温登瑰;张立玮;王士杰;李英赛;于卫芳;王晓玲;王俊和;李素平;李永伟;王顺平;尔立绵;丛庆文;马彩芬
目的:制备粒径小、形态均匀和包封率高的氧氟沙星纳米粒,并对纳米粒的稳定性进行考察.方法:选用聚氰基丙烯酸丁酯为载体,在单因素实验基础上结合均匀实验设计优化出氧氟沙星纳米粒的制备工艺,并从温度、湿度和光照3个方面对纳米粒的稳定性进行考察.结果:采用此方法制备的纳米粒粒径小,形态均匀,载药量高,包封率可达69.69%,且稳定性好.结论:此氧氟沙星纳米粒的制备工艺切实可行.
作者:张红岭;朱玲;刘伟;樊予惠;张振中 刊期: 2007年第01期
目的:探讨缺血前经门静脉注射还原型谷胱甘肽(GSH)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法:20只雄性SD大鼠随机均分为2组,生理盐水处理组(IR组)和GSH预处理组(GPC组),缺血前分别经门静脉主干注射生理盐水或GSH 3 ml/kg,15 min后阻断左、中叶肝蒂45 min,再开放肝蒂40 min,建立约70%肝脏缺血再灌注损伤模型.缺血前及再灌注末经下腔静脉穿刺抽血,测血清ALT、AST含量;取左叶肝组织,测丙二醛(MDA)含量和P-选择素表达情况.结果:缺血前2组血清ALT、AST水平、左叶肝组织MDA含量差异无统计学意义(P均>0.05).再灌注末,GPC组血清ALT、AST水平、缺血肝组织MDA含量和P-选择素蛋白表达低于IR组(P均<0.05).结论:缺血前经门静脉途径注射GSH可以有效减轻肝脏缺血再灌注损伤程度,该作用可能与减少血循环中自由基含量、抑制肝组织P-选择素表达有关.
作者:薛飞;王广田;庞志刚;刘超;孙建军;赵玉洲 刊期: 2007年第01期
1999年10月至2005年10月,收治腭部肿瘤患者23例,均采用单纯无覆盖带蒂颊脂垫进行修复.经治疗及精心护理,所有病例术后创面愈合良好,修复效果满意,无感染、面部畸形及功能障碍等并发症.现将护理体会总结如下.
作者:李峰;赵军方;冯延苹 刊期: 2007年第01期
目的:探讨葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)表达与食管癌发生、发展的关系.方法:应用免疫组化SP法检测60例食管鳞癌及其癌旁不典型增生组织、正常食管黏膜组织中GLUT和IGF-Ⅰ的表达.结果:上述3种组织中GLUT1的阳性表达率分别为91.67%、58.82%和20.00%,差异有统计学意义(P<0.05).上述3种组织中IGF-Ⅰ的阳性表达率分别为75.00%、44.12%和0.00%,差异有统计学意义(P<0.05).结论:GLUT1和IGF-Ⅰ蛋白的过表达可能共同参与了食管鳞癌的发生、发展.
作者:赵卫;任宏政;陈芙蓉;张振;王磊;陈奎生 刊期: 2007年第01期
目的:探讨RNAi技术对人食管癌EC9706细胞肝素酶(heparanase,Hpa)基因表达的影响.方法:针对Hpa不同基因位点设计合成寡核苷酸,然后转录为小分子干扰RNA(siRNA),分别用浓度为10 μmol/L、15 μmol/L、20 μmol/L的siRNA经LipofectamineTM 2000脂质体介导转染EC9706细胞72 h,同时设无关序列组及不转染组.采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中Hpa基因的表达.结果:siRNA可有效抑制人食管癌EC9706细胞Hpa基因的表达,以15 μmol/L的siRNA作用效应强,但不同浓度siRNA两两相比,差异均无统计学意义(P>0.05),不同浓度siRNA对Hpa基因表达的抑制效应均显著强于无关序列组及不转染组(P<0.05).结论:RNAi技术可有效抑制人食管癌EC9706细胞Hpa基因的表达.
作者:李文才;孙淼淼;张红;曹学全;娄欣;高冬玲;张岚;宋一民;陈奎生 刊期: 2007年第01期
目的:检测肾母细胞瘤组织中DNA倍体、SPF和NM23的表达.方法:选取35例肾母细胞瘤组织和10例正常肾组织,采用流式细胞仪(FCM)检测DNA倍体、SPF,免疫组化SP法检测NM23的表达.结果:肾母细胞瘤组织中DNA异倍体率、SPF均高于正常对照组,差异有统计学意义.NM23在正常对照组的阳性表达率(90.0%)明显高于肾母细胞瘤组织(31.4%).DNA倍体与NM23呈负相关.结论:联合检测DNA倍体、SPF、NM23可为评价肾母细胞瘤的生物学行为和临床治疗提供一定的依据.
