杨小政；任永信；朱翔；车荟；马成；殷国勇
目的:探讨琥珀酸能否促进野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠模型心肺小动脉间质纤维化,并初步探索其机制.方法:4～5周龄健康雄性SD大鼠30只,体重120～180 g,随机分为对照组、野百合碱(monocrotaline,MCT)组、野百合碱和琥珀酸(sue-cinic acid,SUC)联合使用组(MCT+SUC组),每组10只.MCT组和MCT+SUC组予腹腔注射MCT建造大鼠肺小动脉高压模型,MCT+SUC组继续予SUC干预4周.4周后,利用漂浮导管检测平均肺动脉压(mean pressure of pulmonary artery,mPAP)、右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)、肺动脉收缩压(systolic blood pressure,SBP)和肺动脉舒张压(diastolic bloodpressure,DBP)等血流动力学指标.安乐死后取组织测定右室肥厚指数,行HE染色观察心脏和肺组织小动脉的肌化情况,Masson、天狼星红染色观测心脏和肺小动脉周围纤维化情况,Western blot和免疫组织化学检测心脏组织血管紧张素Ⅱ(an-giotensinⅡ,AngⅡ)、血小板衍生因子-BB (platelet derived growth factor,PDGF-BB)和成纤维细胞生长因子-2(《fibroblast growthfactor 2,FGF2)等蛋白表达水平.结果:MCT组、MCT+SUC组大鼠均表现食量减少、倦卧等症状,MCT+SUC组大鼠出现唇周紫绀、气促等表现较早.MCT+SUC组RVSP、mPAP、肺动脉SBP和肺动脉DBP、右室肥厚指数、心肺小动脉中层增厚程度均明显大于MCT组(P均＜0.05).HE染色显示,MCT组心肺小动脉轻度增厚,MCT+SUC组心脏小动脉壁增厚程度较MCT组更加明显,局部心肌组织炎性细胞浸润增加.天狼星红染色与Masson染色结果显示,MCT+SUC组心肺小动脉周围间质内胶原纤维异常增生,MCT组心肺小动脉周围未见胶原纤维异常增生.Western blot和免疫组织化学结果显示,MCT+SUC组和MCT组肺组织AngⅡ、PDGF-BB、FGF2蛋白表达水平变化与对照组相比均有不同程度的升高,MCT+SUC组较MCT组上升水平更加明显.结论:SUC可以促进MCT诱导的心肺小动脉间质纤维化的形成,其机制可能是上调FGF2和PDGF-BB等促纤维化的细胞因子,AngⅡ表达升高,导致心肺小动脉间质纤维化的形成.
作者：吴泽宇；石奇琪；黄河溯源；杨磊；陆梦婷；莫绪明 刊期： 2017年第09期
目的:研究胰岛素对人胰腺癌细胞侵袭与迁移的作用及其可能机制.方法:RT-qPCR、Western blot检测胰腺癌细胞株胰岛素受体(insulin receptor,IR)的表达.CCK8检测不同浓度胰岛素刺激下胰腺癌细胞的活性并确定其适浓度;适宜浓度胰岛素刺激下,CCK8检测胰腺癌细胞增殖能力的改变;通过Transwell实验,检测胰岛素刺激条件下胰腺癌细胞侵袭与迁移能力的变化;Western blot检验胰岛素刺激后胰腺癌细胞基质金属蛋白酶(matrix metalloprotease,MMP)-2、7、9的表达变化.结果:胰腺癌细胞株PANC-1和Miapaca-2的IR表达相对高(P＜0.05);胰岛素浓度为100 nmol/L时,对上述两细胞活性影响大(P＜0.05);胰岛素能明显促进PANC-1和Miapaca-2的增殖、迁移与侵袭(P＜0.05);胰岛素刺激后胰腺癌细胞迁移与侵袭的改变可能与其MMP-2、7、9的表达增加相关(P＜0.05).结论:胰岛素可能通过增强MMP-2、7、9表达促进胰腺癌细胞株PANC-1和Mia-paca-2的迁移及侵袭.
