李靓；石科；李俊平；柴丹丹；薛乐勋
目的:探讨机动车尾气有机提取物的体外遗传毒性作用.方法:用双核细胞微核试验和彗星试验评价机动车尾气有机提取物(2.5、5.0和10.0 mg/L)对HepG2细胞的遗传毒性,另设溶剂对照组和阳性对照组,每组6个平行孔.结果:各组双核细胞微核率和Olive尾矩比较,差异有均统计学意义(F=18.608和9.525,P均＜0.001).5.0和10.0 mg/L有机提取物组双核细胞微核率高于溶剂对照组,3个剂量组Olive尾矩均高于溶剂对照组(P均＜0.05).结论:机动车尾气有机提取物对HepG2细胞具有明显的遗传毒性.
作者：郭海玲；夏向群；杨海燕 刊期： 2011年第06期
目的:探讨胃肠道间质瘤组织中Ki-67、细胞周期素D1( Cyclin D1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、凋亡抑制蛋白( Livin)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达与Fletcher分级的相关性.方法:应用免疫组化SP法检测67例胃肠道间质瘤存档蜡块标本中各蛋白的表达情况,单因素和多因素分析各蛋白表达与Fletcher分级的关系.结果:单因素分析结果显示,不同危险度分组中,Ki-67、Cyclin D1、Livin及MMP-9蛋白表达的差异有统计学意义(P均＜0.05).有序Logistic回归多因素分析结果显示,Cyclin D1和MMP-9对Fletcher分级影响显著,是Fletcher分级的独立影响因子,Cyclin D1和MMP-9的优势比分别为3.51和3.29.结论:Cyclin D1、MMP-9蛋白在胃肠道间质瘤组织中的表达与Fletcher分级具有明确的相关性,可作为判定恶性程度的参照因素.
作者：务森；张谢夫；赵春临；刘涛 刊期： 2011年第06期
目的:检测骨肉瘤组织中血管生成素-2( Ang-2)与血管内皮生长因子(VEGF)的表达及微血管密度(MVD).方法:采用RT-PCR技术和Western blot法检测69例骨肉瘤患者和12例正常对照骨组织中Ang-2的表达；采用免疫组化法检测69例骨肉瘤组织中VEGF与CD34的表达,计算MVD；分析Ang-2的表达与VEGF、MVD的关系.结果:骨肉瘤组Ang-2 mRNA的表达量、Ang-2蛋白阳性表达率、VEGF蛋白阳性表达率及MVD均高于对照组(t=8.2 53,x2校正 =11.960和11.470,P均＜0.01).高VEGF表达组Ang-2蛋白与mRNA的表达高于低VEGF表达组(P＜0.01)；高MVD组Ang-2蛋白与mRNA的表达高于低MVD组(P＜0.01).结论:Ang-2参与了骨肉瘤的血管生成及调控,在骨肉瘤的发生中起着重要的作用.
作者：赵小明；薛新宏；赵少平 刊期： 2011年第06期
目的:比较不同剂量的放射治疗对人脑胶质瘤干细胞及其分化的胶质瘤细胞的杀灭作用,探讨胶质瘤干细胞与放疗耐受的相关性.方法:分离、培养并纯化人脑胶质瘤干细胞,并同时诱导纯化的肿瘤干细胞向胶质瘤细胞分化,对人脑胶质瘤干细胞及其分化后的胶质瘤细胞分别以0、2、3、5、8、12 Gy的6MVX线照射后,继续培养72 h,采用MTT法检测细胞的增殖情况.结果:由胶质瘤干细胞分化出的子代胶质瘤细胞对放射治疗的耐受性下降,且随照射剂量增大,细胞生长抑制显著(F=125.971,P＜0.001).结论:脑胶质瘤干细胞分化后,对放射治疗的耐受性下降.
作者：李远；关方霞；杨波；胡祥；杜英；焦红亮；田毅 刊期： 2011年第06期
新生血管性青光眼( neovascular glaucoma,NVG)是由于纤维血管组织在房角增生,导致小梁网阻塞,周边虹膜前粘连及进行性房角关闭,进而引起眼压升高,应用一般的抗青光眼药物及滤过性手术难以控制.近年来较多的研究[1]证实,二极管激光性能稳定,易于穿透巩膜,凝固部分睫状体组织,减少房水的生成,使眼压下降,缓解疼痛.玻璃体内注射Avastin对消退虹膜新生血管并进一步控制眼压有明确的疗效[2].
