安红伟；卢昌均；程岗
目的:检测Hela细胞雄激素受体(AR)基因外显子1的甲基化水平.方法:用亚硫酸氢盐克隆测序法和联合亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测不同来源Hela细胞AR基因外显子1的甲基化水平,BiQ Analyzer软件分析测序结果.结果:在非CpG胞嘧啶转化率＞98％的前提下,Hela细胞AR基因外显子1片段的总甲基化率≥96.2％,除第8个CpG位点外,其他CpG位点均为完全甲基化或高甲基化.COBRA法与测序法结果一致.结论:DNA甲基化可能是Hela细胞AR基因失活的分子机制.
作者：李笑竹；赵贵森；岳阳阳；翟仙敦；艾红伟；薛小琦 刊期： 2011年第06期
目的:测定2-甲氧基雌二醇中残留溶剂甲醇和二氯甲烷的含量.方法:采用气相色谱法检测3批2-甲氧基雌二醇样品中的组分.应用氢火焰离子化检测器( FID),以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,采用HP-INNOWAX柱(30mx0.53 mm×1 μm),以PEG20M为固定相,柱温45℃,保持3 min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持5min；进样器温度200℃；检测器温度300℃；载气为氮气；分流比为2∶1.结果:实现了各组分的基线分离；3批样品中的残留溶剂含量均符合要求.结论:该方法灵敏、准确、可靠,适用于2-甲氧基雌二醇中有机溶剂残留量的测定.
作者：李杨；施秀芳；张青青；张超峰；杜斌 刊期： 2011年第06期
目的:分析比较煤矿作业工人呼吸道诱导痰细胞学的表现.方法:对接尘非尘肺工人62名、未接尘非尘肺工人53名、尘肺患者22例和健康对照10人进行呼吸道诱痰,将痰液处理后进行细胞总数计数和分类计数.结果:接尘与未接尘非尘肺工人痰细胞总数、中性粒细胞(N)、巨噬细胞(M)、淋巴细胞(L)及嗜酸性粒细胞(Eo)计数比较,差异均无统计学意义(F分别为0.986、0.607、0.481、0.317和0.020,P均＞0.05).不同工龄接尘非尘肺工人痰细胞总数、N、L及Eo计数差异亦无统计学意义(F分别为0.431、2.390、0.341和0.351,P均＞0.05),但接尘工龄10 a及以上组M计数较高(F=2.723,P=0.038).健康对照、Ⅰ期尘肺和Ⅱ+Ⅲ期尘肺患者痰细胞总数及细胞分类计数差异无统计学意义(F分别为0.704、3.103、1.812、1.531和0.394,P均＞0.05).结论:呼吸道巨噬细胞计数可以作为尘肺进展的标志；诱导痰方法可用于粉尘作业工人痰细胞学变化的监测.
作者：赫金凤；任文杰；张巧；吴卫东；徐宏平；王桂芝；王婧华；胡东生 刊期： 2011年第06期
目的:建立毫菊中木犀草素和木犀草苷含量的反相高效液相色谱测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Scienhome C18(4.6 mm×200 mm,5μm),检测波长350 nm,柱温30℃,流速l mL/min.结果:木犀草苷含量在0.004 8 ～0.038 4 μg内线性良好,Y=10 000 000X -6 650,r =0.999 9,回收率为104.9％,RSD为1.64％；木犀草素含量在0.032 ～0.256 μg内线性良好,Y=8 000 000X -20 581,r=0.999 9,回收率为101.7％,RSD为1.68％.结论:该测定方法准确可靠,重现性好,对毫菊的质量控制有重要意义.
