章希炜；杨宏宇；孙蓬；邹君杰；孙锋
目的:利用基因芯片技术检测结核分枝杆菌(MTB)对链霉素(SM)和乙胺丁醇(EMB)耐药性的技术平台建立.方法:应用基因芯片法测定160株MTB临床分离株的SM和EMB耐药性,并与BAC了EC960法结果进行比较,分别对结果相符与不相符的菌株进行测序.结果:基因芯片法测定160株MTB临床分离株,结果显示SM敏感111株、耐药49株,以rpsL 43、88位aag突变为agg为主.芯片检测结果EMB敏感142株、耐药18株,耐EMB的MTB以embB 306位atg突变为gtg为主.基阅芯片法检测链霉素、乙胺丁醇耐药的敏感性、特异性分别为80.0%、99%和60.0%、100%.两种测定方法结果不符的菌株中,采用基因测序法测定,结果显示基因芯片法检测点突变具有高度的特异性.结论:基阅芯片法检测MTB对SM与EMB耐药性方法具有快速、简单,特异性高,准确性高,可作为MTB的SM与EMB耐药性快速筛选方法.
作者：石小华；景奉香；胡忠义；崔振玲；赵建龙；朱蕾 刊期： 2009年第04期
目的:探讨64排螺旋CT检查肾积水的评价.方法:对临床疑诊肾积水的52例患者行64排螺旋CT容积扫描及尿路三维重建.结果:52例患者均有不同程度肾盂积水及部分输尿管扩张,其中肾盂输尿管连接部良性狭窄4例,巨输尿管1例,腔静脉后输尿管4例,输尿管结石18例,输尿管结核3例,输尿管癌8例.腹膜后纤维化3例.CT图像不仅能清晰显示肾积水的程度,还可以明确输尿管梗阻的部位及原因.结论:64排螺旋CT是评价肾积水程度及梗阻原因的重要影像学方法.
作者：高丽媛；张玉花；葛欣然 刊期： 2009年第04期
目的:通过建立大鼠肾脏急性缺血再灌注(I/R)及缺血预适应/再灌注(I/P+I/R)模型,初步研究不同的缺血方式后肾脏IκB激酶β(IKKβ)的变化及其与中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)的相互关系.方法:雄性SD大鼠摘除右肾、分离出左肾动脉后随机均分为3组:假手术组(sham组);缺血再灌注组(I/R组);缺血预适应+缺血冉灌注组(I/P/+I/R组).分别用生化学检测血清肌酐(Scr)的变化,组织病理学评价肾小管损伤程度评分,用免疫荧光定量分析IKKβ的表达,免疫组织化学染色检测肾脏组织中NGAL的表达,免疫印迹检测肾脏组织中IKKβ、NGAL的表达.结果:Scr水平及肾小管损伤评分提示,I/R组肾脏组织病理改变明显,与sham组比较损伤程度重(P<0.01);与I/R组比较,I/P+I/R组损伤程度则明显减轻(P<0.05).免疫荧光定量分析与免疫印迹检测IKKβ的表达提示,I/P+I/R组的表达明显高于sham组(P<0.01,P<0.05);VR+I/P组较I/R组则明显减少(P<0.05).免疫组织化学染色检测与免疫印迹检测NGAL的表达提示,I/P+I/R组的表达明显高于sham组(P<0.01,P<0.05);I/R+I/P组较I/R组则明显减少(P<0.05).且IKKβ与NGAL两种蛋白的表达呈正相关(P<0.01).结论:IKKβ参与了肾脏的缺血再灌注损伤,促进了肾损伤标志物NGAL的产生,肾脏缺血预适应抑制IKKβ的激活,减少NGAL的产生.与肾脏保护作用有关.
