陈肖;曾因明;顾卫东;吴长毅
目的设计一个抗缺氧诱导因子1α(HIF-1α)mRNA的锤头状核酶,并构建它的基因表达载体,以便用于肿瘤的基因治疗.方法用RNA结构分析软件预测HIF-1α mRNA的二级结构并选择合适的核酶作用靶点,以选定的靶点设计相应的锤头状核酶,合成编码核酶的DNA并克隆到载体pSP72上,酶切及DNA测序鉴定核酶序列.结果HIF-1α mRNA的72位含有GUC三联体,可以作为核酶的切割靶点,设计的核酶包括22nt的催化活性中心和16 nt的侧翼序列.计算机辅助预测证明此位点为合适的靶点,限制性内切酶和DNA测序证实核酶基因正确插入载体pSP72上.结论成功设计并构建抗HIF-1α mRNA锤头状核酶基因表达载体,为进一步运用核酶切割HIF-1αmRNA基因,从而抑制肿瘤生长提供了必要条件.
作者:李婷;吴永平 刊期: 2004年第04期
目的探讨低温对大鼠内毒素性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺脂质过氧化的影响.方法采用大鼠腹腔注射内毒素(LPS,1mg·kg-1),16 h后再气管内滴注LPS(3 mg·kg-1)建立ARDS模型.24只雄性SD大鼠被随机分为3组:对照组(C组)、ARDS组(A组)、低温组(H组).ARDS后3 h处死动物,检测肺组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果3组各时间点平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)相比无统计学差异(P>0.05).A组氧合指数(PaO2/FiO2)在ARDS时及ARDS后1、2、3 h与C组相比显著下降(P<0.01).A组与C组相比大鼠肺组织中MDA含量明显增高、SOD活性显著下降(P<0.05);而H组与A组相比,大鼠肺组织中MDA含量明显降低、SOD活性显著升高(P<0.05),但与C组相比无统计学意义(P>0.05).结论低温可减轻内毒素性ARDS大鼠肺组织脂质过氧化.
作者:陈肖;曾因明;顾卫东;吴长毅 刊期: 2004年第04期
目的探讨淫羊藿总黄酮对人工全髋关节无菌性松动的影响.方法随机选择准备行人工关节置换术患者21例.采集外周血,分离单个核细胞,然后将其分为两大组,即Ⅰ、Ⅱ组.Ⅰ组标本分成5个亚组:单个核细胞组(对照组)、单个核细胞+骨水泥微粒组、单个核细胞+骨水泥微粒+淫羊藿总黄酮(5 mg/L)组、单个核细胞+骨水泥微粒+淫羊藿总黄酮(10 mg/L)组、单个核细胞+骨水泥微粒+淫羊藿总黄酮(20mg/L)组.Ⅱ组分为3个亚组:单个核细胞+骨水泥+佛波脂组、单个核细胞+培养液组、单个核细胞+骨水泥+淫羊藿总黄酮(10mg/L)组.培养后,放免法测定Ⅰ组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术检测Ⅱ组TACEmRNA表达.结果单个核细胞+骨水泥微粒组的TNF-α含量明显高于对照组(P<0.01);单个核细胞+骨水泥微粒+淫羊藿总黄酮的TNF-α含量明显低于单核细胞+骨水泥微粒组(P<0.01);而不同浓度淫羊藿总黄酮组之间的差异无统计学意义(P>0.05).单个核细胞+骨水泥微粒组TACE mRNA的表达呈强阳性,而单个核细胞+骨水泥微粒+淫羊藿总黄酮组TACE mRNA的表达明显减弱.结论骨水泥微粒可刺激单个核细胞分泌TNF-α,而淫羊藿总黄酮能通过下调人外周血单个核细胞TACE mRNA的表达,有效地抑制单个核细胞的这种分泌,对人工关节的松动可能起到防治作用.
