学术投稿

同种异体骨髓单个核细胞移植对急性心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

侯剑峰;法宪恩;张蕾;张瑞成

关键词:细胞移植, 心肌梗死, 细胞凋亡, 同种异体, 大鼠
摘要:目的:探讨大鼠同种异体骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BM-MNCs)急性心肌梗死区内移植对大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法:健康雄性Wistar大鼠24只,用结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠心肌梗死模型后,分别将制备的培养基(对照组)和BM-MNCs悬液(移植组)由心外膜下植入梗死心肌周围.移植术后4周,超声心动图评价左室形态及功能,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组化法检测心肌细胞中Bcl-2、Fas、FasL蛋白的表达水平,同时观察梗死区心肌内移植BM-MNCs及其周边区组织形态学特点.结果:移植术后4周,移植组左室收缩末期内径和左室舒张末期内径明显低于对照组(P<0.01),左室射血分数、左室短轴缩短率明显高于对照组(P<0.01).TUNEL结果显示:移植组心肌细胞凋亡指数(AI)明显低于对照组(P<0.05).免疫组化结果显示:与对照组相比,移植组心肌细胞中Bcl-2蛋白平均光密度值显著升高(P<0.05),Fas、FasL蛋白平均光密度值显著降低(P<0.05),同时观察到移植组心肌梗死区内有BrdU标记阳性的BM-MNCs移植细胞存活.结论:同种异体BM-MNCs移植可以抑制心肌梗死后心肌细胞凋亡的发生,改善急性心肌梗死后的心脏功能,其机制可能与其调节Bcl-2、Fas、FasL的表达有关.
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  • 阿莫西林完全抗原的合成与鉴定

    目的:制备阿莫西林完全抗原并鉴定.方法:采用碳二亚胺两步法将半抗原阿莫西林与牛血清白蛋白偶联制备免疫原,采用混合酸酐法将阿莫西林与卵清蛋白偶联制备ELISA包被原.采用紫外光谱分析和动物免疫试验鉴定偶联产物.结果与结论:紫外光谱分析和动物免疫试验证实阿莫西林抗原合成成功,该抗原可用于阿莫西林ELISA检测试剂盒的研制.

    作者:孙武勇;刘向辉;屈凌波;李建军;王云龙;李斐菲 刊期: 2007年第01期

  • 人铜锌超氧化物歧化酶真核表达载体的构建及在酿酒酵母中的分泌表达

    目的:探讨酿酒酵母中人铜锌超氧化物歧化酶(hCu/Zn-SOD)的分泌表达.方法:采用RT-PCR技术从人胃总RNA中分离扩增hCu/Zn-SOD的cDNA,与酿酒酵母交配因子(MF)α信号肽编码序列融合,将融合基因插人大肠杆菌-酵母细胞穿梭型质粒pYES2.0,构建真核分泌表达质粒pYES-MS,将其转化入酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl中,用半乳糖进行诱导表达,采用SDS-PAGE、蛋白质免疫印迹分析及电泳谱活性染色测定表达产物分泌情况及其活性.结果:该工程菌可高效表达一相对分子质量约为21 000的蛋白并与兔抗人Cu/Zn-SOD多抗有特异的免疫反应,同时在培养基上清中检测到此表达蛋白的分泌,具有特异性SOD酶活性.结论:作者成功构建了pYES-MS/INV菌株,该菌株大量表达有天然酶活性的hCu/Zn-SOD,并有部分hCu/Zn-SOD分泌到酵母细胞外,为开发hCu/Zn-SOD的基因工程产品奠定了良好的基础.