作者：王存良；李远哲 刊期： 2011年第06期
目的:介绍河南省在“世行贷款/英国赠款中国农村卫生发展项目(卫Ⅺ项目)”支持下,在县级医院开展基本医疗服务综合支付制度改革试点的创新做法及初步实施效果.方法:通过深度访谈了解制度设计,机构调查收集试点医疗机构服务量、质量及费用等数据,采用时间序列分析法进行分析.结果:该改革模式创造性提出了“四位一体”的县级医院支付制度综合改革新框架,并在部分卫Ⅺ项目县县级医院开展了实践应用,效果明显.结论:该模式的提出和应用为当前深化医药卫生体制改革提出的完善公立医院支付制度改革、推进县级医院综合改革提供了一个良好的思路和案例.
作者：吴建；周学山；谢双保 刊期： 2011年第06期
目的:探讨谷氨酰胺对急性全脑缺血再灌注损伤时小肠黏膜Occludin蛋白表达的影响.方法:采用四血管阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注动物模型.实验分4组,分别为假手术组、盐水对照组、奥扎格雷组和谷氨酰胺组,每组24只大鼠.建模成功后,盐水对照组立即腹腔注射2 mL生理盐水；奥扎格雷钠组按33.67 mg/kg腹腔注射奥扎格雷钠；谷氨酰胺组按33.67 mg/kg腹腔注射奥扎格雷钠和按0.4 g/kg腹腔注射体积分数20％的L-丙氨酸-L-谷氨酰胺双肽注射液.再灌注6、12及24h,每组各处死大鼠8只,取脑和小肠,光镜下观察脑组织海马区病理改变,免疫组化SP法测定小肠黏膜Occludin蛋白表达.结果:盐水对照组、奥扎格雷钠组和谷氨酰胺组于再灌注6、12和24h海马锥体细胞结构紊乱、边界模糊,在12和24 h各时间点,4组大鼠肠黏膜Occludin蛋白表达差异有统计学意义(H=15.175和20.234,P均＜0.001).与假手术组比较,其余3组Ocdudin蛋白表达下降(P＜0.05)；与谷氨酰胺组相比,盐水对照组和奥扎格雷钠组表达下降(P＜0.05).结论:谷氨酰胺可以提高全脑缺血再灌注大鼠小肠组织中Occludin蛋白表达水平,从而减轻全脑缺血再灌注对小肠黏膜的损伤.
作者：王庆治；张帮杰；王素娟；张丽萍；谭军 刊期： 2011年第06期
目的:探讨黄杞总黄酮对脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用及可能机制.方法:48只SD大鼠随机分成6组,假手术组、模型组、黄杞总黄酮( 200、100、50 mg/kg)组、脑心通(292 mg/kg)组,每组8只.采用线栓法建立脑缺血再灌注模型.进行神经行为评分和脑组织含水量测定.然后检测血清中一氧化氮(NO)水平、脑组织匀浆中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果:各组间神经行为评分、脑组织含水量、血清中NO水平、脑组织匀浆中MDA含量、SOD和GSH-Px活性比较,差异均有统计学意义(F为35.305、40.259、15.338、21.022、10.497和12.381,P均＜0.001).除100 mg/kg黄杞总黄酮组GSH-Px外,200和100 mg/kg黄杞总黄酮组各指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P均＜0.05).结论:黄杞总黄酮对脑缺血再灌注损伤具有改善作用,可能与其抗氧化活性有关.
作者：冯静；柴东燕；秦玉花；乔海灵 刊期： 2011年第06期
目的:应用经颅多普勒(TCD)监测蛛网膜下腔出血(SAH)急性期患者的脑血流动力学变化,评估脑脊液置换减轻脑血管痉挛(CVS)的疗效,并进而无创预测颅内压(ICP).方法:将60例SAH患者随机分为脑脊液置换组与非置换组各30例,发病第1、3、5、7天均行TCD检测,记录收缩期峰血流速度(vs)、舒张期末血流速度(vd)、平均血流速度(vm)及搏动指数(PI).置换组每次检测完成后立即行腰椎穿刺、脑脊液测压并行脑脊液置换,非置换组仅行脑脊液测压.结果:2组患者病程不同时间点间va、vm及vd差异均有统计学意义,组间效应及交互效应vs差异亦有统计学意义(P均＜0.05)；置换组血流速度第5天达高峰,第7天稍有减慢,而非置换组呈逐渐增快趋势,第7天达高峰；与非置换组比较,置换组CVS发生率降低(x2=6.239,P=0.012),程度减轻.以PI为解释变量,ICP为反应变量建立回归方程:ICP =4.666+ 15.246×PI(F=93.275,P＜0.001).应用该回归方程对ICP进行预测,与实际ICP相比,预测差值在5 mmHg内者占85.6％.结论:SAH急性期患者脑血流速度呈增快趋势,脑脊液置换可有效减轻CVS；TCD可较为准确地无创预测SAH急性期患者的ICP.
