吕征;吕天润;万斌
目的:应用腺病毒载体AdEasy系统构建携带反义多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)的重组腺病毒载体.方法:将MRP基因片段反向克隆到腺病毒载体质粒pAdTrack-CMV上,与骨架质粒在大肠杆菌BJ5183体内进行同源重组,经293细胞包装、扩增后得到携带反义MRP的重组腺病毒AdEasy-GFP-ASmrp.结果:成功地构建了携带反义MRP的重组腺病毒载体系统,经测定病毒滴度可达2.5×109efu/ml,感染复数(multiplicity of infection,MOI)为100时对SMMC7721/ADM细胞株转导效率可达90%以上.结论:腺病毒载体AdEasy系统能简便、有效地产生重组腺病毒,且生成的病毒滴度高、转导效率好,为进一步研究肝癌耐药机制及其逆转方式提供实验基础.
作者:陈琳;苟兴华;严律南;韩蕾;李德华;赵永恒;胡海洋 刊期: 2005年第11期
目的:评价腔内激光治疗下肢浅静脉曲张的临床疗效.方法:39例下肢浅静脉曲张患者,共47条肢体,采用钬激光治疗结合下肢浅静脉高位结扎及钬激光治疗同时行曲张团块及交通支切除.结果:39例患者术后随访2~6个月,彩色超声多普勒检查显示大隐静脉主干均发生血栓性闭塞,所有病例在术后3~4周内均出现曲张静脉消失,色素减轻.结论:腔内钬激光治疗下肢静脉曲张近期(6个月以内)疗效明确,损伤小,术后恢复快,适于推广.
作者:赵伟;李建平;夏加增;孙晓光;姚路斌;周宏;何旻;曹芳;洪波 刊期: 2005年第11期
目的:通过检测川崎病患儿静脉输注丙球治疗前后外周血T细胞表面CD40L(CD154)表达,探讨川崎病冠状动脉损伤的发病机制.方法:采用流式细胞仪检测26例川崎病患儿静脉输注丙球治疗前后、16例其他发热性疾病患儿、15例正常儿童外周血T细胞表面的CD40L表达.采用酶联免疫吸附试验检测相应血清中可溶性CD40L.结果:川崎病患儿CD4+T细胞表面CD40L表达(66.26±6.71)%显著高于其他发热性疾病对照组(58.11±6.35)%及正常儿童对照组(46.96±4.27)%,川崎病患儿静脉输注丙球治疗后明显下降(58.86±7.49)%.川崎病患儿血清中可溶性CD40L(17.36±5.72)ng/ml亦显著高于其他发热性疾病对照组(12.17±4.28)ng/ml及正常儿童对照组(7.48±3.59)ng/ml,静脉输注丙球治疗后无明显下降(16.46±5.12)ng/ml.CD4+T细胞表面CD40L表达与川崎病冠状动脉损伤有关,而CD8+T细胞表面CD40L的表达及可溶性CD40L与冠状动脉损伤无关.川崎病患儿CD4+T细胞表面CD40L表达与C反应蛋白(CRP)水平正相关(r=0.553,P<0.05).结论:CD40L异常表达在川崎病发病机制中其起重要作用.静脉输注丙球能下调CD40L表达,且有利于治疗血管炎.
作者:张雅媛;鲍华英;张兰芳;施圣云;邱卫娟;钱小青;王大为 刊期: 2005年第11期
目的:建立一种方便、实用的慢性器官移植排斥反应模型,为研究器官移植后慢性排斥反应的发病机制、预防和治疗提供平台.方法:以近交系F344大鼠和近交系Lewis大鼠作为供、受体,取供体的双肾作为供肾,借助静脉支架管,行供体的静脉与受体肾静脉的端端吻合,肾动脉与腹主动脉行端侧吻合.施行原位异体肾移植.移植后即给与环孢素腹腔注射.并于术后4周后行病理检查.结果:所有手术均于60 min内完成.所有的受体均存活超过60天,围手术期死亡数为零.受体无急性排斥反应发生.4周后可见典型的慢性排斥反应发生.结论:建立了大鼠慢性排斥反应肾移植模型.为研究慢性排斥反应的发生、进展和干预治疗提供了良好的平台.