    作者:李雪莲;马一君;武峰;史兆兴;王恒梁;黄留玉 刊期: 2007年第01期

  • 3种充填材料应用于绝经后骨质疏松症山羊经皮椎体成形术后椎体的超微结构观察

    目的:在山羊骨质疏松症模型上,观察经皮椎体成形术(PVP)中聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)、磷酸钙人工骨(CPC)和复合重组人类骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的磷酸钙人工骨(rhBMP-2/CPC)3种充填材料充填后椎体的超微结构变化.方法:6~8岁中老年雌性山羊8只,均行双侧卵巢切除术,术后4个月建立骨质疏松症模型.在C形臂X光机监视下,随机选取每只山羊的L2~L6的2节椎体行PVP,分别充填PMMA、CPC和rhBMP-2/CPC,保证每只山羊2节穿刺椎体的充填材料各不相同,术后4个月麻醉动物,活体取出椎体,行扫描电镜观察.结果:8只山羊16个椎体的PVP均成功,3种充填材料分布于椎体内,共出现4个椎体的渗漏.扫描电镜观察:PMMA呈层状黏附于松质骨表面,两者界限明显,PMMA表面有极少量的细胞成分存在,未见骨质长人PMMA和PMMA的降解;CPC呈松散的团状,渗透于骨组织中,与骨组织融合在一起,有新骨组织长入其内部,呈交错连接,无界膜形成,有不规则的互相连通的自然孔隙存在,细胞成分较多,可见CPC吸收;与CPC结构相比,rhBMP-2/CPC细胞成分更为丰富,可见大量成簇的成骨细胞,并可见较成熟的骨小梁形成.结论:rhBMP-2/CPC和CPC均具有降解活性和骨传导活性,优于PMMA.rhBMP-2/CPC还具有诱导成骨活性,可能成为PVP中强化骨质疏松椎体的首选充填材料.

    作者:刘宏建;杜靖远;王义生;刘辉 刊期: 2007年第01期

  • 肝素酶特异性RNAi对人食管癌移植瘤组织中Hpa基因表达的影响

    目的:应用RNAi技术沉默肝素酶(heparanase,Hpa)基因,探讨其对人食管癌裸鼠移植瘤组织中Hpa基因表达的影响.方法:①先转染后成瘤:采用浓度为15 μmol/L体外合成的Hpa小分子干扰RNA(siRNA)转染EC9706细胞72 h,另设无关序列组及空白对照组.然后将转染后的EC9706细胞种植于裸鼠皮下构建裸鼠食管癌移植瘤,待瘤体长至足够大时,取瘤组织;②先成瘤后转染:构建裸鼠食管癌移植瘤模型,待肿瘤长出1周后,依每次3 μg/只腹腔注射siRNA及无关序列,连续3 d,另1组仅注射PBS作空白对照,然后取瘤组织.采用免疫组化及原位杂交技术观察各组瘤组织中肝素酶蛋白及mRNA的表达.结果:无论是先转染后成瘤组还是先成瘤后转染组siRNA均可下调裸鼠食管癌移植瘤组织中Hpa蛋白及mRNA的表达,与无关序列组及空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:应用RNAi技术沉默Hpa基因可以有效下调裸鼠食管癌移植瘤组织中Hpa蛋白及mRNA的表达,为临床防治食管癌浸润转移奠定了一定的理论基础.

    作者:孙淼淼;张红;曹学全;娄欣;高冬玲;张岚;宋一民;陈奎生 刊期: 2007年第01期

  • 脑静脉窦血栓46例临床分析

    脑静脉窦血栓(cerebral venous sinus thrombosis,CVST)是一类少见的缺血性脑血管疾病,发病率低,病因复杂,症状和临床表现高度多变.2000年1月至2006年10月,本科共收治46例CVST,现将临床表现、影像学特征、致病原因、治疗方法与预后分析报道如下.

    作者:王建祯;凌锋;吉训明;李慎茂;缪中荣;朱风水;何心 刊期: 2007年第01期

  • 河南汉族人群D7S3048基因座遗传多态性分布

    目的:了解河南汉族人群中STR基因座D7S3048的遗传多态性.方法:采用PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染技术分析河南地区119例无血缘关系汉族人群该STR位点的遗传多态性.结果:首次获得河南汉族人群中D7S3048的分布情况.D7S3048基因座检出10个等位基因,基因型为37个,基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡.汉族与蒙古族相比较,等位基因分布有差异.结论:河南地区汉族人群中D7S3048位点具有较高的多态性,在法医学和人类遗传学研究中是很好的遗传标记.

