学术投稿

凝血酶调节蛋白N端155个氨基酸残基的原核表达

潘薇;钱高潮

关键词:凝血酶调节蛋白, 原核表达
摘要:目的研究凝血酶调节蛋白(TM)N端155个氨基酸残基的原核表达.方法通过PCR特异性扩增TM编码N端155个氨基酸残基的基因片段,将目的基因片段连接入pQE31表达载体,转化入大肠杆菌中,用IPTG诱导表达.将表达的融合蛋白鉴定及纯化.结果N端155个氨基酸残基目的蛋白在大肠杆菌中大量表达,总量达到全菌蛋白的30%以上.表达的蛋白全部以包涵体形式存在,经Western blot鉴定为目的蛋白,可纯化和复性.结论凝血酶调节蛋白N端155个氨基酸残基目的蛋白可通过原核大量表达,为进一步研究其功能及制备抗体提供了条件.
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    目的观察大鼠胰腺冷缺血后细胞凋亡的变化.方法大鼠胰腺肝素生理盐水原位灌注后切取并冷保存0、3、6、12、24 h,分别用光镜、电镜、流式细胞仪及TUNEL法检测胰腺组织中细胞凋亡的变化.结果冷保存6 h胰腺组织中细胞凋亡数轻度增多(P<0.05),冷保存12 h及24h时,细胞凋亡明显增多(P<0.01).结论胰腺冷缺血损伤可引起胰腺腺泡细胞凋亡.

    作者:张召辉;李玺;夏安周;路逵阳 刊期: 2004年第04期

  • 抗HIF-1αmRNA锤头状核酶设计及其基因克隆

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    作者:李婷;吴永平 刊期: 2004年第04期

  • 直肠癌Miles术后患者自我形象紊乱的诊断和护理

    目的探讨自我形象紊乱(self-image disorder)这一护理诊断在直肠癌Miles术后患者中的应用及其相关护理措施.方法对78例直肠癌Miles术后患者进行资料收集和问卷调查分析,同时比较不同年龄、性别、文化程度患者自我形象紊乱的发生率,并针对患者的特点进行护理干预.结果78例患者中46例发生自我形象紊乱,占58.97%,发生率随受教育程度的升高而降低,差异极显著(P<0.01).老年患者的发生率较年轻患者高,女性较男性稍高,但无统计学差异.结论自我形象紊乱在直肠癌Miles术后患者中的发生率较高,尤其是老年、文化程度较低的患者发生率更高.自我形象紊乱影响患者的术后恢复,影响其生活质量,因此应予以充分重视,积极治疗,使患者恢复信心,提高生活质量.

    作者:张玉霜;徐为;柴东勤 刊期: 2004年第04期

  • 诱导型一氧化氮合酶与环氧化酶-2在未成熟心肌缺血预处理延迟性保护机制中的关系

    目的探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与环氧化酶-2(COX-2)在未成熟兔心肌缺血预处理延迟性保护机制中的关系.方法健康2~3周中国大白兔36只,随机分为6组:假手术组(Ⅰ组),缺血再灌注组(Ⅱ组),缺血预处理组(Ⅲ组),缺血预处理+二甲亚砜组(Ⅳ组),缺血预处理+NS-398组(Ⅴ组)和缺血预处理+1400W组(Ⅵ组),每组6只.分别于预处理24h后行心肌缺血30min,再灌注60min,观察左室发展压(LVDP)、左室压上升及下降大速率(+dp/dtmax,-dp/dtmax)变化.采用Western blot及比色法分别测定COX-2蛋白活性及iNOS活性.结果缺血再灌注1 h后Ⅱ、Ⅴ、Ⅵ组LVDP、+dp/dtmax、-dp/dtmax恢复率均显著低于Ⅲ组(P<0.01),Ⅲ、Ⅳ组LVDP、±dp/dtmax恢复率较其他组升高明显(P<0.01);Ⅲ组心肌iNOS活性较Ⅰ及Ⅱ组活性显著升高(P<0.05),Ⅴ和Ⅵ组心肌COX-2蛋白活性较Ⅲ组显著降低(P<0.05).结论iNOS和COX-2共同参与了未成熟兔缺血预处理延迟性心肌保护作用,COX-2处于iNOS下游,iNOS对COX-2活性具有调控作用.

