宫伟彦；郭海军；刘伟佳；李晓辉；栾德春；吴晓旻；刘爱玲
目的 对影响ABI3500xl全自动测序仪测序过程的因素进行研究,以提高测序的准确度和成功率并降低成本.方法 对PCR反应体系、产物纯化方法进行优化.将BigDye分别稀释8、16和32倍进行测序PCR反应,比较不同的BigDye稀释倍数对PCR产物测序结果的影响;使用CENTRI-SEP柱纯化法、BigDye CleaningBeads磁珠法和乙醇乙酸钠EDTA法对测序PCR产物进行纯化,比较不同纯化方法对测序结果的影响.结果 BigDye稀释8倍和16倍时,PCR反应体系的测序结果正常,而稀释32倍时测序结果出现碱基误读;3种不同的测序PCR产物纯化方法均可得到满意的测序结果.相比之下,CENTRI-SEP Kit纯化方法所需时间短(0.5 h),但是成本较高;乙醇乙酸钠EDTA纯化方法成本低,但耗时较长(2 h);磁珠纯化法所需时间(1 h)和成本介于CENTRI-SEP Kit法和乙醇乙酸钠EDTA法之间,但不适于高通量操作.结论 ABI3500xl全自动测序仪测序过程中,BigDye稀释16倍时所得测序结果准确且成本较低;3种测序PCR产物纯化方法均可得到准确的测序结果,实际工作中应根据操作者具备的实验条件选择适纯化方法,以减少测序时间和成本.
作者：闫韶飞；王伟；徐进；白莉；甘辛；李凤琴 刊期： 2015年第03期
目的 采用系统评价的方法,从剂量、干预时间、对照碳水化合物种类亚组等方面量化果糖对糖尿病人群血甘油三酯的影响.方法 全面检索1970-2014年在MedLine,EMbase,Cochrane图书馆临床对照试验资料库,中国生物医学文献数据库(CNKI)、万方数据库发表的果糖与血脂关系的所有临床随机对照研究文献资料,对符合纳入标准的文献应用RevMan 5.3软件进行果糖对血甘油三酯(TG)水平影响的Meta分析,并对不同剂量(＜50g/d,50～100 g/d,≥100g/d)、不同对照物(蔗糖、淀粉及混合膳食)以及不同干预时间(＜1月组和≥1月)进行亚组分析.结果 符合纳入标准的临床随机对照文献共15篇,包含21项研究.Meta亚组分析结果显示,在糖尿病整体人群中,果糖未引起TG升高.但果糖能引起2型糖尿病人群血TG的升高:当果糖摄入剂量＜ 100 g/d时,对TG无不良影响[加权平均差WMD为-0.20,95％ CI(-0.62,0.22),P=0.35];当≥100g/d时,则能引起TG升高[WMD0.17,95％ CI(0.08,0.25),P＜0.0001].当蔗糖和混合膳食作为对照物时,果糖未使TG水平升高;但当淀粉作为对照物时,果糖能使TG升高[WMD 0.13,95％CI(0.02,0.23),P=0.02].结论 果糖对TG水平影响在2型糖尿病人群中较1型糖尿病人群敏感,当高剂量(≥100g/d)时能引起TG升高,并与对照的碳水化合物种类有关.