作者:郭开今;王若义;程兆明;唐先业;陈向阳 刊期: 2004年第04期
目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与环氧化酶-2(COX-2)在未成熟兔心肌缺血预处理延迟性保护机制中的关系.方法健康2~3周中国大白兔36只,随机分为6组:假手术组(Ⅰ组),缺血再灌注组(Ⅱ组),缺血预处理组(Ⅲ组),缺血预处理+二甲亚砜组(Ⅳ组),缺血预处理+NS-398组(Ⅴ组)和缺血预处理+1400W组(Ⅵ组),每组6只.分别于预处理24h后行心肌缺血30min,再灌注60min,观察左室发展压(LVDP)、左室压上升及下降大速率(+dp/dtmax,-dp/dtmax)变化.采用Western blot及比色法分别测定COX-2蛋白活性及iNOS活性.结果缺血再灌注1 h后Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ组LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax恢复率均显著低于Ⅲ组(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ组LVDP、±dp/dtmax恢复率较其他组升高明显(P<0.01);Ⅲ组心肌iNOS活性较Ⅰ及Ⅱ组活性显著升高(P<0.05),Ⅴ和Ⅵ组心肌COX-2蛋白活性较Ⅲ组显著降低(P<0.05).结论iNOS和COX-2共同参与了未成熟兔缺血预处理延迟性心肌保护作用,COX-2处于iNOS下游,iNOS对COX-2活性具有调控作用.
作者:刘伊娜;董红燕;张中明;祝晓 刊期: 2004年第04期
目的观察大鼠胰腺冷缺血后细胞凋亡的变化.方法大鼠胰腺肝素生理盐水原位灌注后切取并冷保存0、3、6、12、24 h,分别用光镜、电镜、流式细胞仪及TUNEL法检测胰腺组织中细胞凋亡的变化.结果冷保存6 h胰腺组织中细胞凋亡数轻度增多(P<0.05),冷保存12 h及24h时,细胞凋亡明显增多(P<0.01).结论胰腺冷缺血损伤可引起胰腺腺泡细胞凋亡.
作者:张召辉;李玺;夏安周;路逵阳 刊期: 2004年第04期
目的观察参麦减轻化疗药物引起的胃肠道反应的作用.方法选择化疗患者138例,根据化疗周期中有无应用参麦注射液,将患者分为2组:应用参麦注射液治疗组(参麦组)81例,未应用参麦注射液组(对照组)57例.观察2组恶心、呕吐发生率及程度.结果参麦组恶心、呕吐发生率为43.2%,对照组为95.9%,参麦组较对照组的发生率明显减少,且程度上也有所减轻.结论参麦注射液对减轻化疗药物所引起的恶心、呕吐反应具有肯定的疗效.
作者:朱正秋;张景然 刊期: 2004年第04期
目的探讨自我形象紊乱(self-image disorder)这一护理诊断在直肠癌Miles术后患者中的应用及其相关护理措施.方法对78例直肠癌Miles术后患者进行资料收集和问卷调查分析,同时比较不同年龄、性别、文化程度患者自我形象紊乱的发生率,并针对患者的特点进行护理干预.结果78例患者中46例发生自我形象紊乱,占58.97%,发生率随受教育程度的升高而降低,差异极显著(P<0.01).老年患者的发生率较年轻患者高,女性较男性稍高,但无统计学差异.结论自我形象紊乱在直肠癌Miles术后患者中的发生率较高,尤其是老年、文化程度较低的患者发生率更高.自我形象紊乱影响患者的术后恢复,影响其生活质量,因此应予以充分重视,积极治疗,使患者恢复信心,提高生活质量.
作者:张玉霜;徐为;柴东勤 刊期: 2004年第04期
目的研究凝血酶调节蛋白(TM)N端155个氨基酸残基的原核表达.方法通过PCR特异性扩增TM编码N端155个氨基酸残基的基因片段,将目的基因片段连接入pQE31表达载体,转化入大肠杆菌中,用IPTG诱导表达.将表达的融合蛋白鉴定及纯化.结果N端155个氨基酸残基目的蛋白在大肠杆菌中大量表达,总量达到全菌蛋白的30%以上.表达的蛋白全部以包涵体形式存在,经Western blot鉴定为目的蛋白,可纯化和复性.结论凝血酶调节蛋白N端155个氨基酸残基目的蛋白可通过原核大量表达,为进一步研究其功能及制备抗体提供了条件.
