原宇宙;杨晓娟;任佩;亢盼;李朝阳;牛侨
目的 对影响ABI3500xl全自动测序仪测序过程的因素进行研究,以提高测序的准确度和成功率并降低成本.方法 对PCR反应体系、产物纯化方法进行优化.将BigDye分别稀释8、16和32倍进行测序PCR反应,比较不同的BigDye稀释倍数对PCR产物测序结果的影响;使用CENTRI-SEP柱纯化法、BigDye CleaningBeads磁珠法和乙醇乙酸钠EDTA法对测序PCR产物进行纯化,比较不同纯化方法对测序结果的影响.结果 BigDye稀释8倍和16倍时,PCR反应体系的测序结果正常,而稀释32倍时测序结果出现碱基误读;3种不同的测序PCR产物纯化方法均可得到满意的测序结果.相比之下,CENTRI-SEP Kit纯化方法所需时间短(0.5 h),但是成本较高;乙醇乙酸钠EDTA纯化方法成本低,但耗时较长(2 h);磁珠纯化法所需时间(1 h)和成本介于CENTRI-SEP Kit法和乙醇乙酸钠EDTA法之间,但不适于高通量操作.结论 ABI3500xl全自动测序仪测序过程中,BigDye稀释16倍时所得测序结果准确且成本较低;3种测序PCR产物纯化方法均可得到准确的测序结果,实际工作中应根据操作者具备的实验条件选择适纯化方法,以减少测序时间和成本.
作者:闫韶飞;王伟;徐进;白莉;甘辛;李凤琴 刊期: 2015年第03期
目的 研究铝对大鼠认知能力及全基因组甲基化的影响.方法 健康清洁级SD雄性大鼠72只,按体质量随机分成两部分9组,实验部分:对照组(生理盐水),低、中、高铝剂量组(0.27、0.54和1.08 mg/kg);干预部分:对照组(生理盐水),铝高剂量组(1.08 mg/kg),铝高剂量+叶酸低、中、高剂量组(0.7、1.5和3.4 mg/kg),每组8只.各组大鼠腹腔注射相应剂量麦芽酚铝(0.2 ml/d),同时叶酸各剂量干预组每日灌胃叶酸1 ml/100 g,连续60 d.采用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力,采用ELISA法测定大鼠全基因组甲基化.结果 Morris水迷宫结果显示,铝暴露可导致大鼠目标象限停留时间明显缩短,穿越原平台位置的次数明显减少,铝低、中、高剂量组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);叶酸干预铝高剂量组可导致大鼠目标象限停留时间明显延长和穿越原平台位置的次数明显增多,铝高剂量组与铝高+叶酸中、高剂量组比较差异有统计学意义(P<0.05).大鼠全基因组甲基化测定结果显示:随铝染毒剂量的增加,0.54、1.08 mg/kg染毒组大鼠全基因组甲基化率显著降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05);而添加高剂量叶酸组全基因组甲基化率显著增加,与铝高剂量组比较差异具有统计学意义(P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义.结论 铝可导致大鼠学习记忆能力下降,大鼠全基因组甲基化率降低,叶酸可能对其有改善作用.
作者:原宇宙;杨晓娟;任佩;亢盼;李朝阳;牛侨 刊期: 2015年第03期
目的 调查中国内陆地区孕妇孕晚期膳食模式与其过渡乳中脂肪酸构成的关系.方法 选取靠近淡水河湖(江苏句容)和远离河湖(河北徐水)的内陆地区各一处,每地区募集孕晚期孕妇40位,调查其孕晚期膳食消费情况及其过渡乳脂肪酸构成.结果 两地区孕妇海鱼消费频次均低于1次/周,句容地区孕妇消费菜籽油显著高于徐水地区(P<0.05).两地区乳母每100 g过渡乳中总脂质含量分别为(4.39 ±1.18)和(3.92±1.47) g(P =0.11),DHA含量分别为(0.46±0.20)%和(0.29±0.09)%(P<0.05).菜籽油摄入量与过渡乳中DHA百分含量显著相关(r =0.362,P<0.05).结论 两地区孕产妇过渡乳脂肪酸构成差异可能由其膳食模式差异所致.充分摄入n-3长链多不饱和脂肪酸的前体(如α亚麻酸)在一定程度上可有效代偿其摄入的不足.
