许雪宁；李秀清；钱易；周文斌；刘晓安
目的:从普通血液和生化指标中寻找与维持性血液透析患者难治性高血压(treatment resistant hypertension,TRH)相关的危险因素,为透析患者的高血压治疗提供帮助.方法:2009年12月-2015年6月在南京医科大学第一附属医院行规律血液透析的高血压患者174例,其中病例组TRH患者69例,对照组非TRH患者105例.采用Logistic回归分析,寻找与TRH相关的危险因素.结果:两组患者性别、肌酐水平和透析时长上差异无统计学意义.病例组平均年龄、尿酸、血白细胞、天门冬氨酸氨基转移酶(aspertate aminotransferace,AST)、谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyl transferase,GGT)和腺苷脱氨酶(adenosine deami-nase,ADA)水平均显著低于对照组;而病例组血清钙和白蛋白(albumin,ALB)显著高于对照组.单因素Logistic回归显示:年龄＜40岁(OR:3.350,P=0.010)、GGT＜20 U/L (OR:2.554,P=0.024)、10 U/L≤AST＜15 U/L (OR:2.499,P=0.011)、ADA＜12 U/L(OR:2.259,P=0.044)是透析患者TRH的危险因素;ALB＜ 41 g/L是保护因素(OR:0.298,P=0.002).逐步法多因素Logistic回归分析显示:A LB水平与TRH呈正相关(OR:1.130,P=0.002),ADA水平与TRH呈负相关(OR:0.900,P=0.027).结论:年龄＜40岁、血清GGT＜20 U/L、10≤AST＜15 U/L和ADA＜12 U/L是维持性血液透析患者TRH的危险因素,而血清ADA降低和血清ALB升高是TRH的独立危险因素.
作者：曹欢；张承宁；盛燕辉；孔祥清；孙伟 刊期： 2017年第09期
目的:观察蟾蜍灵对体外庆大霉素诱导的大鼠肾小管上皮细胞自噬的影响.方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞,分为正常对照组、庆大霉素组(2 mg/mL)、蟾蜍灵组(1×10-8 mol/L)、庆大霉素+蟾蜍灵组(庆大霉素2 mg/mL+蟾蜍灵1×10-8 mol/L).应用透射电镜观察各组大鼠肾小管上皮细胞的自噬水平;Western blot检测庆大霉素及蟾蜍灵对肾小管上皮细胞自噬标志蛋白LC3Ⅱ、P62及肾损伤分子1(kindey injury molecule-1,KIM1)表达的影响.结果:透射电镜下观察:与对照组相比,庆大霉素组自噬相关形态指标自噬体、自噬泡等数量明显增加;蟾蜍灵干预后,细胞自噬体数量较庆大霉素组明显减少.Western blot结果显示,与对照组相比,庆大霉素组自噬标志蛋白LC3Ⅱ、P62、KIM1的蛋白相对表达量均升高(P＜0.05),蟾蜍灵干预后,LC3Ⅱ、P62及KIM1蛋白相对表达量较庆大霉素组下降(P＜0.05).结论:庆大霉素可促进大鼠肾小管上皮细胞发生自噬、提高KIM1蛋白的表达;蟾蜍灵可部分缓解庆大霉素诱导的肾小管上皮细胞自噬的增加及KIM1蛋白表达量的提高,提示这可能是其发挥肾脏保护作用的机制之一.
作者：丁玲；施会敏；张爱青；甘卫华 刊期： 2017年第09期
目的:研究RNPC1对乳腺癌细胞MCF-7阿霉素药物敏感性的影响.方法:在MCF-7细胞中使用慢病毒转染法,设敲除(shRNPC1)组和过表达RNPC1组、敲除对照(SCR)组和过表达对照(NC)组.用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组MCF-7细胞中RNPC1的mRNA和蛋白水平.以不同浓度的阿霉素处理各组MCF-7细胞,CCK-8法检测各组细胞生长抑制率.阿霉素处理各组MCF-7细胞后,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中调亡相关蛋白的表达.结果:shRNPC1组RNPC1 mRNA和蛋白相对表达量均低于SCR组,过表达RNPC1组RNPC1 mRNA及蛋白相对表达量均高于NC组(P＜0.05).阿霉素处理各组MCF-7细胞后,shRNPC1组IC50明显于低于SCR组(P,＜0.05),过表达组IC50明显高于NC组(P＜0.05).阿霉素处理各组MCF-7细胞24 h后,发现shRNPC1组凋亡率明显高于SCR组;过表达RNPC1组凋亡率显著低于NC组(P＜0.05).阿霉素处理各组MCF-7细胞24 h后,shRNPC1组抑凋亡蛋白BCL-XL、BCL-2的表达低于SCR组,促凋亡蛋白BIM和BID的表达高于SCR组;过表达RNPC1组抑凋亡蛋白BCL-CL、BCL-2的表达高于NC组,促凋亡蛋白BIM和BID的表达低于NC组.结论:RNPC1能降低乳腺癌细胞MCF-7对阿霉素的敏感性,其机制与抗细胞凋亡有关.
