黄瑾瑜；郭亮
目的 克隆人抗黏病毒蛋白-MxA基因,构建其原核表达载体并进行表达、纯化、活性鉴定,为深入开展该蛋白功能的研究奠定基础.方法 从IFN-β诱导的A549细胞系中提取总RNA,通过RT-pCR技术扩增出MxA全长cDNA,克隆于pUC119载体,酶切鉴定后并经测序证实序列正确,再克隆于pET-32a(+)载体上构建表达载体pET-32a(+)-MxA,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达并优化诱导条件,通过NTA-Agarose亲和层析和割胶电洗脱法获取纯化MxA蛋白,用SDS-PACE电泳分析表达产物,并通过对病毒VSV的抑制作用鉴定其活性.结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示RT-PCR扩增出两条片段,大小同预计片段相符,并经测序证实与公布的MxA基因序列一致;重组载体转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳初步鉴定,目的 蛋白约占总菌体蛋白的25%,与预计的分子量91 kd相一致.用NTA-Agarose亲和层析法可获得纯度>95%的目的 蛋白,割胶电洗脱回收法可获得纯度>90%的目的 蛋白.结论 克隆了人抗黏病毒蛋白-MxA基因,克隆基因在大肠杆菌中获得了较高水平的表达,并通过两种方法获得了该蛋白的纯化物.
作者：刘鹏；吴康；王坤；葛正珍；孟祥勋 刊期： 2009年第01期
目的 探讨肺癌患者化疗前后免疫功能变化及和功能状态评分问的关系.方法 60例初治肺癌患者化疗前、化疗两个周期后分别用流式细胞仪检测的外周血淋巴细胞免疫分型并与20例正常体检者作对照.同时对肺癌患者进行功能状态评分.结果 肺癌患者化疗前CD3+,CD4+,NK细胞比例分别为(46.19±8.72)%、(20.57±5.80)%、(17.67±6.53)%,均低于正常对照组[分别是(59.76±6.92)%、(35.89±6.97)%、(21.51±4.64)%],差异有统计学意义(P<0.05),CD8+细胞比例为(28.51±8.21)%,高于正常对照组[(20.93±4.78)%],差异有统计学意义(P<0.05).CD19+细胞比例为(7.54±4.29)%,与正常组[(9.52±4.06)%]相比,差异无统计学意义(P>0.05).一线两药含铂方案化疗两个周期后,肺癌患者外周血CD3+、CD4+、NK细胞比例分别为(57.96±8.33)%、(33.29±6.90)%、(21.48±5.78)%,较化疗前有增多趋势,差异有统计学意义(P<0.05),而CD8+细胞比例为(21.64±5.10)%,较化疗前减少,差异有统计学意义(P<0.05).肺癌患者功能状态评分化疗前平均为1.48±0.60,化疗后平均为1.45±0.95,差异无统计学意义(P>0.05).结论 肺癌患者免疫功能较正常人普遍降低,化疗在短期内有可能使肺癌患者免疫水平得到一定程度恢复,检测肺癌患者外周血淋巴细胞免疫分型可作为疗效评估和全身功能状态评分的补充.
作者：嵇成红；施敏骅 刊期： 2009年第01期
目的 建立实时定量PCR检测小鼠T淋巴细胞中信号结合T细胞受体删除环(sjTREC)水平和T细胞受体β链可变区(TRBV)CDR3的方法,推测其中的初始T细胞的数目和克隆性,评价胸腺输出功能及免疫重建,从而为胸腺输出功能及移植后T细胞免疫提供可靠的研究方法.方法 分别提取小鼠脾脏细胞基因组DNA和总RNA.PCR方法扩增DNA标本目的 片段.纯化鉴定并构建含sjTREC片段的质粒标准品.建立稳定的实时定量PCR反应检测小鼠脾脏淋巴细胞sjTREC含量的方法.采用半巢式PCR扩增TRBV基因产物.采用ABI 3700分析TRBV谱型.结果 构建了可靠的sjTREC和TCRα质粒标准品.在实时定量PCR中建立了可靠的标准曲线.建立的定量PCR方法分析可成功用于脾细胞的sjTREC含量的检测.8周龄BALB/c小鼠脾细胞sjTREC含量为(626±115)拷贝/105个脾细胞.结论 建立了可靠的定量检测小鼠T淋巴细胞中sjTREC含量的方法,建立了分析T细胞谱型的方法,为研究生理和病理条件下胸腺输出功能及T细胞免疫莺建改变提供了可靠的方法.
