许芳;石科;李靓;张楠楠;薛乐勋
目的:研究丁基苯酞(NBP)对老龄大鼠慢性脑缺血脑组织瞬时感受器电位M2型(TRPM2)及核酸内切酶G(EndoG)表达的影响.方法:80只老龄Wistar大鼠随机分为4组,每组20只,分别为假手术组、模型组、NBP低剂量治疗组和NBP高剂量治疗组.采用双侧颈总动脉永久结扎建立慢性脑缺血模型.3个月后,HE染色观察脑组织形态学变化,免疫组化SP法染色检测TRPM2和EndoG的表达变化.结果:各组大鼠脑皮层与海马区组织TRPM2和EndoG表达比较,差异有统计学意义(F=310.046、127.115、49.959和80.292,P均<0.05).模型组皮质和海马TRPM2、EndoG表达较假手术组增多(P<0.05),而NBP低剂量和高剂量治疗组较模型组减少(P<o.o5),NBP高剂量组较低剂量治疗组降低更加明显(P<0.05).结论:NBP可能通过下调TRPM2和EndoG的表达,抑制细胞损伤和死亡,发挥对慢性缺血性脑组织的神经保护作用.
作者:张会芳;声宏;焦淑洁;刘希 刊期: 2011年第06期
目的:探讨非小细胞肺癌( NSCLC)组织中CD68和c-Jun蛋白的表达与肺癌发生发展的关系及其意义.方法:采用免疫组化SP法检测67例人NSCLC标本(每个标本取癌、癌旁和正常组织)中CD68和c-Jun蛋白的表达,应用Spearman秩相关检验CD68阳性细胞数与c-Jun蛋白表达的相关性.结果:肺癌、癌旁及正常肺组织中CD68阳性细胞数依次为11.8±1.4、97.5±2.5和52.1±1.9,差异有统计学意义(F=52 334.934,P<0.001);c-Jun蛋白的平均光密度值依次为0.25±0.03、0.23±0.02和0.20±0.01,差异有统计学意义(F=91.280,P<0.001).癌旁组织中CD68阳性细胞数与年龄、性别、病理类型、分化程度、吸烟无关(P>0.05),与TNM分期(F=158.273,P<0.001)、淋巴结转移(F=84.985,P<0.001)、是否侵及胸膜(F=16.422,P<0.001)有关.癌旁组织中c-Jun蛋白的表达与年龄、性别、病理类型、吸烟无关(P>0.05),与TNM分期(F=19.319,P<0.001)、分化程度(F=33.918,P<0.001)、淋巴结转移(t=12.155,P<0.001)、是否侵及胸膜(F=8.318,P=0.005)有关.在癌旁组织中CD68阳性细胞数与c-Jun蛋白的表达呈正相关(rs =0.519,P<0.001).结论:巨噬细胞主要浸润在癌旁组织中,可能通过激活蛋白-1促进NSCLC的发展转移.
作者:刘瑜;王娜;冯斐斐;燕贞;王威;张少锋;秦丽娟;吴逸明 刊期: 2011年第06期
目的:分析比较煤矿作业工人呼吸道诱导痰细胞学的表现.方法:对接尘非尘肺工人62名、未接尘非尘肺工人53名、尘肺患者22例和健康对照10人进行呼吸道诱痰,将痰液处理后进行细胞总数计数和分类计数.结果:接尘与未接尘非尘肺工人痰细胞总数、中性粒细胞(N)、巨噬细胞(M)、淋巴细胞(L)及嗜酸性粒细胞(Eo)计数比较,差异均无统计学意义(F分别为0.986、0.607、0.481、0.317和0.020,P均>0.05).不同工龄接尘非尘肺工人痰细胞总数、N、L及Eo计数差异亦无统计学意义(F分别为0.431、2.390、0.341和0.351,P均>0.05),但接尘工龄10 a及以上组M计数较高(F=2.723,P=0.038).健康对照、Ⅰ期尘肺和Ⅱ+Ⅲ期尘肺患者痰细胞总数及细胞分类计数差异无统计学意义(F分别为0.704、3.103、1.812、1.531和0.394,P均>0.05).结论:呼吸道巨噬细胞计数可以作为尘肺进展的标志;诱导痰方法可用于粉尘作业工人痰细胞学变化的监测.
