学术投稿

基因检测在新生儿脓毒症早期诊断中的价值

张芳;宋力;党力亨;孟英韬;张金婷

关键词:16S, 核糖体核糖核酸, 细菌, 脓毒症, 婴儿, 新生
摘要:目的 分析16S rRNA基因检测在新生儿脓毒症早期诊断中的临床价值,探讨快速、可靠地诊断该症的试验方法.方法在16S rRNA基因保守区选择一对通用引物,收集临床常见的致病菌株37株,提取细菌DNA并进行PCR检测,采用琼脂糖凝胶电泳法观察扩增结果,同时对该引物的灵敏性及特异性进行检验.对106例临床疑诊为脓毒症的新生儿于入院24 h内,在严格无菌条件下采集血标本,提取DNA进行PCR扩增,同时行血培养、血常规检查及CRP及ESR水平检测,并与同期住院的20例非感染性疾病患儿进行比较.结果 PCR检测细菌DNA均得到预期的约371 bp大小的扩增产物,该引物仅扩增细菌DNA,与病毒及人基因组DNA无交叉反应,其扩增下限为104CFU·L-1的大肠埃希菌.106例疑诊为脓毒症的患儿,血培养阳性15例,PCR检测阳性36例,PCR的阳性检出率显著高于血培养(P<0.005),20例非感染组患儿PCR结果均为阴性.依据新生儿脓毒症诊断标准,PCR的敏感性、特异性及诊断指数分别为82.93%、96.92%和179.85,优于血培养及5项非特异指标至少2项异常的诊断方法.PCR方法6~8 h即能检测出结果,改良核酸提取技术可以将检测时间缩短至4~6 h.结论 PCR方法检测细菌16S rDNA能迅速判断临床标本中是否存在细菌,对于早期诊断新生儿脓毒症具有较高的敏感性及特异性.
中华实用儿科临床杂志相关文献
  • 轮换抗生素控制细菌耐药在新生儿重症监护病房中的应用

    目的 探讨定期轮换使用抗生素对降低新生儿重症监护病房(NICU)细菌耐药率的作用.方法 回顾性分析2007年6月-2010年6月东莞市妇幼保健院NICU收治的502例应用头孢他啶、哌拉西林他唑巴坦或头孢噻肟的患儿,观察肺炎克雷伯菌亚种感染的108例在相继5个研究阶段轮换使用头孢他啶和哌拉西林他唑巴坦时细菌耐药性的变化.基础阶段为12个月,无序地应用头孢他啶、哌拉西林他唑巴坦及头孢噻肟;后4个阶段每一阶段为6个月,交替使用头孢他啶与哌拉西林他唑巴坦,基本不用头孢噻肟.结果 随着停用头孢他啶时间的延长,肺炎克雷伯菌亚种对头孢他啶的耐药率从基础阶段的59.3%下降至第3阶段的40 4%,到第4阶段又上升至45.9%,各阶段其耐药率比较差异有统计学意义(χ2=3.992,P<0.05).哌拉西林他唑巴坦耐药率从基础阶段的6.7%下降至第4阶段的2.6%,而第5阶段则为4.5%,各阶段其耐药率比较差异有统计学意义(χ2=4.683,P<0.05).头孢噻肟的耐药率也逐渐下降,从基础阶段的59.8%下降至第2阶段的47.8%,第3阶段继续有所下降为45.4%,第4阶段为40 4%,第5阶段为33.6%,各阶段其耐药率比较差异有统计学意义(χ2=3.896,P<0.05),但停药2 a耐药率仍偏高,未能消除.结论抗生素轮换在相对封闭的环境,可达到降低细菌耐药率的成效.但细菌耐药性的消除需2 a以上或更长时间.

