尹磊;张功员;刘键;李晟磊;赵秋民;刘宗文;陈奎生;张钦宪
目的:建立能够在体外长期培养胰腺导管上皮细胞的方法.方法:成年昆明小鼠,颈椎脱臼法处死,取胰腺组织,以Ⅴ型胶原酶消化,400目滤网过滤,分离胰腺导管上皮细胞,用添加有各种生长因子的DMEM/F12培养基培养,待细胞达到90%以上汇合时以胰酶消化传代.在不同时间点取样,于普通光镜和相差显微镜下观察细胞形态学变化;采用免疫细胞化学方法检测细胞角蛋白-19(CK-19)的表达情况;并行双硫腙(DTZ)染色.结果:原代及传代培养的细胞具有上皮样细胞的典型特征,CK-19染色阳性,DTZ染色阴性,可初步鉴定为胰腺导管上皮细胞.结论:所建立的原代和传代培养方法,适宜于小鼠胰腺导管上皮细胞的体外生长.
作者:赵艳艳;秦贵军;张颖辉;罗方 刊期: 2007年第06期
高血压是引起心血管疾病的主要危险因素之一.作者对职业性慢性汞中毒患者40例的血压进行了分析,以探讨慢性汞中毒对血压的影响.
作者:曹建霞;张金盈 刊期: 2007年第06期
目的:探讨肿瘤细胞RNA转染脐血树突状细胞(DCs)分泌的exosomes对细胞毒T细胞(CTL)特异性抗肿瘤作用的影响.方法:分离脐血单个核细胞,经干细胞因子(SCF)、粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)诱导和BGC823 RNA转染形成成熟DCs,收集DCs培养上清,采用超速离心法分离exosomes,并用透射电镜、SDS-PAGE和Western blot进行鉴定;利用MTT比色分析法观察exosomes诱导T细胞增殖和CTL的杀瘤活性.结果:经诱导和BGC823 RNA转染后DCs分泌的exosomes表达MHC-Ⅱ、CD54、CD86,对T细胞的刺激指数(SI)为(2.53±0.09),CTL杀瘤活性(64.92±0.37)%,较转染前的(1.26±0.07)和(35.28±0.16)%均增高(P<0.01).结论:从脐血中诱导的DCs经肿瘤细胞RNA转染后分泌的exosomes,能在体外活化T细胞,有望成为新型非细胞结构的DCs亚单位疫苗.
作者:杜英;李倩如;李付广;黄玉敏;孙蕾;董子明 刊期: 2007年第06期
进展型脑梗死是指脑缺血6 h后,局灶性神经功能缺损症状进行性加重,发病率、致残率、致死率较高,其主要发生机制是血栓继续发展或形成[1].奥扎格雷钠(ozagrel sodium)是一种强力血栓烷合成酶抑制剂,也是新型的抗血小板聚集药物,临床上已用于治疗动脉硬化性脑梗死及其伴随的运动障碍[2].作者用奥扎格雷钠治疗进展型脑梗死患者34例,疗效较好,报道如下.
作者:赵燕民;洪丽;陈品 刊期: 2007年第06期
目的:检测人胃腺癌组织中唾液酸化路易斯-X(SLeX)抗原的表达,并探讨其与胃腺癌转移潜能的关系.方法:采用原位杂交技术检测36例人胃腺癌组织(男22例,女14例;≤60岁16例,>60岁20例;肿瘤直径≤5 cm13例,>5 cm 23例;高、中分化11例,低分化25例;有淋巴结转移24例,无淋巴结转移12例;浸润至黏膜下层以内6例,肌层11例,浆膜层19例;组织学分级,Ⅰ级3例,Ⅱ级9例,Ⅲ级24例;TNM分期,Ⅰ、Ⅱ期11例,Ⅲ、Ⅳ期25例)、15例相应癌旁不典型增生组织及10例正常胃黏膜组织中SLeX抗原合成酶α-1,3岩藻糖转移酶(α-1,3 Fuc-T)的mRNA表达水平,应用免疫组织化学检测3种组织中SLeX抗原的蛋白表达水平.结果:胃腺癌组织中SLeX抗原和α-1,3 Fuc-T mRNA阳性表达率高于正常组织、癌旁不典型增生组织,差异均有统计学意义(P均<0.05).胃腺癌组织中,Slex抗原和α-1,3 Fuc-T mRNA的阳性表达率与分化程度、淋巴结转移情况、浸润深度、组织学分级和TNM分期相关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小无关(P均>0.05).结论:SLeX抗原表达与人胃腺癌转移和浸润密切相关,可作为判断胃腺癌浸润和转移的指标之一.