作者：周旭婕；吴靓；朱磊；孙茜；丁强 刊期： 2017年第09期
目的:探索3-磷酸肌醇依赖的蛋白激酶-1(3-phosphoinositide-dependent protein kinase-1,PDK1)在海马依赖的学习记忆中的作用.方法:采用Cre/Loxp系统条件性敲除了表达在背侧端脑中Emx1 (empty spiracles homeobox 1)阳性神经细胞中的PDK1,利用聚合酶链式反应及行为学实验Morris水迷宫对PDK1敲除小鼠进行研究.结果:该系统确实能敲除海马中的PDK1,且敲除后的小鼠学习记忆能力明显下降.结论:PDK1敲除后影响了小鼠的学习记忆能力,PDK1在海马介导的学习记忆过程中有重要作用.
作者：许敏；韩潇宁；杨中州；赵春杰；高隽 刊期： 2017年第09期
目的:探讨十二指肠空肠旁路术(duodenal-jejunal bypass,DJB)与十二指肠空肠吻合术(duodenal-jejunal anastomosi,DJA)对2型糖尿病治疗效果的异同及视黄醇结合蛋白4(retinol binding protein-4,RBP-4)和葡萄糖转运蛋白4(glucose trans-porter-4,GLUT-4)在其中的作用.方法:糖尿病大鼠随机分为DJA组、DJB组和假手术组,测定其手术前后体重、摄食量、空腹血糖、空腹胰岛素、RBP-4水平,评估手术前后糖代谢情况及胰岛素抵抗情况,术后第8周测定GLUT-4水平.结果:与假手术组相比,DJA组和DJB组术后空腹血糖降低,OGTT葡萄糖曲线下面积减少,胰岛素抵抗有所改善,RBP-4水平下降,骨骼肌GLUT-4水平升高.结论:DJB和DJA手术能不依赖摄食量、体重及胰岛素分泌的增加而改善糖尿病大鼠糖代谢,缓解其胰岛素抵抗状态,两者对空腹血糖的改善作用相似,但DJA手术对餐后血糖调节作用较差,可能与术后RBP-4降低、GLUT-4升高幅度不同有关.
作者：卜和美；马向华；孙婧；方达 刊期： 2017年第09期
目的:探讨琥珀酸能否促进野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型心肺小动脉间质纤维化,并初步探索其机制.方法:4～5周龄健康雄性SD大鼠30只,体重120～180 g,随机分为对照组、野百合碱(monocrotaline,MCT)组、野百合碱和琥珀酸(sue-cinic acid,SUC)联合使用组(MCT+SUC组),每组10只.MCT组和MCT+SUC组予腹腔注射MCT建造大鼠肺小动脉高压模型,MCT+SUC组继续予SUC干预4周.4周后,利用漂浮导管检测平均肺动脉压(mean pressure of pulmonary artery,mPAP)、右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)、肺动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP)和肺动脉舒张压(diastolic bloodpressure,DBP)等血流动力学指标.安乐死后取组织测定右室肥厚指数,行HE染色观察心脏和肺组织小动脉的肌化情况,Masson、天狼星红染色观测心脏和肺小动脉周围纤维化情况,Western blot和免疫组织化学检测心脏组织血管紧张素Ⅱ(an-giotensinⅡ,AngⅡ)、血小板衍生因子-BB (platelet derived growth factor,PDGF-BB)和成纤维细胞生长因子-2(《fibroblast growthfactor 2,FGF2)等蛋白表达水平.结果:MCT组、MCT+SUC组大鼠均表现食量减少、倦卧等症状,MCT+SUC组大鼠出现唇周紫绀、气促等表现较早.MCT+SUC组RVSP、mPAP、肺动脉SBP和肺动脉DBP、右室肥厚指数、心肺小动脉中层增厚程度均明显大于MCT组(P均＜0.05).HE染色显示,MCT组心肺小动脉轻度增厚,MCT+SUC组心脏小动脉壁增厚程度较MCT组更加明显,局部心肌组织炎性细胞浸润增加.天狼星红染色与Masson染色结果显示,MCT+SUC组心肺小动脉周围间质内胶原纤维异常增生,MCT组心肺小动脉周围未见胶原纤维异常增生.Western blot和免疫组织化学结果显示,MCT+SUC组和MCT组肺组织AngⅡ、PDGF-BB、FGF2蛋白表达水平变化与对照组相比均有不同程度的升高,MCT+SUC组较MCT组上升水平更加明显.结论:SUC可以促进MCT诱导的心肺小动脉间质纤维化的形成,其机制可能是上调FGF2和PDGF-BB等促纤维化的细胞因子,AngⅡ表达升高,导致心肺小动脉间质纤维化的形成.