作者：武煜；尹忠诚；曹长春；陈宇；张立元；刘晓东；缪嘉燕 刊期： 2009年第04期
目的:探讨细胞游离DNA含量及DNA完整性在良恶性胸腹水中的临床意义.方法:应用实时ALU-qPCR(115 bp、247 bp)方法分析28例良性胸腹水患者和38例恶性胸腹水患者的胸腹水中细胞游离DNA含量以及DNA完整性的情况.结果:ALU247片段含量在良恶性胸腹水组中有统计学差异(P<0.05),但ALU115片段在两组中并无统计学差异(P>0.05);恶性胸腹水中DNA完整性明显高于良性对照组(P<0.05).DNA完整性的ROC曲线下面积为0.716(P<0.01).结论:恶性胸腹水有较高的ALU247片度含量以及DNA完整性,其中DNA完整性可能是一个很有价值的诊断指标.
作者：殷霞丽；谢丽；禹立霞；钱晓萍；刘宝瑞 刊期： 2009年第04期
目的:建立了一种单管等位基因特异性扩增法同时测定多重单核苷酸多态性(SNP).方法:以TYP基因外显子1上的3个SNP位点(71G>A、425A>T和758G>A)为例,首先采用PCR预扩增得一段含所有待测SNP位点的长片段;然后用限制性内切酶将其消化成短片段,在连接酶的作用下与设计的DNA适配器相连;以此连接产物为模板,在单个PCR管中加入一种适配器特异性通用引物和所有等位基因特异性引物进行PCR扩增;后用琼脂糖凝胶电泳法分离检测PCR扩增产物,并根据扩增片段的大小判断SNP的类型.结果:采用该法成功测定了30名健康中国人的TYP基因中的3个SNP位点,与限制性片段长度多态性法(RFLP)测定结果完全一致.结论:该方法特异性高、结果准确、检测成本低,可用于同时测定多个SNP位点.
作者：汪维鹏；李融；王森 刊期： 2009年第04期
目的:研究食管鳞癌中ITGA6(integrin α6)、CTHRC1(collagen triple helix repeat containing 1)基因的表达,并探讨其与食管鳞癌临床病理参数之间的关系.方法:应用免疫组化S-P法分析46例人食管鳞癌组织及10例食管正常组织中ITGA6、CTHRC1蛋白的表达情况.结果:①ITGA6、CTHRC1在食管鳞癌组织中有增强表达,表达率分别为71.7%(33/46)和56.5%(26/46),而在10例正常食管组织中均未见表达.②ITGA6、CTHRC1在淋巴结转移组中的阳性表达率显著高于无淋巴结转移组(P<0.05).③ITGA6、CTHRC1表达与年龄、性别、肿瘤大小及病理类型无明显相关性(P>0.05).结论:ITGA6、CTHRC1可能与食管鳞癌侵袭、转移相关,有望成为食管鳞癌新的治疗靶点.
作者：刘伟；施瑞华；朱宏；郝波 刊期： 2009年第04期
目的:探讨孕早期胎儿颈部透明层(NT)增厚在产前超声筛查染色体异常(特别是21-三体综合征)中的价值.方法:检索Cochrane图书馆、PubMed、OVID、Springer数据库、中国期刊网和中国生物医学文献数据库(1990年1月至2008年8月)中的中英文文献,按照诊断试验的纳入标准筛选文献,收集所有相关的诊断试验文献,应用Meta-DiSc 1.4软件对符合条件的研究结果进行Meta分析.结果:共纳入文献14篇,检查胎儿共计162 992人.11篇文献对孕早期胎儿NT≥第95百分位对染色体异常的诊断价值进行了分析,汇总灵敏度、特异性和曲线下面积(AUC)分别为78.8%、92.1%和0.891;12篇文献对孕早期胎儿NT≥第95百分位对21-三体综合征的诊断价值进行了分析,汇总灵敏度、特异性和AUC分别为81.3%、92.6%和0.883.结论:孕早期NT增厚对染色体异常(特别是21-三体综合征)产前诊断的敏感性、特异性和诊断的准确性均较高,可用于孕早期染色体异常的产前筛查.
