郑和平;江丽芳;方丹云;吴兴中;李燕娃;许刚;薛耀华;冯占芹;吴亚安;黄进梅
患者男,56岁.因双侧鼻前庭黏膜部位皮疹不适伴左鼻唇沟结节2月余就诊.首诊于耳鼻咽喉科,因对症处理疗效不佳于2005年3月转入皮肤科.
作者:曾同祥;郭华雄 刊期: 2007年第05期
目的 构建pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,通过显微注射法建立HPV16 E6/7转基因小鼠模型.方法 应用基因重组技术,构建pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,将经线性化的包含启动子、目的基因、PolyA尾的完整的真核表达DNA,通过将外源基因显微注射到供体小鼠受精卵的雄原核中,再植入到假孕受体鼠的输卵管中,获得129只F0代小鼠,常规法提取这些转基因小鼠的基因组DNA,进行PCR分析,得到5只原代转基因小鼠,再进行DNA印迹分析,其中4只小鼠的DNA出现与阳性质粒对照类似的特异条带,说明E6/7整合在这4只小鼠的基因组中.将Founder小鼠与正常FVB配种,后代经PCR检测,统计结果符合孟德尔遗传定律,证明外源基因稳定遗传给后代.在4只5月龄F0代阳性转基因小鼠中有2只小鼠耳朵皮肤出现不典型增生改变.结果 成功构建了pCEP4-HPV16 E6/7真核表达质粒,用包含CMV启动子、HPV16 E6/7目的基因转基因的小鼠已出现皮肤组织不典型增生.结论 获得可繁殖传代的整合了HPV16 E6/7基因的转基因小鼠模型.
作者:高慧;黄正芳;王琴;李厚达;毕志刚 刊期: 2007年第05期
目的 探讨RNA干预技术的两种形式在体外对人乳头瘤病毒(HPV)11型E7基因的沉默作用.方法 化学合成1对小片段干扰RNA(siRNA-11E7),同时构建3个短发夹状小RNA(shRNA)表达质粒(pRNAT-11E7 1#、2#、3#),分别转染稳定表达HPV11E7的C57BL/6小鼠黑素瘤细胞系B16细胞株,采用实时荧光定量PCR技术检测细胞转染前后靶基因mRNA的表达水平.结果 siRNA-11E7转染细胞后6、12、24、48、72、96、120 h对靶基因表达的抑制率分别为12.60%、31.41%、41.93%、42.93%、74.35%、32.71%、29.00%;佳作用浓度为25 nmol/L(抑制率70.06%),低作用浓度可至3.13 nmol/L(抑制率47.00%).以0.4 μg pRNAT-11E7 1#、2#、3#及上述3个质粒等量混合转染细胞72 h后对靶基因表达的抑制率分别达44.52%、59.26%、89.62%、54.09%,阴性质粒无干预作用.pRNAT-11E7 3#作用6、12、24、48、72、96、120 h对靶基因表达抑制率分别为0、17.50%、40.90%、42.40%、61.90%、51 50%、0%;佳作用剂量0.2 μg.结论 siRNA及shRNA表达载体均可在体外安全高效地沉默HPV11E7基因的表达,其干预作用存在一定的量效性和时效性,且可能存在佳作用浓度(剂量)和佳作用时间.
作者:陈贤祯;程浩;汤晓燕;张行;朱可建;叶俊;林爱华;岑建萍;金纳 刊期: 2007年第05期
目的 研究腺病毒载体介导HPV-11 E7基因转染树突细胞(DC)对其表型和功能的影响.方法 用佳感染滴度(MOI)重组腺病毒pAD-E7转染成熟DC,流式细胞仪检测转染前后DC表型变化,并用3H-TdR掺入法检测转染前后DC刺激同种淋巴细胞增殖的能力及ELISA检测DC、T细胞共同培养上清中细胞因子的水平.结果 MOI 100为pAD-E7转染DC佳滴度,pAD-E7转染成熟DC前后对细胞表面的特征性表型CD1a、CD83及CD40、HLA-DR无影响,转染后的DC仍具有较强的刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,能刺激T细胞分泌大量IFN-γ、IL-12.结论 pAD-E7转染成熟DC对其功能无明显影响,转染后的DC与T细胞共孵育能诱导T细胞向Th1细胞极化.