作者：吴泽宇；石奇琪；黄河溯源；杨磊；陆梦婷；莫绪明 刊期： 2017年第09期
目的:探讨橄榄苦苷(oleuropein,OP)和丙烯醛(acrolein,ACR)对人支气管上皮样细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)内质网应激(endouplasmic reticulum stress,ERS)相关的增殖与凋亡影响的可能机制.方法:OP与ACR联合处理HBE细胞,MTT比色法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法和流式细胞检测细胞凋亡,Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA表达;雄性Sprague-Dawley大鼠经ACR腹腔注射和(或)橄榄叶提取物(o-live leaf extract,OLE)灌胃处理,取大鼠肺组织,Western blot法检测ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA表达.结果:体外实验证实ACR可以抑制HBE细胞的增殖,诱导其凋亡;联合OP处理后,ACR抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用明显受到抑制;同时,ACR上调HBE细胞中ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,联合OP可抑制GRP78和CHOP的表达;在mRNA水平上,ACR单独处理上调了ERS相关分子GRP78和CHOP的mRNA表达水平,而联合OP处理,GRP78和CHOP的mRNA水平未见明显变化;Sprague-Dawley大鼠体内实验结果与体外细胞实验基本一致.结论:ACR抑制HBE细胞增殖,促发ERS,进而诱导HBE细胞凋亡.在蛋白质翻译水平上,OP可以通过抑制ERS途径,拮抗ACR诱导的细胞凋亡效应.
作者：徐朝琪；许玉宇；姜盼；冯晴 刊期： 2017年第09期
目的:研究骨髓来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)条件培养基(mesenchymal stem cell-conditionedmedium,MSC-CM)对肝纤维化是否有治疗作用及其作用机制.方法:6周龄SD大鼠随机分为3组(n=8):模型组,治疗组,正常对照组.建立四氯化碳(CCLJ4)诱导大鼠肝纤维化模型,腹腔注射CCL4,1.5 mL/kg,每周2次,持续8周.MSC培养至3～5代用于MSC-CM的制备,获取的MSC-CM并超滤浓缩约25倍,过滤除菌.在实验第5周起,治疗组经尾静脉注射2 mg/kg MSC-CM,每天1次至第8周末,同时模型组和正常组注射相同剂量的L-DMEM.至实验终点,按照原位灌注和密度梯度离心法提取肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC),并留取肝组织行病理学检查.通过Masson染色和免疫组织化学染色法来检测胶原纤维沉积的程度和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达程度;qRT-PCR和Western blot检测HSCs中α-SMA、转化生长因子β1 (transforming growth factor β1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteina-ses-2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2 (tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)mRNA和蛋白的表达水平.结果:MSC-CM治疗组肝脏炎症程度较模型组减轻,胶原纤维和α-SMA表达量均较模型组明显降低(P＜0.05),但未达到正常组水平(P＜0.05).治疗组HSC中TGF-β1、α-SMA、Collagen Ⅰ mRNA和蛋白表达水平较模型组明显下降(P＜0.05),MMP-2 mRNA表达水平较模型组升高(P＜0.05).结论:静脉注射MSC-CM对CCLJ4诱导的肝纤维化有一定治疗作用,这一过程可能与MSC-CM能降低TGF-β1的表达、抑制HSC活化及促进胶原蛋白降解有关.