作者:潘薇;钱高潮 刊期: 2004年第04期
目的建立简单易行、可靠稳定的大鼠脑胶质瘤模型,为研究脑胶质瘤的发病机制及治疗方法提供操作平台.方法SD大鼠24只,采用脑立体定向术将1×106个/ml C6大鼠脑胶质瘤细胞接种于SD大鼠的右侧尾壳核区,分别于肿瘤细胞种植后10、15、20、25天观察大鼠的生存状态、大鼠脑胶质瘤大体标本的体积、苏木精-伊红染色、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组织化学检查以及电镜检查.结果大鼠于接种C6胶质瘤细胞后15天左右,出现较为明显的颅内高压症状,20~25天时大多处于濒危状态,死亡率为20.83%.大体标本检查,24只大鼠成瘤率100%,在肿瘤细胞种植后10、15、20、25天肿瘤的体积分别为(15.21±2.76)、(86.16±13.33)、(252.84±49.85)、(472.45±65.02)mm3,瘤体随着鼠龄的延长,中线结构明显移位,占位效应愈来愈明显.苏木精-伊红染色可见肿瘤组织的病理类型为Ⅱ、Ⅲ级.GFAP免疫组织化学检查呈阳性表达,说明大鼠脑胶质瘤模型的肿瘤标本为胶质源性肿瘤.电镜观察C6大鼠脑胶质瘤细胞有2种细胞形态.结论该方法建立的C6大鼠脑胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤,能够满足胶质瘤实验研究的需要.
作者:白永文;于如同;倪鸣山;范曰超;李学元 刊期: 2004年第04期
目的探讨细胞间隙连接蛋白43(CX43)与上皮性卵巢癌化疗疗效(耐药或敏感)及临床病理的关系.方法从1999年1月至2003年6月间临床资料及随访资料完整的卵巢癌病例中,筛选出60例原发上皮性卵巢癌和6例正常卵巢作为研究对象.根据临床诊断将其分为3组:①化疗耐药组30例,②化疗敏感组30例,③正常卵巢组6例.全部病例术前均未接受过放疗,入院后均行全子宫和双附件切除+盆腔淋巴结清扫+阑尾切除+大网膜切除术,66例患者均有随访结果.用流式细胞仪定量分析66例标本组织中CX43蛋白的表达量.结果CX43蛋白的表达为化疗耐药组<化疗敏感组<正常卵巢组织,单向方差分析两两比较结果差异有显著意义.结论CX43蛋白表达量的下降与上皮性卵巢癌的化疗耐药显著相关.
作者:孙志华;吴强;冯继良;左连富;刘江惠;沈宗丽;张学光 刊期: 2004年第04期
目的探讨免疫组织化学染色中常用的PowerVision二步法与SABC三步法各自的适用性.方法取大鼠的胃体组织,分别应用PowerVision二步法与SABC三步法进行12种抗体免疫组化染色.结果PowerVision二步法对其中6种抗体的显示优于SABC法,对3种抗体的显示不及SABC法;而2种方法对其中3种抗体的显示无差别.结论2种方法对不同抗体的显示有差别.
作者:张大红;王琳;乔伟丽 刊期: 2004年第04期
目的观察缬沙坦和苯那普利对肾病综合征大鼠24h尿钠排泄、血浆与肾组织内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的影响.方法24只成年SD大鼠分为阿霉素肾病组、缬沙坦组、苯那普利组及正常对照组.观察28天后的24h尿蛋白、尿钠排泄,血浆与肾组织ET、AngⅡ水平.结果缬沙坦、苯那普利均可增加肾病大鼠尿钠排泄;缬沙坦可降低肾病大鼠24 h尿蛋白、降低ET水平,但不能降低AngⅡ水平;苯那普利可降低肾病大鼠24h尿蛋白,降低ET、AngⅡ水平.结论缬沙坦及苯那普利降低尿蛋白排泄的作用可能与降低ET水平,改善内皮细胞功能有关.
作者:尹忠诚;刘娅;李胜开 刊期: 2004年第04期
目的提高儿童第四脑室肿瘤的手术治疗效果.方法回顾性分析我科手术治疗的29例儿童第四脑室肿瘤的临床资料.结果肿瘤全切除18例,近全切除5例,大部切除6例.术后病理证实髓母细胞瘤13例,室管膜瘤9例,脉络丛乳头状瘤3例,星形细胞瘤3例,皮样囊肿1例.术后脑积水8例,其中6例行侧脑室-腹腔分流术.术后颅内感染9例,2例死于颅内感染.随访27例,随访时间10天至7年,18例恢复正常生活,4例肿瘤1年内复发,2例再次手术切除.结论术前MRI检查明确肿瘤位置,应用显微外科技术,积极处理术后脑积水,预防颅内感染等是提高手术疗效的关键.