作者:夏宗江;刘秋亮;王家祥 刊期: 2007年第01期
目的:制备阿莫西林完全抗原并鉴定.方法:采用碳二亚胺两步法将半抗原阿莫西林与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,采用混合酸酐法将阿莫西林与卵清蛋白偶联制备ELISA包被原.采用紫外光谱分析和动物免疫试验鉴定偶联产物.结果与结论:紫外光谱分析和动物免疫试验证实阿莫西林抗原合成成功,该抗原可用于阿莫西林ELISA检测试剂盒的研制.
作者:孙武勇;刘向辉;屈凌波;李建军;王云龙;李斐菲 刊期: 2007年第01期
目的:建立和优化重症肌无力(MG)胸腺组织蛋白质组双向电泳技术方法.方法:提取MG患者(n=3)增生型胸腺组织蛋白,以固相pH梯度胶条做第一向等电聚焦电泳,SDS聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳为第二向.在以上过程中分别对蛋白提取、等电聚焦程序(A、B、C、D)和凝胶染色方法等各个实验环节进行控制和优化,利用PDQuest 7.1.1软件分析获得的二维凝胶图像.结果:①采用一步法提取胸腺组织蛋白质,第一向等电聚焦采用7cm IPG胶条,聚焦程序选择B,硝酸银染色.3例标本重复4次,共获12幅二维凝胶图像.随机选取1例标本的2幅图像,利用软件对2幅中的蛋白点进行匹配,匹配率为82.1%;3份样品共12幅凝胶图像的对比,获得3个共同存在的标志蛋白点,相对分子质量和等电点分别为:A点(82 700,7.0)、B点(50 700,5.76)和C点(33 300,5.02).②进一步优化上述实验条件,选择1例标本,采用两步法提取胸腺组织蛋白质,选用17 cm IPG胶条,聚焦采用程序D,考马斯亮蓝染色,获得的二维凝胶图像与一步法(其他条件相同)比较.一步法可检测到蛋白质点326个,两步法可检测到562个蛋白点.结论:①建立了MG胸腺组织蛋白质组提取的方法.采用两步法可以更有效地提取胸腺组织蛋白质组.②利用优化后的实验方法,获得了MG胸腺组织蛋白二维凝胶图像,为开展MG胸腺组织蛋白质组学研究打下了基础.
作者:高峰;杨继要;崔新征;郭亮;杜英;张清勇 刊期: 2007年第01期
目的:探讨长期饮用高氟水对人群生殖内分泌的影响.方法:测定高氟区和对照区的水氟、居民即刻尿氟含量,随机选择2地成年居民各40名,应用放免分析法测定其血清中促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)和降钙素(CT)4种激素的含量.结果:高氟区水氟((3.86±1.19)mg/L)及人群尿氟水平((4.23±2.38)mg/L)均高于对照区((0.79±0.41)mg/L,(1.61±1.44)mg/L),差异均有统计学意义(P<0.05).高氟区人群男性血清LH和T水平与对照区人群比较差异无统计学意义(P>0.05).高氟区人群女性血清LH水平(中位数13.72IU/L,极差51.51 IU/L)高于对照区(中位数8.38 IU/L,极差21.59 IU/L)(P<0.05).两地女性人群血清E2水平差异无统计学意义(P>0.05).高氟区成年居民血清CT水平((63.5±33.1)ng/L)与对照区成年居民((74.1±26.5)ng/L)相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:高氟饮水影响女性人群血清LH水平.
作者:朱静媛;巴月;李二卫;程学敏;刘松;高利华;崔留欣 刊期: 2007年第01期
目的:了解进展较快的食管和贲门癌前病变的时间,为寻找合适的筛查间隔提供线索.方法:在食管癌高发区河北涉县对40~69岁人群开展重复的内镜筛查.结果:301例重复筛查共观察到40例病情发生进展者,其中7例重度不典型增生中:1例首检为正常,间隔13个月检出重度不典型增生,1例首检为基底细胞增生,间隔7个月检出,4例首检为轻度不典型增生,分别间隔3个月、4个月、4个月、10.5个月检出,1例首检为中度不典型增生,间隔12.5个月检出;6例原位癌及黏膜内癌中:1例首检为轻度不典型增生,间隔48个月检出,2例中度不典型增生分别间隔4个月、13个月检出2例,3例重度不典型增生分别间隔3.5个月、9个月、17.5个月检出;3例浸润性癌中:1例中度不典型增生,间隔50个月检出、2例重度不典型增生间隔14个月和19个月检出.结论:食管和贲门癌前病变的滞留时间变异较大,有必要适当缩短筛查间隔,通过及时复查捕获那些进展较快、多点起源和首检遗漏的癌前病变.
