王频佳;张德纯
不动杆菌(Acinetobacter species)已成为各种感染的重要病原菌,其分离率在非发酵菌中仅次于铜绿假单胞菌[1],且耐药菌株有增多趋势[2],因而常导致严重的医院感染.本文总结与分析近年来医院内不动杆菌感染的临床特点,并进行菌株耐药性研究,结果如下.
作者:田维珍;邓光荣;陈芳 刊期: 2005年第02期
目的探讨胃癌患者外周血中CD28+T细胞数量和患者胃癌原代细胞表面B7的表达水平,以探讨胃癌患者共刺激通路是否异常.方法采用流式细胞术检测胃癌患者外周血中CD28+T细胞与胃癌患者原代细胞B7分子的表达,并与胃良性疾病作比较.结果胃癌患者CD28+T细胞数低于对照组(P<0.01).胃癌患者原代细胞表面B7-1(CD80)、B7-2(CD86)表达水平低于对照组(P<0.01).结论胃癌患者外周血T细胞低表达CD28分子,胃癌细胞低表达B7分子,从而影响B7-CD28共刺激通路,使T细胞不能有效地清除肿瘤.
作者:迟小伟;刘杰 刊期: 2005年第02期
目的研究结直肠癌患者外周血中CRD-BP mRNA的表达,探讨其作为结直肠癌标志物的可行性。方法用套式荧光实时PCR对64例结直肠癌患者、20例胃肠道良性疾病患者和25例健康成人进行外周血CRD-BP mRNA的检测,并对阳性PCR产物进行克隆、测序。结果结直癌患者中,28(43.8%)例检测到CRD-BP mRNA表达,在良性病和健康人均无表达,两组差异显著(χ2=26.493,P<0.001)。CRD-BP mRNA的表达与结直肠癌的Dukes分期有显著相关性(χ2=8.195,P<0.05)。结论在结直肠癌患者的外周血中,能够检测到CRD-BP mRNA的表达,CRD-BP mRNA可作为外周血中结直肠癌细胞的肿瘤标志物用于临床诊断。
作者:王方金;何蕴韶;张常华;何裕隆;程钢 刊期: 2005年第02期
我们于2003年10月从1例急性阑尾炎患者阑尾周围脓肿液中分离出1株Pseudomonas.alcaligenes(产碱假单胞菌)报道如下.
作者:杨锐 刊期: 2005年第02期
目的构建实时荧光定量PCR(FQ-PCR)标准以定量检测原癌基因c-met mRNA的表达.方法以Trizol裂解抽提法提取新鲜肝组织总RNA.以RT-PCR法制备c-met cDNA目的片段并进行扩增;以A-T载体克隆法将纯化的目的片段与pGEM-T Easy Vector连接成重组质粒并转化E.coli DH5α.采用碱裂解法提取重组质粒,联合用直接PCR、α互补法和氨苄青霉素筛选法、EcoRⅠ限制性酶切和序列分析法鉴定其特异性.用聚乙二醇沉淀法纯化质粒并测定A260,从而确定原液的重组质粒拷贝浓度并以此制备FQ-PCR梯度浓度标准.结果 c-met cDNA目的片段成功制备并获得稳定的重组质粒,保持了目的片段的特异性和序列完整性.结论成功构建了c-met实时FQ-PCR参考标准.
作者:岑东;吕建新;裴仁治 刊期: 2005年第02期
有报道[1]说操作者接受专业培训后,快速血糖仪的测定结果和实验室结果有良好的相关性.目前的问题是血糖仪的操作者多数为非实验室人员,未经过专业培训和上岗考核,故对血糖仪即时检验(POCT)测定结果的准确性也无从知晓.我们对温州医学院附属一院34台快速血糖仪做室间质控调查,现报道如下.
作者:池胜英;陈筱菲;徐克;陈晓东;袁谦 刊期: 2005年第02期
目的探讨肺炎克雷伯菌外膜蛋白缺失与亚胺培南耐药性的关系.方法对2株临床分离的耐亚胺培南肺炎克雷伯菌进行传代,用肉汤稀释法检测其低抑菌浓度(MIC),并提取外膜蛋白(OMP)进行SDS-PAGE.结果 2株多重耐药的肺炎克雷伯菌经传9代后除对亚胺培南恢复为敏感以外,对其余抗生素的耐药性不变;经SDS-PAGE发现对亚胺培南耐药肺炎克雷伯菌与敏感株相比,缺少分子量35 000~45 000之间的一条带,从位置判断该条带可能为OMP k36或OMP k37的一种膜蛋白.结论肺炎克雷伯菌OMP缺失可能与对亚胺培南的耐药密切相关,细菌经传代修复膜蛋白后可恢复对亚胺培南的敏感性.