作者：陈广华；吴德沛；王易；常惠荣；朱子玲；冯宇锋 刊期： 2009年第01期
目的 研究99mTc标记抗人胰腺癌单克隆抗体SZ-121在荷人胰腺癌裸鼠体内的显像及生物分布,探讨其用于胰腺癌早期诊断的可行性.方法 采用皮下种植法建立荷人胰腺癌裸鼠移植瘤模型,以2-亚氨基噻吩盐酸盐(2-IT)修饰SZ-121,99mTc-葡庚糖酸钠(GH)配体交换法标记SZ-121,经裸鼠尾静脉注入99mTc-SZ-121后1、4 h对裸鼠进行γ显像,于24 h测定荷瘤小鼠体内组织的放射性分布.结果 γ显像及生物分布显示,99mTc-SZ-121被静脉注入荷瘤鼠后1 h,肿瘤即清晰显影,随时问延长趋于增浓,且瘤组织与非瘤组织的放射性比值(T/NT)也逐渐增高,肿瘤每克组织百分注射剂量率(%IDPg)曲均高于注射99mTc-IgG的对照组(P(0.05).结论 99mTc-SZ-121具有活体内定位导向能力,显像时间短,可能是一种有前途的胰腺癌显像剂.
作者：尤徐阳；万卫星；何扬；郁春景 刊期： 2009年第01期
目的 探讨南美响尾蛇神经毒素(Crotoxin)对人肺腺癌A549细胞的作用及其对吉非替尼(Iressa)的抗肿瘤效果.方法 通过细胞生长抑制实验和细胞集落形成实验观察Crotoxin及其与Iressa联用对人肺腺癌A549细胞的作用,生长抑制实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,集落形成实验采用平板克隆法.结果 Crotoxin对人胚肺成纤维细胞的生长无明显影响,但可明显抑制人肺腺癌A549细胞的生长,与Iressa联用可增强Iressa的抗肿瘤效果.结论 Crotoxin对人肺腺癌A549细胞的生长有抑制作用,与Iressa联用效应为协同或相加.
作者：叶彬；何靖康；马海涛；秦正红；邬珺超；韩蓉 刊期： 2009年第01期
目的 研究博莱霉素(BLM)所致大鼠肺纤维化的病理形态学变化和三七总皂甙(PNS)的干预作用及其机制.方法 通过气管内注入BLM复制动物肺纤维化模型,于造模后第2天各治疗组开始每天给药,于给药后第7,14,28天分别随机处死一批大鼠,取肺组织行HE染色,用免疫组织化学方法检测肺组织中TGF-β1的表达,并测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量.结果 PNS能抑制实验性肺纤维化大鼠肺组织中胶原沉积及TGF-β1的异常升高,减轻其肺部的病理损害.结论 PNS对BLM诱导产生的肺纤维化有一定的抑制作用.
作者：武慧；冯一中；顾振纶；林军；周文轩；郭次仪 刊期： 2009年第01期
目的 探讨腹腔镜胃痛根治术治疗部分进展期胃癌的可行性和效果.方法 对9例进展期胃癌患者的临床资料进行分析,其中根治性远侧胃次全切除术8例,根治性近侧胃次全切除术1例.结果 9例患者无中转开腹,平均手术时间(260±109)min,平均术中出血量(120±42)ml,平均淋巴结清除数(5.7±2.2)枚,切缘距肿瘤平均长度(6.3±0.5)cm,平均术后进食时间(5.8±2.1)d,平均术后住院天数(12.5±3.4)d,未发生吻合口漏、十二指肠残端漏及死亡.结论 腹腔镜胃癌根治术治疗部分进展期胃癌在技术上是可行的,近期疗效良好,远期疗效有待进一步研究.
作者：范小庆；邢春根；吴浩荣；王浩炜；龚巍 刊期： 2009年第01期
目的 构建Rho蛋白鸟苷解离抑制因子(LyGDI)真核表达载体并建立稳定转染A549细胞株.方法 PCR扩增LyGDI基因片段,构建pEGFP-C1-LyGDI真核表达载体,经酶切、PCR、测序验证其正确性.脂质体法转染真核细胞A549,G418筛选建立稳定转染的细胞株,RT-PCR、免疫印迹检测稳定转染的细胞株.结果 构建了真核表达载体并建立了稳定转染的A549细胞株,成功表达LyGDI蛋白.结论 LyGDI真核表达载体成功构建及稳定转染A549细胞株的建立,为研究LyGDI过度表达对肿瘤侵袭性和转移的影响奠定了实验基础.
