徐发林；朱长连；程秀永；胡生海；耿琳琳；贾莉婷
目的:构建人端粒酶逆转录酶原核表达载体pGEX-4T-1-hTERT,并观察融合蛋白的表达.方法:用RT-PCR方法从人肝癌组织中扩增出带有EcoR I酶切位点的hTERT基因片段,与pGEM-T Easy连接,转化感受态大肠杆菌JMl09,经蓝-白筛选、PCR扩增等筛选阳性菌落,用EcoR I酶切获取目的片段,并与EcoR I酶切过的pGEX-4T-1质粒连接,重组子转化BL21感受态大肠杆菌,PCR扩增筛选出阳性菌落.基因测序并用Omega 2.0软件比较分析重组质粒中hTERT基因片段与GenBank中的已知序列的同源性.通过诱导pGEX-4T-1融合蛋白表达,用抗hTERT多抗对融合蛋白进行Western blot鉴定,薄层凝胶光密度扫描测定融合蛋白表达量.结果:PCR扩增等方法证实,人端粒酶逆转录酶原核表达载体pGEX-4T-1-hTERT构建成功,其中hTERT基因片段与GenBank中相应基因同源性为98.73%,氨基酸序列同源性为99.68%.Western blot检出GST-hTERT融合蛋白,其表达量达28.4%.结论:成功构建了pGEX-4T-1-hTERT原核重组质粒并获得高度表达.
作者：张巧；赵国强；刘红梅；宫亚欧；丁兰萍；薛乐勋；杨胜利 刊期： 2005年第03期
目的:探讨倍他乐克对慢性充血性心力衰竭(CHF)患者心率变异性(HRV)的影响.方法:70例CHF患者随机均分为2组,每组35例.2组患者性别、年龄及心功能差异无统计学意义.对照组给予常规抗心衰治疗,治疗组常规抗心衰治疗,在心衰初步控制后加服倍他乐克,从小剂量开始,缓慢增加剂量.治疗前和治疗3个月后分别测定2组患者的HRV;出院后随访半年,记录再住院率、病死率.结果:治疗3个月后,治疗组的HRV各指标SDNN、SDANN、rMSSD、PNN50均较治疗前及对照组明显提高(P＜0.05),总有效率97.1%(34/35),高于对照组的71.4%(25/35)(P＜0.05).随访半年,治疗组再住院率17.1%(6/35),低于对照组42.9%(15/35)(P＜0.05).结论:在常规治疗的基础上,加用倍他乐克治疗慢性CHF,可提高患者HRV,增强疗效,改善预后.
作者：高寒梅；郭龙枝；裴济民 刊期： 2005年第03期
目的:构建乙肝表面抗原(HBsAg)-人微小病毒B19VP2蛋白的原核高效表达系统.方法:用PCR扩增HBsAg基因及B19病毒VP2基因,分别与pGEM-T重组,构建出pGEM-T-HBs及pGEM-T-VP2并测序分析;测序证实序列正确后,将pGEM-T-HBs中的HBs基因克隆入pGEX-5X-1表达载体中,得到pGEX-5X-1-HBs;再将pGEM-T-VP2中的VP2基因克隆入pGEX-5X-1-HBs中,得到pGEX-5X-1-HBs-VP2后转化至BL21(DE3)宿主菌中,并以IPTG诱导表达融合蛋白,以Western-blot鉴定.结果:pGEX-5X-1-HBs-VP2可在大肠杆菌BL21中高效表达,表达产物经Western-blot鉴定具有HBsAg及B19 VP2的双重抗原性.结论:成功构建pGEX-5X-1-HBs-VP2原核表达载体,且其表达的重组蛋白具有良好的抗原性,为HBV和B19病毒重组多价疫苗的研究奠定了基础.
作者：赵国强；张世杰；刘全离；徐慧丹；陈宗德 刊期： 2005年第03期
1999年7月至2002年10月,作者在常规治疗的基础上,静脉应用丙种球蛋白(IVIG)治疗新生儿ABO溶血病46例,疗效满意,现报道如下.