作者：龚玉静；郝燕燕 刊期： 2011年第06期
目的:测定2-甲氧基雌二醇中残留溶剂甲醇和二氯甲烷的含量.方法:采用气相色谱法检测3批2-甲氧基雌二醇样品中的组分.应用氢火焰离子化检测器( FID),以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,采用HP-INNOWAX柱(30mx0.53 mm×1 μm),以PEG20M为固定相,柱温45℃,保持3 min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持5min；进样器温度200℃；检测器温度300℃；载气为氮气；分流比为2∶1.结果:实现了各组分的基线分离；3批样品中的残留溶剂含量均符合要求.结论:该方法灵敏、准确、可靠,适用于2-甲氧基雌二醇中有机溶剂残留量的测定.
作者：李杨；施秀芳；张青青；张超峰；杜斌 刊期： 2011年第06期
老年性痴呆又称阿尔茨海默病( Alzheimer's disease,AD),是一种神经系统进行性变性疾病,它常以近期记忆减退为首发症状,逐渐累及记忆、计算、定向、理解、思维等多种形式的认知功能,终甚至导致丧失正常的社会生活能力[1].康复治疗是根据患者的生活活动能力、运动功能及认知功能损害的程度,制定的一套康复治疗计划,是使病、残及伤者身心健康与功能恢复的重要手段[2].2006年8月至2011年1月,作者对41例AD患者进行康复治疗,观察治疗后患者认知功能的变化,探讨AD患者康复的有效治疗模式,报道如下.
作者：杜云红；穆俊林；宋景贵；马振武；顾仁骏 刊期： 2011年第06期
目的:探讨黄杞总黄酮对脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用及可能机制.方法:48只SD大鼠随机分成6组,假手术组、模型组、黄杞总黄酮( 200、100、50 mg/kg)组、脑心通(292 mg/kg)组,每组8只.采用线栓法建立脑缺血再灌注模型.进行神经行为评分和脑组织含水量测定.然后检测血清中一氧化氮(NO)水平、脑组织匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果:各组间神经行为评分、脑组织含水量、血清中NO水平、脑组织匀浆中MDA含量、SOD和GSH-Px活性比较,差异均有统计学意义(F为35.305、40.259、15.338、21.022、10.497和12.381,P均＜0.001).除100 mg/kg黄杞总黄酮组GSH-Px外,200和100 mg/kg黄杞总黄酮组各指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论:黄杞总黄酮对脑缺血再灌注损伤具有改善作用,可能与其抗氧化活性有关.
作者：冯静；柴东燕；秦玉花；乔海灵 刊期： 2011年第06期
近年结核病发病率呈增高趋势,WHO估计2000年至2020年,将有近10亿人新感染结核病[1].目前全球每年约有900万人感染结核病,300万人死于结核病[2].我国又是全球结核病高负担的国家之一,而结核病的早期诊断和有效治疗是控制结核病疫情的关键,因此,准确、快捷、简便的实验室检测方法对于结核病的早期诊断和及时治疗具有十分重要的意义.
作者：袁丽娜；党霞；史慧敏；王子玲 刊期： 2011年第06期
目的:检测Hela细胞雄激素受体(AR)基因外显子1的甲基化水平.方法:用亚硫酸氢盐克隆测序法和联合亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测不同来源Hela细胞AR基因外显子1的甲基化水平,BiQ Analyzer软件分析测序结果.结果:在非CpG胞嘧啶转化率＞98％的前提下,Hela细胞AR基因外显子1片段的总甲基化率≥96.2％,除第8个CpG位点外,其他CpG位点均为完全甲基化或高甲基化.COBRA法与测序法结果一致.结论:DNA甲基化可能是Hela细胞AR基因失活的分子机制.
作者：李笑竹；赵贵森；岳阳阳；翟仙敦；艾红伟；薛小琦 刊期： 2011年第06期
糖尿病肾病( diabetic nephropathy,DN)是糖尿病微血管病变之一,是导致终末期肾病的主要病因.早期治疗DN对延缓慢性肾功能不全的发生、发展有着重要的临床意义[1].作者收集了2008年1月至2010年3月漯河市第六人民医院收治的186例DN患者的临床资料,观察了不同剂量厄贝沙坦治疗DN的疗效,报道如下.
作者：孙四平 刊期： 2011年第06期
目的:探讨玻璃化冷冻法对冻融胚胎移植周期结局的影响.方法:对324个玻璃化冷冻人卵裂期胚胎复苏周期和146个程序化慢速冷冻胚胎复苏周期进行分析,比较2组冷冻胚胎复苏后的存活率、完整率、种植率、临床妊娠率、孕周、新生儿身高及体质量等指标.结果:玻璃化冷冻组的胚胎完整率、临床妊娠率均高于程序化慢速冷冻组(83.24％ vs47.54％,x2=179.772,P＜0.001；37.38％ vs 27.66％,x22=4.073,P=0.044)；2组流产率、分娩孕周、新生儿出生体质量及身高比较,差异无统计学意义(P均＞0.05).结论:玻璃化冷冻胚胎较程序化慢速冷冻法有更高的复苏胚胎完整率及临床妊娠率,可在临床上安全应用.
