王军;朱登纳
目的:获得FLA8基因cDNA序列.方法:根据衣藻、小球藻等驱动蛋白-2亚基的氨基酸高度保守序列GYNGTIF、NEDPKDA设计一对简并引物,采用RT-PCR及3'RACE和5'RACE的方法扩增杜氏盐藻FLA8基因的全长.结果:克隆得到的杜氏盐藻FLA8基因cDNA全长序列为2 612 bp,序列分析显示其包括90 bp的5'UTR、167 bp的3'UTR以及2 355 bp的开放阅读框,其编码784个氮基酸残基,蛋白质的理论等电点为6.65,相对分子质量为85 097.氨基酸序列同源性分析显示其与其他物种有较高的同源性:团藻(98%)、衣藻(99%)、小球藻(92%).结论:得到杜氏盐藻驱动蛋白-2亚基FLA8的基因全长.
作者:李俊平;刘岷;毛丽红;石科;李靓;许尧;薛乐勋 刊期: 2011年第06期
目的:了解河南省某地区配偶间HIV性传播状况,为预防控制艾滋病配偶间性传播提供科学依据.方法:2006年1月1日至2009年12月31日对河南省某地区2651个HIV单阳家庭进行随访检测,分别在每年度的6月底和12月底对感染者配偶用酶联免疫吸附试验和免疫印迹试验进行一次HIV抗体检测.结果:共对2 445个家庭完成随访调查,随访率为92.2%,配偶间HIV传播73对,累计性传播率2.98%.由丈夫传染给妻子44对(传播率4.33%),由妻子传染给丈夫29对(传播率2.03%).丈夫年龄在30~39岁的家庭性传播率为55.8% (23/348)高于40岁以上年龄组(0.6%,1/1 053).结论:河南某地区建立随访关系的配偶间HIV性传播率较先前明显降低,但需要进一步加大预防配偶间HIV性传播工作的力度,大限度避免HIV配偶间传播.
作者:马楠;段广才;王奇;杨海燕 刊期: 2011年第06期
目的:探讨外周穿刺中心静脉置管术( PICC)患者血清TNF-α、IL-6、IL-10及凝血四项水平的变化.方法:以未PICC患者38例为对照(包括肿瘤患者10例、非肿瘤患者18例和血液病患者10例),对比分析PICC患者(包括肿瘤患者14例、非肿瘤患者20例和血液病患者16例)炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10和凝血四项水平的变化.放射免疫法测定血浆TNF-α、IL-6水平,酶联免疫吸附试验测定IL-10,全自动血凝仪测定凝血四项.结果:PICC肿瘤、非肿瘤、血液病组TNF-α水平高于相应未PICC对照组(t分别为2.330、3.606和3.110,P均<0.05),IL-6水平低于相应对照组(t分别为7.120、5.863和2.572,P均<0.05),IL-10水平无明显变化(t分别为0.881、0.887和0.079,P均>0.05);非肿瘤PICC组凝血四项与未PICC对照组比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).结论:PICC置管后血浆TNF-α水平的升高和IL-6水平的下降可能与静脉血栓形成有关.
作者:张振香;林蓓蕾;陈颖;王艳丽;杨巧芳;程瑞莲;高峰 刊期: 2011年第06期
糖尿病肾病( diabetic nephropathy,DN)是糖尿病微血管病变之一,是导致终末期肾病的主要病因.早期治疗DN对延缓慢性肾功能不全的发生、发展有着重要的临床意义[1].作者收集了2008年1月至2010年3月漯河市第六人民医院收治的186例DN患者的临床资料,观察了不同剂量厄贝沙坦治疗DN的疗效,报道如下.
作者:孙四平 刊期: 2011年第06期
目的:探讨玻璃化冷冻法对冻融胚胎移植周期结局的影响.方法:对324个玻璃化冷冻人卵裂期胚胎复苏周期和146个程序化慢速冷冻胚胎复苏周期进行分析,比较2组冷冻胚胎复苏后的存活率、完整率、种植率、临床妊娠率、孕周、新生儿身高及体质量等指标.结果:玻璃化冷冻组的胚胎完整率、临床妊娠率均高于程序化慢速冷冻组(83.24% vs47.54%,x2=179.772,P<0.001;37.38% vs 27.66%,x22=4.073,P=0.044);2组流产率、分娩孕周、新生儿出生体质量及身高比较,差异无统计学意义(P均>0.05).结论:玻璃化冷冻胚胎较程序化慢速冷冻法有更高的复苏胚胎完整率及临床妊娠率,可在临床上安全应用.
