学术投稿

基于1H-NMR的当归四逆汤抗凝血作用的代谢组学研究

郑华;秦霞;宋慧;唐超玲;阮俊翔;张洪也;陆世银;梁永红;苏志恒

关键词:当归四逆汤, 抗凝, 1H-NMR, 代谢组学, 代谢标志物
摘要:采用1 H-NMR代谢组学技术研究当归四逆汤抗凝血作用机制以及对小鼠血浆内源性代谢产物的影响.当归四逆汤灌胃给药1周后,观察当归四逆汤对小鼠凝血酶时间的影响,并采用1 H-NMR技术分析小鼠血浆代谢指纹图谱,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA),研究给药组与正常组之间的代谢物组差异,筛选与抗凝血作用相关的潜在生物标志物.连续当归四逆汤灌胃给药1周后,能显著延长小鼠凝血酶时间(P<0.05).代谢组学结果显示空白组和复方组能明显区分,与空白组比较,复方组内源性代谢产物肉碱、苯丙氨酸和异丁酸显著上调(P<0.01),赖氨酸、组氨酸和胆固醇显著下调(P<0.05).肉碱、苯丙氨酸、组氨酸和胆固醇为当归四逆汤抗凝过程中潜在代谢标志物,当归四逆汤可能通过调节脂质代谢、能量代谢和氨基酸代谢影响血小板聚集功能和组织因子、纤维蛋白酶的表达来发挥抗凝作用.
中国中药杂志相关文献
  • 补肾活血方案治疗排卵障碍性不孕不育的多中心随机双盲对照临床研究

    目的:采用多中心随机双模双模拟阳性药物对照设计,验证补肾活血方案治疗卵巢功能障碍性(排卵障碍性)不孕不育的贡献度,为临床治疗提供科学依据.方法:严格按照诊断标准、纳入标准和排除标准筛选病例,6种排卵障碍性不孕不育患者入组349例,随机分为试验组177例(补肾促卵冲剂组)和对照组172例(克罗米芬组),观察2组患者治疗前后的排卵率、妊娠率、总有效率、子宫内膜、优势卵泡及血清性激素水平的变化.结果:排卵率试验组为69.34%,对照组71.01%;妊娠率试验组为41.35%,对照组为29.23%;总有效率试验组为91.73%,对照组为80.77%.治疗后子宫内膜厚度有显著性差异(P<0.05).试验组血清性激素PRL、E2治疗前后有显著性差异(P<0.05).未发现试验药物不良反应,安全性指标无异常.结论:6种疾病采用补肾活血中药治疗前后,试验组与对照组相比,妊娠率有显著性差异(P<0.05),排卵率无显著性差异.试验组总有效率明显高于对照组,有显著性差异(P<0.05).2组均可以促进卵泡发育及排出,试验组促进子宫内膜的生长,提高子宫内膜胚胎容受性,调节PRL,E2,优于对照组.

    作者:马堃;刘雁峰;何军琴;李敏;单婧 刊期: 2015年第20期

  • 基于DNA条形码的桑螵蛸基原动物鉴定研究

    市场调查与文献报道发现,螳螂目昆虫产的卵鞘大多作为桑螵蛸入药,而药典仅收载了3种螳螂的卵鞘,非药典品种的卵鞘入药由于未加评估可能影响临床用药安全,因此亟需研究其原昆虫,由于桑螵蛸是螳螂的卵鞘,形态学等方法无法直接判断其基原,基于DNA条形码技术在动物分类研究中广泛应用,在中药鉴定中也愈发重要.研究首次利用DNA条形码技术,获得了市售桑螵蛸的COI序列,分析了其遗传距离,并构建系统发育树,准确区分了桑螵蛸的种类和原昆虫,证实了大刀螂Tenodera sinensis和巨斧螳螂Hierodula patellifera分别为团螵蛸和黑螵蛸的基原昆虫,小刀螂Statilia maculate和薄翅螳螂Mantis religiosa均为长螵蛸的原昆虫.