作者:高颐雄;张坚;王春荣;李丽祥;满青青;宋鹏坤 刊期: 2015年第03期
目的 建立一种简便快速的分散固相萃取前处理方法,结合液相色谱法测定焙烤食品中的富马酸二甲酯.方法 样品用甲醇超声提取,采用高速冷冻离心和分散固相萃取净化方式去除油脂、色素等杂质,采用C18柱(4.6mm×25 mm,5μm),流动相为甲醇-0.03 mol/L乙酸钠和0.008 mol/L溴化四丁基铵溶液,检测波长220nm.结果 该方法在0.1~20 μg/ml范围内呈良好线性,r>0.999,在不同空白基质样品中不同添加水平下,平均回收率为82.8% ~ 107.5%,相对标准偏差(RSD)为3.30% ~7.30%(n =6),检出限(LOD)为0.4 mg/kg,定量限(LOQ)为1.0 mg/kg.结论 该方法简便、快速、准确,适用于焙烤食品中富马酸二甲酯含量的检测.
作者:杨杰;罗梦甜;冯迪;苗虹;宋书锋;赵云峰 刊期: 2015年第03期
目的 比较两种细胞活力检测方法,即磺酰罗丹明B(SRB)法和噻唑蓝(MTT)法在皮肤来源细胞中的应用.方法 选用几种化妆品研究中常用的皮肤来源细胞系,包括角质细胞HaCaT、黑色素细胞B16及成纤维细胞BALB/C 3T3,分别应用MTT法和SRB法检测细胞活力,并对两种方法进行比较,包括线性范围、信噪比、变异系数、信号稳定时间等.结果 SRB法的线性范围大于MTT法,变异系数小于MTT法,信号稳定时间比MTT法长.SRB法检测过程中可以暂停,有利于进行批量检测.SRB法可以进行重复检测,如果检测过程中发生意外或者对检测结果存有质疑,可以通过重复检测进行补救.结论 在3种皮肤来源细胞系中,使用SRB法检测细胞活力,实验方法灵活、高效,检测结果稳定、精确,可以与MTT法互为补充使用,尤其是在大批量样本检测中具备优势.
作者:吕冰峰;裴新荣;崔生辉;罗飞亚;张庆生;邢书霞 刊期: 2015年第03期
目的 构建肉鸡屠宰场中沙门菌的定量评估模型,评估影响肉鸡胴体携带沙门菌变化的因素,优选减少沙门菌污染的干预措施.方法 采用2012年济南市肉鸡沙门菌专项监测的数据和调查所得的工艺参数,在Excel表格中构建以褪毛后为评估起点,除内脏和清洗预冷为过程的模块化的过程风险模型,并通过@risk软件模拟运行.结果 模型计算出预冷池后肉鸡胴体上沙门菌的浓度为1.96 MPN/g,相对于初始值褪毛后沙门菌的浓度18 MPN/g,降低程度大.通过敏感性分析,褪毛后沙门菌的浓度和预冷池水中沙门菌的浓度的相关系数分别为0.84和0.34,是主要影响因素.结论 本研究为肉鸡屠宰场沙门菌的定量评估提供了一个可借鉴的模型框架,风险管理者依据本模型提出的控制措施为降低褪毛后沙门菌的浓度和预冷池水中沙门菌的浓度.
作者:张玉;陈玉贞;胡春光;张华宁;毕振旺;毕振强 刊期: 2015年第03期
双酚A(bisphenol A)是一种常见的环境内分泌干扰物(EDCs),它常用作聚碳酸酯塑料、聚苯乙烯树脂和牙科密封剂的原料.BPA的环境污染很广泛,可通过水和食物进入人体,95%人群的尿样能够检测到BPA.流行病学资料和动物实验研究表明,BPA能够快速穿透胎盘屏障和血脑屏障,并且孕期BPA暴露能够致子代心理行为发育改变.本文将重点从表观遗传学、基因组与非基因组效应、氧化应激、多巴胺系统、突触数量和可塑性改变等方面阐述孕期BPA暴露对子代心理行为发育影响的机制.
