程淑霞；成慧君；王莉
目的：探讨微囊藻毒素-LR对小鼠肝、肾和睾丸组织蛋白质的氧化损伤程度。方法：用3.0、6.0和12.0μg/kg3种不同浓度的微囊藻毒素-LR对小鼠进行腹腔注射染毒（n=5）,染毒时间为7d,每天1次,并设阴性对照组。用2,4-二硝基苯肼比色法测定3种组织的蛋白质羰基含量。结果：随着微囊藻毒素-LR剂量的升高,小鼠肝、肾和睾丸的蛋白质羰基含量升高（F分别为44.631、21.975和23.962,P均〈0.001）。3.0μg/kg染毒组肝、肾蛋白质羰基含量[（3.72±0.23）和（3.99±0.48）mmol/kg]高于阴性对照组[（2.90±0.22）和（3.27±0.23）mmol/kg]（P均〈0.05）。3.0μg/kg染毒组睾丸蛋白质羰基含量[（1.91±0.25）mmol/kg]与阴性对照组[（1.69±0.27）mmol/kg]相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。6.0μg/kg染毒组肝、肾和睾丸蛋白质羰基含量[（4.55±0.45）、（4.44±0.53）和（2.53±0.24）mmol/kg]和12.0μg/kg染毒组肝、肾和睾丸蛋白质羰基含量[（5.62±0.55）、（5.67±0.60）和（3.15±0.41）mmol/kg]均高于阴性对照组（P均〈0.01）。结论：微囊藻毒素-LR对小鼠肝、肾和睾丸组织的蛋白质有氧化损伤作用。
作者：段丽菊；张慧珍；李博；冯亚静；程学敏；杉浦则夫；张振亚；崔留欣 刊期： 2010年第06期
胸腔积液是呼吸内科常见的一种临床综合征，其病因复杂，临床上常采用的诊断性检查包括X射线、CT、胸水常规及生化检查。细胞学检查、经皮胸膜穿刺活检和胸腔镜检查。老年患者中恶性肿瘤占一定比例，故胸膜组织病理诊断不可缺少，胸膜活检和内科胸腔镜检查为常用取材方式。郑州大学第二附属医院呼吸内科收治老年胸腔积液患者54例，接受胸膜活检及内科胸腔镜检查，分析报道如下。
作者：刘颖；吴金如；夏熙郑；齐景宪；高元勋 刊期： 2010年第06期
目的：构建杜氏盐藻cDNA文库并从该文库中筛选类驱动蛋白钙调素结合蛋白（KCBP）基因cDNA序列。方法：取对数生长期的杜氏盐藻细胞,提取总RNA并分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,连接到pAP3neo载体上,采用电转化法将重组质粒转化大肠杆菌DH10B。计算平板上单菌落数,测定文库的滴定度和重组率。运用PCR法筛选含有KCBP基因特异片段的质粒。结果：文库滴定度为5.6×106pfu/mL,重组率在90%左右,插入片段长度在0.4～6.0kb,平均长度为1.9kb。利用PCR法从该文库中筛选到了含有新基因KCBP特异片段的单菌落,经测序与cDNA末端快速扩增（RACE）-PCR获得的杜氏盐藻KCBP基因cDNA序列相符,此序列属于kine-sin-14家族。结论：成功构建杜氏盐藻cDNA文库,并从该文库筛选出一个kinesin样cDNA序列。
作者：柳丽平；李杰；王翠；阎赘梦；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
目的：检测不同品系SV40T转基因小鼠血浆胃泌素水平。方法：取已建立的8个品系SV40T转基因小鼠和B6小鼠空腹血,应用ELISA法检测血浆胃泌素水平。结果：B6小鼠、2#、4#、16#、24#、51#、57#、61#和73#品系转基因小鼠血浆胃泌素水平（μg/L）分别为（2.814±0.209）、（1.135±0.114）、（0.853±0.701）、（2.371±0.335）、（1.371±0.190）、（0.685±0.374）、（2.274±0.251）、（2.471±0.251）和（0.986±0.173）,9组相比,差异有统计学意义（F=17.449,P〈0.001）;其中2#、4#、24#、51#及73#品系转基因小鼠血浆胃泌素水平较B6小鼠明显降低（P〈0.05）。结论：筛选出了5个稳定表达的SV40T转基因小鼠品系。