    作者:刘伊娜;董红燕;张中明;祝晓 刊期: 2004年第04期

  • 参麦减轻含顺铂方案消化道反应的疗效观察

    目的观察参麦减轻化疗药物引起的胃肠道反应的作用.方法选择化疗患者138例,根据化疗周期中有无应用参麦注射液,将患者分为2组:应用参麦注射液治疗组(参麦组)81例,未应用参麦注射液组(对照组)57例.观察2组恶心、呕吐发生率及程度.结果参麦组恶心、呕吐发生率为43.2%,对照组为95.9%,参麦组较对照组的发生率明显减少,且程度上也有所减轻.结论参麦注射液对减轻化疗药物所引起的恶心、呕吐反应具有肯定的疗效.

    作者:朱正秋;张景然 刊期: 2004年第04期

  • 吗啡戒断大鼠中缝背核FOS、NADPH-d的表达

    目的研究吗啡戒断大鼠中缝背核FOS、NADPH-d酶表达的变化.方法运用免疫组织化学、组织化学方法观测吗啡戒断大鼠动物模型中缝背核FOS、NADPH-d酶表达的变化.结果吗啡戒断组FOS、NADPH-d阳性神经元、纤维和终末表达明显增加(P<0.05).结论一氧化氮参与吗啡耐受、依赖和戒断的转导与调控;中缝背核可能是介导吗啡耐受、依赖和戒断的部位之一.

    作者:王红军;曹俊平;张励才 刊期: 2004年第04期

  • 长春瑞宾联合顺铂治疗转移性乳腺癌的临床观察

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    作者:张岩;卞绍堂;吴艳 刊期: 2004年第04期

  • 金属-烤瓷修复体的应用

    金属-烤瓷修复体作为一种新型口腔修复体,具有高强度、高耐磨、防腐蚀、不变色等优点.

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  • HBx蛋白的生物学效应

    HBx是乙型肝炎病毒(HBV)的X开放读码框架所编码的具有多种调控功能的病毒蛋白质.HBx通过激活宿主细胞和病毒自身基因的转录,调控细胞凋亡,抑制细胞中受损DNA的修复以及激活细胞中MAPK、JNK等的信号转导通路等多种调控作用,直接或间接地对病毒自身的复制与增殖以及宿主细胞中基因的表达与调控、细胞的凋亡与癌变等过程产生广泛的影响.

    作者:孙伟;王慧 刊期: 2004年第04期

  • 氯胺酮、依托咪酯、异丙酚抗电惊厥的实验研究

    目的观察氯胺酮、依托咪酯、异丙酚3种静脉全麻药对电刺激惊厥的保护作用.方法将昆明种小鼠随机分成10组,每组10只,分别腹腔注射生理盐水0.1 ml/kg,氯胺酮50、25、12.5 mg/kg,依托咪酯10、5、2.5mg/kg,异丙酚100、50、mg/kg,5 min后给予电刺激,观察小鼠惊厥发生率、死亡率、强直持续期.结果氯胺酮除12.5 mg/kg外皆可明显降低电惊厥发生率(P<0.01),而12.5 mg/kg明显缩短强直持续期(P<0.01);依托咪酯2.5、5 mg/kg可缩短强直持续期(P<0.01),对惊厥发生率无明显影响,10 mg/kg可完全拮抗电刺激惊厥;异丙酚25mg/kg可降低电惊厥发生率(P<0.05),并明显缩短强直持续期(P<0.01),50、100 mg/kg异丙酚使用后无强直型惊厥出现.结论3种静脉全麻药随剂量增加对抗电刺激引起的惊厥的作用增强.

