徐金标;潘俊杰;吕群丹;程科军
建立一种简便准确的蛇胆汁药材DNA分子鉴别方法.测试并优化胆汁药材基因组DNA提取方法,并针对蛇类的COⅠ,Cyt b,16S基因序列设计4对蛇类鉴别引物,根据特异性和扩增效率筛选佳引物.使用其中1对引物Cytb1,20种蛇胆汁DNA均能扩增得到约400 bp的条带,同样条件下7种其他动物胆汁DNA均无扩增条带.该方法特异性强,准确度高,重复性好,为加强控制蛇胆汁药材质量提供了有效方法.
作者:吴桂凡;张文娟;程显隆;谢培德;罗轶;石岩;魏锋;马双成 刊期: 2018年第10期
对红花石蒜Lycoris radiata鳞茎的生物碱类成分进行研究.采用硅胶、反向硅胶、凝胶及MCI-gel树脂等多种色谱技术,对红花石蒜的生物碱进行分离和纯化,并通过1 H-NMR,13 C-NMR和MS等波谱方法鉴定化合物的结构.从该植物鳞茎70%乙醇提取液的氯仿萃取部分中分离得到9个amaryllidaceae类生物碱,分别鉴定为(+)-N-methoxylcarbonyl-1,2-methylene-dioxyl-isocorydione(1),isocorydione(2),8-demethyl-dehydrocrebanine(3),(+)-3-hydroxy-anhydrolycorine N-oxide(4),vasconine(5),pancratinine D(6),yemenine A(7),11-O-acetylhaemanthamine(8)和5,6-dihydro-5-methyl-2-hydroxyphenanthridine(9).其中,化合物1为新化合物,化合物2~9为首次从该植物中分离得到.
作者:胡疆;刘雁;李强;张丽芳;景年华;史俊友;吕涛;殷斯;彭天凤;郝珊瑚 刊期: 2018年第10期
研究药物纳米晶自稳定pickering乳(NSSPE)的肠吸收性质.采用大鼠在体单向肠灌流模型,高效液相色谱法测定灌流液中葛根素的浓度,考察NSSPE在十二指肠、空肠、回肠和结肠中的吸收速率常数(Ka)和表观渗透系数(Papp),并与葛根素的原料药、纳米晶和普通乳进行比较.结果显示,葛根素NSSPE在各肠段Ka和Papp大小依次为:十二指肠>空肠>回肠>结肠.其中十二指肠显著大于空肠和回肠(P<0.05),极显著大于结肠(P<0.01),空肠和回肠间没有显著性差异.与其余3种制剂比较,葛根素NSSPE在十二指肠中的Ka和Papp显著大于原料药、纳米晶和普通乳(P<0.05);空肠和结肠中的Ka和Papp极显著大于原料药、纳米晶和普通乳(P<0.01);回肠中的Ka和Papp显著大于葛根素的原料药和普通乳(P<0.05),但与纳米晶无显著差别.由此证实,NSSPE能显著提高葛根素在小肠中的吸收.
作者:王帅;李清清;王帆;易涛;张继芬 刊期: 2018年第10期
蜡梅科包括蜡梅属、夏蜡梅属、美国蜡梅属和奇子树属4个属.蜡梅科植物广泛分布于中国、北美和澳大利亚,不仅具有极佳的观赏价值,也具有重要的药食价值.蜡梅科植物中含有丰富的挥发性成分,还有较多的生物碱、倍半萜和香豆素类成分,其中二聚吡咯并吲哚型、二聚哌啶并喹啉型生物碱,二聚、三聚香豆素类成分是其特征性成分.该文全面阐述蜡梅科植物中化学成分,并着重于阐述蜡梅科中非挥发性成分,包括生物碱类、萜类、黄酮类、香豆素类、甾体类等的化学结构及其药理活性,以期为蜡梅科植物的进一步研究和开发提供参考.
