韩海红;李凤琴;徐进;陈艳;余东敏;闫韶飞;吴青;李薇薇;郭云昌
沙门菌是引起我国食源性疾病的重要致病菌.传统的沙门菌生化鉴定和血清分型方法已不能满足日益繁重的检测工作要求,快速灵敏的分子生物学方法越来越多地应用于沙门菌研究中.本文就基因水平的沙门菌检测、鉴定及分型新进展进行综述.
作者:赫英英 刊期: 2015年第03期
目的 建立同时测定饮用水中4种双酚类物质(双酚F、双酚A、四氯双酚A和四溴双酚A)的液相色谱-串联质谱的方法.方法 200 ml水样经C18固相萃取柱富集净化,甲醇洗脱后,用T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm)分离,在负电离模式下用串联质谱仪定性定量分析.结果 4种双酚类物质方法检出限为0.20 ~5.5ng/L,两个水平的加标回收率为87.1% ~ 109.0%,日内精密度为6.3% ~ 12.4%,日间精密度为4.5% ~15.4%.应用该方法测定了15份水样,其中1份浸泡水中测出双酚A,含量为85.4 ng/L,其余样品中均未测出目标物.结论 该方法可以测定水中4种双酚类物质,方法准确可靠,灵敏度高.
作者:胡小键;张海婧;王肖红;丁昌明;林少彬 刊期: 2015年第03期
目的 研究酶联免疫法和化学发光法两种方法检测血清中25-羟基维生素D[25(OH)D]浓度结果的一致性.方法 参考NCCLS-EP9-A2文件的相关规定,收集了40例人体血清样品,分别使用IDS酶联免疫试剂盒和IDS-iSYS化学发光法自动分析仪检测25(OH)D浓度.剔除方法内及方法间离群值,分析两种检测方法的相关性,并进行回归分析、偏倚性分析.结果 两种方法的相关系数r =0.981,回归方程为y=0.995x+2.3928,偏倚性分析显示随着样品浓度的升高,两种方法检测值之间的相对标准偏差有减小的趋势.结论 酶联免疫法和化学发光法检测血清中25(OH)D浓度的重复性及相关性较好.
作者:云春凤;陈竞;杨春;朴建华;杨晓光 刊期: 2015年第03期
铁缺乏(iron deficiency,ID)是常见的营养素缺乏症和全球性健康问题,铁缺乏的生物学客观指标及其检验方法是铁营养状况的个体诊断及人群筛查的核心技术,是铁缺乏观察研究、危害分析及营养干预的科学基础.本文综述了18项铁缺乏诊断指标包括近年来开始应用的低色素红细胞百分率、网织红细胞浓度、血清或尿铁调节素等指标的检验方法及特点.本文对血清铁蛋白-C-反应蛋白/α1-酸性糖蛋白指标体系(SF-CRP/AGP)、血清铁蛋白-可溶性运铁蛋白受体(SF-sTfR)两指标模型、血清铁蛋白-运铁蛋白饱和度-原卟啉/锌卟啉(SF-TS-FEP/ZPP)等三指标或多指标模型及铁储量(BI)模型研究进展进行综述,并探讨各指标体系的应用前景.综述表明SF-CRP/AGP研究较多,是目前推荐选择的铁缺乏指标,但SF值受炎症因子影响且其判断阈值存在争议.SF-sTfR和BI模型较为稳定,可减少炎症影响,sTfR阈值研究不足,还需积累更多数据.