作者:蒋新良;张嵘 刊期: 2005年第02期
目的了解体液中核异常细胞分级(包括轻度、中度、高度核异质细胞)与肿瘤标志物及临床诊断之间的关系.方法将患者的体液细胞学检查结果与血清肿瘤标志物结果及临床诊断进行比较分析.结果 67例患者中,找到高度核异质细胞34例,中度核异质细胞17例,轻度核异质细胞16例,与恶性肿瘤的诊断符合率分别为100%、70.6%、25%.3种核异质细胞群的患者CEA水平有显著性差异(P<0.01),而Fer、CA125、CA15-3、CA19-9间无显著性差异(P>0.05).结论细胞核异质程度与血清CEA值呈正相关,细胞学检查与CEA值综合分析能提高恶性肿瘤的诊断效率.
作者:赵招凤;严卓琳;吴茅;刘建栋 刊期: 2005年第02期
目的探讨谷氨酸脱氢酶(GLD)在肝移植术中及术后早期对供肝冷、热缺血及再灌注损伤程度的判断价值以及对肝移植预后的评估作用.方法对18例原位肝移植患者及18例腹腔其他器官移植患者从下腔静脉阻断至术毕每0.5 h一次,术后每日晨一次连续30 d测定患者血清GLD、ALT、AST、LDH、γGT、ALP的活性.结果在新肝移植后(下腔静脉开放)20 min~3 h内,GLD、AST、ALT、LDH都出现一明显上升又回落过程,其相互间的相关性良好,而与γGT、ALP不相关.其中以GLD上升幅度大,且峰值出现较早,GLD的上升幅度变化率与ALT、AST、LDH变化率有显著性差别(P<0.001).GLD的平均变化率是LDH的6.7倍. 肝移植术后预后良好组GLD的升高平均值为169.6 U/L,预后不良组为1 719.6 U/L.术后GLD>800 U/L的4例肝移植患者,平均生存期为19.5 d.结论血清GLD可作为肝移植早期判断供肝损伤程度的有效指标,其敏感性、特异性显著高于ALT、AST、LDH.肝移植术后患者血清GLD水平剧增示预后不良.
作者:王丹;江艺;兰小鹏 刊期: 2005年第02期
目的了解大肠埃希菌多重耐药菌株中1、2类整合酶基因的携带情况,研究整合子与抗生素多重耐药的相关性.方法对102株大肠埃希菌临床分离株做药物敏感性分析和整合子的PCR基因检测.结果 102株大肠埃希菌对11种抗生素的耐药率为:氨苄青霉素(94%)、庆大霉素(88%)、环丙沙星(88%)、阿莫西林/克拉维酸(70%)、头孢唑啉(62%)、头孢他啶(50%)、哌拉西林(41%)、哌拉西林/他唑巴坦(38%)、头孢哌酮/舒巴坦(29%)、丁胺卡那(24%)和泰能(2%).102株大肠埃希菌中51%找到不同插入大小的整合子,插入基因盒大小范围是650 bp到2 600 bp;intⅠ1整合酶基因检出率为85%, PCR扩增出280 bp大小的intⅠ1基因片段,而未检测到intⅠ2整合酶基因.结论 1类整合子在大肠埃希菌多重耐药菌株中常见,整合子的存在与细菌的多重抗生素耐药有密切关系.
作者:杜艳;郭翀;胡莹;陈端 刊期: 2005年第02期
目的建立实时定量PCR(RQ-PCR)检测慢性髓系白血病(CML)bcr/ablP210融合基因转录本,评价其在CML诊断和微小残留病(MRD)监测中的意义.方法设计TaqMan探针和引物,建立RQ-PCR法对b3a2和ABL阳性模板进行扩增,并检测22例CML患者bcr/ablP210转录本含量.结果 RQ-PCR法低可检测到10个拷贝/μl的阳性模板,但重复性较差,而108~102拷贝/μl的重复性良好,正常对照无扩增信号.19例初诊CML患者bcr/ablP210转录本绝对含量为1.42×102~2.24×105拷贝/50 ng(中位数量3.06×104拷贝/50 ng),ABL纠正后的相对含量为3%~687%(中位数147%).2例患者骨髓移植后bcr/ablP210转录本下降,1例患者由慢性期进展为加速期时含量显著增高.结论 RQ-PCR方法敏感、可靠,可用于CML患者的诊断和MRD随访监测.
作者:林江;钱军;陈子兴;薛永权;费霞;王法春;张永宁 刊期: 2005年第02期
目的检测健康蒙古族人群血浆MBL的浓度.方法用EDTA-Na2抗凝血浆,ELISA检测.结果<40岁组血浆中的MBL含量为(2.962±1.833)mg/L;40~60岁组血浆MBL含量为(2.580±2.040)mg/L;>60岁组血浆MBL含量为(1.063±1.233)mg/L.结论>60岁组血浆MBL水平显著低于≤60岁组.男女性别间MBL 水平无显著差异.
作者:李萍;贾天军;季建军 刊期: 2005年第02期
非梅毒螺旋体抗原血清试验-快速血浆反应素环卡片试验(RPR和TRUST)是诊断梅毒常用的筛查试验,但是我们研究发现,它对潜伏期和Ⅰ期梅毒的敏感性较低,存在漏诊现象.而梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)具有高度的敏感性和特异性,更适宜高危人群梅毒螺旋体感染的筛查.
