孟晓峰；徐朝阳；陈辉；李晓文
目的：检测皮肤恶性黑色素瘤（CMM）组织中Runt相关转录因子3（Runx3）和Smad4蛋白的表达。方法：采用免疫组化SP法检测42例CMM、20例皮肤交界痣组织和20例正常皮肤组织中Runx3和Smad4蛋白的表达。结果：正常皮肤、皮肤交界痣及CMM组织中Runx3蛋白的阳性表达率分别为90.0%（18/20）、85.0%（17/20）和26.2%（11/42）,3者相比,差异有统计学意义（χ2=31.371,P〈0.001）;正常皮肤、皮肤交界痣及CMM组织中Smad4蛋白的阳性表达率分别为85.0%（17/20）、85.0%（17/20）和42.9%（20/42）,3者相比,差异有统计学意义（χ2=12.731,P=0.002）。CMM组织中Runx3和Smad4蛋白的表达存在关联性（rp=0.378,P=0.008）。结论：CMM组织中Runx3蛋白低表达或失表达,可能抑制了TGF-β/Smad4信号通路的激活,从而促进细胞的恶性转化和增殖。
作者：陈曼静；张娟；陈建华 刊期： 2010年第06期
目的：检测大、小鼠空肠、肝及肾组织中P型铜转运ATP酶（ATP7B）蛋白的表达。方法：分别取6只SD大鼠和7只昆明小鼠,取空肠、肝及肾组织,常规石蜡切片,采用免疫组化法检测ATP7B蛋白的表达。结果：大、小鼠空肠绒毛上皮的纹状缘和近基底部、小肠腺、肾小管和肝细胞中均有不同程度的ATP7B蛋白表达。大鼠空肠、肝及肾组织ATP7B的积分光密度分别为（224474.380±228536.513）、（94116.484±45821.113）和（118128.741±41046.629）,小鼠上述3种组织中ATP7B的积分光密度分别为（129023.602±87570.591）、（150614.511±52981.792）和（118403.634±53656.681）,大、小鼠同一组织器官ATP7B的积分光密度相比,差异均无统计学意义（t=1.239、1.355、0.009,P均〉0.05）。结论：ATP7B蛋白在大、小鼠空肠、肝及肾组织中均有表达,其表达量的高低与动物种属关系不大。
作者：王杰玉；杨杰；李勇莉；王国栋；侯锐；高建凯；高福莲 刊期： 2010年第06期
目的：建立稳定遗传的纯合子SV40T胃壁细胞定位表达转基因小鼠品系。方法：通过定量PCR法比较已知杂合子小鼠和未知阳性小鼠中外源基因的起始模板量来确定小鼠的基因型,并通过测交的方法来验证试验结果。结果：用定量PCR法选育出15只纯合子小鼠,经测交验证它们与野生型小鼠交配所生的后代均为阳性,证明了定量PCR的结果是正确的。通过纯合子之间的全同胞交配建立了6个独立的纯合子品系。结论：定量PCR具有省时、省力及高通量等优点,能够很好地应用于筛选纯合子转基因动物。
作者：郜十伟；刘书漫；陈辉；李倩茹；金辉；张钦宪 刊期： 2010年第06期
目的：构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因的shRNA真核表达质粒,研究其对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z的干扰作用。方法：根据VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因序列,各设计2条寡核苷酸序列,合成互补DNA链,插入真核表达质粒pGenesil-1中,同时构建单基因（VEGF）质粒pGenesil-2。分别转染CNE-2Z细胞,分为多基因质粒（P-1）组和单基因质粒（P-2）组,并设空白对照（BC）组和阴性对照（NC）组。采用MTT法检测细胞增殖活性。采用实时定量PCR和Western-blot检测4种基因在人鼻咽癌细胞系CNE-2Z中的表达。体内裸鼠成瘤实验观察单基因和多基因质粒干预对肿瘤的抑制作用。结果：通过酶切和测序证实重组真核表达载体构建正确。MTT显示细胞增殖受到抑制,且多基因质粒对细胞增殖的抑制作用明显强于单基因质粒。目的基因在mRNA和蛋白水平上表达均下降。裸鼠实验显示P-1组抑制肿瘤细胞增长的作用要强于P-2组。结论：成功构建一个载体编码4个不同基因的shRNA质粒载体系统。转染鼻咽癌细胞后,与单独沉默VEGF相比,同时干扰VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因可以更好地抑制细胞增殖。
作者：宋英；董明敏；杨海峰 刊期： 2010年第06期
