唐庆;范恒;寿折星;刘星星
目的:阐明苦参中“环状年轮”的结构特征及异常构造的产生,进一步讨论苦参的药用部位问题.方法:对苦参的根系及药材进行实地调查,并对其根系进行形态观察和发育解剖学研究.结果:北方部分地区生长的苦参存在横走根状茎(文中统称为“根状茎”),其与根在外观和显微特征方面都存在差异;根中的异常结构是由于次生木质部中产生了大量薄壁细胞,其中一些薄壁细胞恢复分生能力转化为异常形成层所产生;苦参横切面中的“环状年轮”与生长轮无关,从外向内依次是由韧皮纤维束呈断续的环、形成层环,以及次生木质部中的薄壁细胞环带组成.结论:苦参的入药部位为根;建议苦参饮片中“环状年轮”的描述改为“环状结构”.
作者:王军;谢晓梅;彭华胜 刊期: 2012年第12期
目的:考察何首乌不同分离部位对入正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞的杀伤作用,寻找能明显杀伤肝癌细胞但对正常肝细胞生长影响较小的分离部位,并初步探讨其对2种细胞不同作用的机制.方法:何首乌70%乙醇提取物经AB-8型大孔树脂吸附,依次用水、50%乙醇和95%乙醇洗脱得到何首乌乙醇提取物的水洗脱部位(RW)、50%乙醇洗脱部位(R50)和95%乙醇洗脱部位(R95);体外培养人正常肝L02细胞及肝癌HepG2细胞,用含何首乌各分离部位的细胞培养液与细胞共同孵育一定时间后,MTT检测及倒置镜下观察约物对L02及HepG2细胞生长的影响,筛选具有区别杀伤作用的部位,考察其剂量和时间作用效应.进一步通过Giemsa染色观察药物作用后细胞核的变化,流式细胞术检测L02细胞周期和凋亡情况.结果:MTT和倒置镜下镜检结果均表明,R50对L02细胞和HepG2细胞具有明显的区别杀伤作用.Giemsa染色和流式细胞术结果表明,R50诱导2种细胞凋亡的程度不同:试验的各个时相下HepG2中凋亡细胞的比例均明显高于L02细胞(HepG2细胞中凋亡细胞的比例在24,48,72 h分别为83.62%,60.52%,74.49%,L02细胞中凋亡细胞的比例则分别为31.02%,20.57%,25.32%,2种细胞阴性对照组中凋亡细胞的比例在各个时相均小于5%),但对2种细胞的细胞周期没有明显影响.结论:何首乌提取物的R50部位对人正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞具有明显的区别杀伤作用,区别杀伤作用的本质是药物诱导2种细胞凋亡的程度不同.
作者:张瑞晨;张超;孙震晓;邓巧虹 刊期: 2012年第12期
目的:分析大鼠灌胃刺五加提取物后血浆、胆汁、尿液和粪便中异嗪皮啶(M0)及其代谢产物.方法:健康雄性wistar大鼠按325 mg·kg-1的剂量灌胃给予刺五加提取物,分别采集给药后1,1.5,2,4,6h肝门静脉血液并用SPE技术制备血浆;采集0~12h胆汁并用SPE技术制备;0~12 h,12 ~24 h分别采集尿液和粪便样品并制备样品,采用UPLC-Q-TOF-MS技术和Metabolynx XS软件联合的方法分析.结果:在大鼠血浆、胆汁、尿液和粪便中检测到M0,在血浆和胆汁中检测到代谢物异嗪皮啶葡萄糖醛酸苷(M1).其中M1是首次报道的异嗪皮啶代谢产物.结论:异嗪皮啶在大鼠体内以葡萄糖醛酸形式代谢,终又以异嗪皮啶形式排出体外.