作者：余章斌；韩树萍；郭锡熔 刊期： 2009年第04期
目的:探讨高糖对大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1表达的影响及Resveratrol的干预作用.方法:体外培养大鼠肾小球系膜细胞.①分为正常对照组(NC组,匍萄糖浓度5.6 mmol/L)、高糖组(HG组,葡萄糖浓度30 mmol/L),分别观察24、48、72 h;②分为NC组、HC组、Resveratrol组(Res组,葡萄糖浓度5.6 mmol/L+Resvemtrol 20 μmol/L)和高糖+Rcsvcratrol组(HG+Res 组,葡萄糖浓度30 mmol/L+Resveratrol浓度分别为5、10、15、20 μmol/L),各组细胞分別培养48 h.用半定量RT-PCR和Western blotting法检测细胞内TGF-β1 mRNA和蛋白表达变化.结果:①与NC组相比,HG刺激后大鼠系膜细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达明显增加,差异均有显著性,P值均<0.01;②与HC组相比,HG+Resveratrol干预后,大鼠系膜细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达呈浓度依赖性减少,差异均有显著性(P值分别为<0.05,<0.01).Res组和NC组之间TGF-β1 mRNA和蛋白表达的差异无显著性(P>0.05).结论:高糖能上调大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达,Resveratrol可能通过抑制高糖引起的系膜细胞TGF-β1高表达而在糖尿病肾病中起治疗作用.
作者：胡爱平；游娜；徐家蓉；蒋秀琴；缪珩；鲁一兵 刊期： 2009年第04期
目的:观察安博立酸(Ambrolic acid,AmbA)对人胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响,初步探讨AmbA对胃癌的体外抗肿瘤活性.方法:将AmbA作用于SGC-7901细胞株,MTT法测定AmbA对SGC-7901细胞增殖的抑制率;光学显微镜观察AmbA作用引起的细胞形态变化;流式细胞仪检测AmbA作用后细胞凋亡情况及进行细胞周期分析.结果:MTT实验结果表明,AmbA对SGC-7901细胞增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间及浓度依赖性;流式细胞仪检测分析表明.AmbA可使细胞阻滞于S期,其作用呈剂量依赖性.结论:AmbA对SGC-7901人胃癌细胞的生长具有明显的抑制作用,其作用的主要途径可能是使细胞阻滞于S期并诱导细胞凋亡.
作者：施建民；孙婧；张国铎；禹立霞；钱晓萍；刘宝瑞 刊期： 2009年第04期
目的:探讨真核起始因子4E(eIF-4E)结合蛋白1(4E-BP1)、核糖体40S小亚基S6K蛋白激酶p70S6K在RAD001抑制胃癌MKN-28、N-87细胞生长中的作用.方法:体外培养人胃癌MKN-28、N-87细胞,给予RAD001干预后通过细胞计数、流式细胞术、Westem-blot检测肿瘤细胞生长、细胞周期分布及p70S6k、4E-BP1蛋白表达及磷酸化情况.结果:细胞计数结果显示RAD001作用于胃癌细胞株MKN-28,N-87 24 h即开始出现对细胞生长的抑制作用,随着作用时间延长至48、72 h,抑制作用逐渐增强.流式细胞术结果显示RAD001作用24 h后MKN-28、N-87细胞株细胞周期发生改变,停滞在G0～G1期细胞比例增加,在实验中显示细胞系N87对于RAD001作用相对敏感.Western-blot结果显示RAD001作用24 h后MKN-28、N-87的4E-BP1和p70S6K表达下降,同时去磷酸化.结论:RAD001是通过抑制mTOR的活性,进而阻断4E-BP1及p70S6K的磷酸化和蛋白质翻译进而调节着细胞周期以发挥抑制胃癌细胞生长的作用.