作者：向雪松；赵佳；朱婧；张鹏；王竹；杨月欣 刊期： 2015年第03期
目的 探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)导致睾丸氧化损伤与睾酮合成途径的关系及可能的机制.方法 24只健康4周龄雄性Wistar大鼠随机分为对照组(玉米油)及DBP低、中、高剂量组(80、200和500 mg/kg),每组6只,经灌胃染毒每日1次、连续染毒4周.染毒结束后称量动物体重及睾丸和附睾的重量,用生化方法检测睾丸匀浆中丙二醛(M DA)和活性氧自由基(ROS)的含量,抗氧化酶超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶-1(GPx-1)的活性变化,类固醇合成酶3β-HSD1、17β-HSD3的活性,用放射免疫法测定外周血中睾酮、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)和睾丸内的睾酮(T)、雄烯二酮(ASD)的水平,用real time-qPCR方法检测StAR、P450scc、3β-HSD1、17β-HSD3、CYP17a1 mRNA水平的表达变化.结果 与对照组相比,高剂量组体重、睾丸重量明显减少(P＜0.05);循环血LH、FSH增高(P＜0.05),循环血及睾丸内睾酮、睾丸内ASD均降低(P＜0.05);MDA和ROS的含量明显升高(P＜0.05),SOD、CAT、GPx-1的活性及3β-HSD1的酶活性均明显降低(P＜0.05);StAR、P450scc、3β-HSD1、CYP17a1 mRNA降低,17β-HSD3 mRNA升高(P＜0.05).中剂量组循环血LH、FSH增高(P＜0.05),睾丸内T和ASD降低(P＜0.05);ROS升高(P＜0.05),GPx-1的活性降低(P＜0.05);3β-HSD1酶活性减少(P＜0.05);StAR、P450scc、CYP17a1 mRNA降低(P＜0.05).低剂量组所有指标未见有统计学意义的改变.结论 DBP暴露干扰了大鼠睾丸氧化/抗氧化平衡,降低了GPx-1活性,抑制CYP17a1基因的表达,降低睾丸ASD水平,终抑制间质细胞内睾酮合成.CYP17a1降低是DBP干扰睾酮合成的毒性作用机制之一.
作者：于淼；张林媛；乔佩环；常兵 刊期： 2015年第03期
目的 探讨PM2.5通过氧化应激对人支气管上皮细胞JAK/STAT信号通路和细胞因子的影响.方法 利用传统侵入式方法培养支气管上皮细胞16HBE,本次研究共从两方面来进行探讨:(1)探讨PM2.5、氧化应激与JAK/STAT信号通路的关系,设立生理盐水对照组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,5 mmol/L)组、50 μg/ml PM2.5组、100 μg/ml PM2.5组、50 μg/ml PM2.5+5 mmol/L NAC组和100 μg/ml PM2.5+5mmol/L NAC组,培养24 h后测定细胞内ROS水平和JAK2、STAT3的基因表达.(2)探讨PM2.5、JAK/STAT信号通路和细胞因子的关系,设立生理盐水对照组、6μmol/LAG490组、100 μg/ml PM2.5组、6 μmol/L AG490+100 μg/ml PM2.5组,培养24 h后检测细胞上清液中白介素-6(IL-6)含量.结果 染毒24 h后,50 μg/ml PM2.5组和100μg/ml PM2.5组16HBE细胞内ROS水平和JAK2、STAT3基因表达均高于生理盐水对照组,PM2.5暴露+NAC保护组ROS水平和JAK2、STAT3的基因表达均低于各自PM2.5暴露组,差异均有统计学意义(P＜0.05).100 μg/ml PM2.5组上清液中IL-6含量高于生理盐水对照组,6 μmol/L AG490+ 100 μg/ml PM2.5组细胞上清波中IL-6含量低于100 μg/ml PM2.5暴露组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 PM2.5能对支气管上皮细胞造成氧化损伤,并可能通过氧化应激调节上皮细胞JAK/STAT信号通路和相关细胞因子的产生.
作者：徐贞贞；张志红；马晓燕；平飞飞；郑鑫 刊期： 2015年第03期
目的 建立超高效液相色谱-高分辨质谱同时快速测定蜂蜜中14种农药残留的方法.方法 样品采用1％甲酸乙腈提取,以N-丙基乙二胺(PSA)和C18作为吸附剂的分散固相萃取法(d-SPE)进行净化,以Accucore aQ C18色谱柱(2.6 μm,2.1mm×150 mm)进行色谱分离,通过高分辨质谱的全扫描/实时二级质谱扫描模式进行定性筛查和定量检测.结果 14种农药残留在一定浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数(r)均大于0.998,定量限(LOQ)为0.6～6μg/kg.空白蜂蜜样品在LOQ、15和30 μg/kg三个加标水平的平均回收率为80.3％～ 112.7％,相对标准偏差为0.4％～7.1％.结论 该方法适合蜂蜜中农药多残留的快速筛查和定量.