作者:刘树民;孙强;白云;卢芳;闫广利;包顺茹 刊期: 2012年第12期
目的:探讨人参皂苷Rg1经PEG修饰后在小鼠的组织靶向分布情况.方法:取SD小鼠随机分为2组,分别给予尾静脉注射Rg1和PEG-Rg1,于不同时间点取血并取各组织脏器,采用UPLC对样品中指标成分人参皂苷Rg1进行含量测定,计算Rg1在各组织分布的靶向系数,观察比较2组在小鼠体内的组织靶向分布情况.结果:人参皂苷Rg1组在小鼠体内各组织分布的AUC大小顺序为肝、肾、肺、心、脾,肝靶向系数为2.01;PEG修饰组在小鼠体内各组织的AUG大小顺序为肾、肝、肺、心、脾,肝靶向系数为9.21.结论:PEG修饰后,Rg1对肝组织的靶向选择性增强,同时对肾、肺组织的靶向选择性也得到增强.
作者:刘梅;王莉;胡凯莉;奉建芳 刊期: 2012年第12期
目的:发状根生产的次生代谢产物含量比植物自身合成的含量高几倍甚至几十倍,利用人参发状根可以生产大量人参皂苷,并有效的抑制癌细胞的增值.方法:通过正交试验设计筛选人参发状根诱导的条件,通过发状根生物积累量和皂苷含量的测定确定培养条件,然后利用MTT法测定了人参皂苷对HepG2细胞的影响.结果:本实验优化了人参发状根的佳诱导条件,吸光度A 0.6,侵染时间为10 min,预培养时间为3d,筛选出发状根的佳培养条件,MS培养基,pH6.1,24℃培养时,发状根的生物积累量和皂苷含均较高,采用人参总皂苷对肝癌细胞HepG2的抑制效果进行研究,证实人参总皂苷对HepG2的抑制率与给药浓度呈正相关.结论:筛选出适的人参发状根诱导及培养条件,不同部位的总皂苷对肝癌细胞HepG2的增殖均具有抑制作用.
作者:杨晶;李天航;郭咏昕;官丽莉;李海燕;李校堃 刊期: 2012年第12期
目的:观察姜黄素对AD模型APP/PS1双转基因小鼠突触相关蛋白突触后致密蛋白-95(postsynaptic density protein-95,PSD-95)和骨架蛋白Shankl表达的影响.方法:将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮阳性对照组(10mg· kg-1·d-1)、姜黄素高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg-1·d-1),正常对照组为相同背景非转基因小鼠.灌胃3个月后,应用免疫组织化学和Western blot方法进行检测.结果:行为学检测,治疗组与模型组相比定位航行实验和空间探索实验存在不同程度的差异(P<0.01或P<0.05).PSD-95和Shank1免疫组化,模型组小鼠大脑海马CA1区较对照组阳性细胞明显减少(P<0.01),姜黄素干预组有所恢复.Western blot检测海马PSD-95的蛋白结果显示,模型组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均比对照组小鼠明显变细、颜色变浅(P<0.01);姜黄素干预组小鼠海马PSD-95的蛋白表达条带均明显增粗、颜色加深(P<0.05).结论:姜黄素增加APP/PSI双转基因小鼠突触相关蛋白shank1和PSD-95表达,改善APP/PS1双转基闵小鼠突触的结构和可塑性,提高空间学习记忆能力.
作者:魏鹏;李瑞晟;王虹;任映;孙海芸;杨金铎;王蓬文 刊期: 2012年第12期
目的:了解云南地区主产的中药材三七和草果上污染真菌的主要类群,分析这2种常用药材上潜在的真菌毒素污染的可能性.方法:采集来源于云南不同地区市售的三七、草果药材,使用稀释平板法分离药材表面真菌,依据形态学特征结合分子生物学方法对主要分离菌株进行鉴定.结果:三七污染真菌以淡紫拟青霉和橘青霉为优势菌;草果污染菌中的优势菌为淡紫拟青霉和黄曲霉.结论:根据三七和草果上污染菌的情况,在云南地区三七存在橘青霉毒素污染的风险,草果存在黄曲霉毒素污染的风险.