作者:娄华;孙丽君;王兴玲;郝大勇;王雪梅;于晓娜 刊期: 2011年第06期
目的:构建具有良好多样性的人尘肺病噬菌体单链抗体( ScFv)库.方法:收集25例尘肺病患者外周血标本共50 mL,密度梯度离心法分离淋巴细胞,Trizol法提取总RNA,逆转录后参考文献设计并合成半巢式PCR引物,扩增抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,Linker连接VH和VL,继而连接到噬菌体载体pCANTAB-SE中,连接产物转入感受态大肠杆菌TG1,超感染辅助噬菌体M13KO7,构建噬菌体ScFv库.结果:扩增出VH和VL基因序列并有效地连接,经转化和超感染,构建了库容为2.4x107pfu/mL的ScFV库.结论:成功构建人尘肺病噬菌体ScFV库.
作者:翟伟;郝长付;高彬;姚武 刊期: 2011年第06期
目的:测定2-甲氧基雌二醇中残留溶剂甲醇和二氯甲烷的含量.方法:采用气相色谱法检测3批2-甲氧基雌二醇样品中的组分.应用氢火焰离子化检测器( FID),以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,采用HP-INNOWAX柱(30mx0.53 mm×1 μm),以PEG20M为固定相,柱温45℃,保持3 min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持5min;进样器温度200℃;检测器温度300℃;载气为氮气;分流比为2∶1.结果:实现了各组分的基线分离;3批样品中的残留溶剂含量均符合要求.结论:该方法灵敏、准确、可靠,适用于2-甲氧基雌二醇中有机溶剂残留量的测定.
作者:李杨;施秀芳;张青青;张超峰;杜斌 刊期: 2011年第06期
老年性痴呆又称阿尔茨海默病( Alzheimer's disease,AD),是一种神经系统进行性变性疾病,它常以近期记忆减退为首发症状,逐渐累及记忆、计算、定向、理解、思维等多种形式的认知功能,终甚至导致丧失正常的社会生活能力[1].康复治疗是根据患者的生活活动能力、运动功能及认知功能损害的程度,制定的一套康复治疗计划,是使病、残及伤者身心健康与功能恢复的重要手段[2].2006年8月至2011年1月,作者对41例AD患者进行康复治疗,观察治疗后患者认知功能的变化,探讨AD患者康复的有效治疗模式,报道如下.
作者:杜云红;穆俊林;宋景贵;马振武;顾仁骏 刊期: 2011年第06期
目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对胰腺癌sw1990细胞增殖及相关基因表达的影响.方法:应用不同剂量5-FU(0、50、100、200、400、800 mg/L)作用sw1990 24、48和72 h后收集细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR检测p53、bax和pten mRNA的表达,Western blot法检测P53、BAX、PTEN及p-AKT蛋白的表达.结果:5-FU抑制sw1990细胞的增殖,抑制作用呈现剂量依赖性(F剂量 =11.024,P=0.012).5-FU作用后sw1990细胞p53、bax及pten mRNA表达均升高(F剂量 =4.317,6.812和10.403,P均<0.05;F时间=3.058,0.906和0.451,P均>0.05);5-FU作用后sw1990细胞P53及BAX蛋白相对表达量高于未处理组(t=9.025,24.562,P<0.05),p-AKT蛋白相对表达量低于未处理组(t=7.239,P=0.042),PTEN蛋白表达量无明显变化(t=4.938,P=0.845).结论:5-FU可能通过调节sw1990中p53 、bax mRNA及P53、BAX、p-AKT蛋白表达,抑制sw1990增殖.
作者:朱春晖;谢勇;吕农华 刊期: 2011年第06期
目的:检测Hela细胞雄激素受体(AR)基因外显子1的甲基化水平.方法:用亚硫酸氢盐克隆测序法和联合亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测不同来源Hela细胞AR基因外显子1的甲基化水平,BiQ Analyzer软件分析测序结果.结果:在非CpG胞嘧啶转化率>98%的前提下,Hela细胞AR基因外显子1片段的总甲基化率≥96.2%,除第8个CpG位点外,其他CpG位点均为完全甲基化或高甲基化.COBRA法与测序法结果一致.结论:DNA甲基化可能是Hela细胞AR基因失活的分子机制.