作者:王丽娟 刊期: 2015年第03期
目的 探讨孕期妊娠相关焦虑的动态变化,分析妊娠相关焦虑的影响因素.方法 收集马鞍山市妇幼保健院孕妇一般人口统计学指标和孕期暴露资料,采用自编的《妊娠相关焦虑量表》评定孕妇不同妊娠时期的妊娠相关焦虑状况,并运用广义估计方程分析妊娠相关焦虑的影响因素.结果 990名孕妇孕早期、中期、晚期妊娠相关焦虑问卷总得分分别为(20.3±4.9)、(19.6±4.6)和(18.9±4.4),差异有统计学意义(F =63.10,P<0.001).孕早期、中期、晚期妊娠相关焦虑检出率分别为21.0%、17.7%和13.6%,差异有统计学意义(x2=18.74,P<0.001).广义估计方程结果显示,孕妇高中文化程度(OR=1.36,95%CI 1.05 ~ 1.75)、家庭人均月收入<2500元(OR=1.33,95%CI 1.01~1.75)、意外妊娠(OR=2.60,95%CI 2.05 ~3.29)、有流产史(OR=1.30,95%CI 1.06~ 1.60)、孕期阴道流血(OR =1.61,95%CI1.22 ~2.12)、孕期发热(OR=1.69,95%CI 1.17 ~2.46)和孕期营养剂使用(OR=1.43,95%CI 1.08~1.88)是妊娠相关焦虑的危险因素.结论 孕妇妊娠相关焦虑随着妊娠进展呈下降趋势;妊娠相关焦虑的发生与孕妇的文化程度、家庭经济状况、意外妊娠、流产史、阴道流血及发热等因素相关.
作者:丁秀秀;毛雷婧;葛星;许韶君;潘维君;严双琴;黄锟;陶芳标 刊期: 2015年第03期
目的 了解山东省青岛市、泰安市、烟台市3~4年级小学生闲暇时锻炼、静态活动状况及影响因素.方法 采取随机整群抽样的方法抽取青岛市、烟台市和泰安市2283名3~4年级小学生,采用自制问卷(包括基本情况、闲暇时参与锻炼情况、静态活动情况等)进行调查.采用Logistic模型分析不同城市、性别、对自身体重认识、对自身外形满意度、家长是否参与锻炼/静态活动时间是否过长等对小学生闲暇锻炼和静态活动的影响.结果 三城市调查前一周闲暇时小学生锻炼参与率为65.9%,锻炼人群中中高强度锻炼天数为4天,平均每天锻炼时间为30 min.小学生闲暇时是否参与锻炼与地区、性别、对自身外形满意度、家长是否参与锻炼有关.闲暇时平均每天静态活动时间为0.9h,平均每天静态活动时间2h及以上的小学生占13.6%.小学生闲暇时静态活动时间过长与其对自身体重认识、家长静态活动时间过长有关.结论 应同时加强小学生和家长的身体活动干预,进一步改善小学生的身体活动现状.
作者:宋超;于欣平;丁彩翠;甄宝杰;陈暕;王延勇;李荔;刘爱玲 刊期: 2015年第03期
目的 对影响ABI3500xl全自动测序仪测序过程的因素进行研究,以提高测序的准确度和成功率并降低成本.方法 对PCR反应体系、产物纯化方法进行优化.将BigDye分别稀释8、16和32倍进行测序PCR反应,比较不同的BigDye稀释倍数对PCR产物测序结果的影响;使用CENTRI-SEP柱纯化法、BigDye CleaningBeads磁珠法和乙醇乙酸钠EDTA法对测序PCR产物进行纯化,比较不同纯化方法对测序结果的影响.结果 BigDye稀释8倍和16倍时,PCR反应体系的测序结果正常,而稀释32倍时测序结果出现碱基误读;3种不同的测序PCR产物纯化方法均可得到满意的测序结果.相比之下,CENTRI-SEP Kit纯化方法所需时间短(0.5 h),但是成本较高;乙醇乙酸钠EDTA纯化方法成本低,但耗时较长(2 h);磁珠纯化法所需时间(1 h)和成本介于CENTRI-SEP Kit法和乙醇乙酸钠EDTA法之间,但不适于高通量操作.结论 ABI3500xl全自动测序仪测序过程中,BigDye稀释16倍时所得测序结果准确且成本较低;3种测序PCR产物纯化方法均可得到准确的测序结果,实际工作中应根据操作者具备的实验条件选择适纯化方法,以减少测序时间和成本.