作者:张腾腾;王若明;丁一;乐晓萍;僧国珍 刊期: 2007年第06期
目的:探讨肾盂输尿管连接部梗阻段细胞增殖与神经分布状况.方法:应用免疫组织化学方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、神经肽Y(NPY)在28例肾盂输尿管连接部梗阻(病例组)和15例正常输尿管组织(对照组)的表达情况.结果:病例组PCNA阳性表达率85.71%(24/28),高于对照组的2/15(x2=21.41,P<0.05);病例组PCNA阳性细胞主要位于黏膜层及纤维结缔组织层,4例阴性表达者存在肌层肥厚.病例组NPY阳性表达率为50%(14/28),低于对照组的86.7%(13/15),差异有统计学意义(x2=5.62,P<0.05).结论:肾盂输尿管连接部梗阻段细胞增殖和神经分布减少在先天性肾积水发病过程中起重要作用.
作者:郝义彬;杨帅平;范应中;张谦;许华峰;杨玉齐;李泸平;王家祥 刊期: 2007年第06期
目的:观察自体肿瘤抗原修饰的树突状细胞(DC)活化的T淋巴细胞的杀瘤效应.方法:取结肠癌患者原发病灶手术标本,贴壁法培养获取结肠癌细胞,制备肿瘤抗原.分离同一患者外周血单个核细胞,体外诱导为DC,用肿瘤抗原修饰.尼龙棉柱过滤获取外周血T淋巴细胞.将肿瘤抗原修饰的DC与T淋巴细胞按1∶100的比例共孵12 h、24 h、36 h、48 h,MTT法观察T淋巴细胞对结肠癌细胞的杀伤作用.结果:肿瘤抗原修饰36 h后,DC的CD11c、CD80、HLA-DR表达均较修饰前增高,并且高于肿瘤抗原修饰24 h、48 h的DC(P均<0.05).肿瘤抗原修饰36 h的DC与自体T淋巴细胞按1∶100共孵育36 h,T淋巴细胞的肿瘤细胞杀伤率大于共孵育12 h、24 h、48h组(P均<0.05).结论:肿瘤抗原修饰的DC在体外可以增加T淋巴细胞的活性,以DC∶T淋巴细胞为1∶100共孵36 h时,T淋巴细胞活性高.
作者:焦保庭;杨伟明;宋辉;贺子彪 刊期: 2007年第06期
目的:对河南省呼吸道合胞病毒(RSV)进行分离与鉴定.方法:选择2006年冬季至2007年春季河南省部分医院急性呼吸道感染患者,采集咽拭子,利用Hep-2细胞和Vero细胞进行病毒分离,对分离株用特异性RTPCR鉴定;对鉴定阳性的RSV毒株进行蛋白G全基因序列测定,并进行同源性分析,构建基因进化树.结果:共分离到4株RSV毒株,各分离株之间核苷酸同源性92%~99%;与A型RSV标准参考株的核苷酸同源性为86%~92%,与B型RSV标准株的同源性为70%.结论:2006年河南省RSV流行株为A型.
作者:丰达星;徐瑾;赵升;许汴利 刊期: 2007年第06期
脑灰质异位症属先天性神经元移行异常疾病,可以单独存在,也可以合并中枢系统其他畸形,自CT及MR应用于临床以来,该病的检出率有了明显的提高[1-2].2000年至2005年,作者采用MRI诊断脑灰质异位症患者22例,报道如下.