作者:冯宁翰;钱立新;华立新;夏国伟;吴军;贺伟峰;宋宁宏;乔迪;徐正铨;张炜;吴宏飞;眭元庚 刊期: 2005年第11期
目的:探讨急性胆源性胰腺炎(AGP)的手术时机.方法:对156例AGP患者根据其是否有胆道梗阻及胰腺是否水肿或坏死分为2组4型进行分析.结果:非梗阻伴水肿型AGP 69例和梗阻伴水肿型AGP 28例均治愈,非梗阻伴坏死型AGP 21例,治愈20例,死亡1例,梗阻伴坏死型AGP 38例,治愈34例,死亡4例.结论:对于非梗阻型急性胆源性胰腺炎可以采取积极的非手术治疗,在2周左右行延期的胆道手术.而梗阻型急性胆源性胰腺炎应在严密监测下积极的非手术治疗24~72 h后,如梗阻不能缓解,则宜早期手术.
作者:姚平;时开网 刊期: 2005年第11期
目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体蛋白在乳腺癌组织中的表达及意义.方法:采用免疫组化法对60例乳腺癌、12例良性乳腺病变组织中VEGF及其受体FLT-1的表达进行检测,探讨其与微血管密度(MVD)、PCNA蛋白及临床病理因素之间的相关性.结果:乳腺癌和良性乳腺组织中VEGF评分分别为8(6~9)分和3(2.25~4.00)分,乳腺癌中表达水平明显升高(P=0.000);乳腺癌组织中血管内皮细胞FLT-1表达阳性率为58.3%,高于良性乳腺组织(25%)(P=0.035),一些乳腺癌细胞也有不同程度FLT-1表达.乳腺癌组织中VEGF与FLT-1表达相关(r=0.311,P=0.016),两者都与MVD相关(r=0.371,P=0.004;r=0.313,P=0.015);乳腺癌组织中VEGF表达与PCNA相关(r=0.353,P=0.006).乳腺癌组织中VEGF、FLT-1表达与患者年龄、肿块大小、淋巴结转移状况、肿瘤分期、雌、孕激素受体状况之间无明显相关性.结论:乳腺癌组织中VEGF、FLT-1蛋白表达水平升高,且与MVD相关,提示它们在乳腺癌血管生成中起重要作用,乳腺癌组织中VEGF表达与PCNA相关,提示高表达VEGF的肿瘤细胞增殖性较强.另外,发现一些乳腺癌细胞也有不同程度FLT-1表达,提示VEGF、FLT-1在乳腺癌生长中起自分泌调节作用.
作者:刘晓;范萍;王水;武正炎 刊期: 2005年第11期
目的:探讨新辅助化疗对乳腺癌激素受体表达强度和表达状态的影响.方法:检测新辅助化疗组和对照组(未新辅助化疗)的乳腺癌患者化疗前或术前空芯针穿刺标本和后手术切除的肿瘤组织雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达情况,并比较两组手术前后ER和PR表达变化的差异.结果:新辅助化疗组60例,ER、PR表达强度发生改变分别为18.3%(11/60)和13.3%(8/60),ER、PR状态发生改变分别为6.7%(4/60)和3.3%(2/60);对照组60例,ER、PR表达强度发生改变分别为15%(9/60)和10%(6/60),ER、PR状态发生改变分别为5.0%(3/60)和3.3%(2/60),两组ER、PR表达强度及表达状态均有改变,但差异无显著性(P>0.05).结论:新辅助化疗对乳腺癌患者的ER、PR表达强度和表达状态的改变无明显影响.