作者：安红伟；卢昌均；程岗 刊期： 2011年第06期
目的:构建杜氏盐藻类驱动蛋白钙调素结合蛋白马达区(KMD)基因原核表达载体并表达纯化KMD.方法:通过软件和在线工具预测KMD的理化性质.构建KMD的原核表达载体pET28a-KMD,而后在大肠杆菌BL21(DE3)内16℃过夜诱导表达KMD,通过超声破碎菌体和高速离心,将上清液进行亲和层析.获得粗纯目的蛋白,再利用离子交换层析和凝胶过滤层析进一步纯化.SDS-PAGE检测层析各阶段蛋白样品.将纯化后的KMD均分3份分别放置在-80℃、4℃和18℃环境中,1周后SDS-PAGE检测目的蛋白是否降解.结果:KMD相对分子质量为37 480,预测pI为7.99.基因中含有的稀有密码子不会明显影响其在大肠杆菌BL21( DE3)中表达.多步层析后可以获得2个独立的目的蛋白洗脱峰,均为KMD且纯度可满足结晶条件搜索.纯化后的KMD在4℃和18℃下放置1周后无降解.结论:获得大量高纯度、均一性良好的KMD蛋白,能够满足培养蛋白晶体所需.
作者：徐朋奇；李木；张红梅；石科；韩康；李梅；薛乐勋 刊期： 2011年第06期
脾脏窦岸细胞血管瘤(littoral cell angioma,LCA)是少见的脾血管源性肿瘤.Falk等[1]于1991年首次报道,该病兼具组织细胞和内皮细胞的特性,但不同于已知脾脏血管源性肿瘤,将其命名为LCA.LCA大多数为良性肿瘤,但也有恶性病例的报道[2].现报道1例LCA并复习文献.
作者：刘艳杰；范正军；薛建锋；程波；张水军 刊期： 2011年第06期
目的:探讨多重连接依赖式探针扩增技术(MLPA)在杜氏肌营养不良(DMD)患者基因诊断中的应用价值,了解河南省DMD患者dystrophin基因突变热点.方法:采用MLPA检测48例河南省DMD患者及13例缺失型患者母亲dystrophin基因突变.结果:48例DMD患者中,有31例(64.6％)检测出dystrophin基因外显子缺失,4例(8.3％)检测出外显子重复.河南省DMD患者dystrophin基因缺失/重复热点区域为第46～53外显子和第8～18外显子.13例患者母亲有11人检测出杂合突变,突变类型与患者相同,余2人未检测出突变.河南省DMD患者基因外显子缺失、重复分布与北京相似(x2=0.256,P=0.880),但与香港和台湾地区有着较大差异(x2分别为11.470和11.303,P分别为0.003和0.004).结论:MLPA在DMD患者及携带者基因诊断中有很高的应用价值.河南省DMD患者dystrophin基因的突变热点与国内其他地区有差异.