    作者:李敏许;张兰;周伟;杨勇 刊期: 2011年第10期

  • 既往健康儿童社区获得性铜绿假单胞菌脓毒症

    目的 总结既往健康儿童社区获得性铜绿假单胞菌脓毒症的临床特点,分析导致死亡的危险因素.方法 回顾性分析本院收治的34例社区获得性铜绿假单胞菌脓毒症患儿的临床资料,根据预后分为存活组、死亡或放弃治疗组,比较二组患儿年龄、性别、发病季节、入院前病程、临床表现和治疗情况.应用SPSS 11.0软件进行统计学分析.结果 34例患儿中男25例,女9例;≤1岁21例(62%);28例(82%)在5-10月份发病.存活13例(38%),其中7例有后遗症;死亡15例(44%);6例(18%)因存活概率极低家长放弃治疗.临床表现以发热、腹泻、腹胀、呼吸急促或呼吸困难常见.20例(59%)发生皮肤坏疽性深脓疱.34例入院前均曾接受抗生素治疗,其中所用抗生素名称明确的22例,抗菌谱均未覆盖铜绿假单胞菌.入院时合并休克26例(76%)、呼吸衰竭25例(74%)、多脏器功能障碍19例(56%).死亡或放弃治疗组休克(χ2=4.33,P=0.037)、呼吸衰竭(χ2=10.75,P=0 001)、多脏器功能障碍(χ2=9.19,P=0.002)发生率明显高于存活组.结论 既往健康儿童社区获得性铜绿假单胞菌脓毒症并非罕见.可疑患儿初始抗感染治疗应使用覆盖铜绿假单胞菌的抗生素.合并休克、呼吸衰竭、多脏器功能障碍和初始抗生素使用不合理是导致死亡的危险因素.

    作者:高恒淼;曾健生;陈晖;贾鑫磊;王荃;李峥;廖琨;张成晔;钱素云 刊期: 2011年第10期

  • 孟鲁司特钠对呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的治疗作用

    病毒是导致婴幼儿呼吸道感染主要的病原体,其中呼吸道合胞病毒(RSV)占50%.RSV感染后呼吸道内半胱氨酰白三烯(CysLTs)除在急性期明显增高外,在急性期1个月内仍可维持在较高水平.呼吸道内CysLTs的持续高水平与患儿反复咳嗽、喘息,持续肺功能异常及哮喘发病率的增高密切相关.孟鲁司特钠为CysLTs特异性受体阻滞剂,可通过阻断CysLTs与其1型受体结合而发挥特异性抗炎作用.对于首次感染RSV的重症毛细支气管炎患儿,在急性期及4周内,每晚口服孟鲁司特钠4 mg,可有效改善急性期临床症状,防止肺功能下降,减轻持续性呼吸道高反应性,降低再次呼吸道RSV感染及反复咳嗽、喘息的发生率.

    作者:李莹;代继宏;符州 刊期: 2011年第10期

  • 人博卡病毒感染的致病机制研究进展

    人类博卡病毒(hBoV)是由瑞典学者Allander等于2005年首先从急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物中分离发现的,其属于细小病毒家族.目前世界上已有不少有关hBoV被检出的报道,但hBoV的致病机制仍不十分清楚.现对hBoV的一般概况及其致病机制的研究进展作一综述.

    作者:梁丹丹;林广裕 刊期: 2011年第10期

  • 病毒性心肌炎诊断的研究进展

    病毒性心肌炎是一种自然病程变化很大的疾病,其临床表现与多数辅助检查均缺乏特异性,致使确诊非常困难,特别是亚临床型及暴发型的病例.因此,应根据患者的症状、体征结合辅助检查的特点,对不同时期的患者予以针对性检查,以进一步确诊病毒性心肌炎.现将有助于病毒性心肌炎诊断的各种检查的特点综述如下.

    作者:裴丽;张军平 刊期: 2011年第10期

  • Citrin缺陷引起小儿肝内胆汁淤积综合征1例

    Citrin缺陷病是由于基因SLC25A13表达异常引发的常染色体隐性遗传病.SLC25A13位于染色体7q21 3[1],其表达异常可导致2种年龄依赖性表型,在成人称为成年发作Ⅱ型瓜氨酸血症(CTLN2),在婴儿则称为肝内胆汁淤积综合征(NICCD).国内报道较少,现报告1例.

    作者:雷小雨 刊期: 2011年第10期

  • 移植患儿的病毒感染

    病毒感染,特别是人类疱疹病毒感染严重影响移植患儿的治疗效果和预后.现介绍移植患儿病毒感染的病原学和发病情况及移植患儿病毒感染的诊断方法,重点介绍人类疱疹病毒感染情况.