作者：张烁；陈达炜；赵云峰 刊期： 2015年第03期
目的 了解山东省青岛市、泰安市、烟台市3～4年级小学生闲暇时锻炼、静态活动状况及影响因素.方法 采取随机整群抽样的方法抽取青岛市、烟台市和泰安市2283名3～4年级小学生,采用自制问卷(包括基本情况、闲暇时参与锻炼情况、静态活动情况等)进行调查.采用Logistic模型分析不同城市、性别、对自身体重认识、对自身外形满意度、家长是否参与锻炼/静态活动时间是否过长等对小学生闲暇锻炼和静态活动的影响.结果 三城市调查前一周闲暇时小学生锻炼参与率为65.9％,锻炼人群中中高强度锻炼天数为4天,平均每天锻炼时间为30 min.小学生闲暇时是否参与锻炼与地区、性别、对自身外形满意度、家长是否参与锻炼有关.闲暇时平均每天静态活动时间为0.9h,平均每天静态活动时间2h及以上的小学生占13.6％.小学生闲暇时静态活动时间过长与其对自身体重认识、家长静态活动时间过长有关.结论 应同时加强小学生和家长的身体活动干预,进一步改善小学生的身体活动现状.
作者：宋超；于欣平；丁彩翠；甄宝杰；陈暕；王延勇；李荔；刘爱玲 刊期： 2015年第03期
目的 探讨能量平衡状态下,不同膳食脂肪摄入量对大鼠血糖、血脂、体脂、胰岛素及瘦素的影响.方法 40只SD雄性大鼠随机分为4组,分别饲喂等能量低脂饲料(脂肪供能比5％)、普通饲料(脂肪供能比15％)、中脂饲料(脂肪供能比25％)和高脂饲料(脂肪供能比40％).测量第0、5和10周血糖和血脂水平及第0、10周血清脂联素和瘦素水平.10周末取肾周及睾周脂肪垫,计算体脂比,用realtime PCR方法测算脂肪中脂联素及瘦素mRNA的相对表达水平.结果 喂养5周及10周后,中脂组和高脂组大鼠血清中甘油三酯含量显著低于低脂组和普通组;10周末,中脂组脂肪中脂联素mRNA的表达水平显著低于低脂组;体脂比、血糖、血胆固醇、血清脂联素和瘦素水平以及脂肪中瘦素mRNA的相对表达水平,各组间均无显著性差异.结论 能量平衡状态下,不同的膳食脂肪摄入量对大鼠体脂、血糖、血清甘油三酯、脂联素及瘦素水平均无影响.
作者：孙岩桐；卓勤；张宇；杨春；杨晓光；朴建华 刊期： 2015年第03期
目的 了解中小学生饮食行为现状,为制定改善中小学生营养状况措施提供依据.方法 采取分层随机整群抽样方法,对沈阳、广州、武汉、成都四城市10626名中小学生进行问卷调查.结果 被调查对象中每天吃早餐的比例为66.9％,早餐营养充足的比例仅为8.5％,每月消费1次及以上西式快餐、零食、饮料的比例分别为63.9％、93.5％、93.5％.常吃的5种零食依次为谷类、新鲜蔬果、奶制品、糖果类、薯类,常喝的5种饮料依次为:奶类、碳酸饮料、包装果蔬汁饮料、功能饮料、鲜榨果蔬汁.不同城市、性别、学段的学生饮食行为存在差异.结论 沈阳、广州、武汉和成都四城市中小学生存在饮食行为不合理现象,学校应加强营养知识健康教育,引导其养成良好的饮食行为和习惯.
作者：宫伟彦；郭海军；刘伟佳；李晓辉；栾德春；吴晓旻；刘爱玲 刊期： 2015年第03期
近年来,随着生活水平的提高,生活方式和饮食习惯的改变,非酒精性脂肪肝病的发病率呈逐年上升的趋势,已经成为危害人类健康的主要慢性肝脏疾病之一,引起了国内外的广泛关注.铁作为人体必需微量元素,通常以多种形式在体内存在,并保持动态平衡.越来越多研究表明,某些慢性疾病的发生与铁超载密切相关.本文主要对铁超载在非酒精性脂肪肝病中的作用进行了综述.
