李玉华;杨留才;孙炯;索艳君;凡利俊
目的 构建由具有肿瘤特异性启动作用的端粒酶逆转录酶启动子(mTERT-promotor)驱动m4-1BBL(CD137 Ligand)基因的腺病毒载体.方法 用PCR和RT-PCR的方法,分别从C57BL/6小鼠组织中克隆mTERT启动子和共刺激分子m4-1BBL基因,通过T载体和转移载体将目的基因亚克降到腺病毒载体上,293A细胞包装成病毒颗粒rAD-mTERT-m4-1BBL,流式细胞仪检测m4-1BBL基因在Hepa 1-6及L929细胞上的表达.结果 通过PCR检测、直接测序证实目的基因克隆成功并亚克隆到表达载体上,细胞免疫化法证实病毒包装成功,流式细胞仪检测发现重组腺病毒载体rAD-mTERT-m4-1BBL能特异性地在肿瘤细胞Hepa 1-6上高表达m4-1BBL.结论 由mTERT-promotor驱动m4-1BBL基因的具有肿瘤特异性的腺病毒载体构建成功,为下一步进行体内外抗肿瘤实验打下了基础.
作者:肖樟生;姚辉华;龚伟达;杜鹏;邢迎清;吴浩荣 刊期: 2009年第03期
目的 比较平衡式快速场回波(B-FFE)技术和呼吸导航三维平衡超快速场回波(3D B-TFE)技术对胸主动脉成像图像质量的影响.方法 对31例临床可疑主动脉病变的患者进行了前瞻性B-FFE和3D B-TFE检查.采用图像分析质量标准对两种方法进行评价.结果 31例B-FFE和3D B-TFE图像均能准确地显示胸主动脉及其弓上分支;图像质量B-FFE显著较3D B-TFE差,差异有高度统计学意义(P<0.01);成像时间B-FFE明显较3D B-TFE短,差异有统计学意义(P<0.05);在患者配合难易程度上,B-FFE较3D B-TFE难.结论 屏气B-FFE和呼吸导航3D B-TFE两种技术均可在不使用对比剂的情况下较为满意地评价胸主动脉情况,3D B-TFE的图像质量优于B-FFE技术.
作者:徐孝秋;杨毅;周丽娟;郭静;孙敬;王灌忠;张彩元;施国尧;沈钧康 刊期: 2009年第03期
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的分离纯化和定向成脂诱导.方法 采用密度梯度离心法分离纯化骨髓间充质干细胞,免疫组织细胞化学法检测BMSCs表面抗原.脂肪诱导剂诱导BMSCs分化为脂肪细胞,利用油红O染色进行检测.结果 免疫组织细胞化学检测结果显示,BMSCs表达CD29、CD44、CD90、CD106,不表达CD34、CD45.BMSCs经脂肪诱导剂诱导后,油红O染色阳性.随着诱导时间的延长,油红O阳性细胞比例增加.结论 体外培养的BMSCs在一定诱导条件下能够向脂肪细胞分化,并且随着诱导时间的延长,脂肪细胞比例不断增加.
作者:钱燕翔;宋琳;徐路尧;周俊松;董运海;宋雪慧;辛莲;张焕相 刊期: 2009年第03期
目的 评价重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体Fc抗体融合蛋白(益赛普)治疗强直性脊柱炎(AS)的疗效和安全性.方法 60例活动性AS患者随机分为治疗组(30例)和对照组(30例),分别应用益赛普、柳氮磺胺吡啶治疗24周,分别在第0、6、14、24周评价两组的临床疗效和安全性.观察指标为ASAS20、ASAS50、ASAS70、AS活动指数(BASDAI)、脊柱痛、晨僵时间、胸廓扩张度、Schober、脊柱侧弯、踝间距以及C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)等.结果 治疗组患者治疗后BASDAI、脊柱痛、胸廓扩张度、Schober、脊柱侧弯、踝间距及CRP、ESR等指标较治疗前均明显改善.差异均有统计学意义(均P<0.05).对照组患者治疗后BASDAI、脊柱痛、晨僵时间及CRP、ESR均较治疗前明显改善,差异均有统计学意义(均P<0.05),但胸廓扩张度、Schober、脊柱侧弯、踝间距治疗前后的差异无统计学意义.两组间比较,治疗组各项观察指标改善程度明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).治疗组不良反应发生率(13.3%)明显低于对照组(40.0%),差异有统计学意义(P<0.05).结论 益赛普治疗活动性AS疗效显著,能改善AS患者的症状、体征、关节功能和生活质量,并具有良好的安全性.