作者:张焱;程敬亮;胡瑛;高剑波;李建灵;杨涛;李荫太;张战利;任翠萍;高雪梅;周志刚;郭华 刊期: 2007年第06期
目的:合成氧氟沙星人工抗原.方法:采用碳二亚胺法将氧氟沙星与牛血清白蛋白偶联合成完全抗原,采用混合酸酐法将氧氟沙星与卵清蛋白偶联合成应用于ELISA检测的包被抗原.结果与结论:经紫外光谱分析和动物免疫试验证明抗原合成成功.该人工抗原可用于氧氟沙星单克隆抗体的制备及其ELISA检测试剂盒的研制.
作者:孙武勇;屈凌波;王云龙;刘文英 刊期: 2007年第06期
目的:探讨MUC4及CerbB-2的表达与食管鳞状细胞癌发生、发展及浸润转移的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测60例食管鳞状细胞癌组织、30例癌旁不典型增生组织和60例正常食管黏膜组织中MUC4及CerbB-2蛋白的表达.结果:食管鳞状细胞癌组织、癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中MUC4的阳性表达率分别为81.7%、56.7%和5.0%,CerbB-2的阳性表达率分别为73.3%、80.0%、36.7%,3组间MUC4与CerbB-2阳性表达率相比,差异均有统计学意义(P<0.05).MUC4及CerbB-2的蛋白表达均与食管鳞状细胞癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05).结论:MUC4及CerbB-2在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,2者联合检测可望成为食管鳞状细胞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.
作者:张岚;王亚莉;高冬玲;张云汉 刊期: 2007年第06期
目的:建立小鼠血浆中β-榄香烯的反相高效液相色谱法含量分析方法.方法:小鼠血浆中加入2倍体积的乙腈提取出β-榄香烯用于测定.色谱柱为Hypersil BDS C18(4.6 mm×200 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(体积比90∶10),检测波长为205 nm,流速为1 mL/min.结果:血浆中其他组分不影响β-榄香烯的检测,在0.4~24.0mg/L浓度范围内,线性关系良好(Y=160.73 X-24.12,r=0.999 6),相对回收率>(95.70±3.07)%.结论:本方法具有简单、快速、准确等特点,适用于测定血浆中β-榄香烯的浓度.
作者:王艳芝;郑甲信;史启君;王彩莲;邓意辉;毕殿洲 刊期: 2007年第06期
目的:评价乳癌患者99mTc-甲氧基异丁基异腈(MIBI)显像结果,并检测癌组织中P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)的表达.方法:42例乳腺癌患者静脉注射99mTc-MIBI 555~740 MBq(15~20 mCi),10 min及3 h后显像.计算早、晚期肿瘤部位平均放射性计数与对侧相应部位平均放射性计数比值(T/N)、清除率.术后标本采用免疫组织化学法检测P-gp、MRP的表达.结果:根据P-gp、MRP免疫组织化学结果将42例患者分为4组:A组P-gp阳性、MRP阳性,7例;B组P-gp阳性、MRP阴性,15例;C组P-gp阴性、MRP阳性,9例;D组P-gp阴性、MRP阴性,11例.早期T/N值,A组、B组与D组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05),其余各组间差异无统计学意义(P均>0.05).晚期T/N值,各组间差异无统计学意义(F=0.460,P=0.650).清除率,A组与B组、C组、D组之间,B组、C组与D组之间,差异均有统计学意义(P均<0.05),而B组与C组之间,差异无统计学意义(P>0.05).结论:乳癌99mTc-MIBI显像计算清除率可用于评估癌组织中P-gp、MRP的表达.
作者:韩星敏;刘保平;程兵;谢新立;阮翘;孙秉奇;林开文 刊期: 2007年第06期
低血糖症是血浆葡萄糖浓度低于正常时的临床状态,病因复杂,误诊率高[1].2002年2月至2006年6月,作者共收治低血糖症患者58例,分析报道如下.