作者：王玉梅；王秀芳；敬明辉 刊期： 2005年第03期
目的:观察骨髓基质细胞(MSCs)移植对大鼠缺血性脑损伤后神经功能恢复的作用并探讨其作用机制.方法:线拴法制作SD大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO)(n=72),随机均分为模型组,磷酸盐缓冲液(PBS)对照组和MSCs组,缺血2 h后再灌注,24 h后MSCs组将标记5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)的2×10 6个MSCs通过颈动脉移植入脑缺血大鼠体内,PBS组经颈动脉注入等体积的PBS液,模型组不做任何处理.另设假手术组(n=6).分别于术后2d,4 d,6 d,8 d采用神经缺损评分检测各组大鼠神经系统功能,用免疫组化方法检测脑内骨髓基质细胞的迁移及营养因子的分泌情况.结果:MSCs移植后,在脑内存活、迁徙、分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)等多种神经保护性因子,与其他组相比,MSCs组神经功能改善情况明显.结论:动脉移植MSCs治疗缺血性脑损伤具有较好的疗效,自分泌或旁分泌多种神经保护性营养因子可能是其主要机制之一.
作者：黄月；许予明；方树友；秦洁；宋波；马兴荣 刊期： 2005年第03期
目的:观察中药槲寄生不同溶剂提取物对血小板活化因子(PAF)的拮抗作用.方法:应用血小板活化因子(PAF)诱导血小板聚集,以槲寄生的石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物和水提取物分别给兔灌胃.观察灌胃前,灌胃后4 h和8 h各提取物对兔血小板聚集功能的影响.结果与结论:槲寄生对PAF诱导的血小板聚集有抑制作用.槲寄生水提取物及乙酸乙酯提取物均有拮抗PAF的作用.
作者：万鼎铭；徐从高；张茂宏 刊期： 2005年第03期
目的:了解动态增强MRI技术评价儿童肾积水肾脏形态及功能的价值.方法:单侧先天性肾盂输尿管连接部狭窄(PUJO)所致肾积水男性患儿7例,均经B超、静脉尿路造影(IVU)及病理证实.观察并记录动态增强MRI注射对比剂Gd-DTPA前和注射后1 min,3 min,5 min,10 min,15 min,30 min,45 min和60 min肾实质和集合系统相对信号强度(RSI).均以对侧正常肾脏作为对照.结果:平扫示积水肾脏皮、髓质分界不清,集合系统信号强度较低;动态扫描示积水肾实质和集合系统RSI逐渐增大,正常肾脏则逐渐减小.结论:动态增强MRI可对儿童肾积水肾脏的功能和形态进行联合评估.
作者：孟然；文建国；郑富增；程敬亮 刊期： 2005年第03期
目的:急性单核细胞白血病(M5)核型分析及其临床意义.方法:采用R显带法对56例M5患者进行核型分析.结果:M5患者中异常染色体的检出率为57.14%(32/56).异常核型组完全缓解率25.00%(8/32),明显低于正常核型组的58.33%(14/24)(P＜0.05).核型异常涉及多的是8号染色体(11/32),表现为±8、t(8;16)和t(8;21).结论:核型异常的M5患者预后不良.
作者：孟小莉 刊期： 2005年第03期
2001年9月至2003年9月,作者采用内镜下十二指肠乳头括约肌切开术(EST)治疗胆总管结石140例,取得了较好的效果,现报道如下.