作者：郭圆圆；樊圆圆；张永婷；王瑜；王媛慧；蔡洁；李军；章莉莉 刊期： 2017年第09期
目的:探讨肿瘤特异性蛋白70(tumor specific protein 70,SP70)在乳腺肿瘤组织及血液中的表达情况及其对乳腺肿瘤良恶性鉴别的意义.方法:乳腺肿瘤患者125例(乳腺癌65例、良性病变60例),免疫组化法检测切片中SP70的表达.ELISA检测120例乳腺肿瘤患者(58例乳腺癌、62例乳腺良性疾病)和60例健康体检者血清中SP70蛋白的水平.结果:SP70在乳腺癌组织中的表达阳性率(55.38％)高于乳腺良性病变(15.00％),差异有统计学意义(x2=23.846,P＜0.001).乳腺癌患者血清中SP70的水平显著高于乳腺良性疾病患者和健康对照,差异有统计学意义(F=11.884,P＜0.001).SP70在血清中的敏感性高于CA153(53.45％ vs.44.82％),且血清中SP70和CA153的表达无显著相关性(r=0.132,P=0.324),两者联合能够明显提高检测敏感性(84.38％).结论:检测乳腺肿瘤组织和血液中SP70的表达对其良恶性的鉴别有重要临床价值.
作者：浦春；秦明明；刘夏；王文军；顾春荣；徐建；王悦；刘京萍；顾敏；朱娟娟；潘世扬 刊期： 2017年第09期
目的:探讨脑卒中前蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)对于光诱导血栓形成性脑缺血模型小鼠行为学缺陷的作用.方法:通过微量给药系统将腺相关病毒AAV-CAG-EGFP-Cre(2μL)注射至HDAC2~鼠的运动皮层用以敲减HDAC2,通过免疫荧光以及免疫印迹(Western blot)分析确证病毒AAV-CAG-EGFP-Cre与对照病毒AAV-CAG-EGFP的表达.7d后进行光诱导血栓形成性脑缺血造模,并于造模前第3天以及造模后第8天采用网格实验和圆筒实验分别检测造模前后AAV-CAG-EGFP-Cre组与AAV-CAG-EGFP组行为学的改变.结果:病毒AAV-CAG-EGFP-Cre相较于对照AAV-CAG-EGFP能特异性地敲减HDAC2,免疫荧光表现为GFP与HDAC2双阳性细胞数减少,Western blot显示针孔周围区HDAC2表达水平降低(P＜0.05).脑缺血前后的行为学检测表明病毒干预后,HDAC2的下调对缺血前行为学无影响,但显著降低了脑缺血后网格实验的失足率(P＜0.001)与圆筒实验的不对称指数(P＜0.001),促进了行为学改善.结论:脑卒中前通过重组病毒敲减HDAC2,可以改善脑卒中后小鼠行为学缺陷.
作者：袁红瑾；林瑜辉；董健；朱东亚 刊期： 2017年第09期
目的:构建中空介孔二氧化硅纳米(hollow mesoporous silica nanoparticles,HMSN)复合载药系统靶向作用于卵巢癌细胞,评估此复合药物运载系统的作用,探究胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor receptor,IGF-1R)特异性抑制剂NVP通过HMSN运载系统联合阿霉素(doxorubicin,DOX)对卵巢癌的治疗效果.方法:在HMSN表面修饰羧基,通过机械搅拌和静电吸引作用包载DOX和荧光NVP构建HMSN复合载药系统;采用透射电镜、红外光谱仪、Zeta电位等方法表征此载药系统;检测HMSN载药系统中DOX和荧光NVP在不同pH值环境中的释放率;通过荧光共聚焦显微镜观察药物运载系统不同时间点在细胞中的聚集情况;将实验分为HMSN-DOX-NVP组、HMSN-DOX组和游离对照组,分别作用于卵巢癌SKOV-3细胞株,MTT法检测3组细胞的抑制率,并通过流式细胞仪检测3组细胞的凋亡率.结果:HMSN在修饰羧基之前所带电荷为-22.3 mV,在其表面修饰羧基后,HMSN所带负电荷增多至-44.9 mV;HMSN负载药物后,其形态和粒径均未发生改变;HMSN复合载药系统所处环境的pH值逐渐降低时,DOX和荧光NVP的释放率逐渐升高;HMSN-DOX-NVP及HMSN-DOX可在细胞中聚集,并可随着作用时间的延长逐渐渗透进入胞核释放药物.HMSN-DOX-NVP组的细胞凋亡率和抑制率均高于HMSN-DOX组和游离对照组(P＜0.05).结论:HMSN复合载药系统通过非特异性的内吞途径可以良好聚集在胞中释放药物并可保证药物活性,NVP联合DOX可提高DOX对卵巢癌细胞的杀伤率并实现针对IGF-1R的靶向抑制.