作者:李笑竹;赵贵森;岳阳阳;翟仙敦;艾红伟;薛小琦 刊期: 2011年第06期
目的:探讨非小细胞肺癌( NSCLC)组织中CD68和c-Jun蛋白的表达与肺癌发生发展的关系及其意义.方法:采用免疫组化SP法检测67例人NSCLC标本(每个标本取癌、癌旁和正常组织)中CD68和c-Jun蛋白的表达,应用Spearman秩相关检验CD68阳性细胞数与c-Jun蛋白表达的相关性.结果:肺癌、癌旁及正常肺组织中CD68阳性细胞数依次为11.8±1.4、97.5±2.5和52.1±1.9,差异有统计学意义(F=52 334.934,P<0.001);c-Jun蛋白的平均光密度值依次为0.25±0.03、0.23±0.02和0.20±0.01,差异有统计学意义(F=91.280,P<0.001).癌旁组织中CD68阳性细胞数与年龄、性别、病理类型、分化程度、吸烟无关(P>0.05),与TNM分期(F=158.273,P<0.001)、淋巴结转移(F=84.985,P<0.001)、是否侵及胸膜(F=16.422,P<0.001)有关.癌旁组织中c-Jun蛋白的表达与年龄、性别、病理类型、吸烟无关(P>0.05),与TNM分期(F=19.319,P<0.001)、分化程度(F=33.918,P<0.001)、淋巴结转移(t=12.155,P<0.001)、是否侵及胸膜(F=8.318,P=0.005)有关.在癌旁组织中CD68阳性细胞数与c-Jun蛋白的表达呈正相关(rs =0.519,P<0.001).结论:巨噬细胞主要浸润在癌旁组织中,可能通过激活蛋白-1促进NSCLC的发展转移.
作者:刘瑜;王娜;冯斐斐;燕贞;王威;张少锋;秦丽娟;吴逸明 刊期: 2011年第06期
脂肪萎缩综合征通常是指脂肪组织缺乏,导致外周胰岛素抵抗和高甘油三酯血症的一组代谢异常疾病.郑州大学第一附属医院内分泌科于2010年8月发现1例脂肪萎缩综合征,报道如下.
作者:万荔;孙良阁;任蕾;朱亚丽;刘爽;张小丽 刊期: 2011年第06期
目的:克隆杜氏盐藻鞭毛相关蛋白(FAP)的cDNA片段并探讨其功能.方法:分析莱茵衣藻等生物的FAP同源蛋白的氨基酸序列保守区域,设计简并引物.提取盐藻总RNA进行RT-PCR.根据得到的序列设计3'RACE引物,巢式PCR扩增该cDNA的3'端序列.秋水仙碱处理对数生长期的盐藻细胞,使细胞停留在分裂中期,并诱导鞭毛缩短,半定量PCR检测FAP基因的表达情况.结果:RT-PCR和3'RACE分别得到长1 535 bp和782bp的cDNA片段,拼接后总长2 141 bp,编码541个氨基酸.序列比对发现与莱茵衣藻的FAP(88%)、团藻CDC48(89%)氨基酸序列均有较高的同源性.秋水仙碱处理后盐藻细胞FAP mRNA表达量高于未处理对照组(F组间=43.192,P<0.001;F时间=2.659,P=0.043;F交互=594.419,P<0.001).结论:成功获得杜氏盐藻FAP的cDNA片段,该基因在秋水仙碱诱导的鞭毛重吸收过程中表达量增高.
作者:李靓;石科;李俊平;柴丹丹;薛乐勋 刊期: 2011年第06期
目的:观察杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基stt3a的酵母双杂交诱饵载体表达产物对酵母细胞有无毒害作用并检测其自激活作用.方法:应用PCR方法获得stt3a可溶端的基因片段,将基因片段按正确的方向插入到酵母表达质粒pGBKT7中,经限制性内酶切鉴定正确后,用PEG/LiAc法转化到酵母菌株Y187中,并通过表型筛选检测诱饵蛋白有无毒性和自激活作用.结果:成功获得了stt3a可溶端的基因片段,其表达的蛋白对酵母菌株Y187无毒害,报告基因-半乳糖苷酶活性没有被诱导.结论:酵母双杂交GAL4系统可以被用来研究杜氏盐藻中与stt3a相互作用的蛋白.