作者：申琦；邵蓓新；郜十伟；陈辉；张钦宪 刊期： 2010年第06期
临床上对于有较大室间隔缺损（ventricularsep．taldefect，VSD）患儿的心功能改变情况一直存在争议。该类患儿在临床上确实有不同程度的“心功能不全”症状，但传统的心功能评价指标如左室射血分数（LVEF）由于受前负荷影响，往往高估陔类患儿的左心收缩功能，多提示左心收缩功能仍在正常范围。
作者：张瑞芳 刊期： 2010年第06期
颧骨是颌面部为突出的骨骼，在遭受外力时，颧骨及其周围骨骼容易发生骨折，称为颧骨复合体骨折，是颌面部常见的骨折之一［1］。郑州人民医院2002年3月至2007年6月采用头皮冠状切口，选择性辅助局部切口入路，应用坚固内固定技术对21例颧骨复合体骨折患者进行手术治疗，疗效满意，现报道如下。
作者：董爱芬 刊期： 2010年第06期
目的：构建人SMRT基因真核和原核表达载体。方法：体外人工合成SMRT-C645bp对应的基因片段,克隆至pUC57载体,酶切,测序正确后,PCR扩增目的基因片段,酶切后亚克隆至pCMV-myc载体和pGEX-6p-1载体,并酶切和测序鉴定。结果：成功构建了人pCMV-myc-SMRT真核表达载体和pGEX-6p-1-SMRT原核表达载体。结论：成功构建了人SMRT真核和原核表达载体,为下一步蛋白间相互作用的证实提供了基础。
作者：王春美；盛光耀；卢洁；郝庆飞；谢垒；白松婷；许松涛；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
目的：检测腹膜透析超滤衰竭患者腹膜组织中碱性成纤维生长因子（bFGF）的表达,并探讨其可能的作用机制。方法：取8名正常对照者、12名尿毒症非透析患者以及10名腹透患者的腹膜活检标本,行RT-PCR、免疫组化染色检测bFGFmRNA和蛋白表达,行CD34染色计数腹膜组织微血管密度（MVD）。结果：bFGF在各组腹膜组织均有表达,尿毒症非透析组、腹透组mRNA水平和蛋白表达水平均较正常组升高[mRNA：（0.63±0.02）,（0.74±0.02）vs（0.46±0.02）;蛋白：（116.4±1.8）,（143.0±2.4）vs（96.2±1.4）],且腹透组升高更为明显,差异有统计学意义（F分别为75.526和62.090,P均〈0.001）;3组腹膜MVD依次为（3.05±0.45）、（5.98±0.47）vs（9.62±0.49）,差异有统计学意义（F=30.452,P〈0.001）,与正常组相比,尿毒症非透析组MVD计数增加,腹透组腹膜组织MVD计数多。结论：腹透患者腹膜组织中bFGF表达升高,可能参与长期透析所致腹膜组织新生微血管形成过程。
作者：高丹；刘章锁；赵占正；梁献慧；李艳 刊期： 2010年第06期
妊娠合并血小板减少（pregnant women compli-cared with thrombocytopenia，PT）是围生期的一种常见病，约占妊娠总数的3．7％[1]。多数患者预后良好，少数病例会导致产后出血、新生儿颅内出血等严重后果。作者回顾性分析了2004年1月至2007年12月郑州大学第一附属医院收治的207例PT患者的临床资料，报道如下。
作者：赵先兰；张苗苗；张连琴；孙璐路 刊期： 2010年第06期