作者:牛影 刊期: 2015年第03期
铁缺乏(iron deficiency,ID)是常见的营养素缺乏症和全球性健康问题,铁缺乏的生物学客观指标及其检验方法是铁营养状况的个体诊断及人群筛查的核心技术,是铁缺乏观察研究、危害分析及营养干预的科学基础.本文综述了18项铁缺乏诊断指标包括近年来开始应用的低色素红细胞百分率、网织红细胞浓度、血清或尿铁调节素等指标的检验方法及特点.本文对血清铁蛋白-C-反应蛋白/α1-酸性糖蛋白指标体系(SF-CRP/AGP)、血清铁蛋白-可溶性运铁蛋白受体(SF-sTfR)两指标模型、血清铁蛋白-运铁蛋白饱和度-原卟啉/锌卟啉(SF-TS-FEP/ZPP)等三指标或多指标模型及铁储量(BI)模型研究进展进行综述,并探讨各指标体系的应用前景.综述表明SF-CRP/AGP研究较多,是目前推荐选择的铁缺乏指标,但SF值受炎症因子影响且其判断阈值存在争议.SF-sTfR和BI模型较为稳定,可减少炎症影响,sTfR阈值研究不足,还需积累更多数据.
作者:王丽娟 刊期: 2015年第03期
目的 了解中小学生饮食行为现状,为制定改善中小学生营养状况措施提供依据.方法 采取分层随机整群抽样方法,对沈阳、广州、武汉、成都四城市10626名中小学生进行问卷调查.结果 被调查对象中每天吃早餐的比例为66.9%,早餐营养充足的比例仅为8.5%,每月消费1次及以上西式快餐、零食、饮料的比例分别为63.9%、93.5%、93.5%.常吃的5种零食依次为谷类、新鲜蔬果、奶制品、糖果类、薯类,常喝的5种饮料依次为:奶类、碳酸饮料、包装果蔬汁饮料、功能饮料、鲜榨果蔬汁.不同城市、性别、学段的学生饮食行为存在差异.结论 沈阳、广州、武汉和成都四城市中小学生存在饮食行为不合理现象,学校应加强营养知识健康教育,引导其养成良好的饮食行为和习惯.
作者:宫伟彦;郭海军;刘伟佳;李晓辉;栾德春;吴晓旻;刘爱玲 刊期: 2015年第03期
目的 探讨能量平衡状态下,不同膳食脂肪摄入量对大鼠血糖、血脂、体脂、胰岛素及瘦素的影响.方法 40只SD雄性大鼠随机分为4组,分别饲喂等能量低脂饲料(脂肪供能比5%)、普通饲料(脂肪供能比15%)、中脂饲料(脂肪供能比25%)和高脂饲料(脂肪供能比40%).测量第0、5和10周血糖和血脂水平及第0、10周血清脂联素和瘦素水平.10周末取肾周及睾周脂肪垫,计算体脂比,用realtime PCR方法测算脂肪中脂联素及瘦素mRNA的相对表达水平.结果 喂养5周及10周后,中脂组和高脂组大鼠血清中甘油三酯含量显著低于低脂组和普通组;10周末,中脂组脂肪中脂联素mRNA的表达水平显著低于低脂组;体脂比、血糖、血胆固醇、血清脂联素和瘦素水平以及脂肪中瘦素mRNA的相对表达水平,各组间均无显著性差异.结论 能量平衡状态下,不同的膳食脂肪摄入量对大鼠体脂、血糖、血清甘油三酯、脂联素及瘦素水平均无影响.