作者：董玉金；吴纪霞；王兴丹；曹丽丽；韩琴芳；周新文 刊期： 2009年第01期
目的 应用磁共振选择性激励技术(PROSET)直观地显示腰骶脊神经根.方法 对36例腰骶椎检查者在常规脊柱扫描后加扫PROSET序列,在PROSET序列原始图像上用3PPS对所需观察的腰骶脊神经追踪定位后再做一次PROSET序列扫描,通过ViewForum4.1工作站MIP和MPR重建图像来观察腰骶脊神经根的显示情况.结果 36例受检者中,腰椎间盘突出15例、神经鞘膜囊肿7例、单纯性神经根变异1例、转移瘤3例,正常腰骶脊神经根10例.本组PROSET原始图像均能清楚地显示腰骶脊神经根的结构,结合3PPS定位后PROSET图像能直观地显示脊神经的硬膜囊、神经根、神经节、神经干;MIP重建后的图像能利用不同层厚从不同角度不同方向来显示脊神经根的形态学改变,而MPR重建可获得选择切面的重建图像,显示病变细节.结论 PROSET能清楚地显示腰骶脊神经根的结构,能直观地显示腰骶脊神经根的完整形态,为腰骶脊神经根病变的诊断提供可靠依据.
作者：徐孝秋；刘金来；范国华；郭建峰；王美芹；孙海涛；沈钧康 刊期： 2009年第01期
目的 探讨术后镇痛及镇痛方式对老年患者术后胰岛素抵抗程度的影响.方法 45例择期行上腹部手术的老年非糖尿病患者,随机分为3组,每组15例,I组伞麻联合硬膜外阻滞并保留术后镇痛;Ⅱ组伞麻并行术后静脉镇痛;Ⅲ组全麻后不保留术后镇痛.所有患者分别于术前(硬膜外穿刺或伞麻诱导前)、术后第1天清晨测定血浆血糖(G)、血清胰岛素(INS).计算胰岛素敏感性指数(ISI).观察记录3组术后2、4、8、16、24、48 h患者疼痛评分(VAS).结果 3组术后G、INS水平均明显高于术前,ISI均明显低于术前.差异均有统计学意义(均P<0.05).Ⅲ组术后G、INS明显高于I、Ⅱ组,ISI明显低于I、Ⅱ组,差异均有统计学意义(均P<0.05).I、Ⅱ组VAS芹异无统计学意义(P>0.05).I组和Ⅱ组术前、术后第1天G、INS、ISI差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 老年患者术后镇痛能明显改善腹部手术后胰岛素抵抗程度.小同镇痛模式对术后第1天胰岛素敏感性改变无明显影响.
作者：张清；李培龙 刊期： 2009年第01期
目的 研究人羊膜间充质干细胞分离培养及免疫调节作用.方法 从羊膜中分离和培养间充质干细胞,并通过形态学的结构特征及流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度.建立双向混合淋巴细胞反应体系,根据不同效靶比E/T(hAMSCa/PBMC)加入丝裂霉素处理过的羊膜细胞,用3H掺入法测定淋巴细胞增殖率,观察间充质干细胞对淋巴细胞增殖的影响.结果 从羊膜组织成功培养出间充质干细胞,细胞贴壁生长,在体外短期内可以稳定增殖和传代,细胞具有与骨髓问充质干细胞相似的表面标志,与混合淋巴细胞反应体系共同培养抑制了淋巴细胞增殖,其增殖抑制率与加入的细胞数量成正比.结论 羊膜问充质干细胞可以抑制混合淋巴细胞反应体系中淋巴细胞增殖,对同种异体免疫反应具有负调节作用.
作者：孙鸿丽；吴德沛；沈云峰；毛玉文 刊期： 2009年第01期
目的 通过131I标记GM-CSF研究GM-CSF诱导白血病细胞株表面GM-CSF受体(GMR)的内在化,为131I-GM-CSF的进一步应用提供实验依据.方法 使用氯胺-T的方法对GM-CSF进行131I标记,用三氯醋酸沉淀法观察标记物的放射纯度及稳定性;将标记物分别与TF-1、HL-60、K-562三种白血病细胞株进行孵育,然后检测配体的胞吞效应.结果 氯胺-T法标记GM-CSF,131I标记率为65%,标记物放化纯能达到98%,4℃下静置第4天时放化纯仍能高于85%;131I-GM-CSF/GMR内在化效率在低表达GMR的K-562细胞中仅为10%,高表达GMR的TF-1为48%,为前者的4.8倍,HL-60的效率介于前两者之间为27%.结论 GMR内在化的数量和细胞表面GMR表达水平成正相关,TF-1细胞GMR表达水平高,其内在化率明显高于HL-60细胞和K-562细胞.
