学术投稿

HPV-11 E7重组腺病毒体外转染树突细胞对其功能的影响

王飞;相文忠;毕志刚;李光富;刘丰;吴海玮;张兆松

关键词:尖锐湿疣, 遗传载体, 乳头状瘤病毒, 人, 树突细胞
摘要:目的 研究腺病毒载体介导HPV-11 E7基因转染树突细胞(DC)对其表型和功能的影响.方法 用佳感染滴度(MOI)重组腺病毒pAD-E7转染成熟DC,流式细胞仪检测转染前后DC表型变化,并用3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种淋巴细胞增殖的能力及ELISA检测DC、T细胞共同培养上清中细胞因子的水平.结果 MOI 100为pAD-E7转染DC佳滴度,pAD-E7转染成熟DC前后对细胞表面的特征性表型CD1a、CD83及CD40、HLA-DR无影响,转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,能刺激T细胞分泌大量IFN-γ、IL-12.结论 pAD-E7转染成熟DC对其功能无明显影响,转染后的DC与T细胞共孵育能诱导T细胞向Th1细胞极化.
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    作者:龚匡隆;尢永燕;张津萍;孙厚华;沙仲;龚向东 刊期: 2007年第05期

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    作者:黄进梅;郑和平;潘慧清;曾维英;吴兴中;李美玲;薛耀华 刊期: 2007年第05期

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    厚皮指症是以近端指间关节周围皮肤肿胀为主要临床表现的一种皮肤病,现将我院收治的8例患者报道如下.

    作者:谢传美;袁国华;朱道银;杨明辉 刊期: 2007年第05期

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    作者:周畅;丰岩清;张成 刊期: 2007年第05期

  • 血管内皮生长因子、缺氧诱导因子1α及基质金属蛋白酶9在尖锐湿疣组织中的表达

    目的 探讨尖锐湿疣(CA)组织中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子(HIF)-1α、基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达及意义.方法 采用免疫组化SP法检测35例CA组织中VEGF、HIF-1α、MMP-9的表达.结果 CA组织中VEGF、HIF-1α和MMP-9阳性表达率分别为100%(35/35)、94.28%(33/35)和100.00%(35/35),正常人对照组VEGF、HIF-1α及MMP-9阳性表达率分别为100.00%(15/15)、66.67%(10/15)和86.67%(13/15);CA组织中VEGF、HIF-1α和MMP-9阳性表达强度多在++~+++,正常人对照组多在-~++;两组VEGF和MMP-9阳性表达率差异均无统计学意义(P>0.05),但VEGF、HIF-1α和MMP-9的表达强度与正常人对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).CA组织中VEGF与HIF-1α和MMP-9表达强度间存在正相关性.结论 CA组织中存在VEGF、HIF-1α和MMP-9过表达,VEGF、HIF-1α和MMP-9在促进CA血管生成中可能发挥作用.

    作者:尹光文;李敏;张守民 刊期: 2007年第05期

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    作者:杨晓红;满孝勇;卜璋于;蔡绥勍;郑敏 刊期: 2007年第05期

  • 解脲脲原体在孕妇与新生儿泌尿生殖道之间的传播

    我们通过对健康母婴间的泌尿生殖道解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)的携带情况以及分群分型的研究,探讨Uu在母婴之间的垂直传播及影响因素.

    作者:史同新;刘立倩;管淑梅;徐敬星 刊期: 2007年第05期

  • 新疆维吾尔族HCR基因多态性与寻常性银屑病的相关性研究

    目的 检测新疆维吾尔族寻常性银屑病(PsV)患者外周血DNA中HCR基因第16外显子的1911位点多态性,探讨其与银屑病发病的相关性.方法 从128例患者及健康对照组132例的抗凝血中提取DNA,用PCR-限制性片段长度多态性法及PCR产物直接测序法鉴定基因类型,对结果进行统计学分析处理.结果 HCR基因第16外显子的1911位点核苷酸存在G、A二态性,可表现为GG纯合、AA纯合、GA杂合三种基因型.基因型和等位基因频率经卡方检验两组比较,差异无统计学意义(P>0.05).其中Ⅰ型、Ⅱ型寻常性银屑病患者与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05),男女寻常性银屑病患者与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 HCR基因第16外显子1911位点的多态性与新疆维吾尔族非家系寻常性银屑病在基因型和等位基因频率方面未发现相关性.