    作者:王茜;侯飞侠;王艺璇;王玉贤;李军德;袁媛;彭成;国锦琳 刊期: 2015年第20期

  • 大黄素抗肿瘤作用研究进展

    大黄素是大黄的主要有效成分之一,具有消炎、抑菌、抗病毒等作用,近年来研究发现其具明显抗肿瘤作用且毒副作用较低而备受关注.该文根据近5年来对大黄素抗肿瘤作用的研究,主要从抑制肿瘤生长、抑制迁移侵袭、联合用药增强疗效、辅佐化疗增敏减毒4个方面论述,以期为进一步研究提供参考.

    作者:林玩福;汪晨;凌昌全 刊期: 2015年第20期

  • 白头翁皂苷对佐剂性关节炎大鼠FZD8表达的影响

    研究中药白头翁有效成分白头翁皂苷(pulchinenoside,PULC)对佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)大鼠Frizzled(FZD)表达的影响.采用足跖注射完全弗氏佐剂制备AA大鼠,原代培养AA大鼠滑膜成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like syno-viocytes,FLS),Real-time qPCR检测PULC灌胃治疗对AA大鼠FLS FZD8表达的影响,MTT,ELISA检测FZD8敲除对FLS增殖和IL-1,IL-6,IL-8表达的影响,Real-time qPCR检测miR-375在FZD8异常表达中的作用.检测发现经PULC灌胃治疗后,AA大鼠FLS中FZD8表达明显降低,FZD8敲除后FLS增殖明显减弱,IL-1,IL-6,IL-8表达明显减少,PULC灌胃治疗后miR-375表达明显升高,上调表达的miR-375能够抑制FZD8的表达.PULC可能通过上调miR-375表达抑制FZD8的表达.

    作者:缪成贵;周国梁;秦梅颂;陈建中;李成凤;何华奇;张兵 刊期: 2015年第20期

  • 银杏叶对照提取物中7种黄酮醇苷类化合物的定量研究

    从银杏叶提取物中提取分离得到6种黄酮醇苷单体化合物,并对其进行标化,在4种分析条件下,用标定后的单体化合物,对2批银杏叶对照提取物中该6个化合物及芦丁进行标定.芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、山柰酚-3-O-鼠李糖-2-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-鼠李糖-2-O-(6-O-对羟基反式桂皮酰)-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-鼠李糖-2-O-(6-O-对羟基反式桂皮酰)-葡萄糖苷含量测定结果的RSD为1.1%~4.6%,槲皮素-3-O-葡萄糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷的测定结果RSD大于5%.结果表明,用银杏叶对照提取物替代相应的对照品,可用于同时测定银杏叶制品中芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、山柰酚-3-O-鼠李糖-2-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-鼠李糖-2-O-(6-O-对羟基反式桂皮酰)-葡萄糖苷、山柰酚-3-O-鼠李糖-2-O-(6-O-对羟基反式桂皮酰)-葡萄糖苷5个黄酮醇苷成分的含量.因此使用对照提取物代替单体对照品测定银杏叶制品具有可行性.

    作者:王京辉;陈晶;王萌萌;傅欣彤;陈有根;郭洪祝 刊期: 2015年第20期

  • 反相离子对色谱法测定三七中三七素含量

    建立反相离子对色谱法测定三七中三七素含量.通过超声提取样品中的三七素,并采用四丁基氢氧化铵离子对试剂与反相高效液相色谱法结合直接测定三七素含量.确定超声提取优化条件为物液比为1:20,连续超声提取2次,每次15min,3500r·min-1,离心15 min.三七不同生长年限、产地、部位、以及同属植株中三七素含量均有差异:一年生三七茎叶三七素含量高;红河州样品三七素含量高于文山州;真空冷冻干燥方式优于其他加工方式;三七高于其他同属植株.该检测方法操作简便,分离度好,稳定性好,适用于三七素含量直接测定,为三七中三七素的质量标准控制提供参考.

