学术投稿

肿瘤特异性蛋白70用于乳腺肿瘤良恶性鉴别

浦春;秦明明;刘夏;王文军;顾春荣;徐建;王悦;刘京萍;顾敏;朱娟娟;潘世扬

关键词:肿瘤特异性蛋白70, 乳腺肿瘤, 鉴别诊断
摘要:目的:探讨肿瘤特异性蛋白70(tumor specific protein 70,SP70)在乳腺肿瘤组织及血液中的表达情况及其对乳腺肿瘤良恶性鉴别的意义.方法:乳腺肿瘤患者125例(乳腺癌65例、良性病变60例),免疫组化法检测切片中SP70的表达.ELISA检测120例乳腺肿瘤患者(58例乳腺癌、62例乳腺良性疾病)和60例健康体检者血清中SP70蛋白的水平.结果:SP70在乳腺癌组织中的表达阳性率(55.38%)高于乳腺良性病变(15.00%),差异有统计学意义(x2=23.846,P<0.001).乳腺癌患者血清中SP70的水平显著高于乳腺良性疾病患者和健康对照,差异有统计学意义(F=11.884,P<0.001).SP70在血清中的敏感性高于CA153(53.45% vs.44.82%),且血清中SP70和CA153的表达无显著相关性(r=0.132,P=0.324),两者联合能够明显提高检测敏感性(84.38%).结论:检测乳腺肿瘤组织和血液中SP70的表达对其良恶性的鉴别有重要临床价值.
南京医科大学学报(自然科学版)杂志相关文献
  • PIED治疗髓核游离型椎间盘突出的手术策略和临床疗效

    目的:评价椎间孔镜下经椎板间入路椎间盘摘除术(percutaneous interlaminar endoscopic discectomy,PIED)治疗髓核游离型椎间盘突出的疗效.方法:2014年1月-2015年12月接受PIED手术治疗髓核游离型椎间盘突出患者11例,并获得完整随访资料,随访时间为1年,通过术前、术后1d、术后1年的视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability inde,ODI)及改良MacNab标准评价患者术后腰腿痛改善情况以及术前术后腰椎MRI对比评价髓核摘除效果及复发情况.结果:11例患者手术成功率为100%.术前腰痛VAS(7.00±1.00)分,术后1d疼痛明显缓解,VAS(0.55±0.52)分,术后1年VAS(0.36±0.50)分;术前平均ODI为(58.55±6.07)%,术后1 d(4.54±2.25)%,术后1年为(1.09±1.04)%;改良Macnab标准评估手术总体结果,所有患者接受手术后症状均基本缓解,恢复了正常工作与生活,优良率达到100%;术后游离的髓核均被完全摘除,无复发椎间盘突出者.结论:PIED能有效治疗髓核游离型椎间盘突出,标准的PIED手术可以获得满意的治疗效果.

    作者:朱翔;杨小政;陈赢;车荟;马成;任永信 刊期: 2017年第09期

  • 血清miRNA-181a在帕金森病中神经保护作用及机制分析

    目的:探讨miRNA-181a对l-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)诱导的帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)多巴胺能神经元损伤的影响及其相关机制.方法:采用胎龄12.5 d的C57BL/6小鼠胚胎中脑进行多巴胺能神经元原代培养,依据不同处理方法分为4组:①空白对照(Control)组;②PD模型(MPP+)组;③阴性对照(miRNA-NC+MPP+)组;④miRNA-181a+MPP+组.酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxlase,TH)可以选择性标记多巴胺能神经元,因此采用荧光显微镜对各组TH染色阳性神经元数目、初级突触分枝及长突触长度进行观察,分析各组之间的差异.结果:Control组多巴胺能神经元细胞体积较大,呈圆形或三角形,胞体发出1个、2个或多个长的分枝以及轴突发出的次级突起,胞体和轴突表面光滑,形态完整,神经元分枝之间相互交织呈网络,联系密切.miRNA-NC+MPP+组经Mpp+作用后多巴胺能神经元的数量减少,绝大多数表现为胞体存在,分枝数目及长突触长度明显减少,网状交织稀少,表面不光滑,有的呈串珠样肿胀或轴突中断、丢失,仅存胞体,少数也表现为胞体空虚、丢失,仅存突起.miRNA-181a+MPP+组较miRNA-NC+MPP+组多巴胺能神经元数目有所增加,胞体形态较好,分枝数目与长突触长度较miRNA-NC+MPP+组有所改善,且表面较光滑,神经元死亡程度较低.结论:miRNA-181a对Mpp+所致多巴胺能神经元损伤起到神经保护作用.

