孙铸兴；王凉；刘斌；吴锡平；刘晓斌；华佳；祁真；尤宇望；张志坚；张悦；单炜薇
目的 探讨RNA干扰乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对CoCl2诱导的乏氧人肝癌细胞SMMC-7721放射敏感性的影响及其机制.方法 利用分子生物学技术构建靶向HIF-1α基因的RNA干扰质粒pGenesil-HIF,脂质体介导转染SMMC-7721细胞后进行乏氧培养,分别采用RT-PCR和Western blot法检测HIF-1α基因的mRNA和蛋白表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,克隆存活实验检测细胞放射敏感性的变化.结果 酶切鉴定和测序证实重组质粒pGenesil-HIF构建正确,转染质粒后乏氧培养24 h,SMMC-7721细胞HIF-1α基因的mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组和阴性干扰组(P＜0.05或P＜0.01);乏氧培养24 h、48 h和72 h后,HIF-1α干扰组细胞增殖活性明显低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),细胞阻滞于G0/G1期(P＜0.01);乏氧培养48 h和72 h后HIF-1α干扰组细胞凋亡百分率明显高于对照组(P＜0.01);乏氧培养72 h后HIF-1α干扰组SMMC-7721细胞放射增敏比为1.45.结论 RNA干扰HIF-1α基因可增强乏氧人肝癌细胞SMMC-7721的放射敏感性,其机制可能与RNA干扰HIF-1α基因抑制乏氧细胞增殖和诱导凋亡有关.
作者：杨巍；朱巍；曹建平；刘芬菊；陈秋 刊期： 2011年第02期
目的 探讨阿魏酸钠对急性脑梗死(ACI)的疗效,并观察其对ACI患者血浆P选择素、血栓素B2(TXB2)、血管性血友病因子(vWF)及6-酮-前列环素F1α(6-keto-PGF1α)的影响.方法 将160例ACI患者随机均分为两组,对照组行常规治疗,观察组在此治疗基础上每天静滴300 mg阿魏酸钠.治疗前后对两组患者进行神经功能缺损程度评分,用酶标法测定P-选择素和vWF,用放免法测定TXB2和6-keto-PGF1α.结果 与对照组比较,观察组神经功能缺损程度评分明显降低,血浆P-选择素、TXB2和vWF降低,而6-keto-PGF1α升高(P＜0.05或＜0.01).结论 阿魏酸钠可能通过抑制ACI患者的血小板活化、调节内皮细胞的功能来改善血液循环,提高临床疗效.
作者：周翔；孙丽红；方琪；沈文红 刊期： 2011年第02期
目的 探讨半枝莲总黄酮对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变形成早期血清脂质水平、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)表达的影响.方法 载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、银杏叶胶囊组和半枝莲总黄酮高、中、低剂量组,取正常C57BL/6小鼠为对照组,每组6只.除模型组、对照组给予等容量羧甲基纤维素钠外,其他各组分别给予阳性对照药与受试药8周.处死小鼠,ELISA法检测血脂水平,黄嘌呤氧化酶法检测SOD活力,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,HE染色观察主动脉形态学变化.结果 半枝莲总黄酮中、高剂量组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平明显低于模型组,高剂量组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显高于模型组(P＜0.05或0.01).半枝莲总黄酮3个剂量组的MDA含量较模型组显著减少,SOD活性表达水平较模型组显著升高(均P＜0.01).结论 半枝莲总黄酮可通过降低载脂蛋白E基因敲除小鼠TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平,升高SOD活性,降低MDA含量,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用.