作者:汪丽;李燕侠;张颖辉;马笑堃;秦贵军 刊期: 2007年第06期
目的:探讨一步制粒法制备美诺佳颗粒的工艺特点.方法:以糊精、蔗糖粉等作为一步制粒的底料,喷入中药流浸膏进行制粒,同时湿法制粒.结果:与传统的湿法制粒相比,一步制粒法制备的颗粒符合药典要求,颗粒致密均匀、流动性好、质量稳定;制备时间、物粒损耗均小于湿法,生产工艺简单,工作强度小.结论:一步制粒法制备的美诺佳颗粒符合GMP生产的要求,可在大生产中推广应用.
作者:郑甲信;王艳芝;李娟 刊期: 2007年第06期
随着人类生活环境改善,户外活动增多,生物中毒发病亦逐渐增加,其中蜂蜇伤常见.蜂螫伤以蜂毒致病,蜂螫伤后轻者只表现为局部红肿热痛,重者可有蜂毒吸收性发热、头晕、恶心、呕吐等全身症状,甚至出血、溶血、休克、昏迷、心、肝、肾功能衰竭,以致死亡[1].蜂蜇伤致多器官功能障碍(MODS)发病率低,病情危重,治疗困难.2005年1月至2006年12月,作者在常规治疗的基础上,早期应用连续性肾脏替代(CRRT)治疗蜂蜇伤致MODS患者12例,疗效满意,报道如下.
作者:张坤峰;邱红渝;刘芳;张杰;樊均明;干昌平 刊期: 2007年第06期
目的:观察内皮细胞凋亡对家兔缺血再灌注心肌无复流的影响.方法:24只家兔建立兔缺血再灌注模型后随机分成3组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和脂多糖(LPS)组(L组).S组开胸只穿线不结扎血管,麻醉维持120 min;IR组结扎30 min,松开再灌注120 min;L组开胸前耳缘静脉输注LPS液50 μg/kg,5 h后开胸按IR组操作进行.应用硫黄素染色评估缺血心肌再灌注后无复流面积;应用氯化三苯基氮四唑(TTC)染色观察心肌梗死范围;应用TUNEL法观察缺血心肌再灌注后无复流区内皮细胞凋亡发生的情况.结果:与IR组相比,L组冠状动脉内皮细胞凋亡指数升高,再灌注心肌无复流面积及心肌梗死范围增加(P均<0.05).与S组相比,IR组、L组内皮细胞凋亡指数均升高(P均<0.05).结论:冠状动脉血管内皮细胞凋亡可以促进无复流的发生.
作者:杨国杰;都瑾;李运伟;曾秋棠 刊期: 2007年第06期
甲状腺肿块是常见的内分泌疾病,在人群中发病率较高,约4%~7%,术前性质的明确有利于治疗方案的选择.术前诊断方法很多,如同位素检查、物理学检查(B超、CT等)均不能明确性质,细针抽吸细胞学检查(fine needle aspiration cytology,FNAC)是目前较常见的诊断方法,确诊率可达90%以上[1-3].作者对比分析了200例甲状腺肿块FNAC与组织学检查结果,报道如下.
作者:吴丽华;张曙;章建国 刊期: 2007年第06期
肾鳞状细胞癌国内外临床报道较少,发病率报道不一.有文献报道其约占肾原发性肿瘤的6.1%,误诊率高达70%[1].作者收治肾鳞状细胞癌1例,现报道如下.
作者:李臻;韩新巍 刊期: 2007年第06期
术中快速病理诊断对临床有重要的指导意义.而术中切片质量是诊断准确性的重要影响因素.目前术中快速病理制片技术主要有冰冻技术、快速石蜡技术以及组织印片细胞学技术.作者对一组标本同时运用上述3种方法制片,观察并比较这些技术的优缺点,报道如下.
作者:李巧新;李锋 刊期: 2007年第06期