    作者:孔程程;杨文平;华建;刘妍;丁海霞 刊期: 2017年第09期

  • miRNA-200a调控FOXC1增敏肺癌EGFR-TKI治疗的研究

    目的:探究miRNA-200a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)靶向治疗疗效的影响及其调控机制.方法:通过RT-PCR、Western blot等方法检测NSCLC细胞中miRNA-200a、FOXC1的表达量;四甲基偶氮唑盐(MTR)实验、细胞划痕实验、Transwell实验分别检测miRNA-200a、FOXC1对肺腺癌细胞生长、迁移、侵袭等生物学行为的影响;荧光素酶报告实验分析FOXC1与miRNA-200a的靶向关系.结果:高表达miRNA-200a抑制肺腺癌细胞的生长、上皮间质转化、迁移、侵袭,并且增加肺腺癌细胞对吉非替尼的敏感性.此外,敲低FOXC1同样可以抑制细胞生长,恢复肺腺癌细胞对吉非替尼敏感性.结论:上调miRNA-200a或下调FOXC1可以增强NSCLC细胞对吉非替尼的敏感性.为克服表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗的耐药性提供了一种新的有效治疗方法.

    作者:尹媛;许伟;吴双双;李燕;赵卫红;吴剑卿 刊期: 2017年第09期

  • 蟾蜍灵对体外庆大霉素诱导的大鼠肾小管上皮细胞自噬的影响

    目的:观察蟾蜍灵对体外庆大霉素诱导的大鼠肾小管上皮细胞自噬的影响.方法:体外培养大鼠肾小管上皮细胞,分为正常对照组、庆大霉素组(2 mg/mL)、蟾蜍灵组(1×10-8 mol/L)、庆大霉素+蟾蜍灵组(庆大霉素2 mg/mL+蟾蜍灵1×10-8 mol/L).应用透射电镜观察各组大鼠肾小管上皮细胞的自噬水平;Western blot检测庆大霉素及蟾蜍灵对肾小管上皮细胞自噬标志蛋白LC3Ⅱ、P62及肾损伤分子1(kindey injury molecule-1,KIM1)表达的影响.结果:透射电镜下观察:与对照组相比,庆大霉素组自噬相关形态指标自噬体、自噬泡等数量明显增加;蟾蜍灵干预后,细胞自噬体数量较庆大霉素组明显减少.Western blot结果显示,与对照组相比,庆大霉素组自噬标志蛋白LC3Ⅱ、P62、KIM1的蛋白相对表达量均升高(P<0.05),蟾蜍灵干预后,LC3Ⅱ、P62及KIM1蛋白相对表达量较庆大霉素组下降(P<0.05).结论:庆大霉素可促进大鼠肾小管上皮细胞发生自噬、提高KIM1蛋白的表达;蟾蜍灵可部分缓解庆大霉素诱导的肾小管上皮细胞自噬的增加及KIM1蛋白表达量的提高,提示这可能是其发挥肾脏保护作用的机制之一.

    作者:丁玲;施会敏;张爱青;甘卫华 刊期: 2017年第09期

  • miRNA-146a基因多态性与肝癌易感性的meta分析

    目的:通过meta分析评价miRNA-146a rs2910164位点基因多态性与肝癌易感性之间的相关性.方法:系统地检索PubMed、Embase、Web of Science、中国知网以及中国生物医学文献数据库2017年1月30日之前发表的相关文章,用总的比值比(odd ratios,OR)及相应的95%可信区间(credibility intervals,CI)来评价miRNA-146a基因多态性与肝癌易感性之间的相关性.结果:共纳入了18项病例对照研究,包括5 657例肝癌病例与6 680例健康对照.经过统计分析未发现miRNA-146ars2910164位点的基因多态性与肝癌易感性之间存在相关性(Cvs.G:OR=0.96,95%CI=0.88~1.06;GC vs.GG:OR=0.98,95%CI=0.88~1.09;CC vs.GG:OR=0.90,95%CI=0.74~1.09;GC/CC vs.GG:OR=0.95,95%CI=0.82~1.10;CC vs.GC/GG:OR=0.95,95%CI=0.84~1.07).结论:目前没有足够证据能够证明miRNA-146a基因多态性与肝癌易感性之间存在相关性.未来有必要在大规模和设计完善的研究中加以验证.