作者：祝娉婷；卜平；孙云；郑新梅；张振刚；张旭东；孙党红 刊期： 2011年第02期
目的 探讨急性冠脉综合征(ACS)患者体内血小板活化、CD40配体(CD40L或CD154)的表达及可溶性CD40L(sCD40L)变化的临床意义.方法 71例住院确诊为冠心病的患者中,稳定性心绞痛(SA)19例,不稳定性心绞痛(UA)23例,急性心肌梗死(AMI)29例.另选对照20例.应用直接免疫荧光流式细胞术测定各组病例血小板表达CD40L和P-选择素(CD62P)的水平,用酶联免疫吸附法测定血清sCD40L水平.结果 ACS患者(包括UA组和AMI组)血小板表达CD40L和CD62P的水平及血清sCD40L水平明显高于SA患者和对照组(P＜0.05),UA组和AMI组、SA组和正常对照组之间的差异均无统计学意义(P＞0.05).sCD40L水平与低密度脂蛋白(LDL)、脂蛋白a水平成正相关.结论 CD40L可能参与了ACS的发生,且可能反映动脉粥样斑块的不稳定.
作者：曹东来；杨向军；蒋文平 刊期： 2011年第02期
目的 探讨褪黑素(MT)保护大鼠肝缺血再灌注损伤的机制.方法 采取大鼠第一肝门阻断的缺血再灌注模型,将健康雄性SD大鼠64只随机分为两组:对照组和MT组,观察每组动物的病理切片,分别检测血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)及肝组织匀浆中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量,免疫组化测定诱导型NO合酶(iNOS)的表达.结果 肝脏缺血再灌注后,有明显的病理损伤改变.MT组再灌注2 h、4 h血清ALT、LDH、肝组织匀浆中MDA和SOD含量与对照组相比均明显降低(均P＜0.01),MT组iNOS表达明显低于对照组(P＜0.01).结论 自由基产生过多是肝脏缺血再灌注损伤初期的主要原因,给予MT预处理可通过调节iNOS和SOD来降低MDA、NO水平,从而减轻肝脏损伤.
作者：杜鹏；吴浩荣；耿小平 刊期： 2011年第02期
目的 探讨产前胎儿超声心动图检查方法的临床价值.方法 应用彩色多普勒超声诊断仪对510例孕20～40周高危孕妇行产前胎儿超声心动图检查,并将胎儿超声检查与胎儿尸检或分娩后彩色多普勒超声检查结果进行对照.结果 胎儿超声心动图510例中,检出异常者71例,结构性心脏异常50例(9.80%),3例未尸检,2例随访丢失,2例生后未见异常,3例漏诊(1例为室间隔缺损,2例为房间隔缺损);非结构性心脏异常21例(4.12%),6例生后未见明显异常.超声心动图检查胎儿异常的敏感度为95.08%,特异度为98.20%,阳性预测值为87.88%,阴性预测值为99.32%.结论 胎儿超声心动图检查对胎儿结构性心血管异常的诊断有重要作用,常规胎儿超声心动图的开展可以提高其检出率.
作者：姚长芳；夏飞；顾欣贤；徐秋琴；沈宗姬；杨俊华 刊期： 2011年第02期
目的 对5个遗传性血小板无力症(GT)家系进行临床特征分析及基因突变检测,以探索其发病机制.方法 通过出血病史、家族史调查,止血和凝血指标检测,血小板聚集实验和流式细胞术检测血小板表面整合素αⅡbβ3表达情况明确5个GT家系的诊断,并用PCR扩增结合直接测序法分析先证者及家系成员的整合素αⅡb基因和β3基因的所有外显子及其侧翼序列,突变位点经检索SNP数据库及查找相关文献排除多态性可能.结果 5个GT家系先证者血小板计数基本正常,凝血象正常,血小板对诱导剂二磷酸腺苷(ADP)反应低下,而对诱导剂瑞斯托霉素反应基本正常;流式细胞术检测结果显示:先证者一为变异型GT,先证者二为Ⅱ型GT,其余3个先证者均为I型GT.基因分析共发现1例杂合突变及4例纯合突变:发生在αⅡb基因的4种突变分别为1652C＞T(551Arg＞Gln)、2671C＞T(891Gln＞stop)、2870C＞T(957Ser＞Leu)、2893-2897insC,发生在β3基因的2种突变分别为1199G＞A(400Cys＞Tyr)、1574G＞A(525Gly＞Asp).结论 β3 1199G＞A纯合突变是家系一先证者发生GT的原因;β3 1574G＞A纯合突变是家系二先证者发生GT的原因;αⅡb 1652C＞T纯合突变是家系三先证者发生GT的原因;αⅡb 2671C＞T(891Gln＞stop)纯合突变是家系四先证者发生GT的原因;αⅡb 2870C＞T(957Ser＞Leu)、2893-2897insC双重杂合突是家系五先证者发生GT的原因.其中2671C＞T(891Gln＞stop)、2870C＞T(957Ser＞Leu)和2893-2897insC这3种突变为首次报道发生于αⅡb基因的突变,1574G＞A(525 Gly＞Asp)为首次报道发生于β3基因的突变.