作者:温登瑰;张立玮;王士杰;李英赛;于卫芳;王晓玲;王俊和;李素平;李永伟;王顺平;尔立绵;丛庆文;马彩芬 刊期: 2007年第01期
环枕畸形可分为3种类型:腹侧受压型、背侧受压型及混合型[1].腹侧受压型及混合型患者畸形部位深,结构复杂,传统的单纯后路减压手术无法缓解症状,甚至可加重颅颈区腹侧压迫和神经功能障碍,导致术后病情恶化,因此,选择手术入路是影响疗效的关键[2].2001年3月至2005年8月,作者采用经口咽人路显微直视下行齿状突切除术治疗颅颈交界区腹侧受压型及混合型环枕畸形患者35例,现报道如下.
作者:柴昌;步星耀;张建国;栗超跃;周伟 刊期: 2007年第01期
目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)对食管癌EC9706细胞组织蛋白酶B(CB)基因表达的影响.方法:设计并用体外转录方法合成针对CB基因的siRNA,转染EC9706细胞(设10 μmol/L、15 μmol/L、20 μmol/L 3个转染浓度),分别培养24 h、48 h、72 h(实验组),采用免疫细胞化学及原位杂交方法检测转染细胞中CB蛋白和mRNA表达的变化,并设正常对照、空白对照、无关对照.结果:不同浓度siRNA转染24 h、48 h、72 h EC9706细胞CB蛋白表达量均较正常、空白及无关对照降低(P<0.05),以转染72 h的抑制效应为明显,但3者相比差异无统计学意义(P>0.05).3个时间段内随浓度增加siRNA抑制效应增强,3者相比差异有统计学意义(P<0.05),正常对照、空白对照、无关对照均未表现出对CB蛋白表达的抑制效应.转染siRNA后部分细胞形态发生改变.结论:特异性siRNA能有效抑制EC9706细胞中CB蛋白和mRNA表达.
作者:娄欣;张红;曹学全;孙淼淼;高冬玲;张岚;宋一民;李冰;陈奎生 刊期: 2007年第01期
目的:检测非霍奇金淋巴瘤组织中Survivin的表达及肿瘤细胞凋亡情况.方法:应用免疫组化S-P法观察50例非霍奇金淋巴瘤和30例淋巴结炎性病变组织中Survivin的表达水平,应用TUNEL检测上述组织中细胞凋亡情况,并分析2者间的关系.结果:淋巴结炎、B细胞淋巴瘤组和T细胞淋巴瘤组中Survivin阳性表达率分别为:46.67%、73.33%、85.00%,差异有统计学意义(P<0.05);在Survivin阳性表达B、T细胞淋巴瘤组织中,细胞凋亡指数分别是0.73±0.45和0.85±0.37,明显低于Survivin阴性表达的细胞凋亡指数(1.60±0.48和1.48±0.39).结论:在非霍奇金淋巴瘤的发生发展过程中Survivin表达引起的凋亡抑制可能有一定的作用,可作为淋巴结炎与B、T细胞淋巴瘤鉴别诊断的参考指标.
作者:史周印;张明智;李道明;高冬玲;庞霞 刊期: 2007年第01期
精索静脉曲张是中青年男性常见疾病,可影响睾丸生精功能和精子活力,是男性不育的重要病因之一.1999年7月至今作者采用改良Palomo术(小切口腹膜后精索静脉高位结扎手术)治疗精索静脉曲张225例,效果满意,报道如下.
作者:常连胜;徐培元;李梁斌;乔保平;张卫星;赵高贤 刊期: 2007年第01期
目的:探讨腹腔镜小肠侧侧置夹吻合术的技术可行性.方法:选取健康Wistar大鼠20只,雌雄各半.随机均分为2组.开腹后,一组以传统的丝线完成肠肠吻合术(丝线组),一组以钛夹完成肠肠吻合术(钛夹组).术后7 d处死2组动物,观察吻合口的愈合情况,吻合口并发症的发生率及镜下所见病变的差异性.结果:钛夹组手术时间较丝线组明显缩短,吻合口爆破压较丝线组明显降低,P均<0.05.2组吻合口均生长良好,但丝线组较钛夹组炎症反应重.丝线组未见吻合口瘘,钛夹组2例发生吻合口瘘.结论:以钛夹完成小肠侧侧吻合术是完全可行的,待优化改进后有可能应用于腹腔镜肠吻合术中.
作者:张豫峰;董良鹏 刊期: 2007年第01期
先天性心脏病合并重度肺动脉高压患者由于术后易发生肺动脉高压危象,往往死于术后低心排及严重右心衰竭[1].2001年1月至2005年6月,作者应用单向活瓣式补片治疗先天性心脏病合并重度肺动脉高压25例,术后无早期死亡和右心功能衰竭病例发生,取得了较好的临床效果,现报道如下.