作者:孙岩桐;卓勤;张宇;杨春;杨晓光;朴建华 刊期: 2015年第03期
目的 探讨母鼠过量补充铁对仔鼠肝脏组织形态和功能的影响.方法 将孕鼠按体重随机分为高、中、低剂量(120、60、30 mg/kg BW)补铁组和生理盐水对照组.选用右旋糖酐铁隔日对母鼠腹腔注射,共6周.测定血清铁含量,血清谷氨酸氨基转移酶(GPT)、天门冬氨酸氨基转移酶(GOT)活性;肝脏铁染色及病理组织学检查肝组织损伤情况,免疫组化法测定肝脏Bax和Bcl-2基因表达,氧化应激水平分析肝组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 补铁6周后,高、中剂量组仔鼠血清铁水平均明显高于对照组(P<0.05).低剂量组仔鼠肝组织有少量铁沉积,而中、高剂量组则有大量铁沉积,且随着肝脏铁蓄积的增多,肝细胞受损程度明显增加.中、高剂量组Bcl-2基因与Bax基因表达量的比值均明显低于对照组(P<0.05).高剂量组肝ALT和AST活性均明显高于对照组(P<0.05).中、高剂量组仔鼠肝组织MDA含量均明显高于对照组(P<0.05),GSH-Px活性均明显低于对照组(P<0.05);高剂量组SOD活性明显低于对照组(P<0.05).结论 孕期和哺乳期母鼠腹腔铁过量补充可导致仔鼠肝脏铁过量沉积,肝组织细胞和功能受到不同程度损伤,氧化应激水平明显提高.
作者:姜颖;马爱国;孙永叶;韩秀霞;蔡静 刊期: 2015年第03期
目的 了解山东省青岛市、泰安市、烟台市3~4年级小学生闲暇时锻炼、静态活动状况及影响因素.方法 采取随机整群抽样的方法抽取青岛市、烟台市和泰安市2283名3~4年级小学生,采用自制问卷(包括基本情况、闲暇时参与锻炼情况、静态活动情况等)进行调查.采用Logistic模型分析不同城市、性别、对自身体重认识、对自身外形满意度、家长是否参与锻炼/静态活动时间是否过长等对小学生闲暇锻炼和静态活动的影响.结果 三城市调查前一周闲暇时小学生锻炼参与率为65.9%,锻炼人群中中高强度锻炼天数为4天,平均每天锻炼时间为30 min.小学生闲暇时是否参与锻炼与地区、性别、对自身外形满意度、家长是否参与锻炼有关.闲暇时平均每天静态活动时间为0.9h,平均每天静态活动时间2h及以上的小学生占13.6%.小学生闲暇时静态活动时间过长与其对自身体重认识、家长静态活动时间过长有关.结论 应同时加强小学生和家长的身体活动干预,进一步改善小学生的身体活动现状.
作者:宋超;于欣平;丁彩翠;甄宝杰;陈暕;王延勇;李荔;刘爱玲 刊期: 2015年第03期
目的 通过喹乙醇染毒人源肾小管上皮细胞(HK-2细胞)并检测活性氧(ROS)和凋亡相关蛋白的表达,探讨喹乙醇肾脏毒性产生过程及其可能的内质网应激相关凋亡机制.方法 分别以不同浓度(1、2、3、4、5、6、7和8μmol/ml)喹乙醇染毒HK-2细胞24 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖率以确定剂量-效应关系;Hoechst-33258荧光染色检测各组细胞凋亡形态,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率和细胞内活性氧含量;免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激相关凋亡蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP94)和凋亡促进因子CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达.结果 根据MTT毒性实验结果,喹乙醇对HK-2细胞凋亡效应的适宜剂量确定为1、2、3和4 μmol/ml.在喹乙醇不同剂量观察组中,喹乙醇染毒2μmol/ml以上剂量组,细胞凋亡率、内质网凋亡相关蛋白GRP79、GRP94和CHOP表达增加,喹乙醇各染毒剂量均可见活性氧水平增加(P<0.05);在喹乙醇不同染毒时间观察组中,喹乙醇染毒12和24 h组,细胞凋亡率、内质网凋亡相关蛋白GRP79、GRP94表达增加,喹乙醇染毒6、12和24 h组,活性氧水平、内质网凋亡相关蛋白CHOP表达增加(P<0.05).结论 喹乙醇可致肾小管上皮细胞发生细胞凋亡从而造成肾脏毒性,凋亡的发生可能与内质网应激相关凋亡途径相关.