作者:王飞;相文忠;毕志刚;李光富;刘丰;吴海玮;张兆松 刊期: 2007年第05期
目的 探讨尖锐湿疣(CA)组织中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子(HIF)-1α、基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达及意义.方法 采用免疫组化SP法检测35例CA组织中VEGF、HIF-1α、MMP-9的表达.结果 CA组织中VEGF、HIF-1α和MMP-9阳性表达率分别为100%(35/35)、94.28%(33/35)和100.00%(35/35),正常人对照组VEGF、HIF-1α及MMP-9阳性表达率分别为100.00%(15/15)、66.67%(10/15)和86.67%(13/15);CA组织中VEGF、HIF-1α和MMP-9阳性表达强度多在++~+++,正常人对照组多在-~++;两组VEGF和MMP-9阳性表达率差异均无统计学意义(P>0.05),但VEGF、HIF-1α和MMP-9的表达强度与正常人对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).CA组织中VEGF与HIF-1α和MMP-9表达强度间存在正相关性.结论 CA组织中存在VEGF、HIF-1α和MMP-9过表达,VEGF、HIF-1α和MMP-9在促进CA血管生成中可能发挥作用.
作者:尹光文;李敏;张守民 刊期: 2007年第05期
目的 探讨尖锐湿疣(CA)皮损角质形成细胞中细胞因子信号转导JAK/STAT通路负调控蛋白细胞因子信号抑制剂-1(SOCS1)和活化STAT的蛋白抑制剂-1(PIAS1)的表达.方法 采用SP免疫组化染色技术检测40例CA患者皮损、20例宫颈癌和20例正常人皮肤(包皮)中SOCS1和PIAS1的表达及分布.结果 ①CA患者皮损中SOCS1和PIAS1的表达阳性细胞分布主要位于棘细胞层,为棕黄着色,阳性反应定位胞质;宫颈鳞状细胞癌亦为胞质阳性表达,棕黄着色,呈弥漫性分布;而正常包皮少数阳性着色主要定位于基底层细胞的胞质,呈浅黄着色.②CA皮损中SOCS1和PIAS1的表达阳性率分别为85%和80%,高于在正常人上皮中的表达(阳性率分别为30%和35%),两组比较差异均有统计学意义(前者χ2=18.15,P<0.01;后者χ2=11.87,P<0.01);宫颈癌中SOCS1和PIAS1的表达阳性率分别为90%和85%,虽较CA有升高,但两者比较差异均无统计学意义(两者均P>0.05).③CA中SOCS1与PIAS1的表达无显著相关性(rs=0.14,P>0.05).结论 CA皮损中可能通过细胞因子信号转导负调控蛋白SOCS1和PIAS1在角质形成细胞过度增殖或恶性转化过程中起调控作用.
作者:陶小华;孟群;潘卫利;董玉娥;罗静;程浩 刊期: 2007年第05期
目的 比较不同剂量和疗程伐昔洛韦治疗复发性生殖器疱疹的疗效和安全性.方法 选择复发性生殖器疱疹为研究对象,采用多中心、随机、双盲、对照临床研究.试验组伐昔洛韦每天2次,每次500 mg,口服5天,对照组伐昔洛韦每天2次,每次300 mg,口服7天.分别于用药前及用药后第1天、第2天取疱液或创面分泌物行疱疹病毒细胞培养,并于用药后第1、2、7天随访观察疗效和不良反应.结果 入组142例,全分析集(FAS)分析142例,符合方案集(PPS)分析133例.治疗后第1、2、7天,试验组和对照组的症状体征积分下降值及有效率比较差异均无统计学意义(P>0.05).FAS集分析单纯疱疹病毒(HSV)的培养阳性率,治疗后第1天试验组由87.50%下降到28.85%,对照组由92.86%下降到54.55%,两组间差异有统计学意义(P=0.007).PPS集分析HSV的培养阳性率,治疗后第1天试验组由90.00%下降到28.00%,对照组由92.59%下降到55.56%,两组比较差异有统计学意义(P=0.005).试验组和对照组不良反应发生率分别为0%和4.23%.结论 加大伐昔洛韦用量治疗复发性生殖器疱疹能显著提高治疗后第1天HSV的清除率,缩短HSV在皮损局部的存在时间.