作者:徐金标;潘俊杰;吕群丹;程科军 刊期: 2018年第10期
槲皮素具有多种生物活性和药理作用,但因水溶性小、生物利用度低、化学稳定性差等缺点限制了其临床应用.为了克服槲皮素的这些缺点,在临床上更好地发挥疗效,近年来已有多种新型给药系统在研究开发中,其中纳米载药系统成为研究的热点.纳米载药系统包括纳米粒、纳米囊、纳米脂质体、纳米胶束、纳米混悬剂及纳米乳等,具有减小粒径、增大表面积、增加药物透膜能力、改善药物的体内循环和分布、提高药物靶向性等优点.该文将近几年国内外对槲皮素纳米载药系统在增加溶解度和溶出度、提高生物利用度、增加药物稳定性、延缓药物释放、增加皮肤渗透性、增强抗氧化能力以及提高治疗作用等方面的研究与应用进行归纳总结,以期为槲皮素制剂的深入研究提供参考.
作者:李韶静;廖应芬;杜青 刊期: 2018年第10期
对菊科植物苍耳Xanthium sibiricum Patr.的干燥成熟带总苞的果实(苍耳子)中的木脂素类成分进行研究.采用正相硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、MCI柱色谱及高效液相色谱等手段对苍耳子的70%乙醇提取物进行分离纯化,应用核磁共振及质谱技术鉴定了17个木脂素类化合物,分别为(-)-pinoresinol(1),balanophonin A(2),diospyrosin(3),dehydrodiconiferyl alcohol(4),2-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-(2-hydroxy-5-methoxyphenyl)-3-oxo-1-propanol(5),(-)-simulanol(6),(-)-7R,8S-dehydrodiconiferyl alcohol(7),chushizisin E(8),dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(9),7R,8S-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4-O-β-D-glucopyranoside(10),erythro-1,2-bis(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-1,3-propane-diol(11),leptolepisol D(12),8-O-4′neolignan 4-O-β-glucopyranoside(13),(-)-(2R)-1-O-β-D-吡喃葡萄糖基-2-﹛2-甲氧基-4-[1-(E)-丙烯-3-醇]苯氧基﹜-丙烷-3-醇(14),1-(4-hydroxy-3-methoxy)-phenyl-2-[4-(1,2,3-trihydroxypropyl)-2-methoxy]-phe-noxy-1,3-propandiol(15),threo-dihydroxy dehydrodiconiferyl alcohol(16)和(-)-(2R)-1-O-β-D-glucopyranosyl-2-﹛2-methoxy-4-[(E)-formylviny1]phenoxyl﹜propane-3-ol(17).其中化合物2~17为首次从苍耳属植物中分离得到,化合物1为首次从苍耳子中分离得到.
作者:姜海;杨柳;邢绪东;颜美玲;郭新月;苏晓琳;孙延平;杨炳友;王秋红;匡海学 刊期: 2018年第10期
罗马基金会已于2016年发布功能性胃肠病(FGIDs)的第4版研究共识,全面展示了该病的源流、定义、诊断分类、生理病理、机制、临床特征、影响因素、治疗评价、研究设计等新进展和观点,对全球相关研究具有较高的指导意义.中医药防治FGIDs具有较好的认知优势和实证疗效,但在临床评价的证据呈现和结果解释方面还极为薄弱,阻碍了中医药独特优势的内在阐释、表征展示和交流累积.该研究甄选分析罗马Ⅳ共识关于临床评价的认知背景和主要观点及相应启示,认为其理念观点趋向系统医学,强调精神心理和社会文化等主观因素对疾病的重要影响和在临床评价中的重要作用,且在理论模式、内外病因、传变流程等较多方面与中医学高度契合,故中医学应突破理念局限,勇于创新结合,协同推进相关研究的全球进程.然后,在中国知网进行规范检索,以国家级课题资助的59项FGIDs中医临床研究为例,汇总分析所用的临床评价方法和指标及相互关系,发现较多关注疾病症状和影响、症状/证候评分、患者报告结局等,但相互关系紊乱,结果解释模糊,本土特色量表较少.因此,建议未来研究回归并突出患者的主体作用和疾病的主观特点,规范结局评价的要素结构和管理方式,提升患者报告结局的价值地位,首选疾病特异性量表(优先推荐中华本土化量表),同时选择症状/体征测评工具、医生报告结局量表等,不推荐将目前常规采用的中医证候评价作为首要结局测评指标.但上述建议也存在一定局限,期待更多的相关研究探索建立本病统一的结局评价体系,提高本病的中医临床研究质量.