作者：郭欣；蔡云朗；任慕兰 刊期： 2017年第09期
目的:观察套扎器辅助性内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)治疗胃底固有肌层胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)的效果.方法:选取35例经超声内镜检查诊断来源胃底固有肌层的GIST病例,瘤体直径0.5～1.3 cm,实验组17例以7连环套扎器行内镜下GIST套扎,套扎后用超声内镜证实GIST完整套入圈套中,再行ESD;对照组18例直接行ESD治疗.结果:35例患者均一次性顺利完整切除病变,两组在手术耗时、术中出血量方面差异有统计学意义(P＜0.05),所有患者接受随访3 ～24个月,未见病灶残留和复发.结论:套扎器辅助性ESD在胃底GIST切除中,方法简便、安全、有效,并发症少,值得临床广泛应用.
作者：仇建伟；钱俊波；王亚民；樊锦河；赵程进 刊期： 2017年第09期
目的:利用医学研究常用ICR品系小鼠,在建立窦状卵泡体外培养体系的基础上,研究黄体生成素(luteinizing hor-mone,LH)与表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导卵母细胞体外成熟及排卵的作用.方法:体外剥离得到大的窦状卵泡用于培养并建立适宜于研究诱导卵母细胞成熟及排卵的窦状卵泡体外培养模型,通过向培养液中添加LH和EGF诱导卵母细胞体外成熟与排卵.结果:成功构建了ICR小鼠窦状卵泡体外培养模型,发现LH或EGF单独处理均可诱导卵泡卵母细胞成熟和卵丘扩展,而两者共同作用才能够诱导卵泡体外排卵.结论:LH/EGF促进ICR小鼠窦状卵泡卵母细胞体外成熟与排卵.
作者：尹耀学；苏友强 刊期： 2017年第09期
目的:评价新型Y型125I粒子金属支架治疗全胃切除术后食管-空肠吻合口狭窄的可行性、安全性和疗效.方法:回顾分析了东南大学附属中大医院2014年8月-2015年5月收治的6例胃癌术后食道-空肠吻合口狭窄患者的临床及影像学资料.首先根据吻合口狭窄的特殊解剖结构病变特点,设计新型Y型125I金属支架治疗.然后在数字减影血管造影(digitalsubtraction angiography,DSA)下置入新型Y型125I粒子金属支架,并于支架置入后行上消化道造影检查,观察支架通畅情况.终随访4～18个月,观察患者进食情况.结果:6例患者均一次性成功置入支架,所有患者术后恶心、呕吐及腹胀症状缓解,生活质量均有所提高,无出血、吻合口瘘等并发症发生.术后所有患者均获得完整随访,其中1例患者于支架置入术后5个月死于肺炎;余5例患者生活质量明显提高.结论:通过研究发现Y型125I金属支架不仅可以扩张吻合口狭窄段、解决单管状支架仅能解除输出袢而牺牲输入袢的不良后果,而且能通过携带的125I粒子对吻合口局部复发的肿瘤进行持续低剂量的γ射线治疗.该技术可行,近期疗效可靠,值得进一步推广应用,但尚需大样本随机对照研究进一步验证.