    作者:李琳;王承潇;曲媛;崔秀明 刊期: 2015年第20期

  • 基于1H-NMR的当归四逆汤抗凝血作用的代谢组学研究

    采用1 H-NMR代谢组学技术研究当归四逆汤抗凝血作用机制以及对小鼠血浆内源性代谢产物的影响.当归四逆汤灌胃给药1周后,观察当归四逆汤对小鼠凝血酶时间的影响,并采用1 H-NMR技术分析小鼠血浆代谢指纹图谱,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares-discrimination analysis,OPLS-DA),研究给药组与正常组之间的代谢物组差异,筛选与抗凝血作用相关的潜在生物标志物.连续当归四逆汤灌胃给药1周后,能显著延长小鼠凝血酶时间(P<0.05).代谢组学结果显示空白组和复方组能明显区分,与空白组比较,复方组内源性代谢产物肉碱、苯丙氨酸和异丁酸显著上调(P<0.01),赖氨酸、组氨酸和胆固醇显著下调(P<0.05).肉碱、苯丙氨酸、组氨酸和胆固醇为当归四逆汤抗凝过程中潜在代谢标志物,当归四逆汤可能通过调节脂质代谢、能量代谢和氨基酸代谢影响血小板聚集功能和组织因子、纤维蛋白酶的表达来发挥抗凝作用.

    作者:郑华;秦霞;宋慧;唐超玲;阮俊翔;张洪也;陆世银;梁永红;苏志恒 刊期: 2015年第20期

  • 长叶缬草化学成分的研究

    对长叶缬草的化学成分进行研究,通过硅胶、Sephadex LH-20柱色谱,制备TLC和反相制备HPLC分离技术,从长叶缬草全草的乙醇提取物中分离得到13个化合物,经MS和NMR等波谱技术鉴定了它们的结构,其中包括11个黄酮类化合物:6,8-二甲基芹菜素(1),6-甲基芹菜素(2),5-羟基-7,4'-二甲氧基黄酮(3),芫花素(4),金合欢素(5),芹菜素(6),槲皮素(7),麦黄酮(8),杜鹃素(9),异野樱素(10),5,3 ',4'-三羟基-7-甲氧基二氢黄酮(11);2个单萜类化合物:(-)-bomyl ferulate(12)和(-)-bomylcaffeate(13).所有化合物均为首次从该植物分离得到,化合物1,9~13为首次该从属植物中分离得到.

    作者:柴士伟;翟永松;王满元 刊期: 2015年第20期

  • AM真菌对滇重楼光合参数及生理指标的影响

    通过室温盆栽接种试验与室内分析相结合的方法,观察灭菌土壤条件下接种28种丛枝菌根(AM)真菌对滇重楼光合参数和生理生化指标的影响.结果表明,滇重楼与AM真菌形成了良好的共生关系.AM真菌诱导处理后,不同AM真菌对滇重楼叶片的光合参数和生理生化指标的影响有所差异,AM真菌的施用能够提高滇重楼叶肉细胞的光合作用强度,提高滇重楼叶片可溶性蛋白和可溶性糖含量及保护酶活性,增强了滇重楼抗不利环境的能力,促进了滇重楼的生长,而滇重楼与AM真菌之间存在一定的相互选择性.从综合接种效应来看,瑚状盾巨囊霉Racocetra coralloidea、美丽盾巨孢囊霉Scutellospora cal-ospora、近明球囊霉Claroideoglomus claroideum、透明盾巨孢囊霉S.pellucida和明球囊霉Rhizophagus clarus是适宜滇重楼大田栽培时推广应用的优良备选菌株.