    作者:孟晓峰;陈辉;孙莉;宋国英;刘华;李晓雯 刊期: 2007年第01期

  • 甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤组织中肾上腺髓质素表达的影响

    目的:观察甲基强的松龙(MP)对大鼠脊髓损伤(SCI)组织中肾上腺髓质素(AM)表达的干预作用.方法:SD大鼠108只随机分为假手术组、MP干预组(MP组)和脊髓损伤组(SCI组),每组36只.假手术组只切除椎板不损伤脊髓,MP组和SCI组采用Allen WD法制作大鼠急性脊髓损伤模型,并于术后1 h经尾静脉分别给予50mg/kg MP和等量生理盐水.于术后2 h、8 h、1 d、2 d、3 d、6 d取骨髓组织(每个时点6只大鼠),HE染色观察脊髓损伤情况,免疫组化染色观察AM的表达,并于术后1 d、3 d、6 d行运动功能评定.结果:HE染色,假手术组各时间点无明显异常,MP组病理变化轻于SCI组.免疫组化染色,假手术组中AM低表达,SCI组AM表达增高并于术后8 h达峰值,以后逐渐降低(P<0.01),MP组AM的表达在术后8 h、1 d、2 d、3 d均高于SCI组,差异有统计学意义(P<0.05).运动功能评分:假手术组1 d、3 d、6 d均高于MP、SCI组,MP组在术后3 d、6 d高于SCI组,P均<0.01.结论:急性脊髓损伤后AM表达代偿性增高并存在动态变化,MP干预可上调AM的表达从而减轻脊髓的继发性损伤.

    作者:郭新庆;郑启新;吴永超 刊期: 2007年第01期

  • 哮喘大鼠模型肺组织中嗜酸粒细胞趋化因子及肺组织和骨髓组织中嗜酸粒细胞趋化因子受体的表达

    目的:探讨嗜酸粒细胞趋化因子(Eotaxin)及其受体(CCR3)在支气管哮喘发病机制中的作用.方法:健康雄性SD大鼠24只,随机分为哮喘组和对照组,每组12只.哮喘组采用卵蛋白(OVA)激发哮喘,对照组用生理盐水代替OVA.于末次激发后4~6 h断尾取血,涂片.麻醉动物,制备肺组织标本与骨髓细胞涂片.计数外周血、骨髓细胞涂片及肺组织嗜酸粒细胞(Eos)百分率;免疫组化技术观察肺组织中Eotaxin蛋白表达及肺组织和骨髓组织中CCR3蛋白表达;原位杂交方法观察肺组织中Eotaxin mRNA的表达.结果:与对照组相比,哮喘组大鼠外周血、骨髓、肺组织Eos百分率明显升高(P<0.01);肺组织中Eotaxin蛋白和mRNA表达明显升高(P<0.01),且和肺组织中Eos百分率呈正相关(P<0.05);肺组织及骨髓中CCR3蛋白表达均明显增加(P<0.01).结论:Eotaxin及其受体CCR3参与了哮喘的发病机制;在Eos从骨髓迁徙到外周血再募集到肺组织这一过程中,Eotaxin与CCR3起重要作用.

    作者:李静;李玉琴 刊期: 2007年第01期

  • 饮用水中钙镁离子浓度对氟暴露人群血清碱性磷酸酶的影响

    目的:探讨饮用水中钙镁离子含量对氟暴露人群血清碱性磷酸酶(AKP)的影响.方法:随机选取氟病区与对照区18~50岁居民各38名,分别采集饮用水及血清标本.采用氟离子选择电极法测定水氟浓度,火焰原子分光光度法测定水钙、水镁含量,金氏法测定血清AKP水平.结果:2区水钙含量差异无统计学意义(P>0.05),氟病区水氟、水镁含量与血清AKP均高于对照区,差异有统计学意义(P<0.05).血清AKP(Y)与水氟(X1)、水钙(X2)、水镁(X3)的回归方程是Y=13.805+1.812X1-0.046X2-0.090X3.结论:氟病区水氟、水钙、水镁对血清AKP均有影响,钙镁联合作用可减轻或延缓机体氟中毒的骨相损害.

    作者:黄辉;巴月;吴建军;李二卫;马建国;李世宏;崔留欣 刊期: 2007年第01期

  • 四硫化四砷对荷NB4细胞SCID小鼠生存期的影响

    目的:探讨四硫化四砷(As4S4)对荷NB4细胞SCID小鼠生存期的影响.方法:34只荷NB4细胞腹水瘤的SCID小鼠均分为2组:治疗组给予As4S4悬液(100 mg/kg)腹腔内注射,隔日1次,共3次;对照组同法给予5 g/L甲基纤维素溶液.观察2组小鼠的生存期.结果:治疗组小鼠的生存期为(22.44±6.77)d,比对照组((16.27±2.34)d)明显延长(P<0.01);As4S4治疗过程中无明显的毒副作用,小鼠终死于NB4细胞增殖所致的腹水.结论:As4S4可抑制SCID小鼠体内NB4细胞的增殖,延长荷瘤小鼠的生存期.