    作者:谢正德 刊期: 2011年第10期

  • 艾滋病并恶性肿瘤2例的影像学及解剖与病理特征

    目的 探讨儿童艾滋病(AIDS)并恶性肿瘤的影像学表现与解剖、病理的相关性.方法 回顾性分析2例AIDS患儿,男、女各1例,经活检及尸体解剖、病理检查确诊并恶性肿瘤,对其影像学及解剖、病理资料进行分析.1例患儿死亡,对其尸体进行断层解剖,并做病理组织学检查.结果 男患儿活体影像扫描可见鞍上池圆形结节影,腹腔肠壁增厚,周围组织黏连;胃肠钡透显示回肠远端呈环抱球状压迹,肠壁缺损,肠管似海马状.尸体影像扫描可见鞍上池境界清楚的略高密度区,腹部影像重建显示肠管积气,结构不清,与尸体冠状解剖标本显示一致.病理证实为AIDS.女患儿活体影像扫描显示肝右叶巨大长T1长T2信号,其内可见短T1短T2信号,包膜尚清楚.病理证实为AIDS并肝母细胞瘤.结论 AIDS患儿除并非霍奇金淋巴瘤等常见肿瘤外,还可并生殖细胞瘤及肝母细胞瘤等罕见恶性肿瘤.这些原发肿瘤往往发生于AIDS患儿,其影像学表现与解剖、病理符合度高.

    作者:刘荣志;程田志;李宏军 刊期: 2011年第10期

  • 拉莫三嗪对丙戊酸类药物治疗无效癫的疗效

    目的 观察拉莫三嗪(LTG)对丙戊酸类药物治疗无效的各种类型癫的疗效及安全性.方法 选择64例单独使用丙戊酸类药物(VPA)治疗至少3个月而未能有效控制癫发作的癫患儿,应用LTG替换治疗.在8周的加量期VPA用量不变,LTG以0.2~0.5 mg· kg-1·d-1为初始剂量,每隔1~2周增加1次剂量,逐渐添加至治疗剂量,VPA按每2周减用原剂量1/4逐渐减量至停用,维持治疗12周.观察LTG加量期和维持期各种类型癫发作的控制情况,计算其总有效率.结果 64例患儿中,11例在使用LTG加量期得到控制,16例发作频率减少≥50%,发作频率减少<50%和发作未控制共37例,总有效率为42.2%.23例在维持期发作完全控制,13例发作频率减少≥50%,发作频率<50%和发作未控制共28例,总有效率为56.2%.加量期与维持期总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05).不良反应包括皮疹4例,嗜睡2例,头晕1例.结论 LTG对于VPA治疗无效的癫患儿疗效显著,且不良反应少.

    作者:刘金玲;黄希顺;黄圣明 刊期: 2011年第10期

  • 儿童病毒性胃肠炎

    儿童病毒性胃肠炎是由多种病毒引起的以胃肠道表现为主要症状,可伴发热、全身不适或胃肠道外表现的急性肠道传染病.严重者可引起脱水、营养不良,甚至死亡.由于目前尚无有效的治疗方法,预防、控制病毒性胃肠炎的感染及暴发流行尤为重要.现就病毒性胃肠炎的病原学、流行病学、发病机制、病理变化及临床表现、诊断方法、预防手段的研究进展进行阐述.