作者：郭松；彭云鹏；陆子鹏；傅跃；尹凌帝；苗毅 刊期： 2017年第09期
目的:制备能同时实现T1-T2双模式磁共振成像的Fe3O4-BSAGd纳米粒子造影剂,并对其造影性能和生物相容性进行评价,以提高磁共振造影剂对病变部位诊断的敏感性及特异性,克服单一阳性造影剂和阴性造影剂的局限性,实现疾病的精准诊断.方法:采用高温热解法制备出油溶性粒径约6 nm的超顺磁性Fe3O4纳米粒子,随后利用超声乳化方式在其表面修饰顺磁性牛血清白蛋白-钆复合物(BSAGd),同时赋予Fe3O4纳米粒子顺磁性、水溶性和良好的生物相容性.并对其形貌、水合粒径(hy-drated diameter,HD)、饱和磁化强度、弛豫效率(relaxation efficiency,r)、体外T1和T2加权成像效果、细胞毒性进行了表征.结果:Fe3O4-BSAGd纳米颗粒径为10 nm,水合粒径约32 nm,分散均匀稳定.Fe3O4-BSAGd的饱和磁化强度为30.2 emu/g.纵向(r1)及横向(r2)弛豫率分别为6.30 mM-1g-1和287.08 mM-1s-1.体外双模式成像结果显示其具有显著的T1-T2成像效果,并呈现浓度依赖性.细胞毒性测试结果显示,Fe3O4-BSAGd的生物相容性较好.结论:所制备的Fe3O4-BSAGd纳米粒子的体外T1和T2造影效果优良,生物相容性极好,为下一步的体内成像奠定了基础.
作者：苏伟；方向明 刊期： 2017年第09期
目的:建立肾移植患者口服西罗莫司片的群体药代动力学模型,研究西罗莫司在人体内的药动学特点,为实施个体化用药提供理论支持.方法:以111例肾移植术后采用西罗莫司进行免疫抑制治疗的患者为研究对象,回顾性收集患者常规监测的西罗莫司稳态血药浓度及相应的实验室检查数据,运用Phoenix NLME药动学软件建立西罗莫司的群体药动学模型,分析影响药动学参数的因素.终模型采用Bootstrap法和可视化预测检查进行内部验证.结果:西罗莫司符合一级消除动力学一室模型.发现红细胞比容对清除率有影响,碱性磷酸酶对分布容积有影响,获得的终模型CLW值为10.8 L/h,V/F为1011L.Bootstrap验证和可视化预测检查的评价结果表明模型预测结果可靠.结论:本研究成功建立了肾移植患者西罗莫司的群体药动学模型,考察了年龄、体重、性别、合并用药以及各生化指标对模型的影响,为实现西罗莫司的临床合理用药提供参考.
作者：张钰；张宏文；杨劲；吴延庆；谭若芸；王丽彬；刘云；王源园；魏继福；王永庆 刊期： 2017年第09期
目的:观察套扎器辅助性内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)治疗胃底固有肌层胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)的效果.方法:选取35例经超声内镜检查诊断来源胃底固有肌层的GIST病例,瘤体直径0.5～1.3 cm,实验组17例以7连环套扎器行内镜下GIST套扎,套扎后用超声内镜证实GIST完整套入圈套中,再行ESD;对照组18例直接行ESD治疗.结果:35例患者均一次性顺利完整切除病变,两组在手术耗时、术中出血量方面差异有统计学意义(P＜0.05),所有患者接受随访3 ～24个月,未见病灶残留和复发.结论:套扎器辅助性ESD在胃底GIST切除中,方法简便、安全、有效,并发症少,值得临床广泛应用.