作者:宋美芳;陈娟;李学兰;唐德英;孙炳达;高微微 刊期: 2012年第12期
绝经后骨质疏松症是更年期妇女的常见全身性骨代谢疾病,体内雌激素水平下降是其重要病因.激素替代疗法(HRT)虽然在多年的临床实践中有着良好和肯定的疗效,但其在提高妇科肿瘤发生率等方面具有明显的副作用.临床实践已经证明,多种妇科中药方剂、单味中药及中药植物雌激素样活性成分对骨质疏松症有确凿疗效且副作用小.其主要通过作用于靶组织、靶细胞的雌激素受体并进而影响其下游信号传导通路中骨代谢相关调节蛋白和因子的表达情况,达到对骨质疏松症的防治效果.同时,近年来雌激素相关受体的研究也为全面揭示中药及其活性成分抗骨质疏松症的作用机制提供了新的可能角度和途径.
作者:赵丕文;牛建昭;David Yue-Wei Lee;王继峰;孙艳玲;李亚东 刊期: 2012年第12期
目的:系统研究中药小槐花中的化学成分.方法:利用大孔树脂,Sephadex LH-20,ODS及正相硅胶柱等色谱手段进行分离,通过多种波谱学数据分析进行化合物的结构鉴定.结果:从小槐花60%乙醇提取物中分离得到15个化合物,经结构鉴定分别为豆甾醇(1),β-谷甾醇(2),柠檬酚(3),黄槿酮A(4),异柠檬酚(5),kenusanoneⅠ (6),neophellamuretin(7),清酒缸酚(8),古柯三醇(9),黄槿酮D(10),山柰酚(11),8-prenylquercetin (12),leachianone G( 13),5,7,4'-三羟基-二氢黄酮醇(14),4H-1 -benzopyran-4-one,2-(3,4-dihydroxyphenyl)-2,3-dihydro-3,5,7-trihydroxy-8-(3-methyl-2-butenyl)-,(2R-trans)-(9CI)(15).结论:除化合物8外,所有化合物均为从该种植物中首次分离得到.
作者:吴瑶;罗强;孙翠玲;王光辉;陈全成;郭志坚;邹秀红;陈海峰 刊期: 2012年第12期
通过大孔吸附树脂、MCI树脂、正相硅胶、Sephadex LH-20、制备薄层色谱和反相HPLC等多种色谱分离方法相结合,从天麻水提物中分离得到23个化合物;借助多种波谱学分析方法鉴定他们的结构为:4-羟基-3-(4-羟基苄基)苄基甲醚(1),4-(甲氧甲基)苯基-I-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),4-羟基-3-(4-羟基苄基)苯甲醛(3),4-(4-羟基苄基)-2-甲氧基苯酚(4),4,4'-亚甲基双(2-甲氧基苯酚)(5),L-苯基乳酸(6),3-甲氧基-4-羟基苄基乙醚(7),对羟基苯甲醇(8),对羟基苄基甲醚(9),对羟基苄基乙醚(10),对羟基苯甲醛(11),对羟基苯甲酸(12),对甲氧基苯甲酸(13),天麻素(14),4-(乙氧甲基)苯基-I-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(15),对醛基苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(16),对甲苯基-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(17),甲基-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(18),5-羟甲基糠醛(19),派立辛(20),派立辛B(21),派立辛C(22)和薯蓣皂苷元(23).其中化合物1和2为新化合物,化合物3~7,18和23为首次从该属植物中分离得到,并首次报道化合物4的碳谱数据.
作者:王亚男;林生;陈明华;江冰娅;郭庆兰;朱承根;王素娟;杨永春;石建功 刊期: 2012年第12期
目的:建立藏药椭圆叶花锚药材HPLC指纹图谱,研究椭圆叶花锚成分,比较不同地区椭圆叶花锚异同.方法:采用Welchrom-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-水系统梯度洗脱,检测波长265 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温40℃,以指纹图谱软件计算相似度,并进行主成分分析.结果:指认了指纹图谱中12个色谱峰,各批次药材成分种类基本一致,但相似度不高,各批次药材间(咄)酮苷与苷元比例差异大,药材成分特征与其产地地理位置间无明显关联.结论:该方法具有简便、专属性强、稳定、可重复的特点,可为椭圆叶花锚药材的鉴别与质量评价提供参考.