作者：刘莹；朱祖安；崔涛 刊期： 2009年第04期
目的:微小RNA(microRNA)异常在肿瘤发生发展中起重要作用,本研究探讨microRNA mir219在肝细胞癌中的异常甲基化和异常表达,可能参与肝细胞癌的发生发展过程.方法:采用pyrosequence、TA克隆测序等方法检测正常肝组织、肝细胞癌细胞株和肝癌标本中mir219上游预测启动子区域甲基化,Taqman实时定量Rt-PCR测定肿瘤组织表达.结果:与正常肝脏组织相比,肝癌细胞株、肝癌标本中mir219上游预测启动子区域中茎环区和上游1kb区域的CpG岛存在高度甲基化.肝癌细胞株、肝癌标本中mir219表达显著下调,与其异常甲基化相关.结论:肝癌中微小RNA mir219茎环序列上游1094 bp区域存在启动子区异常甲基化,表达下调,提示mir219异常可能在肝细胞癌发生发展巾起重要作用,是潜在的抑癌基因.
作者：韩蓓；钱祝银；高文涛 刊期： 2009年第04期
目的:运用二维超声斑点追踪技术评价经皮室间隔封堵术前后患者心脏扭转运动的变化.方法:检测18例室间隔缺损患者封堵术前、术后第3天、术后1个月、术后3个月的常规心脏二维多普勒超声参数,并运用二维斑点追踪技术对患者的左心室旋转及扭转运动进行分析,以探讨室间隔缺损封堵术对其心脏扭转运动的影响.结果:封堵术后第3天,舒张期末左室内径(LVEDd)、左室舒张末容积(LVEDV)较术前减低较明显,左心室的基底部、心尖部的旋转角度及整体的扭转运动的角度较术前稍有减低.术后1个月、术后3个月,LVEDd、LVEDV较术前仍有降低,但降低的程度有减小的趋势;而左心室的基底部、心尖部的旋转角度及整体的扭转运动的角度仍有降低,降低的程度以术后1个月明显,以后降低程度减小.患者封堵术前、术后第3天、术后1个月、术后3个月的LVEF稍有改变,但差异尤统计学意义.无论是封堵术前、术后第3天、术后1个月、还是术后3个月有,病人的左心室的基底部、心尖部的旋转角度峰值及整体的扭转运动的角度峰值均和LVEF呈线性相关,且以左室整体的扭转运动的角度峰值和LVEF的相关性好.结论:经皮室间隔缺损封堵术通过逆转左室的重构而改善左室的扭转运动,且左室整体的扭转运动与LVEF的相关性好.
作者：庄燕；许迪；雍永宏；陈银花；李晓飞 刊期： 2009年第04期
目的:评价氟比洛芬酯超前镇痛联合异丙酚、瑞芬太尼静脉麻醉在小儿疝修补术中的麻醉效果.方法:年龄3～7岁、拟择期行疝修补术的患儿90例,ASA I级,随机分为氯胺酮组(K组)、丙泊酚复合瑞芬太尼组(P组)和氟比洛芬酯超前镇痛联合异丙酚、瑞芬太尼组(F组),每组30例.记录术前、切皮、缝合皮肤时的心率(HR),记录患儿停药后清醒时间,随访术后2 h烦躁发生率.结果:K组患儿切皮和缝合皮肤时心率较切皮前增高,同时亦高于同时点的P组和F组心率(P<0.05).停药后P组、F组苏醒时间短于K组(P<0.05).在术后2 h,P组烦躁发生率较K组、F组增高(P<0.05).结论:氟比洛芬酯超前镇痛联合异丙酚、瑞芬太尼麻醉用于小儿疝修补术,苏醒快,术后烦躁发生率低,可以常规使用.