作者：崔庆亚；余自强；苏健；张威；白霞；阮长耿 刊期： 2011年第02期
目的 克隆人CD40基因并原核高效表达其胞外段.方法 采用RT-PCR法,从高表达人CD40抗原的XG-2细胞中扩增CD40全长基因,并将其插入pMD18-T载体中进行测序验证.用特异引物扩增CD40抗原分子的胞外段基因(可溶性CD40、sCD40基因片段),再亚克隆至原核表达载体pGEX-5x-3,将测序正确的重组表达载体转化大肠杆菌B121(DE3),用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达,Western blot检测目的蛋白.结果 RT-PCR能从XG-2细胞总RNA中扩增出特异的目的基因,测序结果显示与GenBank中登录的完全一致,构建的原核表达重组载体pGEX-5x-3/hCD40ECD在表达宿主菌BL21(DE3)中经IPTG诱导能获得有效表达,Western blot证实了目的蛋白条带的特异性.结论 获得了人CD40分子的基因及其胞外段原核表达产物,为进一步研究CD40分子的功能和sCD40的应用奠定了良好的基础.
作者：姜智；陈永井；葛彦；张学光 刊期： 2011年第02期
目的 探讨核转录因子(NF)-KB65的阻断剂SN50对裸鼠人胃癌移植瘤生长的影响.方法 建立裸鼠胃癌移植瘤模型后将20只裸鼠随机分成对照组(n＝5)和SN50实验组(n＝15),用生理盐水处理对照组、SN50处理实验组,于第5 d、10 d、15 d分别取5只裸鼠测量肿瘤体积,计算抑瘤率.采用免疫组织化学染色观察凋亡指标Bcl-2、Bax和p53表达的变化.结果 使用SN50处理肿瘤后5 d、10 d、15 d肿瘤生长抑制率逐渐增高;与对照组相比,凋亡指标Bcl-2的表达下调,p53和Bax的表达上调(均P＜0.05).结论 NF-KBp65的阻断剂SN50可能通过下调Bcl-2的表达和上调p53、Bax的表达导致细胞凋亡,从而终抑制移植瘤的生长.
作者：郁立衍；朱宝松；赵奎；孙家磊；邢春根 刊期： 2011年第02期
目的 探讨组织蛋白酶B和μ-钙激活蛋白酶的特异性抑制剂E64d对创伤性脑损伤(TBI)后神经细胞的保护作用,并对其调节机制进行初步探讨,为临床救治TBI患者提供新的靶点.方法 采用改良的自由落体损伤装置建立小鼠TBI模型,实验组侧脑室注射0.5μg/μ1的E64d 1μ1,对照组侧脑室注射等体积1%的二甲基亚砜,并按伤后时间不同分为伤后1 h、6 h、12 h、24 h、48 h组,并按时间点断头取脑,运用Western blot法检测TBI后各实验组脑组织中凋亡相关蛋白caspase-3、tBid的表达情况,运用免疫荧光法进行caspase-3阳性细胞计数.结果 实验组凋亡相关蛋白caspase-3、tBid的表达量明显降低,且以伤后24～48 h为显著(P＜0.05).结论 E64d可以通过阻断内外源的凋亡通路对TBI后神经细胞起保护作用,改善神经细胞损伤导致的神经功能障碍,可能为治疗脑外伤提供新靶点,为研究防治创伤性脑损伤后继发性损伤提供新思路.