作者:赵文敏;陈志伟;王鸣军 刊期: 2009年第03期
目的 总结婴儿大型室间隔缺损(VSD)合并肺动脉高压的外科治疗经验,探讨早期手术时机、适应证和围手术期处理问题.方法 对婴儿大型VSD合并肺动脉高压60例(VSD膜周型46例,肺动脉瓣下型14例),均在全麻及体外循环下行一期根治术.结果 术后无死亡,所有患儿均痊愈出院.随访所有患儿活动量和生长发育改善,呼吸道感染明显减少,无后遗症.结论 早期手术治疗可提高和改善婴儿大型VSD多合并肺动脉高压的治疗效果和预后,完善围手术期管理是降低并发症、减少病死率的关键.
作者:廖健毅;徐洪军;徐永根;曹鼎方;冉旭东 刊期: 2009年第03期
目的 探讨腔内治疗主动脉夹层动脉瘤的方法和疗效.方法 42例主动脉夹层动脉瘤患者均以带膜支架型人工血管行腔内隔绝术,4例先行右颈总动脉-左颈总动脉人工血管旁路术,再行腔内隔绝术.结果 42例手术成功,无1例患者死亡,无术后截瘫,随访假腔血栓形成.结论 腔内治疗主动脉夹层动脉瘤是安全、有效的方法,具有创伤小、并发症少的优点.
作者:戎建杰;李晓强;钱爱民;段鹏飞;桑宏飞;朱礼炜 刊期: 2009年第03期
目的 观察重组人白细胞介素-11(rhIL-11)和重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)联用对60Coγ射线照射所致急性放射病的疗效.方法 16只比格狗随机分为对照组(5只)、对症治疗组(5只)和细胞因子治疗组(6只).所有动物均接受4.5 Gy60Coγ射线照射,并在照后当天开始治疗,对症治疗组仅给予积极的对症支持治疗,细胞因子治疗组在对症治疗的基础上,加用rhIL-11和rhG-CSF,对照组不给予任何治疗.观察动物的一般情况、外周血象、外周血有核细胞早期凋亡率和坏死率、血浆中细胞因子含量及组织病理学变化.结果 细胞因子治疗组动物的45 d存活率升高,外周血象也明显改善;外周血有核细胞早期凋亡率和坏死率明显降低;外周血血浆中IL-2和IFN-γ含量在早期均升高,随后IL-2迅速下降,IFN-γ含量相对比较稳定;骨髓组织病理学结果显示造血功能明显恢复.结论rhIL-11和rhG-CSF联用可促进急性放射病比格狗的造血和免疫功能恢复,是治疗急性放射病的有效方法.
作者:胡志清;张学光;王修珍;井莹莹;朱南康;张日;缪竞诚 刊期: 2009年第03期
目的 探讨梅毒患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的比例及其临床意义.方法 应用流式细胞分析仪检测42例梅毒患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞的比例,并与30名正常人群的检测结果相对照.结果 梅毒患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞比例[(8.94±6.72)%]较正常人对照组[(5.36±4.5)%]显著增高,差异有高度统计学意义(P<0.01),但其与快速血浆反应素试验(RPR)滴度无相关性(P>0.05).结论 梅毒患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞比例较高,它们对梅毒患者具有免疫抑制功能.