作者：姚乃修；颜学军 刊期： 2009年第04期
目的:探讨在激素非依赖性前列腺癌(HRPC)PC3细胞中,内皮素-1(ET-1)刺激对环氧化酶-2(COX-2)表达的影响,以及内皮素受体A(ETAR)与内皮素受体B(ETBR)在此调控通路中的作用.方法:用不同浓度(0.1、1.0、10.0、100.0 nmol/L)ET-1刺激前列腺癌PC3细胞相同时间(24 h);另外用BQ123(ETAR拮抗剂)、BQ788(ETBR拮抗剂)单独作用于PC3细胞或与100 nmoL/L ET-1联合作用于细胞24 h.均采用Western blot技术检测细胞中COX-2蛋白含量的变化:采用RT-PCR技术检测细胞中COX-2 mRNA的变化情况.结果:PC3细胞在0.1-100.0 nmol/L浓度的ET-1刺激后COX-2的蛋白及mRNA表达水平均显著上调,并显示有明显的浓度依赖性.BQ123在蛋白质和mRNA水平均显著抑制ET-1介导的COX-2的上调,与单纯应用ET-1组有显著差别(P<0.05),BQ788则对ET-1介导的COX-2的表达没有抑制作用(P>0.05).结论:在前列腺癌PC3细胞中,ET-1对COX-2的表达有上调作用;ETAR参与厂这一调控过程,ETBR可能未参与此过程.这为ETAR拮抗剂和选择性COX-2抑制剂联合应用于HRPC的治疗提供了分子生物学基础.
作者：苏琦；许露伟；李文成；王自正；朱金海；贾瑞鹏 刊期： 2009年第04期
目的:研究局部表面麻醉在逆行输尿管硬镜治疗输尿管结石中的可行性.方法:收集逆行硬性输尿管镜治疗输尿管结石3 637例.分为采用持续硬膜外麻醉、骶麻或腰麻称为椎管内麻醉(IA)阶段和基本采用局部麻醉(LA)辅以镇痛剂(盐酸哌替啶)阶段.回顾性分析两者在1次手术成功率、手术并发症、麻醉并发症、疼痛评分、麻醉耐受(有效性)、手术时间,疾病治疗时间、可比的治疗费用等并进行比较.结果:在麻醉耐受度、手术成功率、手术时间、手术并发症等方面二者无明显差异(P>0.05).而在疼痛评分、疾病治疗时间、可比的治疗费用有显著差异,LA组的疼痛评分较IA组高(P<0.05),麻醉并发症发生率、治疗时间和可比治疗费用LA组远低于IA组(P<0.01).结论:局部表面麻醉下逆行输尿管硬镜治疗输尿管结石町以作为一种较为安全、有效、可行、治疗费用低廉的方法,术中疼痛可一定程度降低手术并发症.
作者：陈方敏；石家齐；谷江；贾本忠；李登宝 刊期： 2009年第04期
目的:探讨胸腺瘤合并重症肌无力(MG)患者手术的安全性和治愈率.总结其.临床经验.方法:1997年8月至2008年8月收治胸腺瘤合并MG患者39例,术前均给予抗胆碱酯酶及激素治疗,病情稳定后经胸骨正中切口行胸腺扩大切除术,术后给予呼吸机支持及药物等治疗.结果:全组无手术死亡,术后未发生肌无力及胆碱能危象,痊愈出院.随访30例,失访9例,随访时间3个月～5年,缓解25例(83.3%),明显改善5例(16.7%).结论:在胸腺瘤合并MG患者的手术治疗中,完整良好的术前评估,完全而彻底的胸腺瘤切除及前纵隔脂肪组织清除,围术期抗胆碱酯酶及激素治疗,呼吸机支持治疗是防止手术并发症及危象发生的关键.
作者：莫奇峰；范位沛；李亚东 刊期： 2009年第04期
目的:探讨腔镜下深筋膜下交通静脉结扎术对较严重的慢性静脉功能不全患者治疗的效果.方法:较严重慢性静脉功能不全患者共122例,每位患者随访时间为3-4个月.其中58例单纯行大隐静脉高位结扎+抽剥术(B组),64例行大隐静脉高位结扎+抽剥术+腔镜下深筋膜下交通静脉结扎术(SEPS)(A组).结果:症状改善和分级提高的比较,两组无统计学差异(P>0.05).相关并发症的比较,除静脉曲张复发(P<0.05)以外,均无统计学差异(P>0.05).术后住院日的比较,两组无统计学差异(P>0.05).溃疡愈合率的比较,两组无统计学差异(P>0.05);愈合时间的比较,两者有显著差异(P<0.001);复发率的比较,两者有显著差异(P<0.05).结论:SEPS治疗效果满意、术后并发症少,具有较好的临床应用价值和推广前景.