    作者:孟晶;戴体俊;段世明;许爱军;郭忠民 刊期: 2004年第04期

  • 半紧闭装置低流量时的第二气体效应

    目的研究半紧闭装置低流量时可能存在的第二气体效应.方法40例ASAⅠ~Ⅱ级全麻患者随机分为A、B两组,各20例,分别在新鲜气流量(A组O2 0.4 L/min+N2O 0.6 L/min,B组O2 1 L/min)下接受1%异氟烷.用Datex气体监测仪校正挥发罐输出浓度(Fd),使异氟烷输出浓度为1%,气管导管连接处连续监测麻醉气体吸入浓度(Fi)、呼气末浓度(FA)、呼气末二氧化碳分压(PETCO2)、吸入氧浓度.观察30 min.比较2组各相同时间点异氟烷FA/Fi和FA/Fd.结果异氟烷的FA/Fi上升速率2组无明显差异(P>0.05),FA/Fd上升速率2组有差异,但不显著(P>0.05).结论第二气体效应在低流量时表现不明显.

    作者:徐文庆;李晓岩;徐威 刊期: 2004年第04期

  • PowerVision法与SABC法在免疫组织化学染色中的比较

    目的探讨免疫组织化学染色中常用的PowerVision二步法与SABC三步法各自的适用性.方法取大鼠的胃体组织,分别应用PowerVision二步法与SABC三步法进行12种抗体免疫组化染色.结果PowerVision二步法对其中6种抗体的显示优于SABC法,对3种抗体的显示不及SABC法;而2种方法对其中3种抗体的显示无差别.结论2种方法对不同抗体的显示有差别.

    作者:张大红;王琳;乔伟丽 刊期: 2004年第04期

  • 凝血酶调节蛋白N端155个氨基酸残基的原核表达

    目的研究凝血酶调节蛋白(TM)N端155个氨基酸残基的原核表达.方法通过PCR特异性扩增TM编码N端155个氨基酸残基的基因片段,将目的基因片段连接入pQE31表达载体,转化入大肠杆菌中,用IPTG诱导表达.将表达的融合蛋白鉴定及纯化.结果N端155个氨基酸残基目的蛋白在大肠杆菌中大量表达,总量达到全菌蛋白的30%以上.表达的蛋白全部以包涵体形式存在,经Western blot鉴定为目的蛋白,可纯化和复性.结论凝血酶调节蛋白N端155个氨基酸残基目的蛋白可通过原核大量表达,为进一步研究其功能及制备抗体提供了条件.

    作者:潘薇;钱高潮 刊期: 2004年第04期

  • p38MAPK在沙土鼠脑缺血再灌注海马神经元损伤中的作用

    目的探讨p38MAPK在沙土鼠脑缺血再灌注损伤海马神经元中的作用.方法采用沙土鼠双侧颈动脉阻断前脑缺血模型,随机分成假手术组(sham组)、缺血再灌注组(IR组)、对照组(control组)、SB202190组及P79350组,后3组分别侧脑室注射1%DMSO、p38MAPK特异性抑制剂SB202190和激动剂P79350.每组根据再灌注时间不同再分为1天、3天和5天3个亚组,每亚组6只动物.在预定时间点行开阔法行为学检查,显微镜下计数海马CA1、CA3区存活神经元数目,TUNEL法检测CA1区凋亡细胞.结果SB202190可以显著减少沙土鼠再灌注3天、5天的探索活动,增加存活海马神经元数目,减少CA1区神经元的凋亡(P<0.05,vs IR组);而P79350可以显著增加沙土鼠再灌注1天、3天、5天的探索活动,减少海马CA1、CA3区存活神经元数量,增加海马CA1区神经元的凋亡(P<0.05,vs IR组).结论抑制p38MAPK的激活可以减轻脑缺血再灌注引起的海马神经元损伤.

    作者:李广明;李军;曹红;王耀歧;曾因明 刊期: 2004年第04期

  • 氯化铷法制备感受态细胞

    目的研究氯化铷法制备感受态细胞的转化效率和不同条件对其的影响.方法采用氯化铷法制备感受态细胞,用不同的质粒进行转化.分析不同菌种、冻存时间对转化效率的影响,并与通常所使用的氯化钙法进行转化效率的比较.结果氯化铷法制备感受态细胞可用于不同的质粒的转化,对于同一种质粒,不同的菌种和冻存时间对转化效率无影响,其转化效率高于氯化钙法.结论氯化铷法制备感受态细胞是一种可以长期保存而不影响转化效率的方法.