作者：周峰；江波；张日；曹国宪；罗世能；周民 刊期： 2009年第01期
目的 观察通心络胶囊对急性脑梗死患者血小板-单核细胞聚集体(PMA)的影响.方法 将80例急性脑梗死患者随机分为阿司匹林治疗组(A组)、阿司匹林+通心络胶囊治疗组(B组)、氯吡格雷治疗组(C组)、氯吡格雷+通心络胶囊治疗组(D组),每组均20例.观察4组患者治疗前后PMA、斯堪的纳维亚神经卒中量表(SNSS)评分、血糖、胆固醇、纤维蛋白原、血小板聚集率(PAR)、可溶性P选择素(sP-sel)和C-反应蛋白(CRP)的变化.结果 PMA水平与PAR、sP-sel、CRP、血糖、胆固醇和纤维蛋白原水平成正相关(P<0.05);与SNSS评分成负相关(P<0.05).脑梗死患者治疗后PMA、PAR均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01),治疗后4组SNSS评分均较治疗前明显改善,芹异有统计学意义(P<0.05);CRP治疗前后均无明显下降,差异均无统计学意义(均P>0.05);sP-sel在B组、C组和D组治疗后均明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05或<0.01).结论 通心络胶囊与抗血小板药物合用町降低患者体内PMA的水平,在抑制血小板活化方面,阿司匹林+通心络胶囊合用与氯吡格雷的效果相似.
作者：刘建芳；王引明；曹勇军；吴延华；冯萍；刘春风 刊期： 2009年第01期
目的 探讨采用Medpor支架全耳廓再造术的术式与效果.方法 26例耳廓缺如患者,采用Medpor支架、皮肤软组织扩张的耳后皮瓣覆盖行耳廓再造.结果 26例皆成功,再造耳廓外形逼真、清晰,随访6个月至5年未见吸收变形.结论 外耳廓缺损采用Medpor支架和扩张的耳后乳突区皮瓣是全耳廓再造术一种较好的方法,效果良好.
作者：张本寿；杨志刚；胡佳乐；徐志久；郑翔；魏福堂 刊期： 2009年第01期
目的 观察快速扩容或麻黄碱预处理对无痛人流手术患者血流动力学的影响.方法 90例ASA I级行无痛人流手术患者,随机分为3组(每组30例),A组(对照组):芬太尼1.5μg/kg+异丙酚2 mg/kg;B组(麻黄碱组):异丙酚20 ml加入麻黄碱15 mg(0.15 rag/kg);C组:在麻醉诱导前15-20 min内快速输入乳酸钠林格液12 ml/kg.结果 A组诱导后SBP、DBP、MAP下降,与基础值相比,差异有统计学意义(P<0.05);B组、C组诱导后SBP、DBP、MAP无明显变化(P>0.05);A组诱导后SBP、DBP、MAP低于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05).A组、C组诱导后HR减慢,与基础值相比,差异有统计学意义(P<0.05),B组HR无明显变化(P>0.05).3组SpO2组间和组内比较,差异均无统计学意义(均P>0.05).结论 快速扩容或麻黄碱预处理均能减轻无痛人流手术过程中异丙酚引起的循环功能抑制,可预防低血压的发生.
作者：胡计嬅；金晓红；杨建平；张慧娟；嵇富海 刊期： 2009年第01期
目的 寻找IRM-2小鼠体内存在的与辐射抗性相关的基因.方法 提取IRM-2小鼠和其亲代小鼠脾细胞总RNA,利用mRNA差异显示技术挑选差异表达片段,对每一条差异带进行特异PCR扩增、克隆和测序.结果 获得IRM-2小鼠独有而亲代小鼠均无的cDNA差异带75条,经测序获得52条差异cDNA序列.与GenBank基因库同源性比较,得到21条与小鼠已知基因不同源的表达序列标签(EST).结论 21条EsT提示IRM-2小鼠体内可能存在辐射抗性相关基因,为进一步分离和鉴定辐射抗性相关基因奠定了基础.