作者：王俊英；朱光宇；郭金和 刊期： 2017年第09期
目的:探讨胸苷激酶1 (thymidine kinase 1,TK1)、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)及糖链抗原199 (carbo-hydrate antigen 19-9,CA199)检测在结肠癌诊断中的应用价值.方法:选取2015年2月-2016年10月在皖南医学院附属马鞍山市中心医院接受治疗的结肠癌患者为研究对象,同时选取同期接受治疗的结肠息肉患者为对照.观察两组TK1、CEA、CA199表达情况,比较不同临床病理特征结肠癌患者TK1、CEA、CA199的表达情况,并分析影响结肠癌患者TK1、CEA、CA199表达情况的因素.结果:结肠癌患者TK1、CEA、CA199阳性表达率明显高于结肠息肉患者(P＜0.001);有淋巴结转移、组织学分型为管腺癌、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、肿瘤直径≥5 cm的结肠癌患者的TK1、CEA、CA199阳性表达率较高,而不同年龄、性别的结肠癌患者TK1、CEA、CA199阳性表达率无明显差别;将单因素分析有意义的淋巴结转移情况、组织学分型、TNM分期和肿瘤大小作为自变量,将结肠癌患者TK1、CEA、CA199表达情况作为因变量,进行多因素Logistic回归分析,结果淋巴结转移情况和TNM分期是影响结肠癌患者TK1、CEA、CA199表达情况的因素.结论:结肠癌患者的TK1、CEA、CA199阳性表达率较高,且与患者的淋巴结转移情况和TNM分期密切相关.
作者：王敏；孙亮 刊期： 2017年第09期
目的:比较微创经椎间孔椎体间融合术(minimally invasive transforaminal lumbar interbody fusion,MIS-TLIF)使用与未使用低剂量重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenic protein 2,rhBMP-2)治疗腰椎退变性疾病术后的影像学指标、临床疗效.方法:纳入2013年3月-2016年2月应用MIS-TLIF手术治疗的52例腰椎退变性疾病患者,回顾性分析两组患者的临床资料.结果:共纳入52例患者,其中未使用rhBMP-2(非BMP组)27例,使用rhBMP-2(BMP组)25例.术后两组Oswestry功能障碍指数、健康检查简表(SF-36)评分、腰痛及腿痛视觉模拟评分均无显著差异(P＞0.05).BMP组术后融合率高于非BMP组(P＜0.05).BMP组的cage沉降程度高于非BMP组(P＜0.05).结论:尽管使用rhBMP-2可能会导致cage沉降程度增加,但低剂量rhBMP-2能够有效提高MIS-TLIF术后椎间融合率.
作者：杨小政；任永信；朱翔；车荟；马成；殷国勇 刊期： 2017年第09期
目的:探讨miRNA-181a对l-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)诱导的帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)多巴胺能神经元损伤的影响及其相关机制.方法:采用胎龄12.5 d的C57BL/6小鼠胚胎中脑进行多巴胺能神经元原代培养,依据不同处理方法分为4组:①空白对照(Control)组;②PD模型(MPP+)组;③阴性对照(miRNA-NC+MPP+)组;④miRNA-181a+MPP+组.酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxlase,TH)可以选择性标记多巴胺能神经元,因此采用荧光显微镜对各组TH染色阳性神经元数目、初级突触分枝及长突触长度进行观察,分析各组之间的差异.结果:Control组多巴胺能神经元细胞体积较大,呈圆形或三角形,胞体发出1个、2个或多个长的分枝以及轴突发出的次级突起,胞体和轴突表面光滑,形态完整,神经元分枝之间相互交织呈网络,联系密切.miRNA-NC+MPP+组经Mpp+作用后多巴胺能神经元的数量减少,绝大多数表现为胞体存在,分枝数目及长突触长度明显减少,网状交织稀少,表面不光滑,有的呈串珠样肿胀或轴突中断、丢失,仅存胞体,少数也表现为胞体空虚、丢失,仅存突起.miRNA-181a+MPP+组较miRNA-NC+MPP+组多巴胺能神经元数目有所增加,胞体形态较好,分枝数目与长突触长度较miRNA-NC+MPP+组有所改善,且表面较光滑,神经元死亡程度较低.结论:miRNA-181a对Mpp+所致多巴胺能神经元损伤起到神经保护作用.