作者：叶琪 刊期： 2015年第03期
目的 建立一种简便快速的分散固相萃取前处理方法,结合液相色谱法测定焙烤食品中的富马酸二甲酯.方法 样品用甲醇超声提取,采用高速冷冻离心和分散固相萃取净化方式去除油脂、色素等杂质,采用C18柱(4.6mm×25 mm,5μm),流动相为甲醇-0.03 mol/L乙酸钠和0.008 mol/L溴化四丁基铵溶液,检测波长220nm.结果 该方法在0.1～20 μg/ml范围内呈良好线性,r＞0.999,在不同空白基质样品中不同添加水平下,平均回收率为82.8％ ～ 107.5％,相对标准偏差(RSD)为3.30％ ～7.30％(n =6),检出限(LOD)为0.4 mg/kg,定量限(LOQ)为1.0 mg/kg.结论 该方法简便、快速、准确,适用于焙烤食品中富马酸二甲酯含量的检测.
作者：杨杰；罗梦甜；冯迪；苗虹；宋书锋；赵云峰 刊期： 2015年第03期
目的 通过喹乙醇染毒人源肾小管上皮细胞(HK-2细胞)并检测活性氧(ROS)和凋亡相关蛋白的表达,探讨喹乙醇肾脏毒性产生过程及其可能的内质网应激相关凋亡机制.方法 分别以不同浓度(1、2、3、4、5、6、7和8μmol/ml)喹乙醇染毒HK-2细胞24 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖率以确定剂量-效应关系;Hoechst-33258荧光染色检测各组细胞凋亡形态,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率和细胞内活性氧含量;免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激相关凋亡蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)和凋亡促进因子CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达.结果 根据MTT毒性实验结果,喹乙醇对HK-2细胞凋亡效应的适宜剂量确定为1、2、3和4 μmol/ml.在喹乙醇不同剂量观察组中,喹乙醇染毒2μmol/ml以上剂量组,细胞凋亡率、内质网凋亡相关蛋白GRP79、GRP94和CHOP表达增加,喹乙醇各染毒剂量均可见活性氧水平增加(P＜0.05);在喹乙醇不同染毒时间观察组中,喹乙醇染毒12和24 h组,细胞凋亡率、内质网凋亡相关蛋白GRP79、GRP94表达增加,喹乙醇染毒6、12和24 h组,活性氧水平、内质网凋亡相关蛋白CHOP表达增加(P＜0.05).结论 喹乙醇可致肾小管上皮细胞发生细胞凋亡从而造成肾脏毒性,凋亡的发生可能与内质网应激相关凋亡途径相关.
作者：李忠生；于常艳；陈宵；张斌；曹鹏；李斌；肖经纬 刊期： 2015年第03期
目的 探讨高碘地区停供碘盐后儿童甲状腺肿大率的变化.方法 在河北省衡水市随机选取了三个水碘在150～300 μg/L的高碘乡,在停供碘盐前后在这三个乡分别随机选取了452和459名8 ～10岁儿童,用B超测量其甲状腺容积,用WHO推荐的年龄标化甲状腺容积标准判定其甲状腺肿大情况.结果 停供碘盐后儿童甲状腺肿大率从24.56％ (111/452)下降到5.88％ (27/459) (P ＜0.01).8、9、10岁儿童的甲状腺肿大率分别从33.70％ (31/92)、23.32％ (45/193)、20.96％(35/167)下降到6.10％ (10/164)、5.52％ (9/163)、6.06％ (8/132).男孩和女孩的甲状腺肿大率分别从27.05％(66/244)、21.63％ (45/208)下降到6.66％ (15/226)、5.15％ (12/233).性别和年龄组甲状腺肿大率的下降均有显著统计学差异.结论 河北省高碘地区停供碘盐一年半以后儿童的甲状腺肿大率显著下降.