作者:赵根尚;郭龙辉;冯德广;法宪恩;张瑞成;王海永;李红卫;侯剑峰 刊期: 2007年第01期
目的:探讨组织蛋白酶B(CB)特异性siRNA对人食管癌EC9706细胞体外侵袭力的抑制作用.方法:将体外转录合成的针对CB的特异性siRNA设10 μmol/L、15 μmol/L和20 μmol/L 3个不同剂量转染人食管癌EC9706细胞,用Boyden chamber体外侵袭实验检测转染前后细胞体外侵袭力的变化.对照组设无关siRNA转染组、空白对照组(转染空脂质体)及正常对照组(不进行任何操作).结果:和正常对照组相比,特异性siRNA 15μmol/L组和20 μmol/L组穿越Matrigel胶的细胞数明显减少(P<0.05),而10 μmol/L特异性siRNA组、空白对照组和无关siRNA转染组与正常对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05).结论:特异性CB siRNA能有效抑制人食管癌EC9706细胞的体外侵袭力.
作者:张红;娄欣;曹学全;孙淼淼;高冬玲;张岚;宋一民;李冰;陈奎生 刊期: 2007年第01期
目的:探讨氨茶碱对平阳霉素诱发的大鼠肺纤维化的干预作用及机制.方法:48只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组和氨茶碱组,每组16只.后2组气管内滴入平阳霉素(5 mg·kg-1)制备肺纤维化模型,滴入前1d分别经腹腔注入生理盐水和氨茶碱溶液(60 mg·kg-1),对照组仅给予生理盐水;气管内滴药后第7 d、28 d分2批处理动物,收集血浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织标本.肺组织病理切片行HE和Masson染色,观察肺泡炎和肺纤维化程度;光镜下计数BALF中炎症细胞的数量;根据血浆与BALF上清中总蛋白的含量计算肺通透系数.采用放免法测定BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平和血浆中环腺嘌呤单核苷酸(cAMP)浓度,比色法测定肺匀浆中丙二醛(MDA)和羟脯氨酸(HYP)水平.结果:第7 d,模型组肺泡炎明显,氨茶碱组病变较轻微;模型组BALF中炎症细胞总数、肺通透系数均高于对照组和氨茶碱组(P<0.01);模型组BALF中TNF-α活性和肺匀浆中MDA和HYP水平均高于对照组,氨茶碱组以上各指标均较模型组降低(P<0.05或0.01).第28 d,模型组出现肺纤维化和蜂窝肺,氨茶碱组病变明显减轻.模型组肺匀浆HYP水平明显高于氨茶碱组;但氨茶碱组血浆中cAMP浓度不论第7 d、28 d均高于模型组.结论:氨茶碱对平阳霉素诱发的肺纤维化有阻断作用,其机制可能与增加cAMP从而缓解肺泡炎有关.
作者:潘金兵;侯宇虹;齐景宪;夏熙郑 刊期: 2007年第01期
目的:检测2型糖尿病并发冠心病(DM-CHD)患者血清芳香酯酶(ArE/PON1)和黄嘌呤氧化酶(XO)活性及脂蛋白含量.方法:测定78例2型糖尿病(DM)、80例DM-CHD患者与81例健康人血清ArE/PON1、XO、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)等有关指标,分析上述指标在DM-CHD发病中的意义.结果:与健康组相比,DM与DM-CHD组患者血清ArE/PON1活性降低、XO活性升高;MDA、CAT等水平升高,SOD活性降低;oxLDL水平升高,HDL-C降低,且DM-CHD组的改变较DM组明显.结论:血清ArE/PON1、OX、SOD及脂蛋白的测定可反映DM与DM-CHD患者机体氧化应激与脂代谢紊乱状况,是监测DM并发CHD的有用指标.
作者:钱书虹;钱庆文;王诗瑾 刊期: 2007年第01期
目的:构建含人幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)郑州分离株MEL HP27 ureB-omp11融合基因的重组表达载体.方法:利用分子克隆技术,扩增Hp UreB、Omp11编码基因及融合基因ureB-omp11,将融合基因ureB-omp11与载体pET30a(+)进行酶切、连接,然后转化并筛选含有目的基因的重组载体.结果:酶切、测序分析表明,插入的基因片段为Hp ureB-omp11融合基因,由2 280 bp组成.与GenBank报道的相比,核苷酸序列同源性为99.39%,氨基酸序列同源性为99.47%.结论:成功构建了MEL Hp27融合蛋白UreB-Omp11的双价疫苗重组载体,为Hp蛋白质疫苗和核酸疫苗的研制奠定了良好的基础.
作者:赵玉霞;章涵;段广才;郗园林 刊期: 2007年第01期