaHCO3混合液为淋洗液,使亚硝酸盐氮与Cl-、NO-f-N、SO24-同时测定.结果:方法低检出限为5.0 μg/L,标准曲线线性范围0.05~5.00 mg/L,相关系数0.9997,相对标准偏差RSD<4.2%,回收率92.5%~104.7%.结论:本方法操作简单,适于基层单位日常检测中需要.
作者:王海云;李倩;赵冬丽 刊期: 2007年第02期
目的:用铝粉做吸附剂,观察其对脂肪干扰三氯联苯和五氯联苯的消除效果以及其对测定值的影响.方法:取一定量的铝粉放人萃取池中做吸附剂,对鱼肉进行快速溶剂萃取.然后用本方法和国标法分别对其测定,检测结果进行分析比较、探讨是否存在差异.结果:浓度在O.05~4.0 μg/ml之间,线性关系良好(r>0.9993~0.9996),测定值与国标法无显著性差异.结论:整个方法具有简便、快速、准确的特点,尤其是简化了萃取过程,消除了脂肪对三氯联苯和五氯联苯的干扰,防止了污染,减少了损耗.
作者:陈京闽;杨绯 刊期: 2007年第02期
水中铜的检验方法首选原子吸收分光光度法,直接测定时仅限于较高浓度的含量(>0.2 mg/L)[1],对于低含量铜的检测则必须通过APDC-MIBK络合萃取后才能满足实验要求,而络合萃取法操作较繁琐,且燃烧有机溶剂MIBK造成实验室污染,对工作人员有一定危害.为了减少样品处理过程的环节,节约试剂,提高效率,本文采用简单的酸浓缩法测定质控水样中低含量铜,取得准确可靠的结果,变异系数为0.48%,回收率为98.9%~101.0%,现报告如下.
作者:欧阳云 刊期: 2007年第02期
目的:了解建材市场的主要污染物及其污染水平;研究低浓度甲醛、苯系物暴露对从业人员的健康影响.方法:采用调查问卷了解调查对象的一般情况;AHMT分光光度法及热解吸-气相色谱法分析现场的甲醛及苯系物浓度;应用临床检测的标准方法测定血常规;聚合酶链式反应(PCR)方法检测研究对象的GSTY1基因型.结果:研究组现场的主要污染物为甲醛、苯、甲苯、二甲苯,4种主要的污染物均未超过国家标准,苯浓度在研究组和对照组现场之间无显著性差异,甲醛、甲苯、二甲苯浓度在两个现场之间具有显著性差异;研究组的白细胞计数、中性粒细胞绝对值、中间细胞绝对值分别为6.41、3.74、0.38 G/L,对照组分别为7.53、4.44、0.43 G/L,三者均为研究组小于对照组,但都在正常值范围内,其余血常规指标在两组之间无显著性差异;研究组按照GSTY1基因型分层,GSTY1基因缺失型的白细胞及中性粒细胞值为7.19、4.21 G/L,GSTT1基因非缺失型二者的值分别为6.14、3.15 G/L,GSTT1基因缺失型大于非缺失型,但其均数在正常值范围内.结论:建材市场的主要污染物为甲醛、苯、甲苯、二甲苯,受温度及湿度的影响,冬季污染物的释放量减少,使板材市场的污染物浓度维持在较低的水平.低浓度甲醛、苯系物暴露时,与对照组相比,机体的血常规观察到了变化,且GSTY1基因型对血常规的变化有影响.
作者:常君瑞;王秦;董小艳;王桂芳;唐志刚;徐春雨;徐东群 刊期: 2007年第02期
目的:以过氧乙酸消毒剂为例,对空气消毒中和试验方法进行改进,并观察现场应用效果.方法:以金黄色葡萄球菌为试验菌,采用微生物采样器采集空气,进行中和剂选择试验.结果:现行中和试验方法可能检测不出中和剂对试验菌的抑制作用,而改进后的中和试验方法能提高检测效能.2 000 mg/L过氧乙酸溶液作用20 min,对不同污染程度场所的空气中自然菌消除率均为90%以上.结论:改进试验方法提高了空气消毒剂消毒效果检测的准确性.2 000 mg/L过氧乙酸溶液可有效用于空气现场消毒.