作者:闫韶飞;王伟;徐进;白莉;甘辛;李凤琴 刊期: 2015年第03期
目的 探讨能量平衡状态下,不同膳食脂肪摄入量对大鼠血糖、血脂、体脂、胰岛素及瘦素的影响.方法 40只SD雄性大鼠随机分为4组,分别饲喂等能量低脂饲料(脂肪供能比5%)、普通饲料(脂肪供能比15%)、中脂饲料(脂肪供能比25%)和高脂饲料(脂肪供能比40%).测量第0、5和10周血糖和血脂水平及第0、10周血清脂联素和瘦素水平.10周末取肾周及睾周脂肪垫,计算体脂比,用realtime PCR方法测算脂肪中脂联素及瘦素mRNA的相对表达水平.结果 喂养5周及10周后,中脂组和高脂组大鼠血清中甘油三酯含量显著低于低脂组和普通组;10周末,中脂组脂肪中脂联素mRNA的表达水平显著低于低脂组;体脂比、血糖、血胆固醇、血清脂联素和瘦素水平以及脂肪中瘦素mRNA的相对表达水平,各组间均无显著性差异.结论 能量平衡状态下,不同的膳食脂肪摄入量对大鼠体脂、血糖、血清甘油三酯、脂联素及瘦素水平均无影响.
作者:孙岩桐;卓勤;张宇;杨春;杨晓光;朴建华 刊期: 2015年第03期
目的 了解北京市售牛乳的6种B族维生素水平,研究品牌和保质期对其的影响.方法 采集北京市面常见牛乳,分析其6种B族维生素,进行统计学分析.结果 不同保质期牛乳中硫胺素含量为210.1~ 339.5μg/L,尼克酰胺含量为581.16 ~ 1261.2 μg/L,二者差异有统计学意义(P<0.05);核黄素含量为397.1~1065.0μg/L,泛酸含量为3005.4 ~ 5081.4 μg/L,二者差异无统计学意义.吡哆醛含量为109.9 ~ 285.6 μg/L,黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)含量为118.2 ~ 1525.9μg/L.新鲜牛乳的吡哆醛和FAD高于长保质期牛乳一倍以上(P<0.05).结论 硫胺素、核黄素、尼克酰胺和泛酸的含量与保质期关系不大,与品牌有关.
作者:任向楠;杨振宇;杨晓光;赖建强;王杰;荫士安;邵兵 刊期: 2015年第03期
目的 研究四川、福建和广西贝类及其养殖环境中分离的副溶血性弧菌的耐药特征.方法 采用微量肉汤稀释法测定186株副溶血性弧菌对8种抗生素包括氨苄西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、四环素、氯霉素、环丙沙星和复方新诺明的耐药性.结果 186株副溶血性弧菌总耐药率为69.35%,主要耐受的抗生素为氨苄西林,氨苄西林的小抑菌浓度(MIC)值的几何均数大于耐药解释标准.4株菌表现为多重耐药/中介.所有菌株对头孢噻肟、头孢他啶、氯霉素、环丙沙星等4种抗生素100%敏感.按照分离省份、采样环节和样品种类分类分析,副溶血性弧菌分离株的氨苄西林耐药谱3个采样环节中养殖场的耐药率高为73.68%,3个省份中四川菌株的耐药率高为70.94%,但差异均没有统计学意义.58份样品中,有44份样品分离出2株及以上菌株,样品分离菌株的耐药谱多态率为77.27%(34/44).结论 贝类及其养殖环境中副溶血性弧菌的氨苄西林耐药率较高,养殖环境可能是副溶血性弧菌耐药性的主要来源,需加强贝类养殖过程的副溶血性弧菌耐药性的监测和控制.