作者:古锐;钟国跃;罗维早;张艺;王昌华;刘翔;赵纪峰;周华蓉 刊期: 2012年第12期
目的:测定红芪多糖3(HPS-3)中4个组分的绝对分子量,相对分子质量分布,均方根旋转半径(Rg),多分散系数(Mw/Mn)等分子特征参数,以均方根旋转半径(Rg)对重均分子量(Mw)作图,计算4个组分在溶液状态的构象.方法:采用凝胶渗透色潜-多角度激光散射(GPC-MALLS)联用技术,流动相为含0.02% NaN3的0.1 mol·L-1NaNO3溶液,UltrahydrogelTM 1000,500色谱柱串联.结果:HPS-3的4个组分中,HPS-3-C的Mw大(1.986 × 105 g·mo1-1);其次为HPS-3-B(1.113× 105g·mol-1)和HPS-3 -D(8.457×104g·mol-1);HPS-3-A的Mw小(1.223×104 g·mol-1),而Rg大(55.5 nm).HPS-3-D相对分子质量分布范围广,Mw/Mn 2.543.在流动相中,HPS-3-A为球型构象,HPS-3-C为无规则线团构象,HPS-3-B和HPS-3-D则均为高枝化度结构.结论:为进一步研究HPS-3中4个组分分子特征与其生物活性的关系提供必要依据.
作者:陈同强;ADILBEKOV J;王娟;沈孝丽;石义凯;胡芳弟;封士兰 刊期: 2012年第12期
目的:研究NOD2在实验性大鼠结肠炎发病机制中的作用,并探讨苦参素注射液对实验性大鼠结肠炎的治疗作用和治疗机制.方法:将40只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、美沙拉嗪组和苦参素注射液(OMT)组,每组10只.对照组未行造模,其余3组均采用三硝基苯磺酸造模.OMT组大鼠给予苦参素注射液肌肉注射,美沙拉嗪组大鼠给予美沙拉嗪混悬液灌胃,模型组和对照组大鼠均以蒸馏水灌胃,治疗15 d,观察实验大鼠结肠黏膜大体形态及组织病理评分,并用免疫组化检测大鼠结肠黏膜NOD2,NF-KB p65蛋白表达,ELISA检测实验大鼠结肠黏膜IL-6的表达.结果:与对照组相比,模型组大鼠结肠黏膜NOD2,NF-κB p65蛋白,IL-6表达较对照组明显升高(P<0.01),美沙拉嗪组、OMT组大鼠结肠黏膜NOD2,NF-κB p65蛋白,IL-6表达较模型组显著降低(P<0.01,P<0.05).结论:结肠黏膜NOD2,NF-κB p65蛋白过度表达,IL-6分泌增多参与了溃疡性结肠炎的发生发展过程,而OMT可以通过抑制NOD2,NF-κB p65蛋白过度表达,降低IL-6分泌,起到减轻结肠黏膜炎症,保护结肠黏膜的作用.
作者:唐庆;范恒;寿折星;刘星星 刊期: 2012年第12期
目的:探讨样本数据重复采集对所构建近红外(NIR)定量校正模型稳健性的影响.初步阐释该影响产生的原因.方法:以银黄液为研究载体,采集样本的近红外光谱,并以高效液相测定值为参考值,采用偏小二乘算法建立黄芩苷定量校正模型,对潜变量因子累积贡献曲线进行深人探讨,在潜变量空间阐述重复采样对所建立的定量校正模型的影响.结果:在对重复采集光谱平均后,以优光谱预处理疗法建立的定量预测模型达到理想预测结果( RMSECV=1.824).该模型潜变量因子累计贡献率曲线下的面积,明显大于其他光谱建模方式,即所得的模型更加稳健.结论:多次测量取平均能够显著提高模型的预测性能,使所得的模型更加稳健.