目的：构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因的shRNA真核表达质粒,研究其对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z的干扰作用。方法：根据VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因序列,各设计2条寡核苷酸序列,合成互补DNA链,插入真核表达质粒pGenesil-1中,同时构建单基因（VEGF）质粒pGenesil-2。分别转染CNE-2Z细胞,分为多基因质粒（P-1）组和单基因质粒（P-2）组,并设空白对照（BC）组和阴性对照（NC）组。采用MTT法检测细胞增殖活性。采用实时定量PCR和Western-blot检测4种基因在人鼻咽癌细胞系CNE-2Z中的表达。体内裸鼠成瘤实验观察单基因和多基因质粒干预对肿瘤的抑制作用。结果：通过酶切和测序证实重组真核表达载体构建正确。MTT显示细胞增殖受到抑制,且多基因质粒对细胞增殖的抑制作用明显强于单基因质粒。目的基因在mRNA和蛋白水平上表达均下降。裸鼠实验显示P-1组抑制肿瘤细胞增长的作用要强于P-2组。结论：成功构建一个载体编码4个不同基因的shRNA质粒载体系统。转染鼻咽癌细胞后,与单独沉默VEGF相比,同时干扰VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因可以更好地抑制细胞增殖。
作者：宋英；董明敏；杨海峰 刊期： 2010年第06期
目的：检测食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中Livin与半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白的表达。方法：采用免疫组化SP法检测53例ESCC及53例癌旁正常食管组织中Livin及Caspase-3蛋白的表达。结果：ESCC组织中Livin蛋白的阳性表达率（52.8%）高于癌旁正常食管组织（7.5%,χ2=20.346,P〈0.001）,其阳性表达率与ESCC浸润深度及淋巴结转移有关（P均〈0.05）。ESCC组织中Caspase-3的阳性表达率（39.6%）低于癌旁正常食管组织（83.0%,χ2=16.690,P〈0.001）,其阳性表达率与ESCC组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关（P均〈0.05）。ESCC组织中Livin与Caspase-3蛋白的表达负关联（rP=-0.302,P=0.021）。结论：Livin和Caspase-3蛋白参与了ESCC的发生与发展;Livin蛋白可能通过抑制Caspase-3蛋白的活性发挥作用。
作者：高萍；臧文巧；王涛 刊期： 2010年第06期
舒芬太尼是一种新型强效麻醉性镇痛药，其理化性质与芬太尼相似，而作用强度为芬太尼的5～10倍，有研究[1]显示等效剂量的舒芬太尼较芬太尼对血流动力学的影响小，应激反应轻。2008年以来，作者在舒芬太尼或芬太尼联合丙泊酚静脉全麻下实行无痛膀胱镜检查，现对其效果与安全性分析报道如下。
作者：赵璞；张卫 刊期： 2010年第06期
目的：分析24个常染色体短串联重复序列（STR）在河南省汉族群体的遗传多态性及其在亲子鉴定案例中的应用价值。方法：应用多位点复合PCR扩增技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳分型技术,对773例亲子鉴定案例进行分析。结果：D7S3048、D18S51、D8S1179、D8S1132、D11S2368、D2S1338、D4S2639和D12S391的个体识别率≥0.94,观察杂合度≥0.79,多态性信息含量≥0.80,且这些位点参与联合排除父权率均在40%以上。结论：短串联重复序列D7S3048、D18S51、D8S1179、D8S1132、D11S2368、D2S1338、D4S2639和D12S391可作为亲子鉴定的首选基因座,在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值。