作者:周村建;王莉;饶贤才;郭在培;涂亚庭;卢念祖;郝飞 刊期: 2007年第05期
皮肤科疾病中有相当一部分是变态反应性疾病,临床上变应原的检测成为治疗过敏性皮肤病的重要一环.变应原的检测方法多样,各有适应证.皮肤科医生应掌握常见变应原检测方法.
作者:张洪波;闵仲生 刊期: 2007年第05期
患者男,40岁.约20天前无明显诱因出现咳嗽、喘憋症状,症状逐渐加重,并见咯血及皮疹,病情进展迅速.既往有支气管哮喘、鼻窦炎、鼻息肉及慢性腹泻病史.
作者:杨秀莉;王丽华;姜丽亚 刊期: 2007年第05期
近年来,基因芯片技术在感染性疾病诊断中的临床应用已经起步[1,2].我们旨在建立检测性传播感染常见病原体的基因芯片技术,并将其应用于生殖器疱疹患者的临床检测;同时,将该方法与目前临床常用的荧光定量PCR(FQ-PCR)技术作比较,初步评价其临床应用价值.
作者:陈洵礼;孙建方;吴黎明;陈岳明;张红河 刊期: 2007年第05期
皮肤病的直观特性使其很适合开展远程会诊[1,2].远程皮肤病会诊与传统会诊相比,其诊断的可靠性和精确性都相当高[2-4].它分为非同步储存-转送方式和同步实时电视会议方式[2].前者设备成本较低,在时间上也更为方便[2].远程皮肤病会诊正在世界范围内成为一种越来越常用的提供皮肤病学服务的方式[2].本文总结通过互联网开展储存-转送远程皮肤病会诊的初步经验.
作者:董慧婷;王向辉;苗青;舒丹;陈继忠;Gerald Gabler;Rainer Hofmann-Wellenhof;Cesare Massone;H Peter Soyer 刊期: 2007年第05期
皮肤划痕症是皮肤科常见病,资料表明[1]可能与患者心理因素有关.本研究通过对皮肤划痕症患者进行症状自评量表(SCL-90)的评定,对其心理特征进行了初步的分析.
作者:宋慧丽;李玉平;李艳玲;四荣联;贾爱华 刊期: 2007年第05期
沙眼衣原体和淋病奈瑟菌是引起泌尿生殖系统感染的主要病原体.通常临床上诊断男性尿道感染主要依靠尿道症状、体征或实验室尿道拭子涂片染色(≥5个多形核白细胞/×1000显微镜)、衣原体检测(抗原、培养或分子生物学方法)、淋球菌涂片镜检和培养等.
作者:龚匡隆;尢永燕;张津萍;孙厚华;沙仲;龚向东 刊期: 2007年第05期
目的 评价5%咪喹莫特乳膏(艾达乐)治疗外生殖器/肛周疣的有效性和安全性.方法 采用随机、双盲、平行对照、七个中心临床研究.患者随机入组,一组患者先接受咪喹莫特治疗16周或至所有基线疣消失,然后给予赋形剂4周.另一组患者先接受赋形剂治疗4周,然后再接受咪喹莫特治疗16周或至所有基线疣消失.每周外用乳膏3次(晚上应用,至少保留8 h),每4周评估一次临床疗效.结果 共144例患者入选.在研究结束时(20周),综合两个治疗组合并显示,基线疣计数减少≥50%的患者为75.0%(意向性治疗分析,ITT)和83.5%(符合方案完成试验集分析,PP),疣完全清除率分别为79.9%(ITT分析)和89.8%(PP分析).在第4周时,咪喹莫特组基线疣计数减少≥50%的患者为48.6%,赋形剂组为19.4%,P=0.0004;咪喹莫特组疣完全清除率为22.2%,赋形剂组为6.9%,P=0.009.常见的不良事件发生是用药部位的皮肤反应(38.9%),无严重不良事件发生.结论 咪喹莫特乳膏治疗外生殖器/肛周疣疗效明显优于赋形剂,每周3次,疗程16周,安全有效,使用方便.