作者：王芹；岳井银；李进；宋力；刘强；穆传杰；吴红英 刊期： 2009年第01期
目的 探讨华法林抗栓治疗对心房颤动(房颤)患者的血小板活化状态的影响.方法 选择106例45-80岁的非瓣膜病持续性房颤患者,随机分为两组,分别给予华法林(INR在1.5-2.5)(华法林组)和阿司匹林150 mg/d(阿司匹林组)治疗并随访1年.于治疗前、治疗后6和12个月,检查血小板计数和血小板大聚集率(MAR),测定血浆血小板α颗粒膜糖蛋白-140(GMP-140)、血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-k-PGF1α)水平.结果 治疗后,华法林组的GMP-140[(31.27±11.47)ng/ml vs(14.08±5.96)ng/ml]和TXB2(112.04 pg/ml vs 90.70 pg/ml)显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.05),阿司匹林组的血小板MAR[(60.54±26.45)% vs(23.29±17.29)]、GMP-140[(31.18±9.78)ng/mlvs(13.11±5.35)ng/ml)、TXB2(103.73 pg/ml vs 38.79 pg/ml)和TXB2/6-k-PGF1α(0.54 vs O.20)显著降低,差异有统计学意义(均P<0.05).Pearson相关分析发现,治疗后GMP-140和TXB2的降低幅度与各自治疗前水平成正相关.随访期间无血栓栓塞和严重出血并发症发生.结论 华法林对房颤患者的血小板活化有抑制作用,但其作用弱于阿司匹林.
作者：李曦；谢英；张维君；温绍君；赵瑞祥；张妍；彭新界；王龙华；周玉杰；文杰；刘雅 刊期： 2009年第01期
目的 探讨狼疮性肾炎患者的临床表现与病理类型的关系.方法 对68例狼疮性肾炎(LN)患者行肾活检,进行临床与病理分析.结果 各病理类型中,Ⅳ型所占比例多,其次为Ⅱ型、V型.Ⅱ型、Ⅲ型主要表现为蛋白尿,且Ⅲ型患者血尿重于Ⅱ型.Ⅳ型和V+Ⅳ型高血压、血尿和肾功能不全发生率均高.V+Ⅲ型与V型蛋白尿均高于Ⅲ型,V+Ⅲ型血尿重于V型和Ⅲ型.Ⅳ型补体C3下降率、抗dsDNA阳性率及活动性指数(AI)明显高于其他类型,差异有统计学意义(P<0.05).慢性指数(CI)以IV型及V型为高,而肾小管间质病变(TIL)以Ⅲ型及Ⅳ型为重.结论 Ⅳ型是常见、活动性高、临床表现突出、预后差的一种类型,需要积极治疗.狼疮性肾炎的病理类型与临床表现有一定相关性,所以临床表现、免疫学指标要和病理结合起来共同制订治疗方案和判断预后.
作者：陈蓓蓓；石永兵 刊期： 2009年第01期
目的 探讨子宫颈癌切除术联合全盆腔照射的疗效及影响生存率的预后因素.方法 回顾性分析77例根治性子宫颈癌切除术后联合全盆腔照射患者的临床资料,采用Kaplan-Meier法计算各亚组患者的生存率.各亚组生存率的比较应用Log-rabk检验,预后的多因素分析采用Cox回归模型.结果 随访时间为5-152个月,中位随访时间为33个月.全组患者1、3、5年的总生存率分别为89.5%、69.8%、51.9%.单因素分析显示患者年龄≤35岁、贫血、分期较晚、肿瘤直径≥4 cm、有淋巴结转移与预后差有关.多因素分析提示年龄、肿瘤直径、淋巴结是否转移是影响生存的独立预后因素.结论 子宫颈癌切除术联合全盆腔照射患者的预后与多种因素有关,年龄是否≤35岁、肿瘤直径是否≥4 cm、淋巴结是否转移是影响生存的独立预后因素.
作者：付金平；范秋虹；朱维培；赵培峰 刊期： 2009年第01期
目的 探讨髋关节置换术后股骨假体周围骨折的病因及其治疗方法.方法 分析髋天节置换术后胶骨假体周围骨折患者12例的临床资料,按Vancouver分型,A型2例,采用保守治疗;B1型7例,应用形状记忆环抱器固定;C型3例,应用锁定加压接骨板内固定.结果 所有病例均获随访,随访时间12～31个,平均18.2个月,骨折均愈合,假体稳定.无感染、畸形愈合、内固定断裂等并发症发生.结论 髋关节置换术后股骨假体周围骨折的治疗比较困难,Vancouver分型标准及治疗方案是较好的指导原则.
作者：李洪伟；孙俊英；马良波 刊期： 2009年第01期
苏州大学学报（医学版）杂志
主管:江苏省教育厅
主办：苏州大学