作者:费伯健;周士福;金留根;林奇 刊期: 2005年第11期
目的:探讨经静脉心肌声学造影(MCE)对慢性心肌缺血心肌血流灌注的诊断价值.方法:建立慢性心肌缺血猪模型,经外周静脉持续滴注微泡造影剂,分别于造模前、造模4周后测算A·β、标化A·β,比较造模前后心肌灌注图像及A·β、标化A·β.结果:造模前声学微泡在心肌组织中均匀分布,色泽明亮,A·β、标化A·β分别为49.82±14.07、1.01±0.21;Ameroid环套扎LCX后4周,局部心肌基本无灌注,回声低暗,A·β、标化A·β分别为4.08±3.56、0.13±0.07,明显低于造模前.结论:心肌声学造影可用于量化评估慢性心肌缺血时的心肌血流灌注状态.
作者:周蕾;许迪;姚静;金玉;唐晓霞;陈莉;雍永宏 刊期: 2005年第11期
目的:观察江苏宜兴地区中小学生的常年性变应原致敏状况.方法:2002~2003年以宜兴市丁山镇930名中小学生(6~16岁)为对象进行室尘和尘螨变应原皮肤划痕试验.结果:室尘和尘螨变应原的皮试阳性率分别为13.1%和10.0%,总阳性率为17.5%.Cochran Armitage趋势分析表明,变应原致敏率随年龄增长而上升(P<0.005);小学一、四年级与初中一年级各组间变应原致敏率无统计学差异,而高中一年级学生的致敏率明显高于其他各年级组(P<0.005).结论:宜兴地区中小学生对常年性变应原的致敏随年龄呈增加趋势,尤以高中学生的致敏率上升为著,应加强环境干预.
作者:鲍永生;殷敏;程雷;高德根;鲁春林;黄永豪;石川和夫;徐其昌;三好彰 刊期: 2005年第11期
目的:比较13C-辛酸呼气试验(OBT)与胃排空功能超声检测(GEU)在糖尿病患者胃排空功能检测中的一致性.方法:2型糖尿病患者71例,对照组30例,分别行OBT与GEU检测,评价胃排空功能,并分别比较两种检测手段所得参数的相关性.结果:OBT显示糖尿病组胃半排空时间(GET1/2)、延迟相时间(tlag)均明显延长,120min胃残留率(Ret120min)增加.GEU亦显示不同时点糖尿病组胃排空率延迟.两种方法在不同时间点胃排空率具有高度相关性,对照组:60 min r=0.501P=0.005,120min r=0.526 P=0.002;糖尿病组:60 min r=0.604 P<0.001,120 min r=0.651 P<0.001.结论:应用OBT方法检测糖尿病胃动力障碍与GEU所得结果一致性较好,OBT不失为一种相对理想和临床实用的检测方法.
作者:莫永珍;卞茸文;娄青林;顾刘宝;张建宁;夏晖;欧阳晓俊;何戎华 刊期: 2005年第11期
目的:探讨用无内固定物的半腱肌腱股薄肌腱重建前交叉韧带的临床运用和效果.方法:南京医科大学第一附属医院自2002年12月至2004年6月对33例前交叉韧带损伤的患者进行了无内固定物的半腱肌腱股薄肌腱重建前交叉韧带术,其中13例移植肌腱采用二股半腱肌腱和二股股薄肌腱,另20例仅为二股半腱肌腱,术前和术后进行Lachman试验评估膝关节的稳定性,用Lysholm评分方法评定膝关节功能.结果:术前Lachman试验均为阳性,术后29例为阴性,4例为阳性.术前Lysholm评分为36~57分,术后Lysholm评分为71~96分.结论:无内固定物的半腱肌腱股薄肌腱重建前交叉韧带为生物固定,固定可靠,费用少,短期效果好,中长期效果有待观察.