作者：杨瑞；罗承良；孙玉霞；包海军；戴定坤；倪宏；陈奚萍；秦正红；陶陆阳 刊期： 2011年第02期
目的 检测血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp,亦称ADAMTS13)与血管性血友病因子(vWF)在肾病综合征(NS)患者血浆中的抗原水平并探讨其临床意义.方法 将70例NS患者分为膜性肾病(MN)组和非膜性肾病(non-MN)组,用ELISA法检测MN组、non-MN组和正常对照组血浆ADAMTS13和vWF抗原,比较各组间ADAMTS13抗原、vWF抗原及vWF/ADAMTS13比值的差异及其与临床指标的关系.结果 (1)与正常对照组相比,两组患者血浆ADAMTS13抗原均明显降低(均P＜0.05),而vWF抗原均明显升高(均P＜0.05).vWF/ADAMTS13比值在3组间两两比较,差异均有高度统计学意义(均P＜0.01).(2)相关分析显示,NS患者血浆ADAMTS13抗原与血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)成正相关(均P＜0.01),与24 h尿蛋白、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)成负相关(P＜0.05或0.01);血浆vWF抗原与TP、ALB成负相关,与24 h尿蛋白、TG、血浆纤维蛋白原、D-二聚体成正相关(P＜0.05或0.01);血浆ADAMTS13抗原与vWF抗原之间无明显相关性(P＞0.05).结论 血浆AD-AMTS13抗原水平低下、ADAMTS13和vWF抗原比例失衡可能是NS形成血栓的重要机制之一.
作者：蒋丽琼；卢国元；沈蕾 刊期： 2011年第02期
目的 探讨地西他滨(DAC)联合抗CD33单抗(GO)治疗难治性急性髓细胞性白血病(AML)的疗效和安全性.方法 对2例难治性AML(M4)患者均进行1个疗程的DAC联合CO治疗(具体剂量为DAC:20 mg·m-2·d.×5 d,第1～5天,GO 9 mg/m2,第6天),应用骨髓涂片、定期监测血常规评价其疗效.结果 经过1个疗程的DAC联合GO治疗后,1例患者未出现疾病进展,骨髓中原幼细胞由35%降至27.5%,巨核细胞由2个/片增加至＞200个/片,血小板由减少改善为数量基本正常,临床上血小板恢复正常水平,一般情况良好.另1例在治疗期间高白细胞得以控制,治疗后第15天复查骨髓提示原幼细胞由38.5%降至12.5%,获得部分缓解.2例患者均未出现肝静脉闭塞病(VOD)及其他脏器功能损害表现.结论 DAC联合GO治疗难治性AML安全可行,尤其是对于一般情况差、不能耐受高剂量化疗或高剂量挽救化疗失败的患者,不失为一种新的治疗选择.
作者：唐晓文；魏孝艾；孙爱宁；陈峰；胡晓慧；颜灵芝；韩悦；顾斌；沈文红；吴德沛 刊期： 2011年第02期
目的 探讨酪氨酸激酶抑制剂AG-490对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞的增殖及凋亡的影响.方法 采用MTT法观察AG-490在体外对人慢性髓系白血病急变细胞株K562细胞增殖的影响,光学显微镜下观察AG-490对K562细胞形态的变化,流式细胞术检测AG-490对K562细胞凋亡及细胞周期的影响,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR技术检测AG-490作用后K562细胞bcr/abl融合基因及凋亡相关基因c-myc mRNA的表达水平.结果 AG-490可明显抑制K562细胞的增殖,并随药物作用时间的延长和浓度的增加,抑制作用越明显(P＜0.05);AG-490可使细胞周期阻滞于G1期,促使其凋亡(P＜0.05).AG-490作用于K562细胞48 h后bcr/abl融合基因的表达无明显改变(P＞0.05),而c-myc的表达水平明显降低(P＜0.05).结论 AG-490可能通过阻断JAK2信号通路而下调c-myc的表达,使K562细胞阻滞于G1期,从而抑制K562细胞增殖,促使其凋亡.