脑静脉血栓形成（cerebral veDous thrombosis，CVT），尤其是脑静脉窦血栓形成（cerebral venoussi—flUS thrombosis，CVST）为少见的缺血性脑血管病，临床表现多样且特异性不强，易误诊。其诊断特别是早期诊断的价值很大。现对23例CVST患者磁共振与磁共振脑静脉成像结果进行分析，报道如下。
作者：杜秀明 刊期： 2010年第06期
目的：分析24个常染色体短串联重复序列（STR）在河南省汉族群体的遗传多态性及其在亲子鉴定案例中的应用价值。方法：应用多位点复合PCR扩增技术及聚丙烯酰胺凝胶电泳分型技术,对773例亲子鉴定案例进行分析。结果：D7S3048、D18S51、D8S1179、D8S1132、D11S2368、D2S1338、D4S2639和D12S391的个体识别率≥0.94,观察杂合度≥0.79,多态性信息含量≥0.80,且这些位点参与联合排除父权率均在40%以上。结论：短串联重复序列D7S3048、D18S51、D8S1179、D8S1132、D11S2368、D2S1338、D4S2639和D12S391可作为亲子鉴定的首选基因座,在法医学应用和群体遗传学研究中有较高的价值。
作者：陈辉；徐朝阳；李晓文；郑红；程晓丽；贺颖；宋国英；刘华 刊期： 2010年第06期
脑脊液鼻漏是颅脑外伤中常见的并发症，多在伤后立即出现或于数日内发生，发生率高达39％，多数经保守治疗可自愈，需手术治疗的仅占2．4％[1]。为了比较不同手术人路修补脑脊液鼻漏的效果，作者就郑州大学第一附属医院收治的60例外伤性脑脊液鼻漏的临床治疗及效果进行分析，报道如下。
作者：郭付有；李治华；宋来君 刊期： 2010年第06期
目的：探讨DOC-2和c-Fos在大肠癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化SP法检测132例大肠癌组织及48例正常肠黏膜组织中DOC-2和c-Fos蛋白的表达情况。结果：大肠癌组织与正常肠黏膜组织中DOC-2的阳性表达率分别为31.1%（41/132）和81.2%（39/48）,c-Fos的阳性表达率分别为56.1%（74/132）和12.5%（6/48）,2组间差异均有统计学意义（χ2分别为35.911,27.051,P〈0.001）。大肠癌组织中DOC-2的表达与患者年龄、性别、组织学类型、分化程度和临床分期无关（P〉0.05）,但与淋巴结及肝转移有关（P〈0.05）;c-Fos蛋白的表达与患者年龄、性别、组织学类型、临床分期、淋巴结及肝转移无关（P〉0.05）,但与分化程度有关（P〈0.05）。大肠癌组织中DOC-2与c-Fos蛋白的表达呈负关联（rP=-0.368,P=0.001）。结论：DOC-2和c-Fos蛋白的异常表达可能在大肠癌的发生发展中起重要作用。
作者：王贵吉；段方方；裴迎新；宋丽杰；段晓光；李林 刊期： 2010年第06期
布加综合征（Budd—Chiar isyndrome，BCS）是血管性病变，外科手术和介入治疗是有效的治疗手段，其术前的影像诊断十分重要。作者结合数字减影血管造影（digital subtraction angiography，DSA）检查结果，将BCS患者下腔静脉（inferior vena cava，IVC）病变的二维及彩色多普勒超声图像（CDFI）与MRI图像进行对比，探讨两种检查方法对BCS患者IVC病变的诊断价值。
作者：王学清；贺晓 刊期： 2010年第06期
小儿气管及支气管异物是临床常见急症，因异物及分泌物阻塞气道，患儿术前多伴有低氧血症，而小儿的呼吸、循环代偿能力较差，置入气管镜的强烈刺激易导致呛咳、屏气、反射性喉痉挛、呼吸停止甚至心跳骤停，且在麻醉诱导后异物取出期间无法行气管内插管辅助或控制呼吸。因此，小儿气管支气管异物取出术麻醉的关键是保持患儿的自主呼吸以保证充分氧供，
作者：吕慧敏；张卫 刊期： 2010年第06期