作者：仇建伟；钱俊波；王亚民；樊锦河；赵程进 刊期： 2017年第09期
目的:观察脂联素受体1 (adiponectin receptor1,AdipoR1)沉默对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞(MH7A)增殖、凋亡的影响.方法:①利用免疫荧光、Western blot鉴定并验证shRNA技术对构建的Adi-poR1沉默MH7A(sh-AdipoR1组)细胞的干扰效率;②分别用CCK8试剂盒、流式细胞仪检测LPS(100 ng/mL)对sh-AdipoR1组及空载病毒对照(sh-NC组)细胞增殖及凋亡的影响;③利用实时定量聚合酶链反应法(real-time polymerase chain reaction,real-timePCR)检测LPS对sh-AdipoR1及sh-NC组细胞中凋亡相关基因BCL-2、BCL-XL、BAX、BAK表达的影响.同时设置无LPS刺激的sh-NC、sh-AdipoR1组作为对照.结果:①荧光显微镜下可见sh-AdipoR1组细胞荧光蛋白表达效率趋近于100％,Western blot检测结果显示:与sh-NC组相比,sh-AdipoR1组AdipoR1蛋白的表达显著下降(P＜0.05),表明AdipoR1沉默的细胞构建成功;②无LPS刺激情况下,sh-NC组与sh-AdipoR1组细胞增殖速率及凋亡细胞比例无明显差异;LPS刺激可显著增加sh-NC组和sh-AdipoR1组细胞相对增殖速率及凋亡细胞比例(P＜0.05);在LPS作用24、48 h,sh-AdipoR1组细胞增殖速率均显著低于sh-NC组(P,＜0.05),而sh-AdipoR1组细胞凋亡率显著高于sh-NC组(P＜0.05);③real-time PCR结果显示,无LPS刺激情况下,sh-NC组与sh-AdipoR1组抑制凋亡基因BCL-2、BCL-XL与促进凋亡基因BAK、BAX的相对表达量均无显著差异(P＞0.05);LPS刺激可降低抑凋亡基因BCL-2、BCL-XL表达,增加促凋亡基因BAX、BAK表达(P＜0.05);在LPS诱导下与sh-NC组相比,sh-AdipoR1组抑制凋亡基因BCL-2、BCL-XL表达下降,促凋亡基因BAX、BAK表达显著升高(P,＜0.05).结论:AdipoR1基因的沉默可抑制LPS诱导的MH7A细胞增殖,促进细胞凋亡,并提示AdipoR1相关信号通路可能在类风湿关节炎发生发展中起到重要作用,阻断该途径可有效阻断LPS诱导的MH7A细胞炎症反应.
作者：王娅妮；赵鹏飞；谈文峰；张缪佳 刊期： 2017年第09期
目的:研究骨髓来源间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)条件培养基(mesenchymal stem cell-conditionedmedium,MSC-CM)对肝纤维化是否有治疗作用及其作用机制.方法:6周龄SD大鼠随机分为3组(n=8):模型组,治疗组,正常对照组.建立四氯化碳(CCLJ4)诱导大鼠肝纤维化模型,腹腔注射CCL4,1.5 mL/kg,每周2次,持续8周.MSC培养至3～5代用于MSC-CM的制备,获取的MSC-CM并超滤浓缩约25倍,过滤除菌.在实验第5周起,治疗组经尾静脉注射2 mg/kg MSC-CM,每天1次至第8周末,同时模型组和正常组注射相同剂量的L-DMEM.至实验终点,按照原位灌注和密度梯度离心法提取肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC),并留取肝组织行病理学检查.通过Masson染色和免疫组织化学染色法来检测胶原纤维沉积的程度和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达程度;qRT-PCR和Western blot检测HSCs中α-SMA、转化生长因子β1 (transforming growth factor β1,TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteina-ses-2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2 (tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)mRNA和蛋白的表达水平.结果:MSC-CM治疗组肝脏炎症程度较模型组减轻,胶原纤维和α-SMA表达量均较模型组明显降低(P＜0.05),但未达到正常组水平(P＜0.05).治疗组HSC中TGF-β1、α-SMA、Collagen Ⅰ mRNA和蛋白表达水平较模型组明显下降(P＜0.05),MMP-2 mRNA表达水平较模型组升高(P＜0.05).结论:静脉注射MSC-CM对CCLJ4诱导的肝纤维化有一定治疗作用,这一过程可能与MSC-CM能降低TGF-β1的表达、抑制HSC活化及促进胶原蛋白降解有关.