作者：高媛；姜智；杨玲焰；郭毅；李炜；郭向红；徐岚；吴士良 刊期： 2011年第02期
目的 观察阿托伐他汀对冠状动脉介入诊断及治疗的患者肾功能、尿微量蛋白改变的影响.方法 246例冠状动脉介入诊断与治疗的患者随机分为他汀组和对照组,每组123例.他汀组于冠状动脉造影术前3 d开始每晚顿服阿托伐他汀40mg,对照组未服用阿托伐他汀及其他调脂类药.所有患者采用水化治疗.观察患者术前1 d、术后36～48 h血清肌酐(Scr)、超敏C反应蛋白(hsCRP)、内生肌酐清除率(Ccr)、尿α1微球蛋白(d1-MG)/尿肌酐(Ucr)、尿微量白蛋白(mALB)/尿肌酐(Ucr)的改变情况.结果 两组患者术后血hsCRP、Scr,尿α1-MG/Ucr及mALB/Ucr较术前均升高(均P＜0.05),而血Ccr较术前降低(P＜0.05).对照组术后血hsCRP、尿α1-MG/Ucr较他汀组术后明显升高(P＜0.05),对照组造影剂肾病发生率(8.13%)高于他汀组(0.81%,P＜0.05).结论 造影剂可造成轻微的肾功能损害;术前3 d使用大剂量阿托伐他汀,可能具有减轻炎症反应、预防造影剂肾病发生的作用.
作者：张东亚；朱静；陈建昌；徐卫亭；罗小雨；赵良平 刊期： 2011年第02期
目的 研究三氧化二砷(As2O3)对人脑胶质瘤干祖细胞增殖和周期的影响及其相关分子表达.方法 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定As2O3对人脑胶质瘤干祖细胞抑制率,流式细胞术检测As2O3对该细胞凋亡和周期的影响,透射电镜观察细胞形态学变化,Western blot和RT-PCR检测Fas、FasL和p53变化.结果 As2O3可明显抑制人脑胶质瘤干祖细胞的增殖,且呈一定的时间剂量依赖关系(P＜0.05);此外,人脑胶质瘤干祖细胞周期G1期细胞的比例增加,S期和G2/M期细胞的比例减少;通过形态学观察发现,随着As2O3剂量的增加,镜下凋亡细胞比例逐渐增加,凋亡小体的数量增加;Western blot检测发现,FasL表达上调,p53下调(P＜0.05).结论 As2O3对人脑胶质瘤干祖细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与上调FasL和下调p53表达相关.
作者：张祖斌；蒋小岗；梁中琴；周文轩；郭次仪；顾振纶 刊期： 2011年第02期
目的 研究ELAC2在体内外对前列腺癌生长的影响.方法 利用脂质体转染法将ELAC2基因转入Du-145细胞,建立稳定表达ELAC2的细胞株,同时设立未转染Du-145和转染空载体的Du-145/pcDNA3作为对照.采用RT-PCR和Western blot法检测转染前后ELAC2的mRNA和蛋白表达水平;MTT法检测细胞生长和增殖情况.采用BALB/c裸鼠建立Du-145前列腺癌移植瘤动物模型,检测在体内ELAC2对前列腺癌生长的影响.结果 RT-PCR检测结果显示,ELAC2在Du-145/ELAC2细胞中mRNA表达明显增加,Western blot法检测同样发现ELAC2蛋白表达水平显著升高.MTT检测结果表明,Du-145/ELAC2细胞增殖较对照组细胞明显减缓(P＜0.05).在体内,Du-145/ELAC2组平均瘤质量和瘤体积均较对照组明显降低(P＜0.05).结论 提高ELAC2基因表达水平能明显抑制体内外前列腺癌细胞Du-145的生长,提示ELAC2可作为前列腺癌治疗的一个新基因.