作者:孙阳;张友林;余银霞;任昌贵;赵缜 刊期: 2005年第02期
目的建立荧光定量PCR检测弓形虫基因的方法,并进行实验室方法学评价.方法 PCR扩增弓形虫529bp重复序列,经TA克隆后转化入大肠杆菌DH5α中;提取重组质粒鉴定后,作为模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验和临床标本检测.结果用重组质粒制作的标准曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系,相关系数0.995,平均试验间变异系数3.28%,无非特异性扩增.临床标本检测阳性率为43.3%.结论建立了检测弓形虫基因的荧光定量PCR方法,快速、灵敏、特异的特点适合临床实验室的应用.
作者:王频佳;张德纯 刊期: 2005年第02期
目的对我院ICU产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的肺炎克雷伯菌进行监测.方法从ICU病房患者的痰、呼吸机管道冷凝水、听诊器及护理人员的手分离的30株肺炎克雷伯菌,用双纸片法鉴定.对确认试验阳性的ESBL肺炎克雷伯菌进行随机扩增DNA多态性(RAPD)分型,并比较不同型别的耐药谱.结果共检出21株ESBL阳性的肺炎克雷伯菌,RAPD分型为A、B、C、D、E、F、G、H 8种型别,其中A型为优势菌株,占33.3%(7/21),药敏结果显示RAPD谱型与药敏谱无明显相关性.结论 ESBL阳性的肺炎克雷伯菌可借护理人员的手、呼吸机管道和听诊器进行传播.提高医护人员对ESBL的认识,遵循无菌操作规程,合理使用抗生素,是防治ESBL产生菌播散的重要措施.
作者:毕俏杰 刊期: 2005年第02期
HCV核心抗原是由HCV基因组中为保守的部分编码而来.研究表明,丙型病毒性肝炎(以下简称丙肝)患者外周血中HCV核心抗原与HCV RNA水平具有良好的相关性[1-2].本文评估HVC核心抗原测定法用于HCV早期诊断的特异性、敏感性及缩短HCV窗口期诊断时间的可行性和临床价值.
作者:洪俊;饶永彩 刊期: 2005年第02期
目的用重复序列引物聚合酶链反应(rep-PCR)的方法分析呼吸科住院患者痰标本中分离到的产超广谱β内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌是否同一起源菌株.方法用双纸片确认法检测超广谱β内酰胺酶(ESBL).用K-B法测定对抗生素的敏感程度,选用肠道菌广泛存在的基因间重复片段为引物进行扩增,对产ESBL大肠埃希菌进行基因分型.结果 rep-PCR法可将大肠埃希菌扩增出丰富的区带.分离到的22株产ESBL大肠埃希菌分属3个基因型.结论 rep-PCR法可用于医院内感染的流行病学调查.
作者:马列婷;杨朵;王亚文 刊期: 2005年第02期
癌性胸腔积液是由肺癌及其他恶性肿瘤累及胸膜或胸膜本身的肿瘤引起,肺癌是首要原因.本文比较肺癌患者血清及胸水中肿瘤标志物CEA、Cyfra21-1、NSE的含量变化,探讨联合检测的临床意义.
作者:刘晨梅;侯敏;张连祥;蔡忠 刊期: 2005年第02期
目的探讨心衰患者血浆B型钠尿肽(BNP)水平变化的临床意义.方法用ELISA检测64例心衰患者、119例健康成人(对照组)血浆BNP水平,比较不同疾病患者的BNP浓度.结果心衰组BNP水平(727.0±454.3 pg/ml)显著高于对照组(101.8±66.4 pg/ml),P<0.01;BNP临界值定为240 pg/ml时诊断心衰的敏感性和特异性分别为88.7%和96.6%;健康人≥50岁组BNP较<50岁组显著增高(P<0.05).结论血浆BNP水平对于心衰的诊断、病情的评估具有重要意义.
作者:曹兴建;郭新荣;管耘园 刊期: 2005年第02期
目的探讨人疱疹病毒6型(human herpesvirus 6,HHV 6)感染在风湿性关节炎(rheumatic arthritis,RhA)和类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)病因学中的作用.方法用套式PCR(nested-PCR)检测40例RhA、62例RA患者和138例健康献血员外周血白细胞(PBWC)和血浆中HHV 6 DNA.结果 RhA组和RA组PBWC中HHV 6 DNA阳性率与正常对照组比较均无显著性差异(P>0.05);部分RhA和RA患者血浆中可检出HHV 6 DNA ,而对照组血浆中HHV 6 DNA阴性.结论部分RhA、RA患者血浆中存在HHV 6 DNA,提示这些患者可能存在HHV 6活动性感染.
作者:孙迎娟;罗兵;李慧;王笑峰;王云;于维林 刊期: 2005年第02期