作者：郭圆圆；樊圆圆；张永婷；王瑜；王媛慧；蔡洁；李军；章莉莉 刊期： 2017年第09期
目的:对比EC-T和TEC两种新辅助化疗方案对Ⅱ/Ⅲ期乳腺癌患者近期疗效及对Ki-67表达的影响.方法:回顾性分析2006年1月-2015年3月南京医科大学第一附属医院收治的162例Ⅱ、Ⅲ期女性乳腺癌患者的临床病理资料.依据术前接受新辅助化疗方案分为EC-T组(61例)和TEC组(101例),两组患者均在术前完成6～8个周期化疗,21 d为1个化疗周期.采用免疫组化检测Ki-67,分析两组患者化疗结束后疗效,以及化疗前、手术后Ki-67表达情况.结果:EC-T组临床有效率(clinical response rate,cRR)为80.3％,TEC组为79.2％,差异无统计学意义(P=0.864).EC-T组获病理完全缓解(pathologic complete response,pCR)率为6.6％,低于TEC组(10.9％),但差异无统计学意义(P=0.357).化疗前EC-T组Ki-67表达阳性率为95.1％,TEC组为89.1％,两组差异无统计学意义(P=0.190).手术后TEC组Ki-67表达阳性率明显低于EC-T组,且两组差异有统计学意义(P=0.012).结论:在Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌患者新辅助化疗中,EC-T方案同TEC方案近期疗效相近.新辅助化疗可降低患者体内Ki-67表达,在降低Ki-67表达阳性率方面,TEC方案明显优于EC-T方案.
作者：许雪宁；李秀清；钱易；周文斌；刘晓安 刊期： 2017年第09期
目的:探究miRNA-200a对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)靶向治疗疗效的影响及其调控机制.方法:通过RT-PCR、Western blot等方法检测NSCLC细胞中miRNA-200a、FOXC1的表达量;四甲基偶氮唑盐(MTR)实验、细胞划痕实验、Transwell实验分别检测miRNA-200a、FOXC1对肺腺癌细胞生长、迁移、侵袭等生物学行为的影响;荧光素酶报告实验分析FOXC1与miRNA-200a的靶向关系.结果:高表达miRNA-200a抑制肺腺癌细胞的生长、上皮间质转化、迁移、侵袭,并且增加肺腺癌细胞对吉非替尼的敏感性.此外,敲低FOXC1同样可以抑制细胞生长,恢复肺腺癌细胞对吉非替尼敏感性.结论:上调miRNA-200a或下调FOXC1可以增强NSCLC细胞对吉非替尼的敏感性.为克服表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂治疗的耐药性提供了一种新的有效治疗方法.