作者：冯素萍；姜海波；王敬贞；马应杰 刊期： 2005年第03期
目的:探讨IL-1β对人眼球后成纤维细胞(RF)产生趋化因子RANTES的影响及其对外周血淋巴细胞(PBL)的趋化作用.方法:取Graves眼病(GO)患者和斜视患者眼球后结缔组织,胶原酶消化法获得RF,分别以0μg/L、0.04μg/L、0.40 μg/L、8.00 μg/L、10.00 μg/L的IL-1β在RPMI培养基中孵育24 h,RT-PCR和ELISA法分别检测RANTES mRNA表达和RF培养上清中RANTES的含量,并观察活性核因子κB抑制剂CAPE对RANTES表达量的影响.采用96微孔板Chemo TX System进行趋化实验检测RF产生的RANTES对PBL的趋化作用,并观察鼠抗人RANTES抗体对PBL游走能力的影响.结果:RF在体外几乎不能产生RANTES,经IL-1β刺激之后,RANTES在mRNA和蛋白水平表达都升高,GO患者RF产生RANTES的量明显高于正常对照RF((182.9±14.1)μg/L vs(77.9±3.8)μg/L,t=16.765,P＜0.01),且在一定范围内具有浓度依赖性.CAPE可明显抑制IL-1β对RF表达RANTES的诱导效应.经IL-1β刺激的RF培养上清可增强PBL的游走能力,此效应可被鼠抗人RANTES抗体所抑制.结论:IL-1β诱导RF表达的RANTES参与了GO眶后淋巴细胞浸润,且RANTES的表达可能与NF-κB的激活有关.
作者：秦贵军；罗方；赵艳艳；张素华；宋方州 刊期： 2005年第03期
1998年11月至2003年4月,作者应用镍钛记忆合金食管带膜内支架治疗食管狭窄24例,食管气管瘘6例,取得了满意的近期疗效,现报道如下.
作者：赵宏亮；李伟；范英杰；乔合坤 刊期： 2005年第03期
目的:比较荧光染料SYBR Green I及EB在定量PCR诊断中检测DNA的敏感性.方法:分别用琼脂糖凝胶电泳SYBR Green I染色及EB染色,检测26例21-三体综合征患者及20例正常人DNA PCR扩增产物,并进行光密度分析比较.结果:SYBR Green I染色于24个循环PCR产物带型清楚,可准确定量检测;EB染色则在28个循环才能进行定量分析.结论:荧光染料SYBR Green I染色较EB染色测量DNA敏感、快捷,在定量PCR技术中值得推广应用.
作者：张茜；谢湘芝；经承学 刊期： 2005年第03期
目的:考察不同提取方法对山茱萸总皂苷含量测定的影响.方法:分别采用无水乙醇回流提取、无水乙醇回流-正丁醇萃取、体积分数为70%乙醇回流提取、体积分数为70%乙醇回流提取-正丁醇萃取、水提取、超声波提取和超临界CO2提取方法,以人参皂苷Re作对照品,比色法测定提取液中山茱萸总皂苷的含量.结果及结论:不同提取方法对皂苷含量有较大的影响,超临界CO2提取技术无溶剂残留,操作温度低,对环境友好,提取效率高,皂苷含量是传统溶剂提取的1.5～2.0倍,有较好的应用前景.
作者：韩志慧；张景伟；赵玉丛；李新宝；刘国际 刊期： 2005年第03期
目的:研究褪黑素(Mel)对糖尿病大鼠氧化应激反应和非酶糖基化反应的影响.方法:用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型.正常大鼠、糖尿病大鼠及用褪黑素治疗8周的糖尿病大鼠各10只,应用荧光法测定心肌组织糖基化终末产物(AGEs)含量,应用比色法测定心肌组织及血清丙二醛(MDA)含量,乳胶免疫聚集抑制法测定糖化血红蛋白(HbA1 c)含量,计算心脏质量指数.结果:与正常大鼠比较,糖尿病大鼠各指标升高,而褪黑素组血清MDA以及心肌组织中AGEs、MDA含量和心脏质量指数均较糖尿病组下降.结论:褪黑素能抑制糖尿病大鼠心肌非酶糖基化和氧化应激反应.