作者：吕胜敏；徐栋；王玉春；杜永贵；贾丽辉；梁索理 刊期： 2015年第03期
多不饱和脂肪酸(PUFA)是人体必需的脂肪酸,其对人体的功能及作用机制已经过大量研究和论证,且主要集中在生命早期的神经发育和以后的智力、认知功能等方面.PUFA家族中诸如n-3系列的EPA、DHA以及n-6系列的ARA等是目前营养强化领域研究的热点.铁作为辅酶参与构成了体内多种重要的酶类并发挥相应的代谢调节功能.本文尝试通过铁缺乏对PUFA合成代谢影响的阐述以期两者在食品强化领域得到更好的应用.
作者：刘辉 刊期： 2015年第03期
目的 研究酶联免疫法和化学发光法两种方法检测血清中25-羟基维生素D[25(OH)D]浓度结果的一致性.方法 参考NCCLS-EP9-A2文件的相关规定,收集了40例人体血清样品,分别使用IDS酶联免疫试剂盒和IDS-iSYS化学发光法自动分析仪检测25(OH)D浓度.剔除方法内及方法间离群值,分析两种检测方法的相关性,并进行回归分析、偏倚性分析.结果 两种方法的相关系数r =0.981,回归方程为y=0.995x+2.3928,偏倚性分析显示随着样品浓度的升高,两种方法检测值之间的相对标准偏差有减小的趋势.结论 酶联免疫法和化学发光法检测血清中25(OH)D浓度的重复性及相关性较好.
作者：云春凤；陈竞；杨春；朴建华；杨晓光 刊期： 2015年第03期
噬菌体展示技术是一项筛选技术,能将外源多肽或蛋白质与噬菌体的衣壳蛋白融合表达,并展示在噬菌体颗粒的表面.因此,可通过该技术获得真菌毒素的模拟表位和抗真菌毒素的重组抗体,这为利用免疫学原理建立无毒检测体系检测真菌毒素带来了新的模式.本文综述了近几年噬菌体展示技术在真菌毒素检测中的应用研究.
作者：陈超超 刊期： 2015年第03期
沙门菌是引起我国食源性疾病的重要致病菌.传统的沙门菌生化鉴定和血清分型方法已不能满足日益繁重的检测工作要求,快速灵敏的分子生物学方法越来越多地应用于沙门菌研究中.本文就基因水平的沙门菌检测、鉴定及分型新进展进行综述.
作者：赫英英 刊期： 2015年第03期
目的 研究铝对大鼠认知能力及全基因组甲基化的影响.方法 健康清洁级SD雄性大鼠72只,按体质量随机分成两部分9组,实验部分:对照组(生理盐水),低、中、高铝剂量组(0.27、0.54和1.08 mg/kg);干预部分:对照组(生理盐水),铝高剂量组(1.08 mg/kg),铝高剂量+叶酸低、中、高剂量组(0.7、1.5和3.4 mg/kg),每组8只.各组大鼠腹腔注射相应剂量麦芽酚铝(0.2 ml/d),同时叶酸各剂量干预组每日灌胃叶酸1 ml/100 g,连续60 d.采用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,采用ELISA法测定大鼠全基因组甲基化.结果 Morris水迷宫结果显示,铝暴露可导致大鼠目标象限停留时间明显缩短,穿越原平台位置的次数明显减少,铝低、中、高剂量组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);叶酸干预铝高剂量组可导致大鼠目标象限停留时间明显延长和穿越原平台位置的次数明显增多,铝高剂量组与铝高+叶酸中、高剂量组比较差异有统计学意义(P＜0.05).大鼠全基因组甲基化测定结果显示:随铝染毒剂量的增加,0.54、1.08 mg/kg染毒组大鼠全基因组甲基化率显著降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P＜0.05);而添加高剂量叶酸组全基因组甲基化率显著增加,与铝高剂量组比较差异具有统计学意义(P＜0.05),与对照组比较差异无统计学意义.结论 铝可导致大鼠学习记忆能力下降,大鼠全基因组甲基化率降低,叶酸可能对其有改善作用.