作者：宁萍；焦旸；胡旭东；朱巍；徐加英；薛景；樊赛军 刊期： 2011年第02期
目的 建立阿尔茨海默病(AD)个体健康危险因素的评价模型,预测个体发生阿尔茨海默病的风险.方法 通过文献检索的方法,收集AD危险因素的病例对照研究资料和队列研究资料,并用RevMan软件对病例对照研究进行Meta分析,以合并的比值比(OR)值和相对危险度(RR)值为基础建立危险分数表,从而建立危险因素评价模型.结果 建立了危险分数表,将表中所列有关分数相加得出组合危险分数,借此预测发病危险.结论 运用该模型可对个体未来发生AD的危险进行预测.
作者：惠晓萍；徐勇 刊期： 2011年第02期
目的 克隆人Tim-3基因,并构建含有该目的基因的重组真核表达载体,获得稳定表达人Tim-3分子的L929基因转染细胞.方法 采用RT-PCR方法从人外周血T淋巴细胞中克隆出Tim-3基因,通过双酶切(XhoI,Sa-II)装入真核表达载体plRES2-EGFP中,脂质体法转染L929细胞,72 h后加入G418进行筛选,挑选出能稳定表达Tim-3蛋白的L929细胞株.结果 构建了用于表达的含Tim-3基因的重组真核表达载体,经脂质体转染L929细胞,继而经RT-PCR和流式细胞术表型检测,筛选出稳定表达人Tim-3蛋白的L929转基因细胞.结论 构建了含人Tim-3基因重组真核表达载体和稳定表达人Tim-3蛋白的细胞株,为该基因功能的后续研究和单克隆抗体的研制奠定了基础.
作者：高鑫；李刚；陈慧；汪家敏；张光波；卢斌峰；张学光 刊期： 2011年第02期
目的 探讨低出生体质量儿的危险因素.方法 搜集2009年9月至2010年3月出生在苏州大学附属第一医院产科的所有新生儿及其母亲产前的流行病学和临床资料,采用线性回归和Logistic回归模型分析低出生体质量的危险因素.结果 单因素分析显示,早产(＜37周)、血小板计数＜100×109/L、红细胞计数＞3.5×1012/L和妊娠期高血压与低出生体质量有关联(P＜0.01),其β值(95%CI)分别为-1 032.9(-1 109.8～-955.9)、-99.1(-244.1～-46.0)、-51.3(-134.3～-31.8)和-342.9(-436.6～-249.2);多重线性回归模型显示,早产(＜37周)、生育史(≥1次)和妊娠期高血压与出生体质量有关联(P＜0.01),其β值(95%CI)分别为-1 000.2(-1 078.1～-922.3)、-212.6(-381.9～-43.3)和-173.4(-245.7～-101.0);多因素Logistic回归模型显示,早产(＜37周)和妊娠高血压与低出生体质量有关联(P＜0.01),其OR值(95%CI)分别为79.5(46.3～136.4)和3.5(1.9～6.4).结论 早产和妊娠高血压疾病是该院低出生体质量重要的独立危险因素.
作者：舒铭铭；潘兴强；陈友国 刊期： 2011年第02期
目的 观察分析重症甲型H1N1流感(重症甲流)患者的临床特点,探讨该病的救治及预后.方法 分析56例重症甲流患者的一般资料、临床表现、实验室检查、肺部CT、治疗及预后.结果 56例中,30～55岁38例(67.9%),有基础疾病者33例(58.9%),出现发热54例(96.4%),白细胞降低18例(32.1%),合并肺部感染56例(100%),死亡6例(10.7%).死亡患者的平均年龄、功能异常脏器数量、须进行机械通气治疗的比例均明显高于存活者(P＜0.05).结论 重症甲流患者年龄偏大,有发热症状并伴肺炎,血常规检查可有异常,年龄大、功能异常的脏器数量多的患者病死率较高;抗病毒药物、激素等的早期应用和控制原发病、氧疗、尽早使用呼吸机是降低病死率的关键.
作者：吴海燕；陈祖涛；吴建成；李燕 刊期： 2011年第02期
苏州大学学报（医学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：苏州大学