作者:展富琴;冯萍;顾爱萍;曹伟;朱梅俪;茅挺;孙兰云;孙燕 刊期: 2009年第03期
目的 探讨血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平与2型糖尿病(T2DM)颈动脉粥样硬化(AS)的关系.方法 00例T2DM患者,分成AS组39例和无AS组61例.30例非糖尿病者为正常对照组.分别检测血清RBP4浓度、甲状腺素转运蛋白(TTR)、体质量指数、血压、血脂和糖化血红蛋白(HbA1c)等.结果 T2DM组(AS组和无AS组)血清RBP4浓度及RBP4/TTR较正常对照组均明显升高;T2DM中AS组较无AS组RBP4/TTR明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),但AS组和无AS组血清RBP4浓度的差异无统计学意义(P>0.05).多危险因素与T2DM颈动脉粥样硬化Logistic回归分析表明RBP4及RBP4/TTR是T2DM颈动脉粥样硬化的危险因素(b>0,OR>1,P<0.1).结论RBP4与12DM密切相关,也是T2DM颈动脉粥样硬化发生的危险因素.
作者:蒋伏松;成兴波;李慧娟;朱蓓;樊华英;张慧;施耀方 刊期: 2009年第03期
目的 探讨多基因表达及相互作用与口腔癌前病变癌变的关系.方法 采用免疫组织化学ABC法对76例上皮异常增生和84例正常口腔黏膜p53、Ki-67、p16和cyclin D1的表达进行研究,并对上皮异常增生患者实际癌变率做了3年追踪调查.结果 口腔黏膜癌前病变组织p53和Ki-67表达明显高于正常口腔黏膜,差异有统计学意义(P<0.05);p53和Ki-67同时过度表达与实际口腔癌前病变癌变率密切相关;口腔黏膜癌前病变组织中存在p16和cyclinD1表达失衡现象.结论 p53和Ki-67同时过度表达及p16和cyclinD1表达失衡是口腔黏膜癌前病变癌变的重要标志.
作者:马三成;赵今;Paul Speight 刊期: 2009年第03期
目的 建立一种新的适用于治疗重症急性胰腺炎(SAP)的猪模型,为SAP肠内给药提供实验和理论依据.方法 8只太湖梅山猪随机分成SAP组和对照组,每组4只.两组均在开腹直视下置入鼻空肠管.SAP组通过胰管内注射5%牛黄胆酸钠建立SAP模型,对照组仅行胰管插管不注射任何药物.比较两组动物一般情况、血清淀粉酶、CT评分及胰腺病理形态学改变,验证鼻空肠管置入及SAP模型诱导是否成功.结果 同对照组比较,SAP组血清淀粉酶的总体均数明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);CT、病理评分均进一步证明了鼻空肠管置入及SAP模型诱导成功.结论 在猪的SAP模型上成功置入鼻空肠营养管,为研究肠内给药在胰腺炎中的应用建立了一种简单、无创、可重复性的动物模型.
作者:林敏;陈卫昌;刘强;祝建红 刊期: 2009年第03期
目的 构建bcl-2特异性RNAi真核细胞质粒表达载体,并研究其对B细胞淋巴瘤Raji细胞的干扰效果.方法 根据GenBank提供的bcl-2 cDNA序列,设计并合成两对短发夹结构的互补DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至载体pGenensil-1构建重组质粒,予以酶切和DNA测序鉴定.脂质体介导重组质粒转染Raji细胞,采用RT-PCR法观察重组质粒对bcl-2 mRNA表达的影响,流式细胞仪测定细胞凋亡.结果 酶切及测序鉴定表明,成功构建bcl-2 shRNA的质粒表达载体pGenesil-1-bcl-2-544和pGenesil-1-bci-2-1009.转染Raji细胞48 h后,RT-PCR结果显示Raji细胞中bcl-2 mRNA表达分别下调了(31.95±3.02)%和(47.57±2.88)%,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Raji细胞凋亡率分别为(14.25±0.84)%和(11.96±0.79)%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建bcl-2特异性RNAi真核细胞质粒表达载体,它能有效沉默bcl-2基因在B细胞淋巴瘤中的表达并促进B细胞淋巴瘤Raji细胞凋亡.