作者:韩海红;李凤琴;徐进;陈艳;余东敏;闫韶飞;吴青;李薇薇;郭云昌 刊期: 2015年第03期
目的 建立一种简便快速的分散固相萃取前处理方法,结合液相色谱法测定焙烤食品中的富马酸二甲酯.方法 样品用甲醇超声提取,采用高速冷冻离心和分散固相萃取净化方式去除油脂、色素等杂质,采用C18柱(4.6mm×25 mm,5μm),流动相为甲醇-0.03 mol/L乙酸钠和0.008 mol/L溴化四丁基铵溶液,检测波长220nm.结果 该方法在0.1~20 μg/ml范围内呈良好线性,r>0.999,在不同空白基质样品中不同添加水平下,平均回收率为82.8% ~ 107.5%,相对标准偏差(RSD)为3.30% ~7.30%(n =6),检出限(LOD)为0.4 mg/kg,定量限(LOQ)为1.0 mg/kg.结论 该方法简便、快速、准确,适用于焙烤食品中富马酸二甲酯含量的检测.
作者:杨杰;罗梦甜;冯迪;苗虹;宋书锋;赵云峰 刊期: 2015年第03期
目的 建立超高效液相色谱-高分辨质谱同时快速测定蜂蜜中14种农药残留的方法.方法 样品采用1%甲酸乙腈提取,以N-丙基乙二胺(PSA)和C18作为吸附剂的分散固相萃取法(d-SPE)进行净化,以Accucore aQ C18色谱柱(2.6 μm,2.1mm×150 mm)进行色谱分离,通过高分辨质谱的全扫描/实时二级质谱扫描模式进行定性筛查和定量检测.结果 14种农药残留在一定浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.998,定量限(LOQ)为0.6~6μg/kg.空白蜂蜜样品在LOQ、15和30 μg/kg三个加标水平的平均回收率为80.3%~ 112.7%,相对标准偏差为0.4%~7.1%.结论 该方法适合蜂蜜中农药多残留的快速筛查和定量.
作者:张烁;陈达炜;赵云峰 刊期: 2015年第03期
目的 了解中小学生饮食行为现状,为制定改善中小学生营养状况措施提供依据.方法 采取分层随机整群抽样方法,对沈阳、广州、武汉、成都四城市10626名中小学生进行问卷调查.结果 被调查对象中每天吃早餐的比例为66.9%,早餐营养充足的比例仅为8.5%,每月消费1次及以上西式快餐、零食、饮料的比例分别为63.9%、93.5%、93.5%.常吃的5种零食依次为谷类、新鲜蔬果、奶制品、糖果类、薯类,常喝的5种饮料依次为:奶类、碳酸饮料、包装果蔬汁饮料、功能饮料、鲜榨果蔬汁.不同城市、性别、学段的学生饮食行为存在差异.结论 沈阳、广州、武汉和成都四城市中小学生存在饮食行为不合理现象,学校应加强营养知识健康教育,引导其养成良好的饮食行为和习惯.
作者:宫伟彦;郭海军;刘伟佳;李晓辉;栾德春;吴晓旻;刘爱玲 刊期: 2015年第03期
目的 探讨PM2.5通过氧化应激对人支气管上皮细胞JAK/STAT信号通路和细胞因子的影响.方法 利用传统侵入式方法培养支气管上皮细胞16HBE,本次研究共从两方面来进行探讨:(1)探讨PM2.5、氧化应激与JAK/STAT信号通路的关系,设立生理盐水对照组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,5 mmol/L)组、50 μg/ml PM2.5组、100 μg/ml PM2.5组、50 μg/ml PM2.5+5 mmol/L NAC组和100 μg/ml PM2.5+5mmol/L NAC组,培养24 h后测定细胞内ROS水平和JAK2、STAT3的基因表达.(2)探讨PM2.5、JAK/STAT信号通路和细胞因子的关系,设立生理盐水对照组、6μmol/LAG490组、100 μg/ml PM2.5组、6 μmol/L AG490+100 μg/ml PM2.5组,培养24 h后检测细胞上清液中白介素-6(IL-6)含量.结果 染毒24 h后,50 μg/ml PM2.5组和100μg/ml PM2.5组16HBE细胞内ROS水平和JAK2、STAT3基因表达均高于生理盐水对照组,PM2.5暴露+NAC保护组ROS水平和JAK2、STAT3的基因表达均低于各自PM2.5暴露组,差异均有统计学意义(P<0.05).100 μg/ml PM2.5组上清液中IL-6含量高于生理盐水对照组,6 μmol/L AG490+ 100 μg/ml PM2.5组细胞上清波中IL-6含量低于100 μg/ml PM2.5暴露组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 PM2.5能对支气管上皮细胞造成氧化损伤,并可能通过氧化应激调节上皮细胞JAK/STAT信号通路和相关细胞因子的产生.