    作者:韦正鑫;郭冬琴;李海峰;丁博;张杰;周浓;于杰 刊期: 2015年第20期

  • 不同干燥方法对光慈姑加工性能和品质影响研究

    为探索不同干燥方法对光慈姑加工性能和品质的影响,为光慈姑规范化加工方法提供依据,研究了普通晾晒、蒸制、水煮、恒温烘干(40,50,60℃)等8种不同干燥方法对光慈姑外观性状、折干率、硬度、复水率及水分、灰分、浸出物和多糖含量等指标的影响.结果表明,普通晾晒及40℃恒温干燥的光慈姑复水率佳,但所需时间长、折干率小、硬度大,色泽差,且组织结构发生了明显的变形和皱缩;60 ℃恒温干燥的光慈姑干燥时间短、含水量低、多糖含量高,但其他各项指标均较差.烫制处理(蒸制和水煮)后的光慈姑虽干燥时间缩短、外观品质较佳,但浸出物及多糖含量降低.50 ℃恒温干燥光慈姑外观品质与市售光慈姑较接近,硬度小,折干率大,复水率较高,浸出物及多糖含量较高,且水分、灰分含量适中.综合考虑,建议选择50℃恒温干燥的方法,与传统方法相比,缩短了干燥时间,还能保证药材质量.

    作者:杨小花;郭巧生;朱再标;陈军;缪媛媛;杨颖;孙媛 刊期: 2015年第20期

  • 效应面法优化芪白平肺颗粒中人参黄芪浸膏真空带式干燥工艺

    该研究确定芪白平肺颗粒中人参黄芪浸膏真空带式干燥的优工艺条件.通过单因素考察试验,并采用Box-Be-hnken设计结合效应面法,以干燥时间、系统加热温度、浸膏相对密度为自变量,干燥前后人参皂苷Rg1,Re,Rb1与黄芪甲苷转移率为因变量,优化人参黄芪浸膏真空带式干燥工艺.得到芪白平肺颗粒中人参黄芪浸膏真空带式干燥的佳工艺条件为干燥时间112 min,加热系统温度87℃,浸膏相对密度1.30 g· mL-1,该条件下人参黄芪浸膏干燥产物中人参皂苷(Rg1+Re)、人参皂苷Rb1与黄芪甲苷转移率分别为88.01%,87.31%,84.34%.表明采用真空带式干燥工艺干燥人参黄芪浸膏,干燥速率高、产品质量好,工艺合理、可行,为大生产提供数据支持.

    作者:李雪峰;徐振秋;闫明;商晶;张艳军;米慧娟;萧伟 刊期: 2015年第20期

  • 人工诱导海南龙血树所产血竭的抗菌活性成分研究

    为了研究人工诱导海南龙血树Dracaena cambodiana所产血竭的化学成分,该研究采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱对其进行分离纯化,并运用波谱方法对所分离的化合物进行结构鉴定.研究从人工诱导海南龙血树所产血竭的乙醇提取物中共分离鉴定出10个化合物,经波谱解析鉴定为3,4-二羟基烯丙基苯(1)、3',4 ',5'-三甲氧基苯丙烯醇(2)、松脂醇(3)、(2R)-7,4'-二羟基-8-甲基黄烷(4)、(2R)-7,4'-二羟基-5-甲氧基-8-甲基黄烷(5)、(2S)-7,3'-二羟基4'-甲氧基-8-甲基黄烷(6)、(2S)-4 ',7-二羟基-6,8-二甲基黄烷(7)、4,2',4'-三羟基查耳酮(8)、4,4'-二羟基-2-甲氧基二氢查耳酮(9)和Cambodianin E(10).抗菌活性测试结果表明化合物1,4,10对香蕉枯萎菌Fusarium oxysporum f.sp.cuben,西瓜枯萎菌F.oxysporum f.sp.niveum,棉花枯萎菌F.oxysporum f.sp.vasinfectum和烟草青枯菌Ralstonia solanacearum有抑制作用.