作者:侯政昆;胡文;刘凤斌;肖嘉欣;吕子畔 刊期: 2018年第10期
采用电转化法将携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的载体PBI-1300导入发根农杆菌C58 C1中,以农杆菌C58 C1工程菌为介导,叶盘法转化灯盏细辛无菌叶片,诱导并筛选出具有潮霉素抗性的毛状根,提取灯盏细辛毛状根基因组DNA,经GFP基因特异性引物扩增,得到与目的基因分子片段大小一致的DNA条带;双光子显微镜下观察可见明显的绿色荧光,上述结果表明GFP基因已成功地整合到灯盏细辛毛状根基因组中,并能够稳定表达.为进一步探究外源基因在灯盏细辛毛状根遗传转化体系中的高效表达奠定基础.
作者:于一凡;郭娟;苏平;马莹;赵瑜君;黄璐琦 刊期: 2018年第10期
该研究采用高糖高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的方法复制2型糖尿病(T2DM)大鼠模型.考察了给药后30 d各组动物胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及血清甘油三酯(TG)含量,并采用Western blot,RT-PCR法检测肝组织中固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)及其裂解激活蛋白(SCAP)表达情况,从而探讨中药黄连在改善T2DM机体胰岛素抵抗的同时,改善脂质代谢紊乱的分子机制.研究结果表明,2种黄连均能有效缓解机体胰岛素抵抗现象,降低血清TG含量,并下调肝组织SREBP-1c,SCAP的表达,其中,雅连组与模型组相比,相关蛋白及基因表达有显著性差异(P<0.05,P<0.01).该结果提示,尽管雅连改善机体胰岛素抵抗作用不及味连,但降脂药效却优于味连;抑制SCAP/SREBP通路蛋白表达可能是中药黄连减少糖尿病机体脂质沉积的途径之一.
作者:刘睿颖;张思远;任彬;何雨蔓;顾健;谭睿 刊期: 2018年第10期
为了阐明铁皮石斛花中花色成分的抗氧化活性及其稳定性,该实验选取10个铁皮石斛家系的花为材料,采用紫外-可见分光光度法测定铁皮石斛全花及唇瓣提取液中的花色苷、类胡萝卜素和类黄酮的含量,以及清除DPPH自由基(DPPH·),超氧阴离子自由基(·O-2)和羟基自由基(·OH)的能力,并分析Cu2+,Mg2+,Al3+,K+等金属离子和食品添加剂对铁皮石斛花中花色苷稳定性的影响.结果表明,铁皮石斛花中含有丰富的花色苷,类胡萝卜素和类黄酮等花色相关成分,这些成分在不同家系及不同部位中的分布存在一定差异,其中唇瓣中花色苷(1330.9μg·g-1)含量显著高于全花样本(696.3μg·g-1),且类胡萝卜素含量与花色苷含量呈显著正相关;铁皮石斛花提取液清除3种自由基的能力都与花色苷含量呈显著正相关,相关系数分别为0.384,0.415,0.455,说明花色苷类成分是铁皮石斛花中主要的抗氧化物质.金属离子Cu2+,Mg2+,Al3+,K+使铁皮石斛花提取液吸光度增大,具有增色作用;甜味剂葡萄糖对铁皮石斛花中花色苷有护色作用,而抗坏血酸对铁皮石斛花中花色苷有明显的破坏作用.