    作者:刘延方;陆道培;江滨 刊期: 2007年第01期

  • 低剂量睾酮对慢性心力衰竭雄性大鼠血清肿瘤坏死因子-α含量的影响

    目的:观察低剂量睾酮(T)对心肌梗死后慢性心衰雄性大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响.方法:对120只健康雄性SD大鼠随机行冠状动脉结扎(n=105)或假手术(PS,n=15).6周后将存活的44只模型鼠随机分为2组:心力衰竭+T治疗组(CHF+T组,n=22,给予T 5 mg/kg肌内注射)、心力衰竭组(CHF组,n=22,给予安慰剂).用药12周后测定血清T及TNF-α含量.结果:CHF组大鼠血清T含量明显低于PS组((1.53±0.77)μg/L vs(4.75±1.61)μg/L,P<0.05),CHF+T组T含量与PS组差异无统计学意义((4.15±0.59)μg/Lvs(4.75±1.61)μg/L,P>0.05).CHF组较PS组血清TNF-α含量明显升高((8.59±3.22)ng/L vs(5.29±2.30)ng/L,P<0.05),CHF+T组较CHF组血清TNF-α含量下降((5.97±1.81)ng/L vs(8.59±3.22)ng/L,P<0.05),与PS组相比((5.29±2.30)ng/L)差异无统计学意义.结论:低剂量T可降低心肌梗死后慢性心衰雄性大鼠血清TNF-α含量.

    作者:孙琳;张彦周;邢晓雯;张澎湃;曹占伟 刊期: 2007年第01期

  • 地塞米松对支气管哮喘模型大鼠气道重建的影响

    目的:观察地塞米松对哮喘模型大鼠气道重建的影响.方法:24只SD大鼠随机分成哮喘模型组、激素干预组和正常对照组,每组8只,前2组以卵蛋白致敏并长期吸人激发大鼠慢性哮喘模型,正常对照组以生理盐水代替卵蛋白同法处理大鼠.激素干预组每次激发前给予地塞米松0.5 mg/只腹腔注射,哮喘模型组给予等量生理盐水,共4周.后1次激发后24 h内处死大鼠,取大鼠肺组织行免疫组化测定Ⅰ、Ⅲ型胶原和转化生长因子β1(TGF-β1)的含量,同时测定气道内外径及平滑肌层、网状基底膜的厚度.结果:哮喘模型组气道壁平滑肌和基底膜层厚度及Ⅲ型胶原与TGF-β1含量均高于正常对照组和激素干预组(P均<0.001),内外径比值低于正常对照组和激素干预组(P<0.001),而激素干预组和正常对照组以上指标差异无统计学意义;3组间Ⅰ型胶原含量差异无统计学意义(P>0.05).结论:地塞米松可减少气道壁胶原沉积和平滑肌增生,从而抑制哮喘大鼠气道重建,其机制可能与抑制TGF-β1的表达有关.

    作者:王文建;杨莉 刊期: 2007年第01期

  • 河南省区县高中生心理及行为问题调查分析

    目的:了解河南省区县高中生的行为生活方式及心理健康状况.方法:采用SCL-90心理测试量表及自拟的调查问卷(包括个人基本情况,饮食情况、睡眠质量,网络影响,不良行为(吸烟,饮酒,吸毒),恋爱及性心理情况等),通过随机抽样的方法从河南省东西南北中部各随机选择2所区县高中,从每所高中随机整群抽取3个班,对2 021名区县高中生进行了调查.结果:共收回有效问卷1 868份,其中男性1 027人,女性841人.行为调查结果显示有0.4%尝试过毒品;心理调查结果显示区县高中生的主要心理问题为强迫、抑郁、躯体化、偏执;恋爱及性心理调查结果显示男生错误评价性自慰的发生率低于女生,而性自慰发生率高于女生.结论:河南省区县高中学生心理及行为问题较为严重,需要全社会的关注和有效的干预.

    作者:王予东;贺红梅;王增珍 刊期: 2007年第01期

  • 食管鳞癌组织中淋巴管生成2种检测方法比较

    目的:探讨人食管鳞癌组织中淋巴管生成灵敏的检测方法.方法:分别采用免疫组化SP法(以血管内皮生长因子受体-3为淋巴管特异性标记物)和酶组织化学法检测49例食管鳞癌组织和癌旁组织中淋巴管密度(分别记为LVDi与LVDe).结果:癌组织中LVDe的表达和癌旁组织中LVDi、LVDe的表达在有、无淋巴结转移时差异均有统计学意义(P<0.01).有淋巴结转移癌组织中LVDi与LVDe之间差异有统计学意义(P<0.01).结论:酶组织化学法可较好地显示食管鳞癌组织中的淋巴管.