作者:侯永杰;李杰;李庆华;王建人;薛乐勋 刊期: 2011年第06期
临床上牙根折裂(根折)的诊断需要丰富的临床经验和灵敏的检查手段,大多数根折临床表现为根尖周炎或者牙周炎相似症状,而且部分根折早期并无明显症状,因此,影像学辅助检查就显得尤其重要.锥形束CT (cone beam computed tomography,CBCT)是近十年开始应用于口腔医疗领域的三维影像辅助诊断设备,有关其在根折诊断方面的应用价值鲜有报道.作者比较了CBCT与传统X线根尖片对根折的诊断效率,以评价CBCT在根折中的临床应用价值.
作者:秦红霞;张晨;闫波;范文娟;赵绮 刊期: 2011年第06期
目的:建立毫菊中木犀草素和木犀草苷含量的反相高效液相色谱测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Scienhome C18(4.6 mm×200 mm,5μm),检测波长350 nm,柱温30℃,流速l mL/min.结果:木犀草苷含量在0.004 8 ~0.038 4 μg内线性良好,Y=10 000 000X -6 650,r =0.999 9,回收率为104.9%,RSD为1.64%;木犀草素含量在0.032 ~0.256 μg内线性良好,Y=8 000 000X -20 581,r=0.999 9,回收率为101.7%,RSD为1.68%.结论:该测定方法准确可靠,重现性好,对毫菊的质量控制有重要意义.
作者:王存良;李远哲 刊期: 2011年第06期
目的:探讨PTEN、E-cadherin和CD44v6蛋白表达与食管癌临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学SP法分别检测39例食管正常黏膜、23例癌旁不典型增生和52例食管鳞状细胞癌组织中PTEN、E-cadherin和CD44v6蛋白的表达水平.结果:食管正常黏膜、癌旁不典型增生和食管鳞状细胞癌组织中PTEN、E-cadherin蛋白阳性表达率逐渐降低(x2=14.322,21.622,P<0.001),CD44v6蛋白阳性表达率逐渐升高(x2=19.372,P<0.00l).PTEN、E-cadherin阳性表达率随癌组织分化程度的降低而降低(P<0.01),随浸润深度的增加而降低(P<0.05);有淋巴结转移者PTEN、E-cadherin阳性表达率低于无淋巴结转移者(x2=9.871和6.502,P=0.002和0.011).CD44v6阳性表达率随癌组织分化程度的降低和浸润深度的增加而逐渐升高(P<0.05),有淋巴结转移者CD44v6阳性表达率高于无淋巴结转移者(x2校正=4.442,P=0.035).癌组织中E-cadherin、PTEN与CD44v6的表达呈负关联(rp =0.585,0.531,P<0.001),PTEN与E-cadherin的表达呈正关联(rp =0.601,P<0.001).结论:PTEN、E-cadherin和CD44v6的异常表达参与了食管鳞状细胞癌的发生、发展和浸润转移.
作者:张思森;张谢夫;张云汉 刊期: 2011年第06期
小儿斜视矫正手术一般手术时间短,刺激中等,但操作精细,术中要求患儿安静、无躁动.氯胺酮静脉全麻因具有镇痛效果好,保护性吞咽反射不消失等优点,长期以来广泛应用于小儿麻醉,但氯胺酮可以提高气道反应性,容易造成喉痉挛、屏气及术后分泌物增多等[1],术中常需麻醉医师托下颌、吸痰以维持呼吸道通畅.
作者:王其敏 刊期: 2011年第06期
缺氧缺血性脑损伤( hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是引起新生儿急性死亡和慢性神经系统损伤的主要原因.目前临床上常用的治疗新生儿HIBD的方法如高压氧疗法、亚低温疗法等都仅局限于对症、支持治疗,只能在一定程度上缓解症状,尚难从根本上恢复神经系统功能.大量研究[1-3]发现,通过移植具有多向分化潜能的神经干细胞( neural stem cells,NSCs)能减少HIBD新生大鼠由于局部缺血而导致的神经细胞死亡,使之运动和学习记忆能力均得到提高.将经过基因修饰的NSCs进行移植,有望为HIBD的治疗提供一个崭新的思路.
作者:王军;朱登纳 刊期: 2011年第06期
脾脏窦岸细胞血管瘤(littoral cell angioma,LCA)是少见的脾血管源性肿瘤.Falk等[1]于1991年首次报道,该病兼具组织细胞和内皮细胞的特性,但不同于已知脾脏血管源性肿瘤,将其命名为LCA.LCA大多数为良性肿瘤,但也有恶性病例的报道[2].现报道1例LCA并复习文献.
作者:刘艳杰;范正军;薛建锋;程波;张水军 刊期: 2011年第06期