作者:赫金凤;任文杰;张巧;吴卫东;徐宏平;王桂芝;王婧华;胡东生 刊期: 2011年第06期
关节镜下前交叉韧带重建是一项非常成熟的技术,无论是单束重建还是双束重建都取得了良好的临床效果.既往研究[1-3]对移植物的选择、固定方法、重建方法及骨隧道内口的定位等方面都做了大量的论述.然而,对肌腱切取、隧道方向、隧道长度等术中操作的细节问题涉及不多.为了进一步完善该项技术,作者对107例自体腘绳肌腱单束重建前交叉韧带术中所遇到的各种问题进行了总结,报道如下.
作者:吴术红;刘毅 刊期: 2011年第06期
目的:了解柯萨奇病毒B5( CoxB5)河南分离株全基因特征及与其他肠道病毒基因的关系.方法:采用RT-PCR扩增全基因,采用DNAStar中的SeqMan拼接所测序列,BioEdit进行同源性比较,Simplot进行相似度分析.结果:CoxB5/Henan/2010基因组全长7 401 bp.与原型株Faulkner相比,编码区氨基酸同源性为95.6%,核苷酸同源性为79.9%,其中VP4-VP2核苷酸差异为17.8%~20.4%,VP1核苷酸差异为19.5%,P2、P3核苷酸差异分别为19.5%、21.7%.不同型别肠道病毒间VP4-VP2核苷酸差异为14.4% ~ 34.9%,VP1核苷酸差异为18.3%~42.3%,P2、P3核苷酸差异为17.1%~21.0%、15.5% ~ 22.6%.结论:与原型株相比,CoxB5/Henan/2010株编码区发生沉默突变,其核苷酸变异并不影响氨基酸序列的变化;肠道病毒基因组各分区在进化中不同步.
作者:黄学勇;许玉玲;李幸乐;晁灵;陈豪敏;许汴利 刊期: 2011年第06期
目的:探讨胃肠道间质瘤组织中Ki-67、细胞周期素D1( Cyclin D1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、凋亡抑制蛋白( Livin)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达与Fletcher分级的相关性.方法:应用免疫组化SP法检测67例胃肠道间质瘤存档蜡块标本中各蛋白的表达情况,单因素和多因素分析各蛋白表达与Fletcher分级的关系.结果:单因素分析结果显示,不同危险度分组中,Ki-67、Cyclin D1、Livin及MMP-9蛋白表达的差异有统计学意义(P均<0.05).有序Logistic回归多因素分析结果显示,Cyclin D1和MMP-9对Fletcher分级影响显著,是Fletcher分级的独立影响因子,Cyclin D1和MMP-9的优势比分别为3.51和3.29.结论:Cyclin D1、MMP-9蛋白在胃肠道间质瘤组织中的表达与Fletcher分级具有明确的相关性,可作为判定恶性程度的参照因素.
作者:务森;张谢夫;赵春临;刘涛 刊期: 2011年第06期
目的:探讨外周穿刺中心静脉置管术( PICC)患者血清TNF-α、IL-6、IL-10及凝血四项水平的变化.方法:以未PICC患者38例为对照(包括肿瘤患者10例、非肿瘤患者18例和血液病患者10例),对比分析PICC患者(包括肿瘤患者14例、非肿瘤患者20例和血液病患者16例)炎症细胞因子TNF-α、IL-6、IL-10和凝血四项水平的变化.放射免疫法测定血浆TNF-α、IL-6水平,酶联免疫吸附试验测定IL-10,全自动血凝仪测定凝血四项.结果:PICC肿瘤、非肿瘤、血液病组TNF-α水平高于相应未PICC对照组(t分别为2.330、3.606和3.110,P均<0.05),IL-6水平低于相应对照组(t分别为7.120、5.863和2.572,P均<0.05),IL-10水平无明显变化(t分别为0.881、0.887和0.079,P均>0.05);非肿瘤PICC组凝血四项与未PICC对照组比较,差异均无统计学意义(P均>0.05).结论:PICC置管后血浆TNF-α水平的升高和IL-6水平的下降可能与静脉血栓形成有关.