    作者:虞红;吴卫东;刘玉峰;普雄明;沈柱;吴丽峰 刊期: 2007年第05期

  • 人乳头瘤病毒16 E6/7转基因小鼠模型的建立

    目的 构建pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,通过显微注射法建立HPV16 E6/7转基因小鼠模型.方法 应用基因重组技术,构建pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,将经线性化的包含启动子、目的基因、PolyA尾的完整的真核表达DNA,通过将外源基因显微注射到供体小鼠受精卵的雄原核中,再植入到假孕受体鼠的输卵管中,获得129只F0代小鼠,常规法提取这些转基因小鼠的基因组DNA,进行PCR分析,得到5只原代转基因小鼠,再进行DNA印迹分析,其中4只小鼠的DNA出现与阳性质粒对照类似的特异条带,说明E6/7整合在这4只小鼠的基因组中.将Founder小鼠与正常FVB配种,后代经PCR检测,统计结果符合孟德尔遗传定律,证明外源基因稳定遗传给后代.在4只5月龄F0代阳性转基因小鼠中有2只小鼠耳朵皮肤出现不典型增生改变.结果 成功构建了pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,用包含CMV启动子、HPV16 E6/7目的基因转基因的小鼠已出现皮肤组织不典型增生.结论 获得可繁殖传代的整合了HPV16 E6/7基因的转基因小鼠模型.

    作者:高慧;黄正芳;王琴;李厚达;毕志刚 刊期: 2007年第05期

  • 沙眼衣原体omp1基因VS1-VS2序列分析与基因分型

    目的 探讨沙眼衣原体omp1基因VS1-VS2序列基因分型和VS1-VS2基因突变率.方法 巢式PCR扩增omp1基因的VS1-VS2序列,自动测序仪测序,运用DNAstar软件进行临床菌株与标准菌株序列的比对.结果 99株临床标本分离株扩增出约453 bp大小的VS1-VS2片段.与标准株比对,除3株测序出现双峰无法确定基因型外,96株菌株分为9个型,以F型29株(30.2%)、E型22株(22.9%)、J型19株(19.8%)、D型12株(12.5%)和H型8株(8.3%)为主.序列分析发现7株存在VS1区碱基的突变或插入,多为有义突变,突变率为7.3%,多见于D、E、F和H型.结论 沙眼衣原体omp1基因序列分析在分子流行病学上具有一定意义.

    作者:郑和平;江丽芳;方丹云;吴兴中;李燕娃;许刚;薛耀华;冯占芹;吴亚安;黄进梅 刊期: 2007年第05期

  • 二期梅毒患者的脑血流和脑脊液检查

    二期梅毒是发展为神经梅毒较为关键的阶段[1].在早期梅毒的诊治工作中,梅毒患者要接受腰椎穿刺术作脑脊液梅毒抗体等检查,以确定/排除神经梅毒、隐性梅毒.腰椎穿刺术有一定的创伤,患者通常难以接受.

    作者:施辛;唐军;刘增礼;刘晖;刘化广;苏玉华 刊期: 2007年第05期

  • 沙眼衣原体主要外膜蛋白基因的克隆、序列测定和真核表达

    沙眼衣原体(Ct)引起的泌尿生殖道感染已成为许多国家和地区常见的性传播疾病之一.其感染特点隐匿、迁延,症状不特异,相当一部分对治疗不敏感,易复发,终出现一系列严重的并发症和后遗症.

    作者:齐蔓莉;刘全忠;陈锦英 刊期: 2007年第05期

  • 变应性肉芽肿性血管炎一例

    患者男,40岁.约20天前无明显诱因出现咳嗽、喘憋症状,症状逐渐加重,并见咯血及皮疹,病情进展迅速.既往有支气管哮喘、鼻窦炎、鼻息肉及慢性腹泻病史.

    作者:杨秀莉;王丽华;姜丽亚 刊期: 2007年第05期

  • 国产异维A酸治疗寻常痤疮的10年回顾

    为总结10年来国内应用异维A酸(商品名泰尔丝)治疗寻常痤疮的疗效和安全性,本文对近10年来公开发表的部分中文文献进行了总结.