作者:江永忠;唐非;姜朴 刊期: 2007年第02期
目的:建立用双波长催化动力学光度法测定痕量铁的新方法.方法:在硫酸介质中,利用铁催化过氧化氢氧化甲基蓝和茜素红褪色反应,分别在390 nm和610 nm处测量催化体系和非催化体系的吸光度的变化,用双波长催化光度法测定痕量铁离子.结果:测定铁离子的线性范围:0.050~1.20 μg/25 ml,检测限:3.2×10-11 g/ml.结论:该法简单,灵敏度高,选择性好,可用于水和人发中痕量铁的测定.
作者:王晨璐;孙登明;崔曼 刊期: 2007年第02期
目的:了解浙江省海、水产品霍乱弧菌污染情况及海、水产品中霍乱弧菌的毒力特征,并对其进行耐药性和同源性分析,研究其分子特征及流行病学意义.方法:2005年7~9月采集浙江省温州、宁波、舟山的海、水产品及杭州某批发市场的甲鱼,对检出的霍乱弧菌菌株进行耐药性分析,采用聚合酶链反应(PCR)方法进行霍乱弧菌肠毒素基因(Ctx)、小带联结毒素基因(Zot)、辅助霍乱肠毒素(Ace)的检测,并参照美国CDC PulseNet的统一方法进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型并作同源性分析.结果:从采集的990份海、水产品标本中检出14株霍乱弧菌,其中分离自青蛙1株、甲鱼9株、贝类1株、甲壳类1株、鱼类1株、其它1株.经耐药性分析,菌株对诺氟沙星、头孢噻肟100%敏感;对复方新诺明、萘啶酸耐药率高,达64.3%,其次为庆大霉素、利福平,耐药率为35.7%.毒力基因检测表明,14株霍乱弧菌中3种毒力基因均阳性的有5株,占35.7%;携带Ctx的有7株,占50.0%;只携带Zot的有4株,占28.6%;另有3株毒力基因均阴性,占21.4%.脉冲场凝胶电泳分型显示,2株稻叶1f同源;2株小川1k同源;1株小川19k降解;9株O139群霍乱弧菌除1株死亡未作分析外,其余8株分为3个型.结论:此次海、水产品检测的霍乱弧菌血清型较多,但以O139群霍乱弧菌为主,其脉冲场凝胶电泳分型较多,这与浙江省近几年霍乱时有散发和多菌型并存的特点一致.耐药率及毒力基因携带情况与广州省有较大的差别.
作者:叶菊莲;程苏云;陆群英;罗芸;吕华坤;孟真;姜理平 刊期: 2007年第02期
目的:了解惠城区市售食品的卫生状况.方法:于2005年1月~5月对惠城区6类食品进行了菌落总数、大肠菌群数和肠道致病菌的检测.结果:6类食品(饮料、凉拌菜、糕点、灌肠类、酱卤肉类、果脯)的超标率分别为7.70%、47.06%、13.34%、11.11%、40.00%、6.25%.除饮料和果脯外其余食品均检出致病菌,检出率为6.12%.结论:凉拌类和酱卤肉类食品的污染较严重,建议有关部门采取有效措施,加强食品卫生的监督管理,以保障食品安全.
作者:毛露甜;王绍芬;曾伟;陈蔡国;梁锦灿;杜梅 刊期: 2007年第02期
目的:研究不同溶剂提取对春花胡枝子黄酮含量及其体外抑菌活性的影响.方法:分别用水、乙醇、甲醇做提取剂,可得粗黄酮粉,将粗黄酮经大孔树脂纯化得精制黄酮.采用盏碟法及平板计数法测定4种黄酮粉抑菌活性.结果:以甲醇、乙醇、水作溶剂可从春花胡枝子叶粉中提取到黄酮含量不同的粗黄酮粉,经大孔树脂纯化后可得到含黄酮74.8%的精制黄酮粉.4种黄酮粉对6种受试菌均有抑制作用,但存在很大差异.相同条件下,春花胡枝子黄酮粉对酵母菌、小麦赤霉菌、苹果炭疽菌的抑制作用大于对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌的抑制作用.pH值对春花胡枝子黄酮粉的抑菌活性有较大的影响,超过或低于佳pH值范围时,抑菌活性急剧下降.结论:不同溶剂提取的春花胡枝子黄酮粉黄酮含量及体外抑菌活性不同.
作者:陈乃东;周守标;罗琦;胡金蓉;柳后起 刊期: 2007年第02期