目的：探讨胃癌及癌前病变组织中环氧合酶-2（COX-2）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白的表达及意义。方法：采用免疫组化方法检测COX-2和iNOS蛋白在28例慢性浅表性胃炎、23例慢性萎缩性胃炎伴肠化、19例胃黏膜不典型增生及53例胃癌组织中的表达情况。结果：慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎伴肠化、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中COX-2蛋白的阳性表达率分别为17.9%、30.4%、42.1%和62.3%;iNOS蛋白的阳性表达率分别为21.4%、34.8%、52.6%和71.7%,差异均有统计学意义（COX-2：χ2=16.725,P=0.001;iNOS：χ2=21.300,P〈0.001）。胃癌组织中,COX-2和iNOS蛋白在侵及浆膜层组织及有淋巴结转移组织中阳性表达率均高于未侵及浆膜层组织及无淋巴结转移组织（COX-2：χ2=4.154和5.123,P=0.042和0.024;iNOS：χ2=5.539和8.640,P=0.019和0.003）;且两者间有关联（rP=0.351,P=0.006）。结论：COX-2和iNOS参与胃癌形成的全过程,且可能为其早期事件。
作者：李晓丽；林锐 刊期： 2010年第06期
目的：探讨白藜芦醇对胃癌BGC-823细胞中凋亡相关基因人程序化死亡分子5（PDCD5）表达的影响,并观察白藜芦醇诱导BGC-823细胞凋亡的效应。方法：分别用25、50、100和200μmol/L的白藜芦醇处理BGC-823细胞24、48和72h后,采用免疫细胞化学和原位杂交方法检测PDCD5表达的变化;运用流式细胞仪和TUNEL法检测细胞凋亡情况。另设空白对照组和溶剂对照组。结果：同一时间点,6组PDCD5蛋白及mRNA的表达差异均有统计学意义（F蛋白=211.881、242.438和184.866,P均〈0.001;FmRNA=207.366、148.411和158.661,P均〈0.001）;同一浓度,24、48和72h时点各组比较,PDCD5蛋白及mRNA的表达差异均无统计学意义（F蛋白=0.950、1.870、2.218和2.232,P均〉0.05;FmRNA=1.267、2.376、1.221和2.292,P均〉0.05）。各组BGC-823细胞凋亡指数比较,差异有统计学意义（F=230.069,P〈0.001）。结论：凋亡相关基因PDCD5可能在白藜芦醇诱导胃癌BGC-823细胞凋亡过程中发挥重要作用。
作者：李晓芳；柴雅玫；文小岗；周强；王志勇；崔黎；陈奎生 刊期： 2010年第06期
以往针对乳头溢液疾病的诊断方法主要有溢液涂片细胞学检查、乳管造影等，但这些方法均存在诊断率不高、不直观且定位困难等缺点［1］。2007年6月至2009年6月，新乡市中心医院头颈乳腺科运用乳管镜对114例乳头溢液患者进行了诊治，效果良好，报道如下。
作者：冯跃庆；王钟富；张志敏 刊期： 2010年第06期
目的：评价PCR短串联重复序列（PCR-STR）在异基因外周血干细胞移植（Allo-PBSCT）后监测中的应用价值。方法：采集13例造血干细胞移植（HSCT）患者首次术后10、20和30d的口腔颊黏膜上皮细胞及外周静脉血,提取基因组DNA,采用PCR-STR法比较其外周血与口腔黏膜细胞中D7S3048、D4S2639、D14S306、D18S535、F13A01、FESFPS、vWA、CSF1PO、TPOX和THO1等STR位点联合基因型改变。结果：13例HSCT患者的外周血中均发现外源STR基因型。10、20和30d13例患者口腔黏膜细胞与外周血检测的10个STR基因位点均至少有5个不同。结论：对受者外周血与口腔黏膜多个STR基因位点的基因型进行对比,可随时监测HSCT患者植入效果。
作者：孟晓峰；徐朝阳；陈辉；李晓文 刊期： 2010年第06期
目的：探讨S100A6与胃癌多药耐药的关系。方法：常规培养人胃癌细胞SGC7901及其耐药细胞株SGC7901/ADR,在SGC7901/ADR细胞培养基中加入阿霉素（0.375mg/L）维持耐药。取对数生长期的SGC7901和SGC7901/ADR细胞,分别采用免疫细胞化学方法、Westernblot方法和RT-PCR检测S100A6蛋白及mRNA的表达情况。结果：免疫细胞化学染色结果显示S100A6在SGC7901细胞中的阳性染色强度高于SGC7901/ADR细胞;Westernblot结果显示SGC7901细胞中S100A6蛋白的相对表达量（4.356±0.759）高于SGC7901/ADR细胞的（2.243±0.089）（t=4.788,P=0.039）;RT-PCR结果显示SGC7901细胞中S100A6mRNA的相对表达量（0.659±0.017）与SGC7901/ADR的（0.582±0.060）相比,差异无统计学意义（t=2.125,P=0.150）。结论：S100A6蛋白在SGC7901和SGC7901/ADR细胞中的差异性表达可能与细胞多药耐药有关;这种差异表达是翻译后事件。