    作者:蒋和梅;王辉;王军;戴好富;骆焱平;梅文莉 刊期: 2015年第20期

  • 斜茎獐牙菜的化学成分研究

    对龙胆科Gentianaceae獐牙菜属植物斜茎獐牙菜Swertia patens90%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部分的化学成分进行研究.采用各种柱色谱方法对该部分进行分离纯化,通过1H-NMR,13 C-NMR,MS等波谱数据分析进行结构鉴定.从中分离鉴定了18个化合物,包括10个裂环烯醚萜及其苷、3个(口山)酮及其苷、1个少见的内酯烯胺酮和4个其他类化合物.分别为3,4-dihydro-1H,6H,8H-naptho[1,2-c:4,5-c',d'] dipyrano-1,8-dione(1)、angelone(2)、gentiogenal(3)、erythricin(4)、红白金花内酯(erythrocentaurin,5)、秦艽碱甲(gentianine,6)、贵州獐牙菜苷B(swertiakoside B,7)、獐牙菜苦苷(swertiamarin,8)、2'-O-actyl-swertiamarin(9)、amarogentin (10)、1,3,5-三羟基(口山)酮(1,3,5-trihydroxyxanthone,11)、1,3-二羟基-5-甲氧基山酮(1,3-dihydroxy-5-methoxyxanthone,12)、1-羟基-2,3,5-三甲氧基咄酮(1-hydroxy-2,3,5-trimethoxyxanthone,13)、gentiocrucine(14)、3-羟基苯甲酮(3-hydroxyphenylketone,15)、4-羟基反式桂皮酸二十六烷酯(n-hexacosyl ester 4-hydroxy-trans-cinnamate,16)、4-羟基顺式桂皮酸二十六烷酯(n-hexacosyl ester 4-hydroxy-cis-cinnamate,17)、cholest-4-en-3-one(18).其中化合物1~7,9~18为首次从斜茎獐牙菜中分离得到.

    作者:何康;曹团武;王洪玲;耿长安;张雪梅;陈纪军 刊期: 2015年第20期

  • 大鼠胃寒证模型造模方法探索

    将大鼠分为空白组、模型组、反左金丸组后,模型组及反左金丸组以冰水灌胃3周,之后予冰水灌胃联合凉水泡浴2周,诱导大鼠胃寒模型形成,反左金丸组每日予反左金丸汤剂灌胃,持续5周.第6周,每组抽取12只大鼠麻醉处死后取胃,部分胃体固定后石蜡包埋并切片,进行组织学检查,部分胃组织进行酶联免疫吸附实验,观察IL-2的浓度.剩余存活大鼠用于观察模型持续时间.造模后,大鼠出现明显胃炎病变,大鼠体征和药物反证结果均符合胃寒模型指标,病理检测等结果证明以冰水灌胃结合凉水泡浴的方法可建立大鼠胃寒模型.

    作者:杨万斌;文彬;张凌杭;刘红 刊期: 2015年第20期

  • 玫瑰花中苯丙素和苯乙醇类化合物研究

    对产自陕西的玫瑰花的化学成分进行了研究,运用硅胶、凝胶、MCI-GEL树脂及PR-HPLC等多种色谱方法相结合从氯仿-甲醇洗脱部分分离得到8个化合物,包括5个苯丙素类化合物(1~5)和3个苯乙醇类化合物(6~8).化合物1为新化合物,且对NB4,SH-SY5Y,PC3,A549和MCF7细胞株均表现出一定的细胞毒活性,其IC50分别为8.2,6.2,4.3,2.8,9.6μmol·L-1.

    作者:王月德;周堃;董伟;刘贵有;李丽梅;娄洁;胡秋芬;叶艳青;周敏 刊期: 2015年第20期

  • 利用UPLC-TQ-MS比较蟾酥鲜品和蟾酥商品化学成分

    蟾酥为蟾蜍科动物中华大蟾蜍Bufo bufo gargarizans或黑框蟾蜍B.melanostictus等近缘种的耳后腺分泌的白色浆汁加工而成,近年来多用于治疗各种癌症,有一定的攻毒抗癌、消肿止痛作用.研究表明其主要抗肿瘤成分为蟾蜍二烯内酯类.蟾蜍二烯内酯有游离型和结合型2种结构.该文通过超高效液相色谱质谱联用技术(UPLC-TQ-MS)对中华大蟾蜍的蟾酥鲜品中蟾蜍二烯酸内酯类成分进行研究.采用UPLC-TQ-MS的正离子多反应监测(MRM)模式.色谱条件:ACQUITY UPLCBEH C18色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.7 μm),柱温35.0℃,流速0.4 mL·min-1,流动相0.1%甲酸超纯水溶液-乙腈溶液.终结合相关文献推导出蟾酥鲜品的37种蟾蜍二烯内酯成分,其中26种为游离型结构,11种为结合型结构.与蟾酥商品比较,二者之间有18种化合物存在显著差异,研究发现蟾酥的部分化学成分经加工处理后有很大的变化,7种结合型蟾蜍二烯内酯大量减少,11种游离型蟾蜍二烯酸内酯含量也随之明显改变,可能是在加工处理过程中蟾蜍二烯酸内酯部分结合型转化成了游离型.