    作者:顾丽华;黄晓丹;季国忠 刊期: 2017年第09期

  • 胰岛素通过MMP-2、7、9促进胰腺癌细胞侵袭与迁移

    目的:研究胰岛素对人胰腺癌细胞侵袭与迁移的作用及其可能机制.方法:RT-qPCR、Western blot检测胰腺癌细胞株胰岛素受体(insulin receptor,IR)的表达.CCK8检测不同浓度胰岛素刺激下胰腺癌细胞的活性并确定其适浓度;适宜浓度胰岛素刺激下,CCK8检测胰腺癌细胞增殖能力的改变;通过Transwell实验,检测胰岛素刺激条件下胰腺癌细胞侵袭与迁移能力的变化;Western blot检验胰岛素刺激后胰腺癌细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloprotease,MMP)-2、7、9的表达变化.结果:胰腺癌细胞株PANC-1和Miapaca-2的IR表达相对高(P<0.05);胰岛素浓度为100 nmol/L时,对上述两细胞活性影响大(P<0.05);胰岛素能明显促进PANC-1和Miapaca-2的增殖、迁移与侵袭(P<0.05);胰岛素刺激后胰腺癌细胞迁移与侵袭的改变可能与其MMP-2、7、9的表达增加相关(P<0.05).结论:胰岛素可能通过增强MMP-2、7、9表达促进胰腺癌细胞株PANC-1和Mia-paca-2的迁移及侵袭.

    作者:郭松;彭云鹏;陆子鹏;傅跃;尹凌帝;苗毅 刊期: 2017年第09期

  • 微创经椎间孔入路腰椎椎间融合术中使用rhBMP-2治疗腰椎退变性疾病

    目的:比较微创经椎间孔椎体间融合术(minimally invasive transforaminal lumbar interbody fusion,MIS-TLIF)使用与未使用低剂量重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenic protein 2,rhBMP-2)治疗腰椎退变性疾病术后的影像学指标、临床疗效.方法:纳入2013年3月-2016年2月应用MIS-TLIF手术治疗的52例腰椎退变性疾病患者,回顾性分析两组患者的临床资料.结果:共纳入52例患者,其中未使用rhBMP-2(非BMP组)27例,使用rhBMP-2(BMP组)25例.术后两组Oswestry功能障碍指数、健康检查简表(SF-36)评分、腰痛及腿痛视觉模拟评分均无显著差异(P>0.05).BMP组术后融合率高于非BMP组(P<0.05).BMP组的cage沉降程度高于非BMP组(P<0.05).结论:尽管使用rhBMP-2可能会导致cage沉降程度增加,但低剂量rhBMP-2能够有效提高MIS-TLIF术后椎间融合率.

    作者:杨小政;任永信;朱翔;车荟;马成;殷国勇 刊期: 2017年第09期

  • miRNA-873促进肝癌细胞的迁移与侵袭

    目的:检测miRNA-873在肝细胞肝癌组织以及细胞系中的表达情况,并进一步探讨miRNA-873对肝癌细胞迁移和侵袭的影响.方法:实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝细胞肝癌组织、癌旁组织以及细胞系中miRNA-873的表达水平.分别用划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力.蛋白质印迹(Western blot)检测Janus激酶20anuskinase 2,JAK2)和信号转导子与转录活化子3(signal transduction and transcriptional activation 3,STAT3)活性的变化.结果:肝癌组织和肝癌细胞系中miRNA-873表达水平明显高于对应的癌旁组织和正常肝脏细胞.RT-PCR证实转染miRNA-873 inhibitor或mimics后miRNA-873的表达量明显降低或升高(P<0.01).与对照组(NC)相比,敲低miRNA-873明显抑制肝癌细胞HepG2迁移和侵袭,差异有统计学意义(P<0.05).过表达miRNA-873则明显促进肝癌细胞Huh7迁移和侵袭,差异有统计学意义(P<0.05).miRNA-873可明显活化JAK2/STAT3信号通路.结论:miRNA-873在肝癌中高表达,且可能通过活化JAK2/STAT3信号通路促进肝癌的迁移与侵袭.