作者:吕征;吕天润;万斌 刊期: 2005年第11期
目的:探讨房间隔缺损(ASD)患者心房肌组织中WNT4基因的表达变化,分析WNT4基因与ASD病理生理学之间的关系.方法:获取20例单纯Ⅱ孔型ASD患者和9例正常对照右房心耳肌组织标本,采用RT-PCR技术检测心房肌组织中WNT4基因mRNA的表达丰度.结果:WNT4基因表达于正常和ASD患者心房肌组织中,正常心肌组织中的表达丰度为(54.67±25.85)%,ASD患者心肌组织中的表达丰度为(33.21±20.37)%,ASD患者心肌组织中WNT4基因的表达丰度显著低于正常对照(t=2.4151,P<0.05).结论:WNT4基因在心肌组织中的异常表达可能与ASD的病理生理学有关,其在ASD患者心肌组织中表达下调可能与ASD病理状态下右房压力负荷增加导致胎儿心脏基因程序启动、心脏特异性染色体重构机制有关.
作者:何巧平;孔祥清 刊期: 2005年第11期
目的:探讨急性缺血性卒中(AIS)患者外周血中性粒细胞(PMN)和单核细胞(MNL)表面黏附分子整合素CD11c/CD18表达的变化及意义.方法:采用流式细胞术,单克隆抗体标记测定28例AIS患者发病72 h内及7天时外周血表面PMN、MNL表面黏附分子CD11c/CD18的表达量.同时测试28例健康者作对照.结果:发病72 h内患者组PMN、MNL表面黏附分子CD11c/CD18的表达显著高于对照组(P<0.01);发病7天后患者组CD11c/CD18的表达有所下降,与72 h内检测结果相比差异无统计学意义(P>0.05);但仍显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论:AIS时激活的PMN、MNL上整合素CD11c/CD18表达上调,可能参与了AIS的炎症反应机制.
作者:夏文伟;赵薛旭;李作汉 刊期: 2005年第11期
目的:探讨P波离散度(Pd)和血浆脑钠肽水平(BNP)预测老年高血压病患者伴发的阵发性心房颤动的发生.方法:观察34例有阵发性心房颤动的老年高血压病患者(A组,平均年龄70岁)的血浆BNP水平、大P波时限(Pmax)、小P波时限(Pmin)、Pd、左房内径(LAD)和左室射血分数(LVEF),并与34例无阵发性心房颤动病史的高血压病患者(B组,平均年龄71岁)比较.结果:血浆BNP水平:A组显著高于B组,(63.75±54.29)ng/L比(32.72±23.37)ng/L,P<0.01;Pd:A组显著高于B组,(69.72±25.04)ms比(28.22±14.15)ms,P<0.001;Pmax A组显著高于B组,(140.02±20.15)ms比(110.35±18.83)ms,P<0.001;LvEF:A组显著低于B组,(61.84±9.01)%比(67.72±5.18)%,P<0.05;Pmin、LAD两组差别无统计学差异.结论:血浆BNP水平和Pd均能预测老年高血压病患者伴发的阵发性心房颤动的发生.
作者:熊亚晴;潘梓青;郭红梅;程学萱 刊期: 2005年第11期
随着腹腔镜技术的日益成熟,腹腔镜下胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)已成为胆囊切除的金标准.本文就LC术中常见问题,结合文献探讨如下.
作者:胡忠亚 刊期: 2005年第11期
目的:对治疗股骨髁部不稳定骨折常用的4种内固定方式进行生物力学评价,为临床治疗提供理论依据.方法:采集24根尸体股骨,模拟股骨髁T形骨折,分组用股骨逆行交锁髓内钉、股骨髁解剖钢板(远端为3孔)、动力髁螺钉和95°角钢板固定,进行轴向压缩试验和轴向扭转试验,测量标本的应变、纵向压缩位移、水平分离位移和扭转角度.结果:发现在同等载荷条件下,中心型逆行交锁髓内钉的强度和刚度优于侧方钢板螺钉系统(P<0.01);动力髁螺钉和逆行交锁髓内钉的抗扭强度和刚度优于95°角钢板和股骨髁解剖钢板(P<0.01).从应力遮挡实验来看,逆行交锁髓内钉和动力髁螺钉的应力遮挡率大.结论:采用逆行交锁髓内钉和动力髁螺钉固定股骨髁T形骨折,具有良好的生物力学性能,但应注意它的应力遮挡效应,骨折愈合后及时取出内固定.