    作者:李振宇;徐开林;潘秀英;鹿群先;陈香梅;何徐彭 刊期: 2004年第04期

  • 低温对内毒素性ARDS大鼠肺脂质过氧化的影响

    目的探讨低温对大鼠内毒素性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)肺脂质过氧化的影响.方法采用大鼠腹腔注射内毒素(LPS,1mg·kg-1),16 h后再气管内滴注LPS(3 mg·kg-1)建立ARDS模型.24只雄性SD大鼠被随机分为3组:对照组(C组)、ARDS组(A组)、低温组(H组).ARDS后3 h处死动物,检测肺组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果3组各时间点平均动脉压(MAP)、中心静脉压(CVP)相比无统计学差异(P>0.05).A组氧合指数(PaO2/FiO2)在ARDS时及ARDS后1、2、3 h与C组相比显著下降(P<0.01).A组与C组相比大鼠肺组织中MDA含量明显增高、SOD活性显著下降(P<0.05);而H组与A组相比,大鼠肺组织中MDA含量明显降低、SOD活性显著升高(P<0.05),但与C组相比无统计学意义(P>0.05).结论低温可减轻内毒素性ARDS大鼠肺组织脂质过氧化.

    作者:陈肖;曾因明;顾卫东;吴长毅 刊期: 2004年第04期

  • 医学名词术语使用规范

    作者: 刊期: 2004年第04期

  • 儿童第四脑室肿瘤手术治疗29例报告

    目的提高儿童第四脑室肿瘤的手术治疗效果.方法回顾性分析我科手术治疗的29例儿童第四脑室肿瘤的临床资料.结果肿瘤全切除18例,近全切除5例,大部切除6例.术后病理证实髓母细胞瘤13例,室管膜瘤9例,脉络丛乳头状瘤3例,星形细胞瘤3例,皮样囊肿1例.术后脑积水8例,其中6例行侧脑室-腹腔分流术.术后颅内感染9例,2例死于颅内感染.随访27例,随访时间10天至7年,18例恢复正常生活,4例肿瘤1年内复发,2例再次手术切除.结论术前MRI检查明确肿瘤位置,应用显微外科技术,积极处理术后脑积水,预防颅内感染等是提高手术疗效的关键.

    作者:李中林;郭克勤;于如同;倪鸣山;刘勇 刊期: 2004年第04期

  • 缬沙坦和苯那普利对肾病综合征大鼠内皮素及血管紧张素水平影响的对照研究

    目的观察缬沙坦和苯那普利对肾病综合征大鼠24h尿钠排泄、血浆与肾组织内皮素(ET)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平的影响.方法24只成年SD大鼠分为阿霉素肾病组、缬沙坦组、苯那普利组及正常对照组.观察28天后的24h尿蛋白、尿钠排泄,血浆与肾组织ET、AngⅡ水平.结果缬沙坦、苯那普利均可增加肾病大鼠尿钠排泄;缬沙坦可降低肾病大鼠24 h尿蛋白、降低ET水平,但不能降低AngⅡ水平;苯那普利可降低肾病大鼠24h尿蛋白,降低ET、AngⅡ水平.结论缬沙坦及苯那普利降低尿蛋白排泄的作用可能与降低ET水平,改善内皮细胞功能有关.

    作者:尹忠诚;刘娅;李胜开 刊期: 2004年第04期

  • 生长抑素受体与胃肿瘤研究现状

    生长抑素受体(somatostatin receptor,SSTR)作为基因型肿瘤标志物之一,正在受到研究者的重视.目前已有不少文献报道生长抑素(SS)对肿瘤有抑制作用,肿瘤组织或细胞株上存在SSTR.随着SSTR 5种亚型先后被克隆,人们对SSTR各亚型的研究进一步深入.SSTR不仅广泛存在于神经内分泌肿瘤的细胞膜上,在消化系实体肿瘤上亦有广泛分布,本文就其在胃肿瘤中的作用机制及研究现状作一综述.

    作者:江兴松;张南征 刊期: 2004年第04期

徐州医科大学学报杂志

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