    作者:王子月;王洪兰;周婧;马宏跃;龚艳;闫文丽;钱大玮 刊期: 2015年第20期

  • 定坤丹临床应用的系统评价

    定坤丹是妇科经典成药的代表者,具有补益肝肾,益气养血,调经舒郁,活血止痛.用于治疗肝肾不足、气血两虚、气滞血瘀引起的月经不调、经行腹痛、崩漏下血、赤白带下、血晕血脱、不孕、产后诸虚以及骨蒸潮热等妇科常见病.近年来关于定坤丹的新用途屡见报道,其在临床应用价值值得进一步挖掘.该文就定坤丹建国以来的临床应用及研究进展进行简要论述,并对其随机对照试验进行概括.

    作者:陈燕霞;马堃 刊期: 2015年第20期

  • 中西医治疗围绝经期综合征策略的探讨

    围绝经期综合征是指妇女绝经前后出现性激素波动或减少所致的一系列躯体及精神心理症状,是妇女常见病症之一.随着世界人口老龄化进程的加快,围绝经期综合征引起了全世界的关注.现代医学在基础理论与临床研究方面发展迅速,但在治疗方面还存在一些难题.临床主要以激素替代疗法为主,但由于存在潜在的危险性,不良反应,并且具有多种禁忌症,降低了患者的依从性和耐受性.中医药在整体观念的指导下对围绝经期综合征进行辨证论治,具有独特的优势,因方法多样、副作用少、疗效确切等,受到越来越多患者的欢迎.研究探讨围绝经期综合征具有十分重要的意义.

    作者:马堃;陈燕霞 刊期: 2015年第20期

  • HPLC同时测定麦冬中5个皂苷成分的含量

    建立测定麦冬药材中麦冬皂苷D,麦冬皂苷D',ophiopojaponin C,去乙酰基ophiopojaponin A,3-O-α-L-鼠李糖-(1→2)-β-葡萄糖麦冬苷元5种成分的HPLC方法.采用HPLC-ELSD方法,色谱柱为Kromasil 100-5C18柱(4.6 mm ×250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-水(B)溶液,梯度洗脱0~45 min,35%~55%A,体积流量1.0mL·min-1;柱温35℃,漂移管温度100℃,气体流速3.0L·min-1;进样量15 μL.结果表明5种成分均达到基线分离,各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系(r>0.999);回收率在95.75%~ 103.1%.建立的麦冬皂苷含量测定方法准确灵敏、重复性好,可应用于麦冬药材质量评价中.

    作者:吴发明;蔡晓洋;王盼;包小红;李敏;周娟 刊期: 2015年第20期

  • 2000例痛经患者问卷调查及临床特点分析

    对2 000例痛经患者进行问卷调查研究,探讨痛经临床特点,以期对痛经的防治提供流行病学参考依据.结果显示初潮年龄、月经周期短、经量多、经期时间长与痛经的发生未见有明显关系.痛经的影响因素主要为感受寒凉;证候(症状)特点主要为虚实夹杂,且随着程度加重,虚证的症状表现越明显;在不同程度痛经中,小腹畏寒症状出现的频率多;寒凝血瘀证型所占比多为53.2%;痛经应对措施以选择卧床休息为主,占79.6%,对于重度痛经患者的药物选择以中西药联合应用为主占43.4%.痛经患者对中药剂型的选择以汤药剂型所占比多26.5%.调查结果得出,避免寒凉对预防痛经的发生有积极的作用,治疗痛经应注重温经散寒.

    作者:王艳英;马堃 刊期: 2015年第20期

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