作者:张四杰;钱正;刘京晶;张新凤;斯金平 刊期: 2018年第10期
该文尝试建立麝香体外抗凝血酶活性效价测定方法,探索品种和产地对麝香抗凝血酶生物活性的影响,为麝香质量生物评价提供科学依据.采用凝血酶滴定法,考察麝香供试品溶液浓度、纤维蛋白原浓度、凝血酶浓度、凝血酶滴定时间间隔对麝香抗凝血酶活性测定的影响,并比较不同品种和产地麝香抗凝血酶活性的大小.结果显示,麝香供试品溶液浓度在一定范围内(0.01~0.02 g·mL-1),纤维蛋白原浓度为0.5%,凝血酶浓度为10 U·mL-1,滴定间隔时间为1 min,每次滴定2μL时,麝香供试品溶液浓度与凝血酶消耗体积呈良好的线性关系(r=0.9914).不同产地林麝麝香抗凝血酶活性效价为(105.0±10.4)U·g-1,马麝麝香抗凝血酶活性效价为(102.4±5.5)U·g-1,原麝(安徽)麝香抗凝血酶活性效价为(97.7±6.6)U·g-1,人工麝香抗凝血酶活性效价为(58.6±6.4)U·g-1.结果表明,抗凝血酶活性效价测定方法简便、快速、准确、可靠,可用于麝香质量生物评价;品种和产地对麝香抗凝血酶活性影响较大,在麝人工饲养时应注意品种和产地的选择;人工麝香和天然麝香的抗凝血酶活性差异较大,提示人工麝香处方配比可能有待进一步优化.
作者:罗云;谭婷;梁新丽;赵海平;廖正根;杨明 刊期: 2018年第10期
建立同时测定小儿豉翘清热颗粒中栀子苷、芍药苷、连翘酯苷A、黄芩苷、连翘苷、甘草酸、大黄酸、和厚朴酚、厚朴酚9种成分的含量测定方法.采用UPLC,Acquity UPLC HSS T3 C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);0.1%磷酸乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液为流动相(B),梯度洗脱;流速0.3 mL·min-1,柱温30℃,检测波长220 nm.被测定的9种成分色谱峰均有较好的分离度,各成分均有较好的线性范围和线性关系(r≥0.999);平均加样回收率在95.84% ~101.4%,RSD均小于3.0%.该方法快速、简便,测定结果准确可靠,适用于小儿豉翘清热颗粒的质量控制.
作者:田刚;杨学芳;李超;吴菲;刘雪;封亮;贾晓斌 刊期: 2018年第10期
以党参提取工艺设计空间计算为例,比较了多指标叠加法和达标概率法等2种设计空间算法.采用模拟实验测定误差的方法计算达标概率,并且研究了模拟次数、计算步长和可接受达标概率阈值等参数对所得设计空间的影响.对于党参提取工艺的研究数据,模拟1万次,计算步长0.02可以获得满意结果.总体来看,多指标叠加法容易理解,多种商业软件具备此功能,但是未能说明在设计空间内操作时,工艺评价指标能达标的可靠程度.模拟实验误差的达标概率法计算相对复杂,但能通过可接受达标概率阈值体现设计空间保证工艺评价指标达标的可靠程度,且设计空间边缘不存在概率突变,因此更推荐达标概率法.
作者:邵静媛;瞿海斌;龚行楚 刊期: 2018年第10期
经过30年的发展,中药色谱指纹图谱技术从学术探讨深入中药研发并应用到实践,推动了中药产业的技术革新与中药质量标准的进步.中药色谱指纹图谱相似度评价方法在这个过程中起到了决定性的作用.结合中药色谱指纹图谱30年发表文献的数量变化及研究趋势,把中药色谱指纹图谱相似度评价划分为3个阶段:即直观比较阶段(1988-1999年)、相似度评价起步阶段(2000-2009年)和相似度评价发展完善阶段(2010-2017年).该文总结了中药色谱指纹图谱相似度评价方法30年研究进展并对未来发展方向进行了展望,以期推动中药色谱指纹图谱相似度评价方法走向成熟阶段.