    作者:邓莉 刊期: 2011年第10期

  • 脂多糖干预小胶质细胞后细胞内促血小板生成素与炎症因子的表达

    目的 探讨脂多糖(LPS)干预小胶质细胞后细胞内促血小板生成素(TPO)及炎症因子的表达.方法将BV2细胞分为6组.1.空白12 h组:BV2细胞正常培养12 h,不添加任何干预因素;2.LPS 0.5 mg·L-1 12 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养12 h,并使其终质量浓度为0.5 mg·L-1;3.LPS 1.0 mg·L-112 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养12 h,并使其终质量浓度为1.0 mg·L-1;4.空白 24 h组:BV2细胞正常培养24 h,不添加任何干预因素;5.LPS 0.5 mg·L-1 24 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养24 h,并使其终质量浓度为0.5 mg·L-1;6.LPS 1.0 mg·L-1 24 h组:在培养好的BV2细胞内添加预先配好的LPS溶液共同培养24 h,并使其终质量浓度为1.0 mg·L-1.采用ELISA法检测BV2细胞内炎症因子(IL-1、IL-6、NF-κB)和TPO的表达;实时荧光定量PCR法检测细胞内IL-1 mRNA、IL-6 mRNA、NF-κB mRNA及TPO mRNA表达水平.结果 LPS 0.5 mg·L-1和1.0 mg·L-1干预BV2细胞后12 h和24 h,IL-1、IL-6、NF-κB和TPO表达水平及其mRNA水平均较空白组升高,且12 h组高于24 h组,但其差异均无统计学意义(Pa>0.05).TPO表达水平与IL-1、IL-6、NF-κB及其mRNA水平的表达均呈显著正相关(Pa<0.01).结论 LPS干预小胶质细胞后IL-1、IL-6、NF-κB和TPO表达升高,参与炎症、凋亡和神经元保护等多种调控机制.

    作者:李乔俊;唐锁勤;王建文 刊期: 2011年第10期

  • 结核病免疫学诊断方法

    结核病目前已成为全球性公共卫生问题,进行及时、准确的诊断是结核病控制的关键.为寻找快速、敏感、特异的结核病诊断方法,国内外学者进行了大量的研究,其中免疫学诊断方法是重要的方法.现就结核病主要的免疫学检测技术加以概述.

    作者:申阿东;孙琳 刊期: 2011年第10期

  • 重症肺炎链球菌感染患儿淋巴细胞亚群与血清免疫球蛋白及其亚类表达的变化

    目的 探讨重症肺炎链球菌感染患儿淋巴细胞亚群与血清免疫球蛋白及IgG亚类水平的变化.方法 收集2009年1月-2010年1月在首都儿科研究所呼吸科住院的27例重症肺炎链球菌肺炎婴幼儿为病例组,65例健康儿童为健康对照组.分别采用流式细胞仪与散射比浊法测定二组儿童细胞免疫(CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+/CD8+、CD19+、NK细胞)与体液免疫(IgG、IgA、IgM)及IgG亚类(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)水平.结果 1.与健康对照组比较,病例组患儿外周血CD3+CD4+数量降低(t=0.000,P<0 05),CD3+CD8+(t=0.000,P<0.05)、CD4+/CD8+(t=0.013,P<0.05)、IgA(t=0.004,P<0.05)、IgM(t=0.000,P<0.05)、IgG2(t=0.018,P<0.05)显著升高.2.病例组患儿中检出IgG亚类缺陷11例(占40.74%),以IgG2、IgG4缺陷为主.3.与健康对照组比较,11例IgG亚类缺陷患儿CD3+CD4+(t=0.006,P<0.05)、CD4+/CD8+(t=0.015,P<0.05)均显著降低,CD3+CD8+(t=0.013,P<0.05)、NK细胞计数(t=0.045,P<0.05)均显著升高.结论 重症肺炎链球菌感染患儿存在细胞免疫和体液免疫紊乱以及IgG亚类缺陷.

    作者:王伟;沙莉;宋欣;刘哲伟 刊期: 2011年第10期

  • Shank3基因单核苷酸多态性与中国汉族儿童孤独症的关联

    目的 探讨Shank3基因单核苷酸多态性(SNPs)与中国汉族儿童孤独症之间的关系.方法 采用PCR与限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法对82例孤独症儿童及80例健康儿童Shank3基因上的2个SNPs位点rs9616915和rs13057681的基因型和等位基因进行测定.采用病例-对照方法分析SNPs位点等位基因的分布,对孤独症组和健康对照组SNPs位点进行Hardy-Weinberg平衡检验.结果 1.健康对照组和孤独症组儿童观察值和预期值间差异均无统计学意义(Pa>0.05),即健康对照组和孤独症组均符合Hardy-Weinberg遗传平衡法则.2.二组儿童rs9616915和rs13057681位点等位基因频率和基因型分布上差异无统计学意义(rs9616915:基因型χ2=0.452,P>0.05;等位基因χ2=0.217,P>0.05;rs13057681:基因型χ2=0.256,P>0.05;等位基因χ2=0.173,P>0.05).结论 Shank3基因rs9616915和rs13057681SNPs片段与中国汉族儿童孤独症的发病无关,孤独症的易感基因有待于进一步研究.