    作者:韩国勇;张龙;陈志强;王小微;朱勤;黄新立;王学浩 刊期: 2017年第09期

  • 间充质干细胞培养上清抑制星状细胞活化治疗肝纤维化的研究

    目的:研究骨髓来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)条件培养基(mesenchymal stem cell-conditionedmedium,MSC-CM)对肝纤维化是否有治疗作用及其作用机制.方法:6周龄SD大鼠随机分为3组(n=8):模型组,治疗组,正常对照组.建立四氯化碳(CCLJ4)诱导大鼠肝纤维化模型,腹腔注射CCL4,1.5 mL/kg,每周2次,持续8周.MSC培养至3~5代用于MSC-CM的制备,获取的MSC-CM并超滤浓缩约25倍,过滤除菌.在实验第5周起,治疗组经尾静脉注射2 mg/kg MSC-CM,每天1次至第8周末,同时模型组和正常组注射相同剂量的L-DMEM.至实验终点,按照原位灌注和密度梯度离心法提取肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC),并留取肝组织行病理学检查.通过Masson染色和免疫组织化学染色法来检测胶原纤维沉积的程度和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达程度;qRT-PCR和Western blot检测HSCs中α-SMA、转化生长因子β1 (transforming growth factor β1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteina-ses-2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2 (tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)mRNA和蛋白的表达水平.结果:MSC-CM治疗组肝脏炎症程度较模型组减轻,胶原纤维和α-SMA表达量均较模型组明显降低(P<0.05),但未达到正常组水平(P<0.05).治疗组HSC中TGF-β1、α-SMA、Collagen Ⅰ mRNA和蛋白表达水平较模型组明显下降(P<0.05),MMP-2 mRNA表达水平较模型组升高(P<0.05).结论:静脉注射MSC-CM对CCLJ4诱导的肝纤维化有一定治疗作用,这一过程可能与MSC-CM能降低TGF-β1的表达、抑制HSC活化及促进胶原蛋白降解有关.

    作者:郭圆圆;樊圆圆;张永婷;王瑜;王媛慧;蔡洁;李军;章莉莉 刊期: 2017年第09期

  • RNPC1基因对乳腺癌细胞MCF-7阿霉素药物敏感性的影响

    目的:研究RNPC1对乳腺癌细胞MCF-7阿霉素药物敏感性的影响.方法:在MCF-7细胞中使用慢病毒转染法,设敲除(shRNPC1)组和过表达RNPC1组、敲除对照(SCR)组和过表达对照(NC)组.用实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组MCF-7细胞中RNPC1的mRNA和蛋白水平.以不同浓度的阿霉素处理各组MCF-7细胞,CCK-8法检测各组细胞生长抑制率.阿霉素处理各组MCF-7细胞后,用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blot法检测各组细胞中调亡相关蛋白的表达.结果:shRNPC1组RNPC1 mRNA和蛋白相对表达量均低于SCR组,过表达RNPC1组RNPC1 mRNA及蛋白相对表达量均高于NC组(P<0.05).阿霉素处理各组MCF-7细胞后,shRNPC1组IC50明显于低于SCR组(P,<0.05),过表达组IC50明显高于NC组(P<0.05).阿霉素处理各组MCF-7细胞24 h后,发现shRNPC1组凋亡率明显高于SCR组;过表达RNPC1组凋亡率显著低于NC组(P<0.05).阿霉素处理各组MCF-7细胞24 h后,shRNPC1组抑凋亡蛋白BCL-XL、BCL-2的表达低于SCR组,促凋亡蛋白BIM和BID的表达高于SCR组;过表达RNPC1组抑凋亡蛋白BCL-CL、BCL-2的表达高于NC组,促凋亡蛋白BIM和BID的表达低于NC组.结论:RNPC1能降低乳腺癌细胞MCF-7对阿霉素的敏感性,其机制与抗细胞凋亡有关.