作者:王爱平;顾军;郭在培;苏晓红;周华;曾凡钦;涂亚庭;朱学骏 刊期: 2007年第05期
沙眼衣原体(Ct)是目前引起女性泌尿生殖道感染的常见的病原体[1],可引起黏液脓性宫颈炎以及盆腔炎、不孕症等.我们试图通过对患者的宫颈分泌物中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)和γ-干扰素(IFN-γ)水平的分析研究,初步探讨生殖道局部免疫与沙眼衣原体生殖道感染临床过程的相互关系.
作者:李燕;刘全忠 刊期: 2007年第05期
随着抗菌药物在临床上的广泛应用,淋球菌对抗菌药物的耐药性持续增加.淋球菌耐药性在不同地区和国家中的分布是不均衡的.1987年我所参加世界卫生组织(WHO)西太区中国淋球菌耐药监测网.将近6年的监测结果报道如下.
作者:朱邦勇;赵秀梅;尹跃平;覃善列;甘泉;吴剑 刊期: 2007年第05期
患者男,48岁.因龟头、冠状沟反复出现赘生物2年伴疼痛3个月于2005年10月25日就诊.2年前曾有非婚性接触史,1个月后,龟头上出现菜花样赘生物,如花生米样大小,在当地卫生院诊断为尖锐湿疣,行电灼治疗并肌内注射干扰素,1个月后复发,又给予CO2激光治疗,1周后再次复发,疣体逐渐增大增多.
作者:张更建;袁伟;张信江;肖瑜;张金松 刊期: 2007年第05期
近年来,沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)引起的泌尿生殖道感染迅速增多,所致的前列腺炎、不孕不育、慢性盆腔炎等严重危害患者的身心健康.本研究在构建E型Ct DNA疫苗的基础上,探讨其诱导小鼠产生的体液免疫应答.
作者:王敬;刘全忠;齐蔓莉 刊期: 2007年第05期
目的 探讨血管内皮生长因子受体(VEGFR)家族在角质形成细胞系HaCaT细胞的表达.方法 RT-PCR法检测HaCaT细胞中VEGFR家族中VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3及neuropilin(NRP)-1、NRP-2的mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测VEGFR家族蛋白质的表达,同时免疫荧光法定位VEGFR家族在HaCaT细胞中的表达情况.结果 RT-PCR发现VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3及NRP-1、NRP-2 mRNA在HaCaT细胞中均有表达;蛋白免疫印迹发现VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3蛋白质相对分子质量均为180 000,NRP-1、NRP-2为140 000.HaCaT细胞膜及细胞质内检测到较强的VEGFR家族荧光信号,以细胞膜表达为强.结论 在mRNA及蛋白质水平,HaCaT细胞均表达VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3及NRP-1、NRP-2.
作者:杨晓红;满孝勇;卜璋于;蔡绥勍;郑敏 刊期: 2007年第05期
目的 探讨沙眼衣原体omp1基因VS1-VS2序列基因分型和VS1-VS2基因突变率.方法 巢式PCR扩增omp1基因的VS1-VS2序列,自动测序仪测序,运用DNAstar软件进行临床菌株与标准菌株序列的比对.结果 99株临床标本分离株扩增出约453 bp大小的VS1-VS2片段.与标准株比对,除3株测序出现双峰无法确定基因型外,96株菌株分为9个型,以F型29株(30.2%)、E型22株(22.9%)、J型19株(19.8%)、D型12株(12.5%)和H型8株(8.3%)为主.序列分析发现7株存在VS1区碱基的突变或插入,多为有义突变,突变率为7.3%,多见于D、E、F和H型.结论 沙眼衣原体omp1基因序列分析在分子流行病学上具有一定意义.
作者:郑和平;江丽芳;方丹云;吴兴中;李燕娃;许刚;薛耀华;冯占芹;吴亚安;黄进梅 刊期: 2007年第05期