    作者:刘海兵;姜志梅;宋瑞;郭岚敏;王立苹 刊期: 2011年第10期

  • 早产儿医院感染的危险因素

    目的 探讨早产儿医院感染的发病情况及危险因素,为医院感染的监控和干预提供理论依据.方法回顾性调查本院2008年1月-2010年1月本院NICU 516例早产儿的临床资料,分析医院感染的危险因素.结果 1.早产儿516例中,74例发生医院感染,发生率为14.3%,共发生医院感染98例次,平均每例发生1.32次,医院感染的住院日相关发生率为8.9‰;感染部位以呼吸道为主(51.0%),其中呼吸机相关性肺炎为多见(占36.0%),其次为皮肤软组织(26.5%)和消化道(14.3%).2.共培养出病原菌69株,革兰阴性杆菌占71.0%,以肺炎克雷伯菌为多见(17.4%);革兰阳性球菌占18.8%,以草绿色链球菌为多见;真菌占10.1%,主要为白色念珠菌.3.胎龄≤32周、出生体质量≤1.5 kg、羊水胎粪污染、胎膜早破≥48 h、糖尿病母亲儿、吸痰次数≥10次、气管插管次数≥3次、机械通气时间≥3 d、置胃管、静脉营养、应用抗生素时间≥2周及住院时间≥2周与医院感染率显著相关,多元Logistic回归方程显示胎龄≤32周、静脉营养、机械通气时间≥3 d及住院时间≥2周是医院感染发生的独立危险因素.结论 NICU早产儿医院感染的危险因素众多,尽量减少侵入性操作次数、缩短静脉营养及住院的时间、合理应用抗生素可有效降低医院感染发生率.

    作者:刘兆娥;朱学梅;杨波 刊期: 2011年第10期

  • 中国早期儿童型白质消融性白质脑病患儿17例自然病程随访及其基因型-表型分析

    目的 通过观察和分析17例中国早期儿童型白质消融性白质脑病(VWM)患儿的自然病程发展,了解其主要神经系统表型的进展特点,初步进行基因型-表型分析.方法 选择2006年9月-2010年10月北京大学第一医院临床诊断的17例VWM中国患儿为研究对象,提取其外周血白细胞DNA,PCR扩增致病基因真核细胞翻译启动因子2B(EIF2B1~5)的外显子及外显子与内含子交界区进行分子诊断.对其神经系统障碍的进展进行随访分析.结果 1.基本情况:17例患儿中男12例,女5例.13例起病前发育正常.2.起病特点:起病年龄平均2.7岁(0.4~6.4岁),70%(12/17例)为感染或头部外伤后急性起病,30%(5/17例)无诱因亚急性起病,均以运动障碍起病.3.病程特点:末次随访平均病程4.30 a(0.30~8.70 a),均呈进行性加重,3例死亡.64%(11/17例)病程中伴发作性加重.已获得独走技能的患儿早于起病后0.17 a不能独走,发病2.00 a后均不能独走.发病4.50 a后患儿均丧失行走能力,早丧失行走能力的年龄为起病后0.42 a,丧失行走能力的平均年龄为5.2岁(2.0~11.0岁),起病年龄越小,丧失行走能力的年龄越早.认知功能障碍进展缓慢.6例(35%)伴惊厥.重型患儿中女童明显少于男童.4.基因型-表型关系:重型患儿中eIF2Bγ突变者多于eIF2Bε突变者,相同基因型(eIF2Bγ:I346T)患儿表型存在明显差异.结论 早期儿童型VWM中国患儿运动功能退化进展为突出,进展速度快.目前尚缺乏明确的基因型-表型相关性.