作者:秦陈浩;申咏梅;宋妙丽;冯萍 刊期: 2009年第03期
目的 了解2型糖尿病患者的血清成纤维细胞生长因子21(FGF-21)水平,并探讨它与体脂、糖脂代谢、胰岛素敏感性及炎症因子等的相关性.方法 用酶联免疫吸附法检测了35例正常对照组(NGT)、54例初诊2型糖尿病组(NDDM)和54例病程≥5年的2型糖尿病组(LDDM)患者的空腹血清FGF-21浓度,同时测定受试者的体格指标及空腹状态下血糖、血脂、胰岛素(FINS)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等,并计算腰臀比(WHR)、体质量指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β).结果 NDDM组和LDDM组的FGF-21水平均显著高于对照组,差异均有高度统计学意义(均P<0.01),但NDDM和LDDM组间的FGF-21差异无统计学意义(P>0.05).简单相关分析显示,FGF-21与年龄、WHR、收缩压(SBP)、空腹血浆葡萄糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、HOMA-IR、hs-CRP均显著正相关,与HOMA-β成显著负相关.多元逐步回归分析表明,空腹血清胰岛素(FINS)、HOMA-IR、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和hs-CRP是血清FGF-21的独立相关因素.Logistic回归分析表明,FGF-21与2型糖尿病成正相关.结论 FGF-21可能参与了2型糖尿病的发生和发展.
作者:朱蓓;王进红;成兴波;蒋伏松 刊期: 2009年第03期
目的 建立转人白血病抑制因子(hLIF)基因逆转录病毒载体的饲养层细胞,并观察其对CD34+造血干/祖细胞(HSPC)的扩增作用.方法 建立转hLIF基因逆转录病毒载体的饲养层细胞,并用RT-PCR法和ELISA法鉴定目的基因的表达;采用免疫磁珠法分离脐带血CD34+HSPC,流式细胞术检测其纯度;将CD34+HSPC与饲养层细胞共培养,流式细胞术检测各组增殖效果.结果 建立的转基因饲养层细胞均有绿色荧光,RT-PCR法和ELISA法证实均有目的基因表达,免疫磁珠法分离的CD34+HSPC纯度可达(95.6+2.58)%,与饲养层细胞共培养后CD34+HSPC可扩增8.74倍,表面黏附分子CXCR4和CD54表达量仍较高.结论 建立的转hLIF基因饲养层细胞对CD34+HSPC有一定的扩增作用,且延缓其分化.
作者:井莹莹;杨吉成;盛伟华;胡志清;郁心;包婉蓉;张日;朱南康;缪竞诚 刊期: 2009年第03期
目的 探讨硅酸二钙涂层离子溶出液对成骨细胞早期增殖和细胞周期的影响及其机制.方法 含有硅酸二钙离子溶出液的DMEM培养基作为实验组,正常DMEM培养基作为对照组,分别接种人成骨细胞株MG63细胞培养.MTT法测定细胞增殖情况;流式细胞仪测定成骨细胞G0/G1、S、G2/M期变化,并进行比较.结果 与对照组比较,实验组MG63细胞增殖在各时间点增强,其中24、72 h的差异有统计学意义(P<0.05);在48、72 h,处在S期和G2/M期的细胞增多;而G0/G1期细胞降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);结论 硅酸二钙涂层离子溶出液能加速成骨细胞周期,进而促进细胞增殖,促进新骨的形成.因此,该材料是一种较理想的生物活性涂层材料.