作者：章希炜；杨宏宇；孙蓬；邹君杰；孙锋 刊期： 2009年第04期
目的:通过试制半固体脱钙体系,建立在坚硬、透光性差的骨性材料内部观察、研究荧光基因标记细胞的方法.方法:靶细胞以携带绿色荧光蛋白的重组慢病毒载体标记后,接种于骨性生物支架材料内部;负载荧光细胞的生物材料经多聚甲醛固定后,研究不同脱钙剂对细胞荧光的影响;负载荧光细胞的生物材料经自创的半固体脱钙体系脱钙后,制备冰冻切片,并与塑料包埋切片、常规石蜡切片比较.结果:荧光倒置显微镜可以观察到在生物材料内部生长的绿色荧光细胞.骨性材料在半固体脱钙过程中,荧光倒置显微镜可以观察到,材料中不透光的坚硬钙质成分逐渐消失,而细胞在原位保持形态和荧光;以不脱钙塑料包埋切片为对照,半固体脱钙和随后的冰冻切片可原位精细保持细胞的荧光和形态,且可适用于大块骨性组织.结论:本研究采用自行试制的半固体脱钙体系,可原位保留骨性材料内部生长细胞的位置、形态和荧光,为进行骨性材料内部结构及功能的相关研究提供依据.
作者：江汕；江千里；裴国献；赵培冉 刊期： 2009年第04期
目的:探讨参附注射液(SFI)对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠白细胞介素-18(IL-18)和白细胞介素-1β(IL-1β)的影响.方法:参照Rice法制备新生大鼠HIBD模型,将新生7 日龄SD大鼠随机分为假手术组(S)、生理盐水对照组(C)、参附治疗组(SF),每组按术后观察时间点不同进一步分为3、12、24 h、6、14天5个亚组,用ELISA方法检测病变侧脑组织中IL-18、IL-1β水平.结果:C组和SF组IL-1β(12、24 h、6天)、IL-18(24、6、14天)表达水平均较S组升高,其差别均有统计学意义(P<0.01);IL-1β在HI后12 h即达到高峰,随后开始下降,14天已降至正常水平.IL-18在HI后24 h开始增加,6天达到高峰,之后开始下降,14天仍高于S组(P<0.01). SF组IL-1β表达水平在12、24 h、6天较C组降低,其差别均有统计学意义(P<0.01);SF组IL-18表达水平在24 h、6、14天较C组减少,其差别均有统计学意义(P<0.01).结论:HIBD后大鼠病变侧大脑皮层IL-18、IL-1β水平明显升高,参附注射液(SFI)下调HIBD新生大鼠IL-18和IL-1β的表达水平,SFI对新生大鼠HIBD有保护作用.
作者：徐艳；陈群娥；王军；王伟；张文辉；周长美；朱红梅；张绍美 刊期： 2009年第04期
目的:探讨阴道超声测量子宫内膜厚度对预测异位妊娠的应用价值.方法:采用阴道超声及血p2HCG对626例异位妊娠疑似患者随访比较,同时观察子宫内膜厚度.结果:626例异位妊娠疑似患者中427例确诊为异位妊娠,97例为自然流产,102例为宫内孕.测得异位妊娠、自然流产及正常宫内孕内膜厚度分别为(7.95 ± 1.12)mm、(11.16±1.89)mm、(12.15±1.65)mm,异位妊娠与宫内孕分别相比,子宫内膜厚度之间差异有统计学意义(P<0.05),而其他内部比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:超声测定子宫内膜厚度对预测异位妊娠患者具有参考价值.
作者：金艳；丁竹筠 刊期： 2009年第04期
南京医科大学学报（自然科学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：南京医科大学