作者:邹纯才;鄢海燕 刊期: 2018年第10期
通过喷雾干燥技术制备甘露醇-HPMC共处理辅料,并对此共处理辅料进行放大生产研究,比较放大前后共处理辅料粉体学和片剂性质的一致性,并以栀子和白芍等5种中药提取物为模型药物,考察共处理辅料在中药粉末直接压片中应用的可行性.结果表明,共处理辅料经过放大生产后,其关键性质几乎没有变化(如压缩成形性、崩解时间、润滑敏感性)或进一步提高(如流动性与收率).在中药粉体直接压片中,此共处理辅料表现出比市售喷雾干燥甘露醇更好的可压性和更大的载药量.综上所述,甘露醇-HPMC共处理辅料具有优良的物理机械性质,有望成为一种新型的粉末直压共处理辅料.
作者:李金枝;阮洪生;林晓 刊期: 2018年第10期
为了开发虎耳草属基因组SSR分子标记,该研究基于Illumina MiSeq高通量测序平台对虎耳草属植物混合样本进行基因组测序,利用MISA程序识别和定位SSR位点,利用Primer 3软件对搜索到的SSR位点两端设计引物.随机合成120对引物进行多态性引物筛选,再从多态性引物中选取易扩增、多态性高的引物,对25种虎耳草属植物基因组进行扩增,检测引物的通用性,并进行UPGMA聚类分析.结果显示,在测序拼接后获得的1881979条序列中,共搜索到587256个SSR.针对2~6个核苷酸为重复基元的SSR位点设计引物,经过逐级筛选,获得17对多态性高、容易扩增的引物,在25种虎耳草属样品中共扩增出2687个多态性条带,每对引物扩增的多态性条带平均为158个,通用率为88.0% ~100%.利用开发的SSR标记对虎耳草属25种植物进行聚类分析,物种间关系与根据传统形态学特征分类的结果存在差异.本研究为虎耳草属植物分类学关系提供了分子证据,所开发的SSR引物具有较高的种间通用性和多态性,为研究该属植物的遗传多样性奠定了基础.
作者:杨雯;蒋伟;钟国跃;刘娜娜;陈谦;王晓云 刊期: 2018年第10期
根腐病是西洋参栽培过程中常见的一种病害,分析根际土壤真菌群落与西洋参根腐病间关系,可为解决根腐病问题提供一定线索.该研究利用Illumina MiSeq测序技术,分析了空白地(C组)、健康参根际土壤(N组)和根腐病参根际土壤(R组)样品中真菌群落结构多样性及组成变化.通过测序,共获得高质量序列505968条,样品稀释曲线表明测序深度充足,取样合理.真菌群落主要属于Ascomycota(54.9%),Basidiomycota(5.6%)等9个门,其优势菌门为Ascomycota;MonograPhella(9.3%),Archaeorhizomyces(3.9%),Mortierella(2.9%)等115个属,其优势菌属为MonograPhella.在属水平上,与C和N组相比,R组中MonograPhella和Mortierella丰度均显著增加.α多样性指数表明,与C组相比,N和R组中真菌群落多样性指数降低,真菌种类减少,R组达到小.β 多样性指数表明,各样品中真菌群落结构均存在明显差异.聚类热图显示各样品中菌属差异较大,R组中MonograPhella和Mortierella比例显著高于C和N组,Trichoderma,Penicillium,CadoPhora在R组中所占比例较小;Phoma和Gibberella在R组中较N组中所占比例显著增加.该研究通过分析土壤根际真菌多样性及群落构成变化,表明真菌多样性指数显著降低和群落结构失衡可能导致西洋参根腐病的发生,这为防治西洋参根腐病发生提供了一定的理论依据.