    作者:周展超 刊期: 2007年第05期

  • 光疗:新进展

    光疗是利用电磁波辐射产生的不同波长的光线来治疗皮肤病的一种方法.光疗的种类很多,包括长波紫外线(UVA),波长320~400 nm,常与补骨脂素联合使用,称为光化学疗法;长波紫外线1(UVA1),波长340~400 nm;宽谱中波紫外线(BB-UVB),波长270~390 nm,波峰313 nm;窄谱中波紫外线(NB-UVB),波长311~313 nm;以及利用不同波长紫外线进行的局部定位光疗.

    作者:Camile L. Hexsel;Henry W. Lim;鞠梅 刊期: 2007年第05期

  • 5%咪喹莫特乳膏治疗外生殖器/肛周疣随机对照研究

    目的 评价5%咪喹莫特乳膏(艾达乐)治疗外生殖器/肛周疣的有效性和安全性.方法 采用随机、双盲、平行对照、七个中心临床研究.患者随机入组,一组患者先接受咪喹莫特治疗16周或至所有基线疣消失,然后给予赋形剂4周.另一组患者先接受赋形剂治疗4周,然后再接受咪喹莫特治疗16周或至所有基线疣消失.每周外用乳膏3次(晚上应用,至少保留8 h),每4周评估一次临床疗效.结果 共144例患者入选.在研究结束时(20周),综合两个治疗组合并显示,基线疣计数减少≥50%的患者为75.0%(意向性治疗分析,ITT)和83.5%(符合方案完成试验集分析,PP),疣完全清除率分别为79.9%(ITT分析)和89.8%(PP分析).在第4周时,咪喹莫特组基线疣计数减少≥50%的患者为48.6%,赋形剂组为19.4%,P=0.0004;咪喹莫特组疣完全清除率为22.2%,赋形剂组为6.9%,P=0.009.常见的不良事件发生是用药部位的皮肤反应(38.9%),无严重不良事件发生.结论 咪喹莫特乳膏治疗外生殖器/肛周疣疗效明显优于赋形剂,每周3次,疗程16周,安全有效,使用方便.

    作者:王爱平;顾军;郭在培;苏晓红;周华;曾凡钦;涂亚庭;朱学骏 刊期: 2007年第05期

  • 不同RNA干预技术对人乳头瘤病毒11型E7基因的沉默作用

    目的 探讨RNA干预技术的两种形式在体外对人乳头瘤病毒(HPV)11型E7基因的沉默作用.方法 化学合成1对小片段干扰RNA(siRNA-11E7),同时构建3个短发夹状小RNA(shRNA)表达质粒(pRNAT-11E7 1#、2#、3#),分别转染稳定表达HPV11E7的C57BL/6小鼠黑素瘤细胞系B16细胞株,采用实时荧光定量PCR技术检测细胞转染前后靶基因mRNA的表达水平.结果 siRNA-11E7转染细胞后6、12、24、48、72、96、120 h对靶基因表达的抑制率分别为12.60%、31.41%、41.93%、42.93%、74.35%、32.71%、29.00%;佳作用浓度为25 nmol/L(抑制率70.06%),低作用浓度可至3.13 nmol/L(抑制率47.00%).以0.4 μg pRNAT-11E7 1#、2#、3#及上述3个质粒等量混合转染细胞72 h后对靶基因表达的抑制率分别达44.52%、59.26%、89.62%、54.09%,阴性质粒无干预作用.pRNAT-11E7 3#作用6、12、24、48、72、96、120 h对靶基因表达抑制率分别为0、17.50%、40.90%、42.40%、61.90%、51 50%、0%;佳作用剂量0.2 μg.结论 siRNA及shRNA表达载体均可在体外安全高效地沉默HPV11E7基因的表达,其干预作用存在一定的量效性和时效性,且可能存在佳作用浓度(剂量)和佳作用时间.

    作者:陈贤祯;程浩;汤晓燕;张行;朱可建;叶俊;林爱华;岑建萍;金纳 刊期: 2007年第05期

中华皮肤科杂志

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