作者:隋丞琳;吴志生;林兆洲;徐冰;杜敏;史新元;乔延江 刊期: 2012年第12期
中药血清药物化学是阐明中药药效物质基础直接而有效的方法,然而中药化学成分的复杂性和体内过程中成分间的相互作用决定了中药体内成分分析的艰巨性.液相色谱-质谱联用技术为中药体内成分的全息表征提供了有效的分析手段,然而由于生物样品中内源性物质的严重干扰难以在采集的色谱图中直观地辨识出中药体内成分,迫切需要引入专属的成分辨识技术,以避免对中药体内成分的人为漏检.该文结合黄连在大鼠血中的移行成分分析,介绍用于质谱数据处理的质量短缺过滤技术、Metabolynx软件以及主成分分析、偏小二乘判别分析、正交偏小二乘判别分析等模式识别方法在中药体内成分辨识中的应用.
作者:闫广利;韩莹;王喜军 刊期: 2012年第12期
目的:基于方证相对原理,通过肝肾纤维化方证数据库筛选分析,选择清热活血中药类方:鳖甲饮子、膈下逐瘀汤、复肝丸3首,以燮理枢机的燮枢汤作对照,观察比较不同类方对CCl4小鼠肝纤维化的药效作用.方法:10周龄C57BL/6小鼠雄性,体重(20 ±3)g,清洁级,随机分为正常组、模组型、鳖甲饮子组、膈下逐瘀汤组、复肝丸组、燮枢汤组.除正常组外,其他各组小鼠均以10% CCl4橄榄油溶液2mL·kg-1体重腹腔注射,每周3次,共4周.造模同时,治疗组在造模之日起分别给予鳖甲饮子、膈下逐瘀汤、复肝丸、燮枢汤浸膏灌胃,每天1次,连续4周.正常组、模型组给予等体积的去离子水灌胃.试莉盒测定血清ALT,AST,y-GT活性及Alb,TBil量,盐酸水解法观察肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积情况.结果:与正常组相比,模型组小鼠体重明显降低,肝体比、脾体比明显升高;肝细胞脂肪变性及炎性坏死明显.胶原纤维沉积明显,形成纤维间隔,并可见假小叶形成.血清ALT,AST,TBil,γ-GT均显著升高,肝组织Hyp含量明显升高.鳖甲饮子组AST有所降低,但肝细胞变性、炎症坏死和胶原沉积没有明显减少;膈下逐瘀汤组脾体比和y-GT显著降低,肝细胞变性和炎症坏死有所减轻,胶原沉积有所减少;复肝丸组脾体比降低,AST,y-GT显著降低,肝细胞变性和炎症坏死有所减轻,胶原沉积显著减少,Hyp含量明显降低;燮枢汤组脾体比降低,但炎症和纤维化程度未减轻.结论:复肝丸显示出较好的抗CCl4小鼠肝纤维化作用.
作者:赵志敏;余慧颖;彭渊;任红旭;陶艳艳;王峥涛;朱邦贤;刘平;刘成海 刊期: 2012年第12期
目的:克隆刺五加的法尼基焦磷酸合酶(farnesyl diphosphate synthase,FPS)基因,并对其进行生物信息学和表达分析.方法:采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术克隆刺五加FPS基因的全长cDNA序列.运用生物信息学方法对该基因进行分析,预测其编码蛋白的结构与功能.并通过RT-PCR法检测FPS在不同器官中的表达情况.结果:刺五加FPS基因的cDNA全长为1 499 bp,开放阅读框长1 029 bp,编码342个氨基酸的蛋白,包含2个富含天冬氨酸(DDXXD)的保守功能域.FPS蛋白无跨膜区域,定位于细胞质中.RT-PCR的结果显示,刺五加FPS基因在各器官中均有表达,但表达具有显著差异(P<0.05).结论:首次分离并报道了刺五加FPS的cDNA克隆,并证实其在不同器官中的表达量不同,为进一步研究FPS对刺五加皂苷合成的影响和表达调控奠定了基础.