作者:张振香;林蓓蕾;陈颖;王艳丽;杨巧芳;程瑞莲;高峰 刊期: 2011年第06期
间歇性心室预激是各种原因引起的旁道前传不应期间歇性延长或阻滞性传导中断,近年来随着计算机技术的发展和成熟,其误诊率逐渐减少.2010年1月至11月郑州大学第二附属医院心电图科对65例体表心电图疑似心室预激的患者进行动态心电图(DCG)检查,现将结果报道如下.
作者:杨丽红;张强;乔鹏;徐金义;吴志红;杨曙艳;李桂侠 刊期: 2011年第06期
目的:克隆杜氏盐藻鞭毛相关蛋白(FAP)的cDNA片段并探讨其功能.方法:分析莱茵衣藻等生物的FAP同源蛋白的氨基酸序列保守区域,设计简并引物.提取盐藻总RNA进行RT-PCR.根据得到的序列设计3'RACE引物,巢式PCR扩增该cDNA的3'端序列.秋水仙碱处理对数生长期的盐藻细胞,使细胞停留在分裂中期,并诱导鞭毛缩短,半定量PCR检测FAP基因的表达情况.结果:RT-PCR和3'RACE分别得到长1 535 bp和782bp的cDNA片段,拼接后总长2 141 bp,编码541个氨基酸.序列比对发现与莱茵衣藻的FAP(88%)、团藻CDC48(89%)氨基酸序列均有较高的同源性.秋水仙碱处理后盐藻细胞FAP mRNA表达量高于未处理对照组(F组间=43.192,P<0.001;F时间=2.659,P=0.043;F交互=594.419,P<0.001).结论:成功获得杜氏盐藻FAP的cDNA片段,该基因在秋水仙碱诱导的鞭毛重吸收过程中表达量增高.
作者:李靓;石科;李俊平;柴丹丹;薛乐勋 刊期: 2011年第06期
急性ST段抬高性心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)急诊经皮冠脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)开通梗死相关动脉时间是影响临床预后的重要因素,尤其是患者就诊至球囊扩张时间对预后的影响已被大规模的临床研究所证实.缩短急诊PCI时间可缩小STEMI患者心肌梗死面积,改善其心功能,减少住院期间死亡率及远期不良心血管事件发生率.
作者:朱记法;李凌;张晓 刊期: 2011年第06期
目的:构建杜氏盐藻类驱动蛋白钙调素结合蛋白马达区(KMD)基因原核表达载体并表达纯化KMD.方法:通过软件和在线工具预测KMD的理化性质.构建KMD的原核表达载体pET28a-KMD,而后在大肠杆菌BL21(DE3)内16℃过夜诱导表达KMD,通过超声破碎菌体和高速离心,将上清液进行亲和层析.获得粗纯目的蛋白,再利用离子交换层析和凝胶过滤层析进一步纯化.SDS-PAGE检测层析各阶段蛋白样品.将纯化后的KMD均分3份分别放置在-80℃、4℃和18℃环境中,1周后SDS-PAGE检测目的蛋白是否降解.结果:KMD相对分子质量为37 480,预测pI为7.99.基因中含有的稀有密码子不会明显影响其在大肠杆菌BL21( DE3)中表达.多步层析后可以获得2个独立的目的蛋白洗脱峰,均为KMD且纯度可满足结晶条件搜索.纯化后的KMD在4℃和18℃下放置1周后无降解.结论:获得大量高纯度、均一性良好的KMD蛋白,能够满足培养蛋白晶体所需.