    作者:周旭婕;吴靓;朱磊;孙茜;丁强 刊期: 2017年第09期

  • 脑卒中前敲减HDAC2改善光照脑缺血模型小鼠的行为学缺陷

    目的:探讨脑卒中前蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)对于光诱导血栓形成性脑缺血模型小鼠行为学缺陷的作用.方法:通过微量给药系统将腺相关病毒AAV-CAG-EGFP-Cre(2μL)注射至HDAC2~鼠的运动皮层用以敲减HDAC2,通过免疫荧光以及免疫印迹(Western blot)分析确证病毒AAV-CAG-EGFP-Cre与对照病毒AAV-CAG-EGFP的表达.7d后进行光诱导血栓形成性脑缺血造模,并于造模前第3天以及造模后第8天采用网格实验和圆筒实验分别检测造模前后AAV-CAG-EGFP-Cre组与AAV-CAG-EGFP组行为学的改变.结果:病毒AAV-CAG-EGFP-Cre相较于对照AAV-CAG-EGFP能特异性地敲减HDAC2,免疫荧光表现为GFP与HDAC2双阳性细胞数减少,Western blot显示针孔周围区HDAC2表达水平降低(P<0.05).脑缺血前后的行为学检测表明病毒干预后,HDAC2的下调对缺血前行为学无影响,但显著降低了脑缺血后网格实验的失足率(P<0.001)与圆筒实验的不对称指数(P<0.001),促进了行为学改善.结论:脑卒中前通过重组病毒敲减HDAC2,可以改善脑卒中后小鼠行为学缺陷.

    作者:袁红瑾;林瑜辉;董健;朱东亚 刊期: 2017年第09期

  • TK1、CEA、CA199检测在结肠癌诊断中的应用价值

    目的:探讨胸苷激酶1 (thymidine kinase 1,TK1)、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)及糖链抗原199 (carbo-hydrate antigen 19-9,CA199)检测在结肠癌诊断中的应用价值.方法:选取2015年2月-2016年10月在皖南医学院附属马鞍山市中心医院接受治疗的结肠癌患者为研究对象,同时选取同期接受治疗的结肠息肉患者为对照.观察两组TK1、CEA、CA199表达情况,比较不同临床病理特征结肠癌患者TK1、CEA、CA199的表达情况,并分析影响结肠癌患者TK1、CEA、CA199表达情况的因素.结果:结肠癌患者TK1、CEA、CA199阳性表达率明显高于结肠息肉患者(P<0.001);有淋巴结转移、组织学分型为管腺癌、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径≥5 cm的结肠癌患者的TK1、CEA、CA199阳性表达率较高,而不同年龄、性别的结肠癌患者TK1、CEA、CA199阳性表达率无明显差别;将单因素分析有意义的淋巴结转移情况、组织学分型、TNM分期和肿瘤大小作为自变量,将结肠癌患者TK1、CEA、CA199表达情况作为因变量,进行多因素Logistic回归分析,结果淋巴结转移情况和TNM分期是影响结肠癌患者TK1、CEA、CA199表达情况的因素.结论:结肠癌患者的TK1、CEA、CA199阳性表达率较高,且与患者的淋巴结转移情况和TNM分期密切相关.

    作者:王敏;孙亮 刊期: 2017年第09期

  • 橄榄苦苷抑制丙烯醛诱导的HBE细胞内质网应激的机制研究

    目的:探讨橄榄苦苷(oleuropein,OP)和丙烯醛(acrolein,ACR)对人支气管上皮样细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)内质网应激(endouplasmic reticulum stress,ERS)相关的增殖与凋亡影响的可能机制.方法:OP与ACR联合处理HBE细胞,MTT比色法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法和流式细胞检测细胞凋亡,Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA表达;雄性Sprague-Dawley大鼠经ACR腹腔注射和(或)橄榄叶提取物(o-live leaf extract,OLE)灌胃处理,取大鼠肺组织,Western blot法检测ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA表达.结果:体外实验证实ACR可以抑制HBE细胞的增殖,诱导其凋亡;联合OP处理后,ACR抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用明显受到抑制;同时,ACR上调HBE细胞中ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,联合OP可抑制GRP78和CHOP的表达;在mRNA水平上,ACR单独处理上调了ERS相关分子GRP78和CHOP的mRNA表达水平,而联合OP处理,GRP78和CHOP的mRNA水平未见明显变化;Sprague-Dawley大鼠体内实验结果与体外细胞实验基本一致.结论:ACR抑制HBE细胞增殖,促发ERS,进而诱导HBE细胞凋亡.在蛋白质翻译水平上,OP可以通过抑制ERS途径,拮抗ACR诱导的细胞凋亡效应.