    作者:代丽芳;吴晔;王静敏;杜丽;冷雪荣;潘艳霞;朱赛楠;姜玉武 刊期: 2011年第10期

  • 低分子质量肝素联合更昔洛韦体外抗人巨细胞病毒的作用

    目的 研究低分子质量肝素(LMWH)联合更昔洛韦(GCV)体外抗人巨细胞病毒(HCMV)感染的作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定LMWH联合GCV对人胚肺成纤维细胞(HELF)的大无毒质量浓度(TC0).应用体外细胞培养技术建立HCMV-AD169感染HELF模型.固定联合药物中LMWH的TC0(625.00 mg·L-1),设LWMH 625.00 mg·L-1、GCV 35.00 mg·L-1、GCV 17.50 mg·L-1、GCV 8.75 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 35.00 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 17.50 mg·L-1、LMWH 625.00 mg·L-1+ GCV 8.75 mg·L-1 7个不同用药组,分别干预HCMV感染细胞模型,使用MTT法检测各组细胞存活率,观察感染细胞特征性细胞病变(CPE),同时应用荧光定量PCR法检测用药后各组HCMV的载量.结果 联合药物的TC0中GCV的质量浓度为375.00 mg·L-1,LMWH的质量浓度为625.00 mg·L-1.当HCMV AD169浓度为100倍半数组织培养感染量(TCID50)感染HELF时,LMWH和GCV均可提高受染细胞存活率,降低受染细胞的HCMV DNA的拷贝数;当固定LMWH的TC0,与3种不同质量浓度GCV配伍时,均在HELF上有明显的抗HCMV的生物活性,并显示配伍后的抑制作用明显大于对应质量浓度单用GCV的抑制作用(P<0.01);当联合用药中GCV剂量减半时与全量应用GCV时的抗HCMV效果相同[即GCV 35.00 mg·L-1组与联合用药LMWH 625.00 mg·L-1+GCV 17.50 mg·L-1组的病毒抑制率和DNA拷贝数比较差异无统计学意义(P>0 05)];且联合用药对细胞的毒性试验结果及显微镜下观察细胞形态变化显示,随着联合用药中二者药物质量浓度的下降,细胞存活率升高,对细胞的毒性作用减弱.结论 LMWH联合GCV具有良好的体外抗HCMV作用,二者具有协同抗病毒作用.

    作者:叶亮英;顾绍庆;郑意;李继安;朱广丽;顾小海 刊期: 2011年第10期

  • 筛选与分析与人巨细胞病毒UL133编码蛋白相互作用的蛋白

    目的 应用酵母双杂交技术筛选人胎脑cDNA文库中与人巨细胞病毒(HCMV)UL/b′ UL133编码蛋白相互作用的蛋白,为研究UL/b′编码蛋白的生物学功能,揭示HCMV先天感染的致病机制奠定基础.方法 设计特异性引物,在引物上下游分别引入NdeⅠ和BamHⅠ限制性内切酶识别位点,采用PCR技术扩增 HCMV临床分离株H株的UL133基因片段,将其扩增产物与载体pGBKT7 同时使用NdeⅠ和BamHⅠ进行双酶切,纯化后,将UL133片段插入到pGBKT7载体上,构建诱饵质粒 pGBKT7-UL133,并测序分析.利用醋酸锂小量酵母转化方法,将测序正确的诱饵质粒pGBKT7-UL133转化入AH109酵母感受态细胞中,然后将转化的菌液涂布在色氨酸缺陷型培养基(-Trp)上,筛选阳性菌落.再将人胎脑cDNA文库质粒转化到含pGBKT7-UL133质粒的AH109菌株中,在四缺培养基(-Ade/-His/-Leu/-Trp)中筛选,在铺有X-Gal的滤纸上进行显色反应,提取显蓝色的阳性酵母筛选质粒,运用电穿孔方法将其转化到TG1的大肠杆菌中,并行PCR鉴定,提取大肠杆菌中的文库质粒,并将其回转到含诱饵质粒pGBKT7-UL133 的酵母菌株中,进行回转验证.对筛选到的阳性克隆进行测序和生物信息学分析.结果 用于酵母双杂交筛选的诱饵质粒pGBKT7-UL133成功构建,含有诱饵质粒的酵母菌株在-Trp上生长.转化有人胎脑cDNA文库和诱饵质粒pGBKT7-UL133的酵母菌AH109,在四缺培养基中观察到有28个酵母菌落生长,通过显色反应、酵母质粒转化及回转酵母细胞筛选得到4个阳性克隆.通过序列比对,发现在这些基因中,其中一个基因编码人类还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)依赖性氧化还原酶1.结论 成功应用酵母双杂交系统筛选出与HCMV UL/b′区UL133编码蛋白相互作用的蛋白-NADPH,提示UL133蛋白可能在增加病毒毒力和传染性,干扰细胞间的信号传导和细胞的生长、分裂、凋亡等方面发挥重要作用.