作者：孔程程；杨文平；华建；刘妍；丁海霞 刊期： 2017年第09期
目的:探究二叶式主动脉瓣中miRNA-195调控瓣膜钙化的可能机制.方法:收集35例接受主动脉瓣置换术患者狭窄的二叶式或三叶式主动脉瓣,通过PCR及Western blot分别检测miRNA-195的表达量、果蝇母源抗皮肤生长因子(drosophilamothers against decapentaplegic 7,SMAD7)的mRNA及蛋白表达量.双荧光素酶法预测miRNA-195的靶基因.在猪瓣膜间质细胞中分别沉默和过表达miRNA-195,检测SMAD7的mRNA表达水平并探究两者的相互关系.在人类瓣膜组织上通过免疫组化染色检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9蛋白水平,通过天狼星红染色检测胶原蛋白水平,通过VonKossa染色比较钙化程度差异,进而研究钙化相关的功能改变.结果:与狭窄的三叶式主动脉瓣相比,狭窄的二叶式主动脉瓣中miRNA-195表达降低,SMAD7的mRNA和蛋白水平升高.双荧光素酶实验提示SMAD7是miRNA-195的直接靶标.在猪瓣膜间质细胞中沉默miRNA-195引起SMAD7 mRNA水平升高,过表达miRNA-195引起SMAD7 mRNA水平降低.狭窄钙化的二叶式主动脉瓣组织中MMP-2、MMP-9及胶原的表达较狭窄钙化的三叶式主动脉瓣升高.结论:在二叶式主动脉瓣中,下调的miR-NA-195促进了SMAD7表达,进而促进细胞外基质的纤维化并终促进其钙化.
作者：郑蕤；堵俊杰；何珂帅；邵永丰 刊期： 2017年第09期
目的:观察甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)对原代小胶质细胞的损伤及炎性相关基因表达的影响.方法:原代培养SD胎鼠小胶质细胞,利用MTT和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)分别检测Meth引起小胶质细胞活力和凋亡的变化.采用实时荧光定量聚合酶链反应法(real-time PCR)观察Meth对小胶质细胞炎性相关因子mRNA表达的影响.ELISA及试剂盒法检测Meth作用后小胶质细胞白介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、诱导型一氧化氮合酶(induciblenitric oxide synthase,iNOS)的分泌改变.结果:MTT实验显示,Meth降低小胶质细胞活力,呈浓度依赖性,浓度为200 μmol/L时与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).TUNEL实验结果显示200 μmol/L Meth可引起细胞凋亡,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).q-PCR结果显示Meth作用于小胶质细胞24 h可降低IL-24、一氧化氮合酶3(nitric oxide synthase 3,NOS3)表达水平,上调Peli3、Sigma受体1(Sigma receptor 1,Sig1-R)、IL-1β、IL-6、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)的表达水平,差异有统计学意义(P＜0.05).此外,蛋白水平亦发现,Meth可促进IL-6和TNF-α的分泌.结论:Meth可降低小胶质细胞活力,诱导小胶质细胞凋亡,并引起IL-1β、IL-1R、IL-6、TLR4等炎性因子mRNA表达变化,促进IL-6和TNF-α的分泌,进而可能损伤中枢神经系统,产生神经毒性.
作者：程洁；蒋雷；环飞；黄雨蒙；王军 刊期： 2017年第09期
目的:明胶-聚苯胺接枝共聚物(gelatin-graft-polyaniline,GP)导电水凝胶的制备和性能研究.方法:采用直接掺杂法制作GP,使用樟脑磺酸(camphor sulfonic acid,CSA)作为掺杂剂.GP溶于水形成导电水凝胶(gelatin-graft-polyaniline hydrogel,GPH),以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐[1-(3-dimethylaminoproply)-3-ethylcarbodiimide,EDC]进行交联.对制备的GP和GPH的形态结构、生物相容性、溶解性、溶胀比和导电性能进行观察研究.结果:GPH导电性能良好(l×104～1×103 S/cm),并随着苯胺含量的增大而增大.但当苯胺的量提高到一定程度,通过明胶共聚获得的GPH溶解性大大降低,同时溶胀比增加.结论:GPH是一种新型的可降解生物材料,具有良好的导电性能,作为支架在组织工程修复中有巨大的应用前景.
作者：吴天一；卜寿山；庄海；尤莹；张继生；许扬 刊期： 2017年第09期
南京医科大学学报（自然科学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：南京医科大学