    作者:徐朝琪;许玉宇;姜盼;冯晴 刊期: 2017年第09期

  • 基于HMSN载药系统的NVP联合DOX靶向治疗卵巢癌

    目的:构建中空介孔二氧化硅纳米(hollow mesoporous silica nanoparticles,HMSN)复合载药系统靶向作用于卵巢癌细胞,评估此复合药物运载系统的作用,探究胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor receptor,IGF-1R)特异性抑制剂NVP通过HMSN运载系统联合阿霉素(doxorubicin,DOX)对卵巢癌的治疗效果.方法:在HMSN表面修饰羧基,通过机械搅拌和静电吸引作用包载DOX和荧光NVP构建HMSN复合载药系统;采用透射电镜、红外光谱仪、Zeta电位等方法表征此载药系统;检测HMSN载药系统中DOX和荧光NVP在不同pH值环境中的释放率;通过荧光共聚焦显微镜观察药物运载系统不同时间点在细胞中的聚集情况;将实验分为HMSN-DOX-NVP组、HMSN-DOX组和游离对照组,分别作用于卵巢癌SKOV-3细胞株,MTT法检测3组细胞的抑制率,并通过流式细胞仪检测3组细胞的凋亡率.结果:HMSN在修饰羧基之前所带电荷为-22.3 mV,在其表面修饰羧基后,HMSN所带负电荷增多至-44.9 mV;HMSN负载药物后,其形态和粒径均未发生改变;HMSN复合载药系统所处环境的pH值逐渐降低时,DOX和荧光NVP的释放率逐渐升高;HMSN-DOX-NVP及HMSN-DOX可在细胞中聚集,并可随着作用时间的延长逐渐渗透进入胞核释放药物.HMSN-DOX-NVP组的细胞凋亡率和抑制率均高于HMSN-DOX组和游离对照组(P<0.05).结论:HMSN复合载药系统通过非特异性的内吞途径可以良好聚集在胞中释放药物并可保证药物活性,NVP联合DOX可提高DOX对卵巢癌细胞的杀伤率并实现针对IGF-1R的靶向抑制.

    作者:郭欣;蔡云朗;任慕兰 刊期: 2017年第09期

  • 甲基苯丙胺对大鼠小胶质细胞的损伤及炎性相关基因表达的影响

    目的:观察甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)对原代小胶质细胞的损伤及炎性相关基因表达的影响.方法:原代培养SD胎鼠小胶质细胞,利用MTT和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)分别检测Meth引起小胶质细胞活力和凋亡的变化.采用实时荧光定量聚合酶链反应法(real-time PCR)观察Meth对小胶质细胞炎性相关因子mRNA表达的影响.ELISA及试剂盒法检测Meth作用后小胶质细胞白介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、诱导型一氧化氮合酶(induciblenitric oxide synthase,iNOS)的分泌改变.结果:MTT实验显示,Meth降低小胶质细胞活力,呈浓度依赖性,浓度为200 μmol/L时与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).TUNEL实验结果显示200 μmol/L Meth可引起细胞凋亡,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).q-PCR结果显示Meth作用于小胶质细胞24 h可降低IL-24、一氧化氮合酶3(nitric oxide synthase 3,NOS3)表达水平,上调Peli3、Sigma受体1(Sigma receptor 1,Sig1-R)、IL-1β、IL-6、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)的表达水平,差异有统计学意义(P<0.05).此外,蛋白水平亦发现,Meth可促进IL-6和TNF-α的分泌.结论:Meth可降低小胶质细胞活力,诱导小胶质细胞凋亡,并引起IL-1β、IL-1R、IL-6、TLR4等炎性因子mRNA表达变化,促进IL-6和TNF-α的分泌,进而可能损伤中枢神经系统,产生神经毒性.