作者：原宇宙；杨晓娟；任佩；亢盼；李朝阳；牛侨 刊期： 2015年第03期
目的 探讨氧化应激相关指标活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)在砷致人角质形成细胞(human keratinocytes,HaCaT)恶性转化不同阶段的动态变化.方法 以含1.0 μmol/L NaAsO2的DMEM高糖完全培养基连续培养HaCaT细胞35代后,用基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达水平变化、细胞生长动力学改变和软琼脂集落形成实验鉴定其是否发生恶性转化.分别收集0、1、7、14、21、28和35代细胞,采用流式细胞仪检测不同代数细胞内ROS活性,生化法检测细胞内MDA含量及SOD活性变化.结果 1.0μmol/L NaAsO2处理HaCaT细胞28代开始MMP-9相对蛋白水平明显上升,35代后细胞生长速度明显增快,倍增时间明显缩短;软琼脂集落形成数为(107±11)个,较对照组(24±7)明显增多(P＜0.01).ROS水平在染毒0到14代间呈先上升后下降随后再上升趋势,14代以后ROS水平逐渐降低.MDA含量在染毒1代时达到峰值,随后呈缓慢下降趋势.SOD活性在染毒0到21代呈先上升后缓慢下降趋势,21代以后其活性再次升高,呈持续上升趋势,且较0代明显升高(P＜0.05).结论 低剂量亚砷酸钠长期诱导HaCaT细胞发生恶性转化过程中伴随细胞内氧化-抗氧化平衡失调,染毒后期SOD活性持续增加而ROS水平持续降低.
作者：马园；王大朋；许熙国；杨旭；王小娟；朱震；赵莹莹；陈敏；许菲菲 刊期： 2015年第03期
铁缺乏(iron deficiency,ID)是常见的营养素缺乏症和全球性健康问题,铁缺乏的生物学客观指标及其检验方法是铁营养状况的个体诊断及人群筛查的核心技术,是铁缺乏观察研究、危害分析及营养干预的科学基础.本文综述了18项铁缺乏诊断指标包括近年来开始应用的低色素红细胞百分率、网织红细胞浓度、血清或尿铁调节素等指标的检验方法及特点.本文对血清铁蛋白-C-反应蛋白/α1-酸性糖蛋白指标体系(SF-CRP/AGP)、血清铁蛋白-可溶性运铁蛋白受体(SF-sTfR)两指标模型、血清铁蛋白-运铁蛋白饱和度-原卟啉/锌卟啉(SF-TS-FEP/ZPP)等三指标或多指标模型及铁储量(BI)模型研究进展进行综述,并探讨各指标体系的应用前景.综述表明SF-CRP/AGP研究较多,是目前推荐选择的铁缺乏指标,但SF值受炎症因子影响且其判断阈值存在争议.SF-sTfR和BI模型较为稳定,可减少炎症影响,sTfR阈值研究不足,还需积累更多数据.
作者：王丽娟 刊期： 2015年第03期
目的 研究四川、福建和广西贝类及其养殖环境中分离的副溶血性弧菌的耐药特征.方法 采用微量肉汤稀释法测定186株副溶血性弧菌对8种抗生素包括氨苄西林、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、四环素、氯霉素、环丙沙星和复方新诺明的耐药性.结果 186株副溶血性弧菌总耐药率为69.35％,主要耐受的抗生素为氨苄西林,氨苄西林的小抑菌浓度(MIC)值的几何均数大于耐药解释标准.4株菌表现为多重耐药/中介.所有菌株对头孢噻肟、头孢他啶、氯霉素、环丙沙星等4种抗生素100％敏感.按照分离省份、采样环节和样品种类分类分析,副溶血性弧菌分离株的氨苄西林耐药谱3个采样环节中养殖场的耐药率高为73.68％,3个省份中四川菌株的耐药率高为70.94％,但差异均没有统计学意义.58份样品中,有44份样品分离出2株及以上菌株,样品分离菌株的耐药谱多态率为77.27％(34/44).结论 贝类及其养殖环境中副溶血性弧菌的氨苄西林耐药率较高,养殖环境可能是副溶血性弧菌耐药性的主要来源,需加强贝类养殖过程的副溶血性弧菌耐药性的监测和控制.
作者：韩海红；李凤琴；徐进；陈艳；余东敏；闫韶飞；吴青；李薇薇；郭云昌 刊期： 2015年第03期
卫生研究杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中国疾病预防控制中心