作者：王凤羽；孙伟伟；李聪敏；常明秀；丰慧根；马林先 刊期： 2011年第06期
缺氧缺血性脑损伤( hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是引起新生儿急性死亡和慢性神经系统损伤的主要原因.目前临床上常用的治疗新生儿HIBD的方法如高压氧疗法、亚低温疗法等都仅局限于对症、支持治疗,只能在一定程度上缓解症状,尚难从根本上恢复神经系统功能.大量研究[1-3]发现,通过移植具有多向分化潜能的神经干细胞( neural stem cells,NSCs)能减少HIBD新生大鼠由于局部缺血而导致的神经细胞死亡,使之运动和学习记忆能力均得到提高.将经过基因修饰的NSCs进行移植,有望为HIBD的治疗提供一个崭新的思路.
作者：王军；朱登纳 刊期： 2011年第06期
老年性痴呆又称阿尔茨海默病( Alzheimer's disease,AD),是一种神经系统进行性变性疾病,它常以近期记忆减退为首发症状,逐渐累及记忆、计算、定向、理解、思维等多种形式的认知功能,终甚至导致丧失正常的社会生活能力[1].康复治疗是根据患者的生活活动能力、运动功能及认知功能损害的程度,制定的一套康复治疗计划,是使病、残及伤者身心健康与功能恢复的重要手段[2].2006年8月至2011年1月,作者对41例AD患者进行康复治疗,观察治疗后患者认知功能的变化,探讨AD患者康复的有效治疗模式,报道如下.
作者：杜云红；穆俊林；宋景贵；马振武；顾仁骏 刊期： 2011年第06期
目的:探讨普罗布考对过氧化氢( H2 O2)诱导的心肌细胞凋亡的影响,探讨其可能的机制.方法:培养的新生大鼠心肌细胞随机分组,分别给予0、1、10和100μmol/L普罗布考预处理6h后,再给予0.2 mmol/L H2O2继续孵育6h.采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR法检测细胞Bcl-2及Bax mRNA的表达,黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶( SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞内丙二醛(MDA)含量.结果:普罗布考剂量依赖性地抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡,降低心肌细胞Bax mRNA表达,升高Bcl-2 mRNA表达,升高心肌细胞SOD活性,降低MDA含量.结论:普罗布考可抑制H2 O2诱导的乳鼠心肌细胞凋亡,其作用机制与改善心肌细胞氧化应激水平有关.
作者：罗萍；杜松；段红艳；李海霞 刊期： 2011年第06期
关节镜下前交叉韧带重建是一项非常成熟的技术,无论是单束重建还是双束重建都取得了良好的临床效果.既往研究[1-3]对移植物的选择、固定方法、重建方法及骨隧道内口的定位等方面都做了大量的论述.然而,对肌腱切取、隧道方向、隧道长度等术中操作的细节问题涉及不多.为了进一步完善该项技术,作者对107例自体腘绳肌腱单束重建前交叉韧带术中所遇到的各种问题进行了总结,报道如下.
作者：吴术红；刘毅 刊期： 2011年第06期
目的:比较不同剂量的放射治疗对人脑胶质瘤干细胞及其分化的胶质瘤细胞的杀灭作用,探讨胶质瘤干细胞与放疗耐受的相关性.方法:分离、培养并纯化人脑胶质瘤干细胞,并同时诱导纯化的肿瘤干细胞向胶质瘤细胞分化,对人脑胶质瘤干细胞及其分化后的胶质瘤细胞分别以0、2、3、5、8、12 Gy的6MVX线照射后,继续培养72 h,采用MTT法检测细胞的增殖情况.结果:由胶质瘤干细胞分化出的子代胶质瘤细胞对放射治疗的耐受性下降,且随照射剂量增大,细胞生长抑制显著(F=125.971,P＜0.001).结论:脑胶质瘤干细胞分化后,对放射治疗的耐受性下降.