    作者:程洁;蒋雷;环飞;黄雨蒙;王军 刊期: 2017年第09期

  • 沉默脂联素受体1对脂多糖诱导的类风湿关节炎滑膜成纤维细胞MH7A增殖凋亡的影响

    目的:观察脂联素受体1 (adiponectin receptor1,AdipoR1)沉默对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(MH7A)增殖、凋亡的影响.方法:①利用免疫荧光、Western blot鉴定并验证shRNA技术对构建的Adi-poR1沉默MH7A(sh-AdipoR1组)细胞的干扰效率;②分别用CCK8试剂盒、流式细胞仪检测LPS(100 ng/mL)对sh-AdipoR1组及空载病毒对照(sh-NC组)细胞增殖及凋亡的影响;③利用实时定量聚合酶链反应法(real-time polymerase chain reaction,real-timePCR)检测LPS对sh-AdipoR1及sh-NC组细胞中凋亡相关基因BCL-2、BCL-XL、BAX、BAK表达的影响.同时设置无LPS刺激的sh-NC、sh-AdipoR1组作为对照.结果:①荧光显微镜下可见sh-AdipoR1组细胞荧光蛋白表达效率趋近于100%,Western blot检测结果显示:与sh-NC组相比,sh-AdipoR1组AdipoR1蛋白的表达显著下降(P<0.05),表明AdipoR1沉默的细胞构建成功;②无LPS刺激情况下,sh-NC组与sh-AdipoR1组细胞增殖速率及凋亡细胞比例无明显差异;LPS刺激可显著增加sh-NC组和sh-AdipoR1组细胞相对增殖速率及凋亡细胞比例(P<0.05);在LPS作用24、48 h,sh-AdipoR1组细胞增殖速率均显著低于sh-NC组(P,<0.05),而sh-AdipoR1组细胞凋亡率显著高于sh-NC组(P<0.05);③real-time PCR结果显示,无LPS刺激情况下,sh-NC组与sh-AdipoR1组抑制凋亡基因BCL-2、BCL-XL与促进凋亡基因BAK、BAX的相对表达量均无显著差异(P>0.05);LPS刺激可降低抑凋亡基因BCL-2、BCL-XL表达,增加促凋亡基因BAX、BAK表达(P<0.05);在LPS诱导下与sh-NC组相比,sh-AdipoR1组抑制凋亡基因BCL-2、BCL-XL表达下降,促凋亡基因BAX、BAK表达显著升高(P,<0.05).结论:AdipoR1基因的沉默可抑制LPS诱导的MH7A细胞增殖,促进细胞凋亡,并提示AdipoR1相关信号通路可能在类风湿关节炎发生发展中起到重要作用,阻断该途径可有效阻断LPS诱导的MH7A细胞炎症反应.

    作者:王娅妮;赵鹏飞;谈文峰;张缪佳 刊期: 2017年第09期

  • 肾移植患者西罗莫司的群体药代动力学模型研究

    目的:建立肾移植患者口服西罗莫司片的群体药代动力学模型,研究西罗莫司在人体内的药动学特点,为实施个体化用药提供理论支持.方法:以111例肾移植术后采用西罗莫司进行免疫抑制治疗的患者为研究对象,回顾性收集患者常规监测的西罗莫司稳态血药浓度及相应的实验室检查数据,运用Phoenix NLME药动学软件建立西罗莫司的群体药动学模型,分析影响药动学参数的因素.终模型采用Bootstrap法和可视化预测检查进行内部验证.结果:西罗莫司符合一级消除动力学一室模型.发现红细胞比容对清除率有影响,碱性磷酸酶对分布容积有影响,获得的终模型CLW值为10.8 L/h,V/F为1011L.Bootstrap验证和可视化预测检查的评价结果表明模型预测结果可靠.结论:本研究成功建立了肾移植患者西罗莫司的群体药动学模型,考察了年龄、体重、性别、合并用药以及各生化指标对模型的影响,为实现西罗莫司的临床合理用药提供参考.