作者：尹媛；许伟；吴双双；李燕；赵卫红；吴剑卿 刊期： 2017年第09期
目的:检测miRNA-873在肝细胞肝癌组织以及细胞系中的表达情况,并进一步探讨miRNA-873对肝癌细胞迁移和侵袭的影响.方法:实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝细胞肝癌组织、癌旁组织以及细胞系中miRNA-873的表达水平.分别用划痕实验和Transwell细胞侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力.蛋白质印迹(Western blot)检测Janus激酶20anuskinase 2,JAK2)和信号转导子与转录活化子3(signal transduction and transcriptional activation 3,STAT3)活性的变化.结果:肝癌组织和肝癌细胞系中miRNA-873表达水平明显高于对应的癌旁组织和正常肝脏细胞.RT-PCR证实转染miRNA-873 inhibitor或mimics后miRNA-873的表达量明显降低或升高(P＜0.01).与对照组(NC)相比,敲低miRNA-873明显抑制肝癌细胞HepG2迁移和侵袭,差异有统计学意义(P＜0.05).过表达miRNA-873则明显促进肝癌细胞Huh7迁移和侵袭,差异有统计学意义(P＜0.05).miRNA-873可明显活化JAK2/STAT3信号通路.结论:miRNA-873在肝癌中高表达,且可能通过活化JAK2/STAT3信号通路促进肝癌的迁移与侵袭.
作者：韩国勇；张龙；陈志强；王小微；朱勤；黄新立；王学浩 刊期： 2017年第09期
目的:利用医学研究常用ICR品系小鼠,在建立窦状卵泡体外培养体系的基础上,研究黄体生成素(luteinizing hor-mone,LH)与表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)诱导卵母细胞体外成熟及排卵的作用.方法:体外剥离得到大的窦状卵泡用于培养并建立适宜于研究诱导卵母细胞成熟及排卵的窦状卵泡体外培养模型,通过向培养液中添加LH和EGF诱导卵母细胞体外成熟与排卵.结果:成功构建了ICR小鼠窦状卵泡体外培养模型,发现LH或EGF单独处理均可诱导卵泡卵母细胞成熟和卵丘扩展,而两者共同作用才能够诱导卵泡体外排卵.结论:LH/EGF促进ICR小鼠窦状卵泡卵母细胞体外成熟与排卵.
作者：尹耀学；苏友强 刊期： 2017年第09期
目的:探讨miRNA-181a对l-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methyl-4-phenyl-pyridinium,MPP+)诱导的帕金森病(Parkinson'sdisease,PD)多巴胺能神经元损伤的影响及其相关机制.方法:采用胎龄12.5 d的C57BL/6小鼠胚胎中脑进行多巴胺能神经元原代培养,依据不同处理方法分为4组:①空白对照(Control)组;②PD模型(MPP+)组;③阴性对照(miRNA-NC+MPP+)组;④miRNA-181a+MPP+组.酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxlase,TH)可以选择性标记多巴胺能神经元,因此采用荧光显微镜对各组TH染色阳性神经元数目、初级突触分枝及长突触长度进行观察,分析各组之间的差异.结果:Control组多巴胺能神经元细胞体积较大,呈圆形或三角形,胞体发出1个、2个或多个长的分枝以及轴突发出的次级突起,胞体和轴突表面光滑,形态完整,神经元分枝之间相互交织呈网络,联系密切.miRNA-NC+MPP+组经Mpp+作用后多巴胺能神经元的数量减少,绝大多数表现为胞体存在,分枝数目及长突触长度明显减少,网状交织稀少,表面不光滑,有的呈串珠样肿胀或轴突中断、丢失,仅存胞体,少数也表现为胞体空虚、丢失,仅存突起.miRNA-181a+MPP+组较miRNA-NC+MPP+组多巴胺能神经元数目有所增加,胞体形态较好,分枝数目与长突触长度较miRNA-NC+MPP+组有所改善,且表面较光滑,神经元死亡程度较低.结论:miRNA-181a对Mpp+所致多巴胺能神经元损伤起到神经保护作用.