作者：李远；关方霞；杨波；胡祥；杜英；焦红亮；田毅 刊期： 2011年第06期
目的:探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对胰腺癌sw1990细胞增殖及相关基因表达的影响.方法:应用不同剂量5-FU(0、50、100、200、400、800 mg/L)作用sw1990 24、48和72 h后收集细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,RT-PCR检测p53、bax和pten mRNA的表达,Western blot法检测P53、BAX、PTEN及p-AKT蛋白的表达.结果:5-FU抑制sw1990细胞的增殖,抑制作用呈现剂量依赖性(F剂量 =11.024,P=0.012).5-FU作用后sw1990细胞p53、bax及pten mRNA表达均升高(F剂量 =4.317,6.812和10.403,P均＜0.05;F时间=3.058,0.906和0.451,P均＞0.05)；5-FU作用后sw1990细胞P53及BAX蛋白相对表达量高于未处理组(t=9.025,24.562,P＜0.05),p-AKT蛋白相对表达量低于未处理组(t=7.239,P=0.042),PTEN蛋白表达量无明显变化(t=4.938,P=0.845).结论:5-FU可能通过调节sw1990中p53 、bax mRNA及P53、BAX、p-AKT蛋白表达,抑制sw1990增殖.
作者：朱春晖；谢勇；吕农华 刊期： 2011年第06期
新生血管性青光眼( neovascular glaucoma,NVG)是由于纤维血管组织在房角增生,导致小梁网阻塞,周边虹膜前粘连及进行性房角关闭,进而引起眼压升高,应用一般的抗青光眼药物及滤过性手术难以控制.近年来较多的研究[1]证实,二极管激光性能稳定,易于穿透巩膜,凝固部分睫状体组织,减少房水的生成,使眼压下降,缓解疼痛.玻璃体内注射Avastin对消退虹膜新生血管并进一步控制眼压有明确的疗效[2].
作者：龚玉静；郝燕燕 刊期： 2011年第06期
目的:探讨包皮组织中肿瘤抑制蛋白p53和细胞周期调节基因p21 waf/cip1的表达与尿道下裂发病的关系.方法:采用RT-PCR技术检测30例尿道下裂患儿和30例对照组患儿包皮组织p53和p21 waf/cip1 mRNA表达水平.结果:与对照组比较,尿道下裂组p53 mRNA的表达降低(t=11.431,P=0.010),p21 waf/cip1 mRNA的表达无变化(t=1.408,P=0.244)；不同程度尿道下裂患儿p53和p21 wat/cip1的mRNA表达水平差异无统计学意义(F=3.641和3.089,P=0.158和0.187).结论:p53和p21 waf/cip1基因表达的变化可使尿道板和尿道襞上皮细胞过度增殖,尿道板腔化受阻,进而导致尿道下裂的发生.
作者：罗向阳；王伟 刊期： 2011年第06期
目的:克隆杜氏盐藻FK506结合蛋白(FKBP)的cDNA片段并探讨其与鞭毛微管解组装的联系.方法:提取杜氏盐藻总RNA,根据已知盐藻FKBP cDNA 3'端序列,用5'RACE方法扩增该cDNA的5'端序列,拼接得到全长并对其序列进行分析.秋水仙碱处理对数生长期杜氏盐藻,处理0、20、40、60、80、100、120、140和160 min后采用实时荧光定量PCR检测FKBP mRNA的表达情况.结果:经5'RACE得到681 bp的FKBP cDNA片段,拼接后得到的cDNA全长1 075 bp,序列分析显示其开放阅读框为762 bp,编码253个氨基酸；经BLAST比对,其氨基酸序列具有FKBP家族特有的功能结构域,与莱茵衣藻、团藻、小球藻、大麦及水稻的同源性分别为61％、54％、47％、48％和51％.杜氏盐藻细胞FKBP mRNA表达量在秋水仙碱处理后20～40 min明显升高,而在40 ～ 100 min时逐渐下降,但仍高于对照组(F组间=32.580,P＜0.001；F时间=5.543,P=0.001；F交互=237.306,P＜0.001).结论:得到了杜氏盐藻的FKBPcDNA全长序列；FKBP参与了杜氏盐藻微管解组装过程,可能参与了细胞通过鞭毛对外界应激反应的应答.
作者：许芳；石科；李靓；张楠楠；薛乐勋 刊期： 2011年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