作者:沈文东;范卫民 刊期: 2005年第11期
目的:通过构建稳定高表达抑癌基因p16的人胆管癌细胞模型,研究p16对胆管癌细胞增殖的影响及其相关机制.方法:将抑癌基因p16的cDNA构建到高效真核表达的质粒载体pcDNA3-neo中的EcoR I/XbaI位点,构建成p16真核表达质粒pcDNA3p16;通过脂质体法将pcDNA3p16质粒转染人胆管癌细胞系QBC939,经G-418筛选,获得稳定高表达p16的人胆管癌细胞模型.用MTT法测定细胞生长曲线,并测定细胞克隆形成能力,用流式细胞光度术测定细胞周期.用Western分子杂交分析癌基因c-myc的蛋白表达水平.结果:与对照组相比,p16高表达的人胆管癌细胞QBC939的增殖受到明显抑制;流式细胞光度术表明p16的高表达导致了较为明显的G1期阻滞作用,但对细胞周期的其他时相并无影响;Western免疫印迹分析结果表明癌基因c-myc的蛋白水平表达下降.结论:抑癌基因p16下调癌基因c-myc的表达是p16抑制细胞增殖的分子机制之一.
作者:陆文熊;傅赞;王若宁;德伟;赵翰林 刊期: 2005年第11期
目的:探讨嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)、总IgE(TIgE)水平、吸入过敏原过筛(Phadiatop)试验和常用食物过敏原过筛(Fx5E)试验在哮喘病中的意义.方法:收集61例哮喘发作患儿、13例正常儿童外周血标本以Pharmacia CAP系统检测血清中的ECP、TigE水平以及Phadiatop、Fx5E的阳性率.结果:哮喘发作组血清ECP、TIgE水平均高于正常儿童组(P<0.001).哮喘组的Phadiatop、Fx5E的阳性率也远高于正常儿童组(P<0.001).结论:TIgE、ECP是反应哮喘气道炎症发生发展的重要指标之一.结合Phadiatop和Fx5E检测结果,对哮喘诊断、病情判断和指导临床治疗具有重要的临床价值.
作者:王振开;潘建伟 刊期: 2005年第11期
为掌握夏秋季腹泻的流行情况,了解我市腹泻病原菌的分布、变化和致病性,并为预防、诊断和治疗提供科学依据.我们于1998年5月~2003年11月,对我院肠道门诊和急性腹泻患者Ⅱ号病监测的同时进行针对性调查,在380例水样腹泻患者的大便,对气单胞菌进行分离,鉴定及药敏试验,现将结果报告如下:
作者:顾筱敏;潘宇红 刊期: 2005年第11期
目的:探讨毛细支气管炎患儿血清可溶性白介素-2受体(sIL-2R)变化的临床意义.方法:应用ELISA测定急性毛细支气管炎发作期80例、哮喘急性发作期23例、健康对照组17例血清sIL-2R水平;同时uniCAP100变态反应检测仪测定血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、特异性IgE(sIgE).结果:急性毛细支气管炎发作期与哮喘急性发作期sIL-2R水平均高于对照组(P<0.01),两患病组间无差异(P>0.05),毛细支气管炎发作期sIL-2R水平的增高与血清ECP的增高、sIgE阳性无关.结论:毛细支气管炎发作期sIL-2R水平增高是普遍的,T细胞激活参与疾病的免疫病理机制.
作者:滕源;谢娟娟;谢国强;朱小红 刊期: 2005年第11期