作者:徐朋奇;李木;张红梅;石科;韩康;李梅;薛乐勋 刊期: 2011年第06期
目的:建立毫菊中木犀草素和木犀草苷含量的反相高效液相色谱测定方法.方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Scienhome C18(4.6 mm×200 mm,5μm),检测波长350 nm,柱温30℃,流速l mL/min.结果:木犀草苷含量在0.004 8 ~0.038 4 μg内线性良好,Y=10 000 000X -6 650,r =0.999 9,回收率为104.9%,RSD为1.64%;木犀草素含量在0.032 ~0.256 μg内线性良好,Y=8 000 000X -20 581,r=0.999 9,回收率为101.7%,RSD为1.68%.结论:该测定方法准确可靠,重现性好,对毫菊的质量控制有重要意义.
作者:王存良;李远哲 刊期: 2011年第06期
目的:检测Hela细胞雄激素受体(AR)基因外显子1的甲基化水平.方法:用亚硫酸氢盐克隆测序法和联合亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测不同来源Hela细胞AR基因外显子1的甲基化水平,BiQ Analyzer软件分析测序结果.结果:在非CpG胞嘧啶转化率>98%的前提下,Hela细胞AR基因外显子1片段的总甲基化率≥96.2%,除第8个CpG位点外,其他CpG位点均为完全甲基化或高甲基化.COBRA法与测序法结果一致.结论:DNA甲基化可能是Hela细胞AR基因失活的分子机制.
作者:李笑竹;赵贵森;岳阳阳;翟仙敦;艾红伟;薛小琦 刊期: 2011年第06期
目的:探讨索坦对肾透明细胞癌786-0细胞生长与Tiam1表达的影响.方法:将对数生长期肾透明细胞癌786-0细胞分为4组:索坦低、中、高浓度处理组和正常对照组.索坦低、中、高浓度处理组细胞分别用2、4和8μmol/L索坦培养24、48和72 h.采用免疫细胞化学和原位杂交技术检测各组细胞中Tiam1蛋白和mRNA的表达.采用MTT和TUNEL法检测培养48 h各组细胞凋亡和存活情况.结果:各组细胞培养24、48和72 h时间点的Tiaml蛋白及mRNA表达比较,差异有统计学意义(F=898.782、551.191、510.484,294.803、460.127、358.019,P均<0.05).索坦高、中、低浓度处理组不同时间点Tiam1蛋白及mRNA表达比较,差异有统计学意义(F=38.601、81.324、262.601,120.671、509.902、56.464,P均<0.05).同一时间点随着索坦浓度增加,细胞Tiam1蛋白及mRNA的表达减弱(P<0.05);同一浓度处理组中,随着时间延长,Tiam1蛋白及mRNA的表达降低(P<0.05).培养48 h,各组细胞存活率和凋亡率比较,差异有统计学意义(F=123.432和120.341,P均<0.001),随着索坦浓度增加,细胞存活率降低,凋亡率增加(P<0.05).结论:索坦可能通过抑制Tiam1基因在肾癌细胞株786-0中表达,促进肿瘤细胞凋亡,抑制细胞生长.
作者:孟庆泽;乔保平;宫璀璀;刘德海;张喜卿 刊期: 2011年第06期
目的:介绍河南省在“世行贷款/英国赠款中国农村卫生发展项目(卫Ⅺ项目)”支持下,在县级医院开展基本医疗服务综合支付制度改革试点的创新做法及初步实施效果.方法:通过深度访谈了解制度设计,机构调查收集试点医疗机构服务量、质量及费用等数据,采用时间序列分析法进行分析.结果:该改革模式创造性提出了“四位一体”的县级医院支付制度综合改革新框架,并在部分卫Ⅺ项目县县级医院开展了实践应用,效果明显.结论:该模式的提出和应用为当前深化医药卫生体制改革提出的完善公立医院支付制度改革、推进县级医院综合改革提供了一个良好的思路和案例.