作者：娄华；孙丽君；王兴玲；郝大勇；王雪梅；于晓娜 刊期： 2011年第06期
目的:测定多发性硬化(MS)初发组与复发组患者血清激肽释放酶1( klkl)与激肽释放酶6(klk6)的水平,研究二者与MS复发的关系.方法:采用ELISA法测定健康对照者、其他神经系统疾病患者、初发MS患者和复发MS患者各50名外周血血清klk1和klk6水平.结果:4组患者血清klk1和klk6水平比较,差异均有统计学意义(F=158.940和61.490,P＜0.001)；MS初发组与复发组血清klk1和klk6水平均高于其他2组,且MS复发组高于初发组(P＜0.05).MS患者血清klk1、klk6水平分别与MS的复发呈正关联(rP=0.555和0.447,P＜0.05).结论:血清klk1、klk6水平与MS复发相关,可能作为反映MS复发的指标.
作者：王梦涵；卢宏；焦淑洁；杜冉；蒋超；刘希 刊期： 2011年第06期
目的:建立毫菊中木犀草素和木犀草苷含量的反相高效液相色谱测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Scienhome C18(4.6 mm×200 mm,5μm),检测波长350 nm,柱温30℃,流速l mL/min.结果:木犀草苷含量在0.004 8 ～0.038 4 μg内线性良好,Y=10 000 000X -6 650,r =0.999 9,回收率为104.9％,RSD为1.64％；木犀草素含量在0.032 ～0.256 μg内线性良好,Y=8 000 000X -20 581,r=0.999 9,回收率为101.7％,RSD为1.68％.结论:该测定方法准确可靠,重现性好,对毫菊的质量控制有重要意义.
作者：王存良；李远哲 刊期： 2011年第06期
目的:了解柯萨奇病毒B5( CoxB5)河南分离株全基因特征及与其他肠道病毒基因的关系.方法:采用RT-PCR扩增全基因,采用DNAStar中的SeqMan拼接所测序列,BioEdit进行同源性比较,Simplot进行相似度分析.结果:CoxB5/Henan/2010基因组全长7 401 bp.与原型株Faulkner相比,编码区氨基酸同源性为95.6％,核苷酸同源性为79.9％,其中VP4-VP2核苷酸差异为17.8％～20.4％,VP1核苷酸差异为19.5％,P2、P3核苷酸差异分别为19.5％、21.7％.不同型别肠道病毒间VP4-VP2核苷酸差异为14.4％ ～ 34.9％,VP1核苷酸差异为18.3％～42.3％,P2、P3核苷酸差异为17.1％～21.0％、15.5％ ～ 22.6％.结论:与原型株相比,CoxB5/Henan/2010株编码区发生沉默突变,其核苷酸变异并不影响氨基酸序列的变化；肠道病毒基因组各分区在进化中不同步.
作者：黄学勇；许玉玲；李幸乐；晁灵；陈豪敏；许汴利 刊期： 2011年第06期
目的:克隆杜氏盐藻FK506结合蛋白(FKBP)的cDNA片段并探讨其与鞭毛微管解组装的联系.方法:提取杜氏盐藻总RNA,根据已知盐藻FKBP cDNA 3'端序列,用5'RACE方法扩增该cDNA的5'端序列,拼接得到全长并对其序列进行分析.秋水仙碱处理对数生长期杜氏盐藻,处理0、20、40、60、80、100、120、140和160 min后采用实时荧光定量PCR检测FKBP mRNA的表达情况.结果:经5'RACE得到681 bp的FKBP cDNA片段,拼接后得到的cDNA全长1 075 bp,序列分析显示其开放阅读框为762 bp,编码253个氨基酸；经BLAST比对,其氨基酸序列具有FKBP家族特有的功能结构域,与莱茵衣藻、团藻、小球藻、大麦及水稻的同源性分别为61％、54％、47％、48％和51％.杜氏盐藻细胞FKBP mRNA表达量在秋水仙碱处理后20～40 min明显升高,而在40 ～ 100 min时逐渐下降,但仍高于对照组(F组间=32.580,P＜0.001；F时间=5.543,P=0.001；F交互=237.306,P＜0.001).结论:得到了杜氏盐藻的FKBPcDNA全长序列；FKBP参与了杜氏盐藻微管解组装过程,可能参与了细胞通过鞭毛对外界应激反应的应答.