作者:余妙;蒋景龙;任绪明;李丽;焦成瑾;杨玲娟;徐皓 刊期: 2018年第10期
24-乙酰泽泻醇A作为泽泻的主要组成部分有抗动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)作用且AS与血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖密切相关,故该研究通过活体取材及培养大鼠腹主动脉VSMCs,50 mg·L-1 ox-LDL诱导VSMCs建立细胞增殖模型,探讨24-乙酰泽泻醇A对ox-LDL诱导大鼠VSMCs增殖影响的作用机制.不同浓度24-乙酰泽泻醇A(5,10,20 mg·L-1)干预细胞增殖模型12,24,48 h,MTT检测VSMCs增殖情况,Western blot法检测VSMCs PCNA,cy-clinD1,cyclinE,p21,p27蛋白表达的变化,RT-PCR检测VSMCs PCNA,p21和p27 mRNA表达情况.MTT结果显示ox-LDL诱导VSMCs的增殖(P<0.05);ox-LDL促进VSMCs PCNA,cyclinD1,cyclinE蛋白表达的增加(P<0.05),抑制p21,p27蛋白及mRNA的表达(P<0.05);24-乙酰泽泻醇A可显著抑制ox-LDL诱导VSMCs的增殖(P<0.05)及PCNA,cyclinD1,cyclinE蛋白表达,同时提高p21,p27蛋白及mRNA的表达量(P<0.05),该现象随着24-乙酰泽泻醇A浓度的增加作用越明显.24-乙酰泽泻醇A可抑制ox-LDL诱导大鼠VSMCs的增殖,其机制可能通过抑制VSMCs细胞周期蛋白(cyclinD1,cyclinE,p21,p27蛋白等)表达有关.
作者:魏伟;周晓茂;汪玉成;林志诚;薛偕华 刊期: 2018年第10期
免疫性肝病是临床上难治性疾病,目前没有特效性药物,因此,研发新的有效干预药物,对防治免疫性肝病有重要的临床价值.为探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对免疫性肝损伤的保护作用,该研究采用不同质量浓度(27,54,108 mg·kg-1)Art灌胃小鼠连续7 d,然后尾静脉注射伴刀豆球蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导小鼠肝损伤模型.于造模后8 h采血液和肝组织进行血清转氨酶(ALT,AST)、组织病变、炎性细胞因子以及NF-κB关键蛋白表达水平的检测.结果表明,与模型组相比,Art高浓度组显著降低了模型小鼠的肝指数、ALT和AST水平(P<0.01),组织病变也明显减轻,同时降低了促炎细胞因子TNF-α,IFN-γ,IL-6,IL-17的水平而增加了炎性抑制因子IL-10的表达(P<0.05),并呈现明显的剂量-效应关系.Western blot法检测结果显示108 mg·kg-1 Art可显著抑制NF-κB关键蛋白p-p65和p-IκBα的表达(P<0.01).NF-κB特异阻断剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)也可显著抑制p-p65和p-IκBα表达并减轻肝损伤.以上结果说明Art主要通过抑制NF-κB信号通路而对ConA诱导的小鼠免疫性肝损伤发挥保护作用.该研究为青蒿琥酯用于自身免疫性肝损伤的防治提供了参考.
作者:曹婕;赵昕;刘明江;郑卉;李金贵 刊期: 2018年第10期
该文研究冬虫夏草人工繁育品对人白血病K562细胞增殖和凋亡的影响并探讨其作用机制.将K562细胞进行常规培养后,采用MTT法检测冬虫夏草人工繁育品对K562细胞存活率的影响;DAPI染核法观察冬虫夏草人工繁育品作用K562细胞后细胞核的形态变化;吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染法观察其对K562细胞凋亡的影响;JC-1染色法检测K562细胞内线粒体膜电位的变化;流式细胞术检测K562细胞周期的变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测对K562细胞中Bax,Bcl-2,caspase 3,caspase 8,cyclin D1,CDK2和CDK4蛋白表达的影响.结果显示,冬虫夏草人工繁育品(0.345~5.524 g·L-1)能够剂量依赖性的抑制K562细胞的增殖(P<0.05),显著诱导K562细胞凋亡,明显降低K562细胞的线粒体膜电位,选择性的将K562细胞阻滞在G1/S期,并且能够显著上调Bax的蛋白表达,同时明显下调Bcl-2,cyclin D1,CDK2,CDK4,caspase 3,caspase 8蛋白的表达.综上,冬虫夏草人工繁育品能够显著抑制人白血病K562细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与诱导细胞周期阻滞并调节Bcl-2/Bax的比值、激活线粒体凋亡通路相关.
作者:白雪莲;杨淑贤;单宇;李文佳;李静;肖瑛;胡雪峰;曹丽 刊期: 2018年第10期