作者:李建有;魏立;孙俊英;岑建农 刊期: 2009年第03期
目的 了解氟桂利嗪添加治疗难治性癫痫患者的临床疗效与逆转多药耐药基因(MDR1)表达的关系.方法 42例难治性癫痫患者在原抗癫痫药不变的基础上应用氟桂利嗪添加冶疗,12周后评价临床疗效.同时用ELISA法检测患者氟桂利嗪添加治疗前后血清P-糖蛋白(PGP),并和正常对照组10人比较.结果 氟桂利嗪添加治疗难治性癫痫的总有效率达52.5%.难治性癫痫患者血清PGP水平显著高于正常对照组,且治疗后血清PGP水平较治疗前明显下降,差异均有统计学意义(分别P<0.01和<0.05).结论 氟桂利嗪添加治疗难治性癫痫有效,其抗癫痫机制可能与逆转PGP表达有关.
作者:徐敏;喻霞云;胡小伟;顾国浩;董万利 刊期: 2009年第03期
目的 研究细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK cells)的体外扩增特性及其在抗肿瘤免疫治疗中的作用.方法通过提取健康供血者的PBMNC,培养诱导CIK细胞,显微镜下观察其扩增倍数、增殖速率,流式细胞仪分析细胞免疫表型,用MTT法观察其对K562细胞的体外杀伤效应,并通过流式细胞仪进一步分析30例实体瘤患者CIK细胞输注前后外周血免疫活性细胞表型的改变.结果 经2周培养,CIK细胞平均增加了30倍,总数达(4.8~5.0)×109,活性细胞比例>90%;体外杀伤率约50%,表型检测效应细胞CD3+,CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD56+亚群比例显著升高,差异有高度统计学意义(P<0.01).实体瘤患者CIK细胞输注后外周血中免疫活性细胞比例也明显升高,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 CIK细胞在体内外能明显抑制肿瘤生长,有效改善患者的免疫功能,为晚期肿瘤治疗提供了新的方法.
作者:沈丽琴;戴宏;庄志祥 刊期: 2009年第03期
目的 比较马来酸曲美布汀联用黛力新与单剂马来酸曲美布汀治疗肠易激综合征(IBS)的疗效.方法 按罗马Ⅱ标准选择84例肠易激综合征患者随机分成2组,每组42例.治疗组给予马来酸曲美布汀200 mg,口服,3次/d,加黛力新每日2片口服;对照组应用单剂马来酸曲美布汀200 mg,口服,3次/d,疗程均4周.结果 治疗组有效率为95.2%,对照组有效率为83.3%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组缓解腹痛、腹胀、便秘的效果优于对照组.结论马来酸曲美布汀能够有效缓解IBS患者的症状;对于以腹痛、腹胀、便秘为主的IBS患者,加用黛力新可以取得更好的疗效.
作者:徐艳;张国华 刊期: 2009年第03期
吞咽障碍是脑卒中患者的常见症状之一,其可影响患者进食,引起脱水及营养不良,也可引起吸入性肺炎,甚至危及生命.因此,及早对患者进行康复训练,促进吞咽功能恢复是非常有意义的.我科自2006年1月至2007年6月共收治脑卒中伴吞咽困难32例,采用了以吞咽功能恢复为主的康复治疗,取得了较好的疗效,现报道如下.
作者:丁蔚 刊期: 2009年第03期
目的 探讨国产西罗莫司洗脱支架(Firebird支架)对不稳定型心绞痛患者左心室舒张功能的中远期影响.方法 对32例植入Firebird支架的不稳定型心绞痛患者32例,应用脉冲组织多普勒技术分别检测支架植入前、植入后1周和3、6、12、24、36个月的二尖瓣环舒张早期与晚期主峰速度(Em和Am)及其比值Em/Am.结果 与支架植入前比较,左心室各项舒张功能指标在支架植入术后1周无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);在支架植入术后3个月开始明显改善,6个月显著改善,差异均有统计学意义(分别P<0.05和P<0.01);并在随后的30个月中保持这种趋势.结论 国产西罗莫司洗脱支架能长期改善不稳定型心绞痛患者的左心室舒张功能.
作者:施亚明;宗永忠;吴春阳;董璟;王斌 刊期: 2009年第03期