作者:李忠生;于常艳;陈宵;张斌;曹鹏;李斌;肖经纬 刊期: 2015年第03期
目的 了解北京市售牛乳的6种B族维生素水平,研究品牌和保质期对其的影响.方法 采集北京市面常见牛乳,分析其6种B族维生素,进行统计学分析.结果 不同保质期牛乳中硫胺素含量为210.1~ 339.5μg/L,尼克酰胺含量为581.16 ~ 1261.2 μg/L,二者差异有统计学意义(P<0.05);核黄素含量为397.1~1065.0μg/L,泛酸含量为3005.4 ~ 5081.4 μg/L,二者差异无统计学意义.吡哆醛含量为109.9 ~ 285.6 μg/L,黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)含量为118.2 ~ 1525.9μg/L.新鲜牛乳的吡哆醛和FAD高于长保质期牛乳一倍以上(P<0.05).结论 硫胺素、核黄素、尼克酰胺和泛酸的含量与保质期关系不大,与品牌有关.
作者:任向楠;杨振宇;杨晓光;赖建强;王杰;荫士安;邵兵 刊期: 2015年第03期
近年来,随着生活水平的提高,生活方式和饮食习惯的改变,非酒精性脂肪肝病的发病率呈逐年上升的趋势,已经成为危害人类健康的主要慢性肝脏疾病之一,引起了国内外的广泛关注.铁作为人体必需微量元素,通常以多种形式在体内存在,并保持动态平衡.越来越多研究表明,某些慢性疾病的发生与铁超载密切相关.本文主要对铁超载在非酒精性脂肪肝病中的作用进行了综述.
作者:叶琪 刊期: 2015年第03期
目的 探讨孕期妊娠相关焦虑的动态变化,分析妊娠相关焦虑的影响因素.方法 收集马鞍山市妇幼保健院孕妇一般人口统计学指标和孕期暴露资料,采用自编的《妊娠相关焦虑量表》评定孕妇不同妊娠时期的妊娠相关焦虑状况,并运用广义估计方程分析妊娠相关焦虑的影响因素.结果 990名孕妇孕早期、中期、晚期妊娠相关焦虑问卷总得分分别为(20.3±4.9)、(19.6±4.6)和(18.9±4.4),差异有统计学意义(F =63.10,P<0.001).孕早期、中期、晚期妊娠相关焦虑检出率分别为21.0%、17.7%和13.6%,差异有统计学意义(x2=18.74,P<0.001).广义估计方程结果显示,孕妇高中文化程度(OR=1.36,95%CI 1.05 ~ 1.75)、家庭人均月收入<2500元(OR=1.33,95%CI 1.01~1.75)、意外妊娠(OR=2.60,95%CI 2.05 ~3.29)、有流产史(OR=1.30,95%CI 1.06~ 1.60)、孕期阴道流血(OR =1.61,95%CI1.22 ~2.12)、孕期发热(OR=1.69,95%CI 1.17 ~2.46)和孕期营养剂使用(OR=1.43,95%CI 1.08~1.88)是妊娠相关焦虑的危险因素.结论 孕妇妊娠相关焦虑随着妊娠进展呈下降趋势;妊娠相关焦虑的发生与孕妇的文化程度、家庭经济状况、意外妊娠、流产史、阴道流血及发热等因素相关.
作者:丁秀秀;毛雷婧;葛星;许韶君;潘维君;严双琴;黄锟;陶芳标 刊期: 2015年第03期
目的 建立同时测定饮用水中4种双酚类物质(双酚F、双酚A、四氯双酚A和四溴双酚A)的液相色谱-串联质谱的方法.方法 200 ml水样经C18固相萃取柱富集净化,甲醇洗脱后,用T3色谱柱(2.1 mm×150 mm,3μm)分离,在负电离模式下用串联质谱仪定性定量分析.结果 4种双酚类物质方法检出限为0.20 ~5.5ng/L,两个水平的加标回收率为87.1% ~ 109.0%,日内精密度为6.3% ~ 12.4%,日间精密度为4.5% ~15.4%.应用该方法测定了15份水样,其中1份浸泡水中测出双酚A,含量为85.4 ng/L,其余样品中均未测出目标物.结论 该方法可以测定水中4种双酚类物质,方法准确可靠,灵敏度高.