作者:徐贞贞;张志红;马晓燕;平飞飞;郑鑫 刊期: 2015年第03期
目的 通过喹乙醇染毒人源肾小管上皮细胞(HK-2细胞)并检测活性氧(ROS)和凋亡相关蛋白的表达,探讨喹乙醇肾脏毒性产生过程及其可能的内质网应激相关凋亡机制.方法 分别以不同浓度(1、2、3、4、5、6、7和8μmol/ml)喹乙醇染毒HK-2细胞24 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖率以确定剂量-效应关系;Hoechst-33258荧光染色检测各组细胞凋亡形态,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率和细胞内活性氧含量;免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激相关凋亡蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)和凋亡促进因子CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达.结果 根据MTT毒性实验结果,喹乙醇对HK-2细胞凋亡效应的适宜剂量确定为1、2、3和4 μmol/ml.在喹乙醇不同剂量观察组中,喹乙醇染毒2μmol/ml以上剂量组,细胞凋亡率、内质网凋亡相关蛋白GRP79、GRP94和CHOP表达增加,喹乙醇各染毒剂量均可见活性氧水平增加(P<0.05);在喹乙醇不同染毒时间观察组中,喹乙醇染毒12和24 h组,细胞凋亡率、内质网凋亡相关蛋白GRP79、GRP94表达增加,喹乙醇染毒6、12和24 h组,活性氧水平、内质网凋亡相关蛋白CHOP表达增加(P<0.05).结论 喹乙醇可致肾小管上皮细胞发生细胞凋亡从而造成肾脏毒性,凋亡的发生可能与内质网应激相关凋亡途径相关.
作者:李忠生;于常艳;陈宵;张斌;曹鹏;李斌;肖经纬 刊期: 2015年第03期
双酚A(bisphenol A)是一种常见的环境内分泌干扰物(EDCs),它常用作聚碳酸酯塑料、聚苯乙烯树脂和牙科密封剂的原料.BPA的环境污染很广泛,可通过水和食物进入人体,95%人群的尿样能够检测到BPA.流行病学资料和动物实验研究表明,BPA能够快速穿透胎盘屏障和血脑屏障,并且孕期BPA暴露能够致子代心理行为发育改变.本文将重点从表观遗传学、基因组与非基因组效应、氧化应激、多巴胺系统、突触数量和可塑性改变等方面阐述孕期BPA暴露对子代心理行为发育影响的机制.
作者:牛影 刊期: 2015年第03期
目的 了解北京市某区自备井水质现状及空间分布特征.方法 在对北京市某区2013年自备井普查数据描述性分析的基础上,采用空间自相关的方法探讨空间分布特征.结果 北京市某区自备井水总体合格率为69.25%,主要不合格项目为总硬度和硝酸盐,合格率分别为87.89%和88.38%.总硬度和硝酸盐在整体上存在空间自相关,全局Moran'sI指数分别为0.4404(P<0.01)和0.5335(P<0.01).总硬度呈现北低南高的趋势,硝酸盐主要是南部地区偏高.结论 北京市某区自备井水合格率偏低,总硬度和硝酸盐存在空间聚集现象.