作者：孔程程；杨文平；华建；刘妍；丁海霞 刊期： 2017年第09期
目的:从普通血液和生化指标中寻找与维持性血液透析患者难治性高血压(treatment resistant hypertension,TRH)相关的危险因素,为透析患者的高血压治疗提供帮助.方法:2009年12月-2015年6月在南京医科大学第一附属医院行规律血液透析的高血压患者174例,其中病例组TRH患者69例,对照组非TRH患者105例.采用Logistic回归分析,寻找与TRH相关的危险因素.结果:两组患者性别、肌酐水平和透析时长上差异无统计学意义.病例组平均年龄、尿酸、血白细胞、天门冬氨酸氨基转移酶(aspertate aminotransferace,AST)、谷氨酰转肽酶(gamma-glutamyl transferase,GGT)和腺苷脱氨酶(adenosine deami-nase,ADA)水平均显著低于对照组;而病例组血清钙和白蛋白(albumin,ALB)显著高于对照组.单因素Logistic回归显示:年龄＜40岁(OR:3.350,P=0.010)、GGT＜20 U/L (OR:2.554,P=0.024)、10 U/L≤AST＜15 U/L (OR:2.499,P=0.011)、ADA＜12 U/L(OR:2.259,P=0.044)是透析患者TRH的危险因素;ALB＜ 41 g/L是保护因素(OR:0.298,P=0.002).逐步法多因素Logistic回归分析显示:A LB水平与TRH呈正相关(OR:1.130,P=0.002),ADA水平与TRH呈负相关(OR:0.900,P=0.027).结论:年龄＜40岁、血清GGT＜20 U/L、10≤AST＜15 U/L和ADA＜12 U/L是维持性血液透析患者TRH的危险因素,而血清ADA降低和血清ALB升高是TRH的独立危险因素.
作者：曹欢；张承宁；盛燕辉；孔祥清；孙伟 刊期： 2017年第09期
目的:探讨脑卒中前蛋白去乙酰化酶2(histone deacetylase 2,HDAC2)对于光诱导血栓形成性脑缺血模型小鼠行为学缺陷的作用.方法:通过微量给药系统将腺相关病毒AAV-CAG-EGFP-Cre(2μL)注射至HDAC2~鼠的运动皮层用以敲减HDAC2,通过免疫荧光以及免疫印迹(Western blot)分析确证病毒AAV-CAG-EGFP-Cre与对照病毒AAV-CAG-EGFP的表达.7d后进行光诱导血栓形成性脑缺血造模,并于造模前第3天以及造模后第8天采用网格实验和圆筒实验分别检测造模前后AAV-CAG-EGFP-Cre组与AAV-CAG-EGFP组行为学的改变.结果:病毒AAV-CAG-EGFP-Cre相较于对照AAV-CAG-EGFP能特异性地敲减HDAC2,免疫荧光表现为GFP与HDAC2双阳性细胞数减少,Western blot显示针孔周围区HDAC2表达水平降低(P＜0.05).脑缺血前后的行为学检测表明病毒干预后,HDAC2的下调对缺血前行为学无影响,但显著降低了脑缺血后网格实验的失足率(P＜0.001)与圆筒实验的不对称指数(P＜0.001),促进了行为学改善.结论:脑卒中前通过重组病毒敲减HDAC2,可以改善脑卒中后小鼠行为学缺陷.
作者：袁红瑾；林瑜辉；董健；朱东亚 刊期： 2017年第09期
目的:探讨肿瘤特异性蛋白70(tumor specific protein 70,SP70)在乳腺肿瘤组织及血液中的表达情况及其对乳腺肿瘤良恶性鉴别的意义.方法:乳腺肿瘤患者125例(乳腺癌65例、良性病变60例),免疫组化法检测切片中SP70的表达.ELISA检测120例乳腺肿瘤患者(58例乳腺癌、62例乳腺良性疾病)和60例健康体检者血清中SP70蛋白的水平.结果:SP70在乳腺癌组织中的表达阳性率(55.38％)高于乳腺良性病变(15.00％),差异有统计学意义(x2=23.846,P＜0.001).乳腺癌患者血清中SP70的水平显著高于乳腺良性疾病患者和健康对照,差异有统计学意义(F=11.884,P＜0.001).SP70在血清中的敏感性高于CA153(53.45％ vs.44.82％),且血清中SP70和CA153的表达无显著相关性(r=0.132,P=0.324),两者联合能够明显提高检测敏感性(84.38％).结论:检测乳腺肿瘤组织和血液中SP70的表达对其良恶性的鉴别有重要临床价值.