作者：陈辉；徐朝阳；李晓文；郑红；程晓丽；贺颖；宋国英；刘华 刊期： 2010年第06期
目的：研究肿瘤相关抗原MAGE-1的抗肿瘤生物活性。方法：取健康人外周血,分离树突状细胞和T淋巴细胞。用脂质体介导法分别将质粒pcDNA3.1-MAGE-1和pcDNA3.1转染人肝癌SMMC-7721细胞株,设未转染的SMMC-7721细胞株为空白对照组,应用Real-timePCR检测3组细胞中MAGE-1 mRNA的表达;再分别用以上3种细胞的冻融抗原致敏树突状细胞,使其激活T淋巴细胞成为细胞毒性T淋巴细胞（CTL）。应用乳酸脱氢酶释放法检测CTL对野生型SMMC-7721细胞的杀伤活性。结果：pcDNA3.1-MAGE-1转染组MAGE-1 mRNA的表达量为（1.211±0.586）,空质粒转染组及未转染组分别为（0.412±0.021）和（0.452±0.317）,3组比较,差异有统计学意义（F=538.652,P〈0.001）。转染pcDNA3.1-MAGE-1重组质粒、pcDNA3.1空质粒的SMMC-7721细胞和未转染的野生型SMMC-7721细胞的冻融抗原所激活的CTL对野生型SMMC-7721细胞的杀伤活性分别为（48.26±2.47）%、（25.84±2.72）%和（26.27±0.81）%,3组比较,差异有统计学意义（F=139.607,P〈0.001）。结论：肿瘤相关抗原MAGE-1能够在体外诱导细胞抗肿瘤免疫反应。
作者：何炜；刘甲；郭玉琴；刘新郑 刊期： 2010年第06期
布加综合征（Budd—Chiar isyndrome，BCS）是血管性病变，外科手术和介入治疗是有效的治疗手段，其术前的影像诊断十分重要。作者结合数字减影血管造影（digital subtraction angiography，DSA）检查结果，将BCS患者下腔静脉（inferior vena cava，IVC）病变的二维及彩色多普勒超声图像（CDFI）与MRI图像进行对比，探讨两种检查方法对BCS患者IVC病变的诊断价值。
作者：王学清；贺晓 刊期： 2010年第06期
目的：观察虎杖总蒽醌对糖尿病肾病（DN）肾脏皮质糖基化终末产物（AGEs）、糖基化终末产物受体的（RAGE）影响。方法：运用链脲佐菌素制作DN模型,将成模NH小鼠随机分为模型组,开搏通组,虎杖总蒽醌高、中、低剂量组（每组17只）,另外选取17只NH小鼠作为正常对照组。运用荧光法、免疫组化法分别观察小鼠肾脏皮质AGEs、RAGE水平的变化。结果：与正常对照组相比,模型组组小鼠肾皮质AGEs水平明显升高,而高、中剂量虎杖总蒽醌组肾脏皮质AGEs水平明显下降（F=15.200,P〈0.001）;模型组小鼠肾皮质RAGE的表达高于正常对照组,而高、中剂量虎杖总蒽醌组较模型组降低,差异具有统计学意义（F=12.485,P〈0.001）。结论：AGEs、RAGE与DN形成有关;虎杖总蒽醌能够降低DN小鼠肾皮质AGEs水平,抑制肾RAGE的表达。
作者：王辉；陈清江；杨再刚；李伟；燕树勋；张冰；苗明三 刊期： 2010年第06期
目的：观察尼古丁（NIC）对脂多糖（LPS）诱导的帕金森病大鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法：60只大鼠随机分为4组,每组15只。LPS组（L组）、NIC组（N组）和NIC＋α7型烟碱乙酰胆碱受体（nAChR-α7）阻断剂α-银环蛇毒素组（α-BTX）（M组）分别腹腔注射PBS、NIC和NIC与α-BTX,连续4周,并于2周末一次性黑质内注射LPS。对照组（C组）均给予PBS。4周末进行阿朴吗啡诱导的旋转试验,并用免疫组化方法观测黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元数量及离子钙结合蛋白1（Iba1）阳性细胞的形态。