作者:邢朝斌;龙月红;何闪;梁能松;李宝财 刊期: 2012年第12期
目的:分离黄连亲水性成分,研究其对小檗碱在HepG2细胞中糖代谢作用的影响.方法:黄连亲水性部位高速逆流色谱制备后,硅胶柱色谱法进行分离.MTT法检测HepG2细胞活力,试剂盒检测细胞消耗的葡萄糖.结果:首次从黄连水溶性组分中分离出胆碱.在实验浓度范围内,胆碱能显著增强小檗碱促进细胞吸收葡萄糖的能力,并显著改善小檗碱对细胞生长抑制的影响.与同剂量的小檗碱相比,100 mg·L-1胆碱与38 mg· L-1小檗碱混合后,细胞对葡萄糖的消耗增加34%,存活率上升到75%.结论:胆碱在增强小檗碱促进细胞吸收葡萄糖和减小小檗碱对细胞的毒副作用方面存在显著协同作用.
作者:陈红英;李学刚;叶小利;晋亚楠;黄静;吴金凤 刊期: 2012年第12期
目的:研究大叶茜草素及羟基茜草素在大鼠各肠段中的吸收动力学特征.方法:采用大鼠在体单向肠灌流模型对大叶茜草素和羟基茜草素在大鼠各肠段的吸收特性进行研究.用酚红标记法校正循环液体积.结果:不同质量浓度的大叶茜草素(12.33,24.66,49.32 mg·L-1)及羟基茜草素(8.455,16.91,33.82 mg· L-1)在各肠段的吸收量顺浓度梯度,渗透系数呈上升趋势且均大于0.2×10-4cm·s-1,在相同浓度下大叶茜草素及羟基茜草素在各肠段P(ep)表现为相同趋势,依次为结肠>十二指肠>回肠>空肠,且有显著性差异(P<0.05).结论:大叶茜草素及羟基茜草素在大鼠肠道内为高渗透性药物,各肠段均有吸收,且在结肠部位可能存在特异性吸收.
作者:王侃;陈星;单鸣秋;丁安伟 刊期: 2012年第12期
目的:建立LC-MS法测定Beagel犬血浆中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱的浓度,研究岩舒注射液在Beagel犬体内药动学过程及其参数.方法:以野百合碱做内标,三氯甲烷提取,甲醇-10 mmol醋酸铵0.02%甲酸水溶液90∶10为流动相,CN柱分离,检测Beagel犬iv 1.2 g·kg-1岩舒注射液后12h内血浆样品中4种生物碱的浓度,用DAS 2.0药动学程序处理血药浓度-时间数据,分析药动学参数.结果:苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱分别在0.01~16.0,0.02 ~60.0,0.0t ~4.0,0.02 ~16.0 mg· L-1具有良好的线性关系,平均回收率均大于90%,精密度试验RSD小于6.4%,稳定性试验RSD小于4.6%;静注岩舒注射液后,4种生物碱在Beagel犬体内的药代动力学符合二室开放模型,Cmax与原药液中浓度比例基本相符;苦参碱和氧化苦参碱、槐果碱和氧化槐果碱的AUC0-∞与原药液中的比例相比均有增大,苦参碱和槐果碱MRT0-∞和t1/2z分别小于氧化苦参碱和氧化槐果碱;4种生物碱表观分布容积苦参碱>氧化苦参碱,槐果碱>氧化槐果碱.结论:该方法用于岩舒注射液中苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱血药浓度的测定准确、灵敏、稳定性好、回收率高,适合其药动学研究.
作者:刘继平;薛梅;黄鑫;王舒;江振洲;张陆勇 刊期: 2012年第12期