    作者:赵阿红;宋一民;张红新;高冬玲;张岚;张云汉;陈奎生 刊期: 2007年第01期

  • 烟雾病30例临床与影像学分析

    1999年6月至2006年6月,本院共收治经数字减影血管造影(DSA)或磁共振血管成像(MRA)证实的烟雾病(Moyamoya病)患者30例现将其临床与影像学特征分析报道如下.

    作者:刘威;王润青;李丽 刊期: 2007年第01期

  • 颊脂垫修复腭部肿瘤切除缺损23例护理体会

    1999年10月至2005年10月,收治腭部肿瘤患者23例,均采用单纯无覆盖带蒂颊脂垫进行修复.经治疗及精心护理,所有病例术后创面愈合良好,修复效果满意,无感染、面部畸形及功能障碍等并发症.现将护理体会总结如下.

    作者:李峰;赵军方;冯延苹 刊期: 2007年第01期

  • 艾迪注射液与化疗合用治疗消化道肿瘤32例

    化疗是目前治疗恶性肿瘤的重要手段,但在治疗的同时,往往会产生一些毒副反应而影响患者的生活质量,甚至使正常治疗不能顺利进行.2003年3月至2004年12月,作者应用艾迪注射液联合化疗治疗消化道肿瘤,与单用化疗对比,观察其临床疗效、患者生活质量、免疫功能改变及毒副反应情况,报道如下.

    作者:吴欣爱;樊青霞;王留兴;王瑞林 刊期: 2007年第01期

  • 高氟饮水对8~12岁儿童牙齿及骨代谢指标的影响

    目的:探讨高氟饮水对儿童牙齿及骨代谢指标的影响.方法:随机抽取62名高氟区和26名对照区的8~12岁儿童,检查氟斑牙患病率,并采集空腹静脉血,应用放免法测定血清骨钙素(BGP)和降钙素(CT)的水平.结果:高氟区儿童氟斑牙患病率为59.68%,对照区为3.85%;高氟区儿童血清BGP为(6.78±3.87)μg/L,对照区为(3.78±1.81)μg/L;高氟区儿童血清CT水平为(492.00±52.67)ng/L,对照区为(948.57±74.72)ng/L,2区以上指标相比,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:长期高氟饮水导致儿童氟斑牙患病率增高,且影响儿童骨代谢.

    作者:马晓英;崔留欣;李世宏;刘洋;朱静媛;程学敏;巴月 刊期: 2007年第01期

  • 热休克蛋白10和热休克蛋白60的表达、纯化及与线粒体DNA转录因子A相互结合

    目的:表达、纯化热休克蛋白10(Hsp10)和热休克蛋白60(Hsp60),研究人类线粒体DNA转录因子A(TFAM)在体外与Hsp10,Hsp60间的相互交联作用.方法:使用Escherichia.Coli(E.coli)诱导表达含有6个组氨酸标记的Hsp10和Hsp60,镍离子鳌合树脂分离纯化后,体外分别与纯化TFAM共育,抗-TFAM抗体免疫沉淀,SDSPAGE分离蛋白,CBB探测分析.结果:Hsp10可在体外与TFAM发生免疫共沉淀,Hsp60不能.结论:Hsp10可能为TFAM-复合体组分.

    作者:程晓丽;神吉智丈;李春燕;金秀日;康東天 刊期: 2007年第01期

  • 乌思他丁治疗肾移植术后重症肺部感染11例

    肺部感染是肾移植术后主要的并发症.其发病隐匿,病情发展迅速,常伴有混合感染,极易发展成急性呼吸窘迫综合征(ARDS),是肾移植受者死亡的主要原因[1-2].为提高肾移植患者重度肺部感染的疗效,作者对11例肾移植术后重度肺部感染患者在常规治疗的基础上加用乌思他丁(UTI)治疗,效果满意,现报道如下.

    作者:史冀华;王静;王跃 刊期: 2007年第01期

郑州大学学报(医学版)杂志

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主管:河南省教育厅

主办:郑州大学