作者:胡小键;张海婧;王肖红;丁昌明;林少彬 刊期: 2015年第03期
目的 采用系统评价的方法,从剂量、干预时间、对照碳水化合物种类亚组等方面量化果糖对糖尿病人群血甘油三酯的影响.方法 全面检索1970-2014年在MedLine,EMbase,Cochrane图书馆临床对照试验资料库,中国生物医学文献数据库(CNKI)、万方数据库发表的果糖与血脂关系的所有临床随机对照研究文献资料,对符合纳入标准的文献应用RevMan 5.3软件进行果糖对血甘油三酯(TG)水平影响的Meta分析,并对不同剂量(<50g/d,50~100 g/d,≥100g/d)、不同对照物(蔗糖、淀粉及混合膳食)以及不同干预时间(<1月组和≥1月)进行亚组分析.结果 符合纳入标准的临床随机对照文献共15篇,包含21项研究.Meta亚组分析结果显示,在糖尿病整体人群中,果糖未引起TG升高.但果糖能引起2型糖尿病人群血TG的升高:当果糖摄入剂量< 100 g/d时,对TG无不良影响[加权平均差WMD为-0.20,95% CI(-0.62,0.22),P=0.35];当≥100g/d时,则能引起TG升高[WMD0.17,95% CI(0.08,0.25),P<0.0001].当蔗糖和混合膳食作为对照物时,果糖未使TG水平升高;但当淀粉作为对照物时,果糖能使TG升高[WMD 0.13,95%CI(0.02,0.23),P=0.02].结论 果糖对TG水平影响在2型糖尿病人群中较1型糖尿病人群敏感,当高剂量(≥100g/d)时能引起TG升高,并与对照的碳水化合物种类有关.
作者:向雪松;赵佳;朱婧;张鹏;王竹;杨月欣 刊期: 2015年第03期
目的 探讨不同水平下的酪蛋白和小麦面筋蛋白对血浆同型半胱氨酸(Hcy)水平的影响.方法 健康Wistar大鼠48只随机分为6组,分别为12.5%、25%、50%酪蛋白组和14.5%、29%、58%小麦面筋蛋白组.大鼠自由进食、饮水,每天称重并记录大鼠进食量.喂养实验饲料14天后处死,采集血液,取肝脏组织,用于测定血浆和肝脏中Hcy、半胱氨酸(Cys)等氨基酸指标以及同型半胱氨酸甜菜碱甲基转移酶(BHMT)和胱硫醚β-合成酶(CBS)等酶学指标.结果 小麦面筋蛋白组的大鼠体重增长显著低于酪蛋白组,而在小麦面筋蛋白组随着蛋白含量的提高,大鼠的饲料摄入量明显逐渐减少.小麦面筋蛋白的摄入使血浆Hcy浓度显著低于酪蛋白组,相反血浆Cys的浓度,小麦蛋白组明显高于酪蛋白组.结论 小麦面筋蛋白对血浆Hcy水平的影响主要取决于高Cys与低蛋氨酸含量,但是其赖氨酸和苏氨酸含量较低也是不能忽视的影响因素之一.其主要的作用机制是Cys的升高促进了Hcy代谢的酶活性,增加了Hcy的代谢消耗.
作者:刘轶群;韩枫;孙丽翠;卢佳希;杉山公男;黄振武 刊期: 2015年第03期
多不饱和脂肪酸(PUFA)是人体必需的脂肪酸,其对人体的功能及作用机制已经过大量研究和论证,且主要集中在生命早期的神经发育和以后的智力、认知功能等方面.PUFA家族中诸如n-3系列的EPA、DHA以及n-6系列的ARA等是目前营养强化领域研究的热点.铁作为辅酶参与构成了体内多种重要的酶类并发挥相应的代谢调节功能.本文尝试通过铁缺乏对PUFA合成代谢影响的阐述以期两者在食品强化领域得到更好的应用.
作者:刘辉 刊期: 2015年第03期