作者:李中林;郭克勤;于如同;倪鸣山;刘勇 刊期: 2004年第04期
目的观察氯胺酮、依托咪酯、异丙酚3种静脉全麻药对电刺激惊厥的保护作用.方法将昆明种小鼠随机分成10组,每组10只,分别腹腔注射生理盐水0.1 ml/kg,氯胺酮50、25、12.5 mg/kg,依托咪酯10、5、2.5mg/kg,异丙酚100、50、mg/kg,5 min后给予电刺激,观察小鼠惊厥发生率、死亡率、强直持续期.结果氯胺酮除12.5 mg/kg外皆可明显降低电惊厥发生率(P<0.01),而12.5 mg/kg明显缩短强直持续期(P<0.01);依托咪酯2.5、5 mg/kg可缩短强直持续期(P<0.01),对惊厥发生率无明显影响,10 mg/kg可完全拮抗电刺激惊厥;异丙酚25mg/kg可降低电惊厥发生率(P<0.05),并明显缩短强直持续期(P<0.01),50、100 mg/kg异丙酚使用后无强直型惊厥出现.结论3种静脉全麻药随剂量增加对抗电刺激引起的惊厥的作用增强.
作者:孟晶;戴体俊;段世明;许爱军;郭忠民 刊期: 2004年第04期
金属-烤瓷修复体作为一种新型口腔修复体,具有高强度、高耐磨、防腐蚀、不变色等优点.
作者:陈丽华 刊期: 2004年第04期
目的克隆抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因(VL),并构建其原核表达载体.方法从能分泌抗人膀胱癌单克隆抗体的杂交瘤细胞BDI-1中提取总RNA,通过RT-PCR扩增出VL cDNA.用HindⅢ和XhoⅠ酶切纯化的RT-PCR产物和原核表达载体pET28a(+),在T4 DNA连接酶作用下室温连接,重组质粒经酶切鉴定,阳性克隆测序并进行序列分析.结果扩增出VL cDNA片段,大小约为340bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致.VL基因序列长度为324bp,编码108个氨基酸.VL基因属于鼠免疫球蛋白κ轻链Ⅳ亚类.结论成功克隆出抗人膀胱癌单克隆抗体轻链可变区基因,并成功构建其原核表达载体.
作者:陈家存;张俊杰;温儒民;薛松;胡书群;孙亚峰;裴冬生 刊期: 2004年第04期
目的研究吗啡戒断大鼠中缝背核FOS、NADPH-d酶表达的变化.方法运用免疫组织化学、组织化学方法观测吗啡戒断大鼠动物模型中缝背核FOS、NADPH-d酶表达的变化.结果吗啡戒断组FOS、NADPH-d阳性神经元、纤维和终末表达明显增加(P<0.05).结论一氧化氮参与吗啡耐受、依赖和戒断的转导与调控;中缝背核可能是介导吗啡耐受、依赖和戒断的部位之一.
作者:王红军;曹俊平;张励才 刊期: 2004年第04期
目的观察国产长春瑞宾加顺铂联合化疗治疗转移性乳腺癌的近期疗效及毒副作用.方法34例经组织学确诊、有可测量的客观指标的转移性乳腺癌患者,采用长春瑞宾25mg/m2,静脉滴注,第1、8天,顺铂35 mg/m2,静脉滴注,第2~4天,21~28天为1个周期.结果34例患者中CR 2例,PR 16例,有效率52.9%,主要毒性反应为骨髓抑制.结论国产长春瑞宾加顺铂联合化疗治疗转移性乳腺癌疗效较好,毒副作用可以耐受.
作者:张岩;卞绍堂;吴艳 刊期: 2004年第04期
目的探讨高龄浅表性多发性膀胱肿瘤的治疗方法.方法回顾性分析36例高龄浅表性多发性膀胱肿瘤患者行膀胱黏膜剥脱加丝裂霉素黏膜下多点注射的治疗情况.结果术后效果满意,总复发率13.9%.结论膀胱黏膜剥脱是一种治疗高龄浅表性多发性膀胱肿瘤的有效方法.
作者:张志刚;温峰;方毅;钱林 刊期: 2004年第04期
HBx是乙型肝炎病毒(HBV)的X开放读码框架所编码的具有多种调控功能的病毒蛋白质.HBx通过激活宿主细胞和病毒自身基因的转录,调控细胞凋亡,抑制细胞中受损DNA的修复以及激活细胞中MAPK、JNK等的信号转导通路等多种调控作用,直接或间接地对病毒自身的复制与增殖以及宿主细胞中基因的表达与调控、细胞的凋亡与癌变等过程产生广泛的影响.
作者:孙伟;王慧 刊期: 2004年第04期