作者：浦春；秦明明；刘夏；王文军；顾春荣；徐建；王悦；刘京萍；顾敏；朱娟娟；潘世扬 刊期： 2017年第09期
目的:探讨橄榄苦苷(oleuropein,OP)和丙烯醛(acrolein,ACR)对人支气管上皮样细胞(human bronchial epithelial cells,HBE)内质网应激(endouplasmic reticulum stress,ERS)相关的增殖与凋亡影响的可能机制.方法:OP与ACR联合处理HBE细胞,MTT比色法检测细胞存活率,Hoechst33258染色法和流式细胞检测细胞凋亡,Western blot检测ERS相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA表达;雄性Sprague-Dawley大鼠经ACR腹腔注射和(或)橄榄叶提取物(o-live leaf extract,OLE)灌胃处理,取大鼠肺组织,Western blot法检测ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,Real-time PCR法检测GRP78和CHOP mRNA表达.结果:体外实验证实ACR可以抑制HBE细胞的增殖,诱导其凋亡;联合OP处理后,ACR抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用明显受到抑制;同时,ACR上调HBE细胞中ERS相关蛋白GRP78和CHOP的表达,联合OP可抑制GRP78和CHOP的表达;在mRNA水平上,ACR单独处理上调了ERS相关分子GRP78和CHOP的mRNA表达水平,而联合OP处理,GRP78和CHOP的mRNA水平未见明显变化;Sprague-Dawley大鼠体内实验结果与体外细胞实验基本一致.结论:ACR抑制HBE细胞增殖,促发ERS,进而诱导HBE细胞凋亡.在蛋白质翻译水平上,OP可以通过抑制ERS途径,拮抗ACR诱导的细胞凋亡效应.
作者：徐朝琪；许玉宇；姜盼；冯晴 刊期： 2017年第09期
目的:通过meta分析评价miRNA-146a rs2910164位点基因多态性与肝癌易感性之间的相关性.方法:系统地检索PubMed、Embase、Web of Science、中国知网以及中国生物医学文献数据库2017年1月30日之前发表的相关文章,用总的比值比(odd ratios,OR)及相应的95％可信区间(credibility intervals,CI)来评价miRNA-146a基因多态性与肝癌易感性之间的相关性.结果:共纳入了18项病例对照研究,包括5 657例肝癌病例与6 680例健康对照.经过统计分析未发现miRNA-146ars2910164位点的基因多态性与肝癌易感性之间存在相关性(Cvs.G:OR=0.96,95％CI=0.88～1.06;GC vs.GG:OR=0.98,95％CI=0.88～1.09;CC vs.GG:OR=0.90,95％CI=0.74～1.09;GC/CC vs.GG:OR=0.95,95％CI=0.82～1.10;CC vs.GC/GG:OR=0.95,95％CI=0.84～1.07).结论:目前没有足够证据能够证明miRNA-146a基因多态性与肝癌易感性之间存在相关性.未来有必要在大规模和设计完善的研究中加以验证.