    作者:崔鑫;任高伟;王桂丽;齐莹;马艳萍;阮强;孙峥嵘 刊期: 2011年第10期

  • 新生儿重症监护室细菌定植和医院感染的监测

    目的 观察NICU细菌定植及医院感染情况,以降低NICU医院感染发病率.方法 2009年1-12月在本院NICU住院的465例新生儿入院时行痰培养,进行定植菌检测.机械通气患儿更换或拔除气管插管时,常规留气管插管头行细菌培养.所有培养阳性结果行药敏试验.住院时间>48 h的426例新生儿纳入医院感染调查,疑似医院感染时,根据临床表现行相关病原学检查.计算医院感染发病率、日医院感染发病率、呼吸机相关性肺炎(VAP)发病率.结果 465例新生儿行痰培养,72.7%(338/465例)有细菌定植,其中38.8%为正常菌群,61.2%为致病菌.定植的致病菌主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌.医院感染发病率为12.4%(53/426例),日医院感染发病率为12.1‰,呼吸机使用率为2.5%,VAP发病率为65.6‰.不同出生体质量组新生儿医院感染发病率差异有统计学意义(χ2=12.35,P<0.05),出生体质量≤1 500 g的新生儿医院感染发病率高.有致病菌定植的新生儿医院感染发病率高于无致病菌定植的新生儿,差异有统计学意义(χ2=19.88,P<0.05).结论 细菌(尤其是致病菌)定植在NICU很常见,革兰阴性细菌是常见定植致病菌,致病菌定植与医院感染密切相关.对NICU住院患儿进行定植菌检测,有助于减少医院感染的发生.

    作者:李茂军;陈昌辉;陈先云;王晓敏;陈丽娜;李兰;李晶 刊期: 2011年第10期

  • 急性白血病并肺部真菌感染57例早期诊断与防治策略

    目的 分析急性白血病并肺部真菌感染(PFI)患儿的临床特征,探讨其早期诊断与防治策略.方法 对2004年3月-2010年3月上海市儿童医院血液科收治的132例儿童急性白血病并PFI情况进行回顾性分析.其中57例患儿发生PFI 60例次,按照欧洲癌症研究和治疗组织(EORTC)标准,确诊PFI 5例次,临床诊断PFI 30例次,拟诊PFI 25例次.结果 1.急性白血病患儿中PFI的发生率为43.18%(57/132例).发生PFI时距确认基础疾病的中位时间为7.2个月(5 d~50个月),其中≤12个月占70%(42/60例),>12个月占30%(18/60例).2.胸部CT表现形式多样,主要表现为炎性渗出、间质改变、云絮状改变及结节影,严重者伴胸腔积液、急性呼吸窘迫综合征.3.PFI患儿中性粒细胞减少(<1.5×109L-1)占71.7%(43/60例次),其中中性粒细胞缺乏(<0 5×109L-1)占40.0%(24/60例次).4.1,3-β-D葡聚糖实验阳性占70.5%(31/44例次),阴性占29.5% (13/44例次).57例患儿真菌培养出念珠菌7株,酵母菌2株.5.治疗有效率为95.0%(57/60例次),抗真菌单药及联合治疗有效率分别为53.3%和41 7%.结论 1.真菌感染是儿童急性白血病继发重症感染的主要病原学之一.2.胸部CT对PFI有重要的诊断价值,微生物培养在儿童中阳性率较低.3.早期诊断与及时治疗是提高PFI疗效的关键.若伴早期呼吸衰竭或呼吸窘迫综合征应及时加压给氧或辅助机械通气,可获得良好的预后.

    作者:邵静波;蒋慧;李红;陆正华;杨静薇;杨为群 刊期: 2011年第10期

中华实用儿科临床杂志

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