作者:赵艳玲;张美云;郭春城;吕鸥;王富嵩;万博宇;魏云芳 刊期: 2015年第03期
目的 调查中国内陆地区孕妇孕晚期膳食模式与其过渡乳中脂肪酸构成的关系.方法 选取靠近淡水河湖(江苏句容)和远离河湖(河北徐水)的内陆地区各一处,每地区募集孕晚期孕妇40位,调查其孕晚期膳食消费情况及其过渡乳脂肪酸构成.结果 两地区孕妇海鱼消费频次均低于1次/周,句容地区孕妇消费菜籽油显著高于徐水地区(P<0.05).两地区乳母每100 g过渡乳中总脂质含量分别为(4.39 ±1.18)和(3.92±1.47) g(P =0.11),DHA含量分别为(0.46±0.20)%和(0.29±0.09)%(P<0.05).菜籽油摄入量与过渡乳中DHA百分含量显著相关(r =0.362,P<0.05).结论 两地区孕产妇过渡乳脂肪酸构成差异可能由其膳食模式差异所致.充分摄入n-3长链多不饱和脂肪酸的前体(如α亚麻酸)在一定程度上可有效代偿其摄入的不足.
作者:高颐雄;张坚;王春荣;李丽祥;满青青;宋鹏坤 刊期: 2015年第03期
目的 探讨氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)在砷致人角质形成细胞(human keratinocytes,HaCaT)恶性转化不同阶段的动态变化.方法 以含1.0 μmol/L NaAsO2的DMEM高糖完全培养基连续培养HaCaT细胞35代后,用基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平变化、细胞生长动力学改变和软琼脂集落形成实验鉴定其是否发生恶性转化.分别收集0、1、7、14、21、28和35代细胞,采用流式细胞仪检测不同代数细胞内ROS活性,生化法检测细胞内MDA含量及SOD活性变化.结果 1.0μmol/L NaAsO2处理HaCaT细胞28代开始MMP-9相对蛋白水平明显上升,35代后细胞生长速度明显增快,倍增时间明显缩短;软琼脂集落形成数为(107±11)个,较对照组(24±7)明显增多(P<0.01).ROS水平在染毒0到14代间呈先上升后下降随后再上升趋势,14代以后ROS水平逐渐降低.MDA含量在染毒1代时达到峰值,随后呈缓慢下降趋势.SOD活性在染毒0到21代呈先上升后缓慢下降趋势,21代以后其活性再次升高,呈持续上升趋势,且较0代明显升高(P<0.05).结论 低剂量亚砷酸钠长期诱导HaCaT细胞发生恶性转化过程中伴随细胞内氧化-抗氧化平衡失调,染毒后期SOD活性持续增加而ROS水平持续降低.
作者:马园;王大朋;许熙国;杨旭;王小娟;朱震;赵莹莹;陈敏;许菲菲 刊期: 2015年第03期
目的 比较两种细胞活力检测方法,即磺酰罗丹明B(SRB)法和噻唑蓝(MTT)法在皮肤来源细胞中的应用.方法 选用几种化妆品研究中常用的皮肤来源细胞系,包括角质细胞HaCaT、黑色素细胞B16及成纤维细胞BALB/C 3T3,分别应用MTT法和SRB法检测细胞活力,并对两种方法进行比较,包括线性范围、信噪比、变异系数、信号稳定时间等.结果 SRB法的线性范围大于MTT法,变异系数小于MTT法,信号稳定时间比MTT法长.SRB法检测过程中可以暂停,有利于进行批量检测.SRB法可以进行重复检测,如果检测过程中发生意外或者对检测结果存有质疑,可以通过重复检测进行补救.结论 在3种皮肤来源细胞系中,使用SRB法检测细胞活力,实验方法灵活、高效,检测结果稳定、精确,可以与MTT法互为补充使用,尤其是在大批量样本检测中具备优势.
作者:吕冰峰;裴新荣;崔生辉;罗飞亚;张庆生;邢书霞 刊期: 2015年第03期