    作者:张钰;张宏文;杨劲;吴延庆;谭若芸;王丽彬;刘云;王源园;魏继福;王永庆 刊期: 2017年第09期

  • 肿瘤特异性蛋白70用于乳腺肿瘤良恶性鉴别

    目的:探讨肿瘤特异性蛋白70(tumor specific protein 70,SP70)在乳腺肿瘤组织及血液中的表达情况及其对乳腺肿瘤良恶性鉴别的意义.方法:乳腺肿瘤患者125例(乳腺癌65例、良性病变60例),免疫组化法检测切片中SP70的表达.ELISA检测120例乳腺肿瘤患者(58例乳腺癌、62例乳腺良性疾病)和60例健康体检者血清中SP70蛋白的水平.结果:SP70在乳腺癌组织中的表达阳性率(55.38%)高于乳腺良性病变(15.00%),差异有统计学意义(x2=23.846,P<0.001).乳腺癌患者血清中SP70的水平显著高于乳腺良性疾病患者和健康对照,差异有统计学意义(F=11.884,P<0.001).SP70在血清中的敏感性高于CA153(53.45% vs.44.82%),且血清中SP70和CA153的表达无显著相关性(r=0.132,P=0.324),两者联合能够明显提高检测敏感性(84.38%).结论:检测乳腺肿瘤组织和血液中SP70的表达对其良恶性的鉴别有重要临床价值.

    作者:浦春;秦明明;刘夏;王文军;顾春荣;徐建;王悦;刘京萍;顾敏;朱娟娟;潘世扬 刊期: 2017年第09期

  • T1-T2双模式磁共振造影剂的制备及表征

    目的:制备能同时实现T1-T2双模式磁共振成像的Fe3O4-BSAGd纳米粒子造影剂,并对其造影性能和生物相容性进行评价,以提高磁共振造影剂对病变部位诊断的敏感性及特异性,克服单一阳性造影剂和阴性造影剂的局限性,实现疾病的精准诊断.方法:采用高温热解法制备出油溶性粒径约6 nm的超顺磁性Fe3O4纳米粒子,随后利用超声乳化方式在其表面修饰顺磁性牛血清白蛋白-钆复合物(BSAGd),同时赋予Fe3O4纳米粒子顺磁性、水溶性和良好的生物相容性.并对其形貌、水合粒径(hy-drated diameter,HD)、饱和磁化强度、弛豫效率(relaxation efficiency,r)、体外T1和T2加权成像效果、细胞毒性进行了表征.结果:Fe3O4-BSAGd纳米颗粒径为10 nm,水合粒径约32 nm,分散均匀稳定.Fe3O4-BSAGd的饱和磁化强度为30.2 emu/g.纵向(r1)及横向(r2)弛豫率分别为6.30 mM-1g-1和287.08 mM-1s-1.体外双模式成像结果显示其具有显著的T1-T2成像效果,并呈现浓度依赖性.细胞毒性测试结果显示,Fe3O4-BSAGd的生物相容性较好.结论:所制备的Fe3O4-BSAGd纳米粒子的体外T1和T2造影效果优良,生物相容性极好,为下一步的体内成像奠定了基础.

    作者:苏伟;方向明 刊期: 2017年第09期

  • 新型Y型125I粒子金属支架治疗胃癌术后食管-空肠吻合口狭窄的初步研究

    目的:评价新型Y型125I粒子金属支架治疗全胃切除术后食管-空肠吻合口狭窄的可行性、安全性和疗效.方法:回顾分析了东南大学附属中大医院2014年8月-2015年5月收治的6例胃癌术后食道-空肠吻合口狭窄患者的临床及影像学资料.首先根据吻合口狭窄的特殊解剖结构病变特点,设计新型Y型125I金属支架治疗.然后在数字减影血管造影(digitalsubtraction angiography,DSA)下置入新型Y型125I粒子金属支架,并于支架置入后行上消化道造影检查,观察支架通畅情况.终随访4~18个月,观察患者进食情况.结果:6例患者均一次性成功置入支架,所有患者术后恶心、呕吐及腹胀症状缓解,生活质量均有所提高,无出血、吻合口瘘等并发症发生.术后所有患者均获得完整随访,其中1例患者于支架置入术后5个月死于肺炎;余5例患者生活质量明显提高.结论:通过研究发现Y型125I金属支架不仅可以扩张吻合口狭窄段、解决单管状支架仅能解除输出袢而牺牲输入袢的不良后果,而且能通过携带的125I粒子对吻合口局部复发的肿瘤进行持续低剂量的γ射线治疗.该技术可行,近期疗效可靠,值得进一步推广应用,但尚需大样本随机对照研究进一步验证.

    作者:王俊英;朱光宇;郭金和 刊期: 2017年第09期

南京医科大学学报(自然科学版)杂志

南京医科大学学报(自然科学版)杂志

主管:江苏省教育厅

主办:南京医科大学