作者：顾丽华；黄晓丹；季国忠 刊期： 2017年第09期
目的:探究二叶式主动脉瓣中miRNA-195调控瓣膜钙化的可能机制.方法:收集35例接受主动脉瓣置换术患者狭窄的二叶式或三叶式主动脉瓣,通过PCR及Western blot分别检测miRNA-195的表达量、果蝇母源抗皮肤生长因子(drosophilamothers against decapentaplegic 7,SMAD7)的mRNA及蛋白表达量.双荧光素酶法预测miRNA-195的靶基因.在猪瓣膜间质细胞中分别沉默和过表达miRNA-195,检测SMAD7的mRNA表达水平并探究两者的相互关系.在人类瓣膜组织上通过免疫组化染色检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9蛋白水平,通过天狼星红染色检测胶原蛋白水平,通过VonKossa染色比较钙化程度差异,进而研究钙化相关的功能改变.结果:与狭窄的三叶式主动脉瓣相比,狭窄的二叶式主动脉瓣中miRNA-195表达降低,SMAD7的mRNA和蛋白水平升高.双荧光素酶实验提示SMAD7是miRNA-195的直接靶标.在猪瓣膜间质细胞中沉默miRNA-195引起SMAD7 mRNA水平升高,过表达miRNA-195引起SMAD7 mRNA水平降低.狭窄钙化的二叶式主动脉瓣组织中MMP-2、MMP-9及胶原的表达较狭窄钙化的三叶式主动脉瓣升高.结论:在二叶式主动脉瓣中,下调的miR-NA-195促进了SMAD7表达,进而促进细胞外基质的纤维化并终促进其钙化.
作者：郑蕤；堵俊杰；何珂帅；邵永丰 刊期： 2017年第09期
目的:观察甲基苯丙胺(methamphetamine,Meth)对原代小胶质细胞的损伤及炎性相关基因表达的影响.方法:原代培养SD胎鼠小胶质细胞,利用MTT和原位末端转移酶标记技术(TUNEL)分别检测Meth引起小胶质细胞活力和凋亡的变化.采用实时荧光定量聚合酶链反应法(real-time PCR)观察Meth对小胶质细胞炎性相关因子mRNA表达的影响.ELISA及试剂盒法检测Meth作用后小胶质细胞白介素(interleukin,IL)-6、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、诱导型一氧化氮合酶(induciblenitric oxide synthase,iNOS)的分泌改变.结果:MTT实验显示,Meth降低小胶质细胞活力,呈浓度依赖性,浓度为200 μmol/L时与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).TUNEL实验结果显示200 μmol/L Meth可引起细胞凋亡,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).q-PCR结果显示Meth作用于小胶质细胞24 h可降低IL-24、一氧化氮合酶3(nitric oxide synthase 3,NOS3)表达水平,上调Peli3、Sigma受体1(Sigma receptor 1,Sig1-R)、IL-1β、IL-6、Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)的表达水平,差异有统计学意义(P＜0.05).此外,蛋白水平亦发现,Meth可促进IL-6和TNF-α的分泌.结论:Meth可降低小胶质细胞活力,诱导小胶质细胞凋亡,并引起IL-1β、IL-1R、IL-6、TLR4等炎性因子mRNA表达变化,促进IL-6和TNF-α的分泌,进而可能损伤中枢神经系统,产生神经毒性.
作者：程洁；蒋雷；环飞；黄雨蒙；王军 刊期： 2017年第09期
目的:明胶-聚苯胺接枝共聚物(gelatin-graft-polyaniline,GP)导电水凝胶的制备和性能研究.方法:采用直接掺杂法制作GP,使用樟脑磺酸(camphor sulfonic acid,CSA)作为掺杂剂.GP溶于水形成导电水凝胶(gelatin-graft-polyaniline hydrogel,GPH),以1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐[1-(3-dimethylaminoproply)-3-ethylcarbodiimide,EDC]进行交联.对制备的GP和GPH的形态结构、生物相容性、溶解性、溶胀比和导电性能进行观察研究.结果:GPH导电性能良好(l×104～1×103 S/cm),并随着苯胺含量的增大而增大.但当苯胺的量提高到一定程度,通过明胶共聚获得的GPH溶解性大大降低,同时溶胀比增加.结论:GPH是一种新型的可降解生物材料,具有良好的导电性能,作为支架在组织工程修复中有巨大的应用前景.
作者：吴天一；卜寿山；庄海；尤莹；张继生；许扬 刊期： 2017年第09期
南京医科大学学报（自然科学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：南京医科大学