作者:吴建;周学山;谢双保 刊期: 2011年第06期
小儿斜视矫正手术一般手术时间短,刺激中等,但操作精细,术中要求患儿安静、无躁动.氯胺酮静脉全麻因具有镇痛效果好,保护性吞咽反射不消失等优点,长期以来广泛应用于小儿麻醉,但氯胺酮可以提高气道反应性,容易造成喉痉挛、屏气及术后分泌物增多等[1],术中常需麻醉医师托下颌、吸痰以维持呼吸道通畅.
作者:王其敏 刊期: 2011年第06期
缺氧缺血性脑损伤( hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是引起新生儿急性死亡和慢性神经系统损伤的主要原因.目前临床上常用的治疗新生儿HIBD的方法如高压氧疗法、亚低温疗法等都仅局限于对症、支持治疗,只能在一定程度上缓解症状,尚难从根本上恢复神经系统功能.大量研究[1-3]发现,通过移植具有多向分化潜能的神经干细胞( neural stem cells,NSCs)能减少HIBD新生大鼠由于局部缺血而导致的神经细胞死亡,使之运动和学习记忆能力均得到提高.将经过基因修饰的NSCs进行移植,有望为HIBD的治疗提供一个崭新的思路.
作者:王军;朱登纳 刊期: 2011年第06期
目的:应用经颅多普勒(TCD)监测蛛网膜下腔出血(SAH)急性期患者的脑血流动力学变化,评估脑脊液置换减轻脑血管痉挛(CVS)的疗效,并进而无创预测颅内压(ICP).方法:将60例SAH患者随机分为脑脊液置换组与非置换组各30例,发病第1、3、5、7天均行TCD检测,记录收缩期峰血流速度(vs)、舒张期末血流速度(vd)、平均血流速度(vm)及搏动指数(PI).置换组每次检测完成后立即行腰椎穿刺、脑脊液测压并行脑脊液置换,非置换组仅行脑脊液测压.结果:2组患者病程不同时间点间va、vm及vd差异均有统计学意义,组间效应及交互效应vs差异亦有统计学意义(P均<0.05);置换组血流速度第5天达高峰,第7天稍有减慢,而非置换组呈逐渐增快趋势,第7天达高峰;与非置换组比较,置换组CVS发生率降低(x2=6.239,P=0.012),程度减轻.以PI为解释变量,ICP为反应变量建立回归方程:ICP =4.666+ 15.246×PI(F=93.275,P<0.001).应用该回归方程对ICP进行预测,与实际ICP相比,预测差值在5 mmHg内者占85.6%.结论:SAH急性期患者脑血流速度呈增快趋势,脑脊液置换可有效减轻CVS;TCD可较为准确地无创预测SAH急性期患者的ICP.
作者:安红伟;卢昌均;程岗 刊期: 2011年第06期
糖尿病肾病( diabetic nephropathy,DN)是糖尿病微血管病变之一,是导致终末期肾病的主要病因.早期治疗DN对延缓慢性肾功能不全的发生、发展有着重要的临床意义[1].作者收集了2008年1月至2010年3月漯河市第六人民医院收治的186例DN患者的临床资料,观察了不同剂量厄贝沙坦治疗DN的疗效,报道如下.
作者:孙四平 刊期: 2011年第06期
目的:测定2-甲氧基雌二醇中残留溶剂甲醇和二氯甲烷的含量.方法:采用气相色谱法检测3批2-甲氧基雌二醇样品中的组分.应用氢火焰离子化检测器( FID),以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,采用HP-INNOWAX柱(30mx0.53 mm×1 μm),以PEG20M为固定相,柱温45℃,保持3 min,然后以20℃/min的速度升温至180℃,保持5min;进样器温度200℃;检测器温度300℃;载气为氮气;分流比为2∶1.结果:实现了各组分的基线分离;3批样品中的残留溶剂含量均符合要求.结论:该方法灵敏、准确、可靠,适用于2-甲氧基雌二醇中有机溶剂残留量的测定.
作者:李杨;施秀芳;张青青;张超峰;杜斌 刊期: 2011年第06期