作者：李青菊；姚蔚；李凤良；李鹏诺；张苏河 刊期： 2005年第03期
目的:探讨羟乙基呱嗪乙硫磺酸对人骨髓间充质干细胞(hMSC)纯化培养的影响.方法:采用全髓直接接种法分离培养13～18周胎龄水囊引产新鲜胎儿股骨骨髓,贴壁细胞达90%以上融合时消化传代.传代细胞分别接种于含100 ml/L胎牛血清的L-DMEM培养基(常规培养基)和加入15 mmol/L羟乙基呱嗪乙硫磺酸(Hepes)的常规培养基(改良培养基)中,观察细胞生长情况,用酸度计监测培养基pH值变化情况,流式细胞仪鉴定细胞纯度及CD抗原表达情况.并诱导改良培养基培养的hMSC向成骨细胞分化,酶细胞化学法和全自动生化仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,鉴定hMSC的成骨分化能力.结果:2种培养基培养的hMSC在细胞形态、生长特性、CD抗原表达等方面相似,但改良培养基由于pH值较恒定而能提高hMSC纯度及细胞增殖速度,且诱骨分化后可形成矿化结节,ALP染色阳性.结论:Hepes能提高全髓直接接种法培养的hMSC纯度及细胞增殖速度,简化骨髓细胞分离程序,减少细胞损伤及受污染机会,利于hMSC培养的推广应用.
作者：李敏霞；李相中；刘清芳 刊期： 2005年第03期
目的:考察利巴韦林在50 g/L葡萄糖注射液中分别与头孢唑啉钠、苯唑青霉素钠、乳糖酸红霉素、酒石酸柱晶白霉素、硫酸庆大霉素、硫酸阿米卡星、硫酸妥布霉素、维生素C、维生素B6、地塞米松等10种静脉注射药物配伍后的稳定性.方法:模拟临床用药操作,将50 g/L葡萄糖注射液与利巴韦林混合,再按临床常用量分别将10种静脉药物加入到混合液中,放置0 h,1 h,2 h后,观察各混合液的澄明度,测定pH和不溶性微粒数.结果:混合液外观澄明,pH因药物性质不同而有所变化;≥25 μm微粒数变化不大,个别配伍有少量发现;≥10 μm微粒增加明显.但均符合药典规定.结论:利巴韦林与该10种常用药物可以配伍使用.
作者：张孝祯；张尽廷；莫熄 刊期： 2005年第03期
目的:探讨高圣草素-7-O-β-D-葡萄糖甙(HG)体外对多形核白细胞分泌炎症介质的影响.方法:利用HG预处理人体主要的炎症细胞多形核白细胞(PMN),测定PAF刺激下PMN产生的炎症介质IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和白三烯B4(LTB4).结果:PAF可刺激PMN产生炎症介质TNF-α、LTB4;HG能完全抑制PAF所致的PMN产生TNF-α,HG能部分抑制PAF所致的PMN产生LTB4;PAF和HG均对PMN产生IL-1β、IL-6及IL-8无影响.结论:HG作为PAF拮抗剂,可抑制炎症介质产生而发挥抗炎作用.
作者：万鼎铭；徐从高；张茂宏 刊期： 2005年第03期
目的:了解郑州市流产或死胎孕妇人微小病毒B19的感染情况.方法:采用ELISA和PCR方法分别检测郑州市237例正常孕妇及29例不明原因流产或死胎孕妇血清中B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA表达情况.结果:29例流产或死胎孕妇B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA阳性率分别为51.7%(15/29)、6.9%(2/29)和13.8%(4/29),237例正常孕妇B19-IgG、B19-IgM和B19 DNA阳性率分别30.4%(72/237)、1.3%(3/237)和2.5%(6/237),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:郑州市孕妇中存在人微小病毒B19的感染,可能导致不明原因流产或死胎.
作者：靳静；冷弘；徐慧丹；刘全离；赵国强 刊期： 2005年第03期
由于临床牙冠过短或残根断端位于龈下而无法修复的牙齿,需采用牙冠延长术,以保证修复体有足够的固位及修复后牙周组织的健康[1].2001年8月至2004年8月,本科对30例32颗前牙行牙冠延长术,效果较好,报道如下.
作者：焦静 刊期： 2005年第03期
近年来术后辅助化疗越来越受到临床工作者的重视[1].1998年至2000年,作者采用全身化疗+腹腔灌注化疗治疗晚期胃癌术后患者50例,疗效满意,报道如下.
作者：刘俊叶；申学昌；刘义兴；冯献明 刊期： 2005年第03期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