作者：许芳；石科；李靓；张楠楠；薛乐勋 刊期： 2011年第06期
目的:构建具有良好多样性的人尘肺病噬菌体单链抗体( ScFv)库.方法:收集25例尘肺病患者外周血标本共50 mL,密度梯度离心法分离淋巴细胞,Trizol法提取总RNA,逆转录后参考文献设计并合成半巢式PCR引物,扩增抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,Linker连接VH和VL,继而连接到噬菌体载体pCANTAB-SE中,连接产物转入感受态大肠杆菌TG1,超感染辅助噬菌体M13KO7,构建噬菌体ScFv库.结果:扩增出VH和VL基因序列并有效地连接,经转化和超感染,构建了库容为2.4x107pfu/mL的ScFV库.结论:成功构建人尘肺病噬菌体ScFV库.
作者：翟伟；郝长付；高彬；姚武 刊期： 2011年第06期
目的:应用经颅多普勒(TCD)监测蛛网膜下腔出血(SAH)急性期患者的脑血流动力学变化,评估脑脊液置换减轻脑血管痉挛(CVS)的疗效,并进而无创预测颅内压(ICP).方法:将60例SAH患者随机分为脑脊液置换组与非置换组各30例,发病第1、3、5、7天均行TCD检测,记录收缩期峰血流速度(vs)、舒张期末血流速度(vd)、平均血流速度(vm)及搏动指数(PI).置换组每次检测完成后立即行腰椎穿刺、脑脊液测压并行脑脊液置换,非置换组仅行脑脊液测压.结果:2组患者病程不同时间点间va、vm及vd差异均有统计学意义,组间效应及交互效应vs差异亦有统计学意义(P均＜0.05)；置换组血流速度第5天达高峰,第7天稍有减慢,而非置换组呈逐渐增快趋势,第7天达高峰；与非置换组比较,置换组CVS发生率降低(x2=6.239,P=0.012),程度减轻.以PI为解释变量,ICP为反应变量建立回归方程:ICP =4.666+ 15.246×PI(F=93.275,P＜0.001).应用该回归方程对ICP进行预测,与实际ICP相比,预测差值在5 mmHg内者占85.6％.结论:SAH急性期患者脑血流速度呈增快趋势,脑脊液置换可有效减轻CVS；TCD可较为准确地无创预测SAH急性期患者的ICP.
作者：安红伟；卢昌均；程岗 刊期： 2011年第06期
目的:研究丁基苯酞(NBP)对老龄大鼠慢性脑缺血脑组织瞬时感受器电位M2型(TRPM2)及核酸内切酶G(EndoG)表达的影响.方法:80只老龄Wistar大鼠随机分为4组,每组20只,分别为假手术组、模型组、NBP低剂量治疗组和NBP高剂量治疗组.采用双侧颈总动脉永久结扎建立慢性脑缺血模型.3个月后,HE染色观察脑组织形态学变化,免疫组化SP法染色检测TRPM2和EndoG的表达变化.结果:各组大鼠脑皮层与海马区组织TRPM2和EndoG表达比较,差异有统计学意义(F=310.046、127.115、49.959和80.292,P均＜0.05).模型组皮质和海马TRPM2、EndoG表达较假手术组增多(P＜0.05),而NBP低剂量和高剂量治疗组较模型组减少(P＜o.o5),NBP高剂量组较低剂量治疗组降低更加明显(P＜0.05).结论:NBP可能通过下调TRPM2和EndoG的表达,抑制细胞损伤和死亡,发挥对慢性缺血性脑组织的神经保护作用.
作者：张会芳；声宏；焦淑洁；刘希 刊期： 2011年第06期
目的:获得FLA8基因cDNA序列.方法:根据衣藻、小球藻等驱动蛋白-2亚基的氨基酸高度保守序列GYNGTIF、NEDPKDA设计一对简并引物,采用RT-PCR及3'RACE和5'RACE的方法扩增杜氏盐藻FLA8基因的全长.结果:克隆得到的杜氏盐藻FLA8基因cDNA全长序列为2 612 bp,序列分析显示其包括90 bp的5'UTR、167 bp的3'UTR以及2 355 bp的开放阅读框,其编码784个氮基酸残基,蛋白质的理论等电点为6.65,相对分子质量为85 097.氨基酸序列同源性分析显示其与其他物种有较高的同源性:团藻(98％)、衣藻(99％)、小球藻(92％).结论:得到杜氏盐藻驱动蛋白-2亚基FLA8的基因全长.
作者：李俊平；刘岷；毛丽红；石科；李靓；许尧；薛乐勋 刊期： 2011年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