作者：李晖；陈丹；唐颖；王丽芬；关宏伟 刊期： 2010年第06期
子宫内膜容受性指子宫内膜对胚胎的接受能力，即允许胚胎黏附其上直至植入完成的特定阶段，它受严格的时间和空间限制。临床促排卵和实验室胚胎体外培养技术日益提高，而体外受精．胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF—ET）的临床妊娠率仍停留在40％～50％，其中一个重要原因就是部分不孕症患者的子宫内膜容受性存在缺陷，影响了胚胎的成功着床，尤其是妊娠失败而无其他明确原因的患者，再次助孕时如何改善子宫内膜容受性以提高妊娠率，成为生殖医学界研究的焦点。
作者：张轶乐；孙莹璞；苏迎春；郭艺红 刊期： 2010年第06期
目的：纯化杜氏盐藻葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）重组蛋白,制备多克隆抗体。方法：PCR扩增得到两端分别添加NdeⅠ和EcoRⅠ酶切位点的GPI基因,双酶切后插入原核表达载体pET28a（＋）,得到重组载体pET28a-GPI,经鉴定正确后,用该重组载体转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导表达后用镍离子柱纯化目的蛋白并免疫新西兰白兔,间接ELISA和Westernblot法检测抗体的效价和特异性。结果：杜氏盐藻GPI基因在大肠杆菌BL21（DE3）中得到高效表达,占总蛋白的41.6%。以高纯度的目标蛋白作为抗原免疫新西兰白兔,得到抗GPI的抗血清。间接ELISA检测抗血清效价达到1：512000,Westernblot检测证实抗血清能与目的蛋白特异性结合。结论：成功纯化了杜氏盐藻GPI重组蛋白并制备了特异性的GPI多克隆抗体。
作者：张磊；崔柳青；李杰；刘红涛；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
胶质瘤占脊髓内肿瘤的90％以上，其中95％为室管膜瘤及星形细胞瘤。MRI为目前诊断脊髓内肿瘤重要的手段，尤其是钆喷酸二甲葡胺（Gd-DT—PA）增强扫描对于术前确定诊断有重要意义［1］。由于室管膜瘤边界清楚，手术可完全切除，预后较好，而星形细胞瘤呈浸润生长，与脊髓组织分界不清，肿瘤全切困难，预后相对较差，因此术前对2者的鉴别诊断有重要的临床意义［2-4］。作者回顾性分析13例室管膜瘤和9例星形细胞瘤的MRI表现，探讨对该病的诊断及鉴别诊断。
作者：王岸飞；张焱；胡瑛；李建灵；荆彦平；王晓艳 刊期： 2010年第06期
职业结构是一个国家的基本社会结构。人们的阶层地位流动主要是在职业结构这一框架内进行的，职业结构变迁既是社会发展和社会变迁的结果，也是社会发展程度的一个重要标志［1］。进入21世纪以来，河南省社会经济发生了巨大变化，这些变化作为职业结构变化的经济和社会基础，引领河南省职业结构也产生了明显变化。关注并正确认识当前和今后一定时期内职业结构构成的变化，有利于合理地分配人力资源，调动社会各个阶层的积极性。该研究利用2005年1％人口抽样调查资料，对河南省就业人员的职业结构进行分析，并与第5次人口普查资料进行比较，探究河南省职业结构的变化，报道如下。
作者：孙浩；张曼平 刊期： 2010年第06期
目的：利用同源重组方法将外源选择标记基因转入杜氏盐藻叶绿体中并表达。方法：以光非依赖性的原叶绿素酸酯还原酶chlN基因为同源片段,以氯霉素乙酰转移酶（cat）基因和除草剂草丁膦（PPT）抗性bar基因为选择标记,构建盐藻叶绿体转化载体pchlN-CAT-BAR,并通过基因枪法转入野生型盐藻细胞,筛选转化藻株。对转化株和野生对照组的细胞计数结果进行统计学分析。结果：在200mg/L氯霉素的选择下,野生型盐藻12d左右死亡,转化藻仍正常生长,再经4mg/LPPT继代筛选3～5代,得到表达氯霉素和PPT抗性的盐藻转化株。盐藻转化株和野生株1个月内藻株生长差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：以chlN基因作为同源片段构建盐藻叶绿体转化载体是可行的。
作者：曾磊；潘卫东；王翠；薛乐勋 刊期： 2010年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