结果：4组大鼠旋转实验阳性率及30min内旋转圈数差异有统计学意义（χ2=10.179,P=0.006;F=54.681,P〈0.001）,TH免疫阳性神经元数差异有统计学意义（F=861.541,P〈0.001）。与N组相比,L组及M组旋转实验阳性率降低,旋转圈数减少（P〈0.05）,TH免疫阳性神经元数减少（P〈0.05）。N组Iba1阳性细胞多呈静止期的形态;L组与M组细胞形态相似,大多呈活化期的形态。结论：NIC可能通过nAChR-α7抑制小胶质细胞的活化,对LPS诱导的帕金森病大鼠多巴胺能神经元起保护作用。
作者：张德智；赵青赞；任秀花；张华；周明付；臧卫东 刊期： 2010年第06期
目的：评价PCR短串联重复序列（PCR-STR）在异基因外周血干细胞移植（Allo-PBSCT）后监测中的应用价值。方法：采集13例造血干细胞移植（HSCT）患者首次术后10、20和30d的口腔颊黏膜上皮细胞及外周静脉血,提取基因组DNA,采用PCR-STR法比较其外周血与口腔黏膜细胞中D7S3048、D4S2639、D14S306、D18S535、F13A01、FESFPS、vWA、CSF1PO、TPOX和THO1等STR位点联合基因型改变。结果：13例HSCT患者的外周血中均发现外源STR基因型。10、20和30d13例患者口腔黏膜细胞与外周血检测的10个STR基因位点均至少有5个不同。结论：对受者外周血与口腔黏膜多个STR基因位点的基因型进行对比,可随时监测HSCT患者植入效果。
作者：孟晓峰；徐朝阳；陈辉；李晓文 刊期： 2010年第06期
目的：检测皮肤恶性黑色素瘤（CMM）组织中Runt相关转录因子3（Runx3）和Smad4蛋白的表达。方法：采用免疫组化SP法检测42例CMM、20例皮肤交界痣组织和20例正常皮肤组织中Runx3和Smad4蛋白的表达。结果：正常皮肤、皮肤交界痣及CMM组织中Runx3蛋白的阳性表达率分别为90.0%（18/20）、85.0%（17/20）和26.2%（11/42）,3者相比,差异有统计学意义（χ2=31.371,P〈0.001）;正常皮肤、皮肤交界痣及CMM组织中Smad4蛋白的阳性表达率分别为85.0%（17/20）、85.0%（17/20）和42.9%（20/42）,3者相比,差异有统计学意义（χ2=12.731,P=0.002）。CMM组织中Runx3和Smad4蛋白的表达存在关联性（rp=0.378,P=0.008）。结论：CMM组织中Runx3蛋白低表达或失表达,可能抑制了TGF-β/Smad4信号通路的激活,从而促进细胞的恶性转化和增殖。
作者：陈曼静；张娟；陈建华 刊期： 2010年第06期
目的：纯化杜氏盐藻葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）重组蛋白,制备多克隆抗体。方法：PCR扩增得到两端分别添加NdeⅠ和EcoRⅠ酶切位点的GPI基因,双酶切后插入原核表达载体pET28a（＋）,得到重组载体pET28a-GPI,经鉴定正确后,用该重组载体转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达后用镍离子柱纯化目的蛋白并免疫新西兰白兔,间接ELISA和Westernblot法检测抗体的效价和特异性。结果：杜氏盐藻GPI基因在大肠杆菌BL21（DE3）中得到高效表达,占总蛋白的41.6%。以高纯度的目标蛋白作为抗原免疫新西兰白兔,得到抗GPI的抗血清。间接ELISA检测抗血清效价达到1：512000,Westernblot检测证实抗血清能与目的蛋白特异性结合。结论：成功纯化了杜氏盐藻GPI重组蛋白并制备了特异性的GPI多克隆抗体。
作者：张磊；崔柳青；李杰；刘红涛；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
