学术投稿

中草药干品和鲜品基因组总DNA提取及质量比较研究

姚庆收;刘秀珍;武玉永;蒋继来

关键词:DNA提取, SDS法, CTAB法, 液氮
摘要:目的 探讨中草药干品和鲜品总DNA的提取方法,并比较干、鲜品总DNA质量之间的差别,为后续研究奠定基础.方法 分别采用SDS法和改良的CTAB法提取6种中草药干品和鲜品总DNA,并对其进行核酸含量测定、电泳检测和酶切反应检测. 结果改良CTAB法提取的DNA质量要高于SDS法,在干品和鲜品样品间,干品提取的DNA质量要高于鲜品.利用CTAB法提取鲜品和干品的各6种DNA样品,进行酶切反应得到了清晰的酶切条带.结论 改良的CTAB法能够获得高质量的中草药总DNA,且该方法得到的干品DNA比鲜品DNA质量更高,酶切验证二者都可以用于进一步的实验分析.
时珍国医国药杂志相关文献
  • 万密斋学术思想研究的意义

    从整理医学大家学术思想对中医学发展的作用,明代在中医学发展的特殊时期,有关万密斋现代研究的不足以及研究万密斋学说可能的前景四方面探讨了再度研究万密斋学术思想的意义.

    作者:文颖娟;潘桂娟 刊期: 2010年第06期

  • 膨润土絮凝法精制刺五加水提液的研究

    目的 考察膨润土絮凝剂对刺五加水提液的澄清效果.方法 将膨润土用于刺五加水提液的澄清,以水提液中有效成分总黄酮的保留率及浸出物得率为考察指标,并与醇沉法进行比较.结果 膨润土絮凝法与醇沉法同样能使药液澄清,能有效降低总固形物的量,而对水提液总黄酮的保留率要优于醇沉法.结论 膨润土絮凝剂可用于刺五加水提液的澄清工艺.

    作者:赵兵;王国清;王鸿钢 刊期: 2010年第06期

  • 冬凌草超临界二氧化碳萃取物体外抑菌作用研究

    目的 考察冬凌草对细菌生长的抑制作用,并比较超临界提取产物与乙醇回流提取物的抑制效果.方法 超临界二氧化碳萃取冬凌草,管碟法证明萃取产物的抑菌能力,并用二倍稀释法测定敏感菌的小抑菌浓度(MIC).结果 冬凌草提取物在金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、产气杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌生长平板上有很明显的抑菌圈,超临界提取物的小抑菌浓度为(mg/ml)金黄色葡萄球菌0.031 75,藤黄八叠球菌0.015 875,枯草芽孢杆菌0.031 75,大肠杆菌0.125,产气杆菌0.125,绿脓杆菌0.062 5,变形杆菌0.062 5.结论 冬凌草提取物对大多数的细菌生长有抑制作用,而且超临界提取物抑制效果明显优于乙醇回流提取物.

    作者:礼彤;阎韵;翟增伟;范立敏;周丽莉 刊期: 2010年第06期

  • 不同树龄厚朴干皮中酚的分离与含量测定

    目的 测定都江堰市不同树龄厚朴干皮中厚朴酚与和厚朴酚含量,为厚朴合理采收和质量评价提供理论依据.方法 应用薄层扫描法测定,薄层板为GF254硅胶板,展开剂为苯-甲醇(10∶1),荧光检测波长为254 nm.结果 厚朴酚与和厚朴酚含量均在树龄30年时达到大值,分别为8.75%和7.52%.结论 干皮中厚朴酚与和厚朴酚的含量均与植物的生长发育年龄有关.厚朴药材的佳采收期应在20~30年间.

    作者:童志平;刘延上;泽仁拉姆;张垠;刘之华 刊期: 2010年第06期

  • 云南红豆杉中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量的固相萃取-高效液相色谱法测定

    目的 建立以固相萃取-高效液相色谱(HPLC)法测定云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量.方法 固相萃取柱:Agilent ODS C18 500 mg/3 ml;色谱柱:Agilent zorbax SB-C18( 250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-水-乙腈(35∶55∶10),流速1.0 ml·min-1,检测波长227 nm,柱温30℃.结果 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ在 1.6~8.0 μg·ml-1范围内,进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为96.8%,RSD为 4.8 %(n= 6).结论 该方法可用于云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量测定,方法稳定,结果准确、可靠.

    作者:孔繁晟;严春艳;庞小雄;贲永光 刊期: 2010年第06期

  • 半夏糖浆质量标准的研究

    半夏糖浆[1]收载于卫生部药品标准中药成方制剂第8册,处方由生半夏、麻黄、紫苑、桔梗、枇杷叶、制远志、陈皮、甘草、薄荷油9味组成.原标准仅收载3项理化鉴别.2010版<中国药典>Ⅰ部标准起草研究中,按照中成药品种增修订项目任务表的要求,根据半夏糖浆处方组成及工艺制备实际情况,结合各单味药的理化性质,根据研究结果,建立了HPLC法测定麻黄的盐酸麻黄碱含量.

    作者:周锐;王辉 刊期: 2010年第06期

  • 黄牛木根脂溶性成分的气相色谱-质谱联用分析

    目的 对黄牛木根脂溶性成分进行研究.方法 利用乙醇提取石油醚萃取黄牛木根中的脂溶性成分,采用气相色谱-质谱联用技术对所得的脂溶性成分进行分析.结果 共鉴定出30个成分,占脂溶性成分总量的53.139%,其中含量大于1%的是:汉地醇(30.687%),油酸(2.596%),棕榈酸(2.476%),β-豆甾醇(2.335%),棕榈酸乙酯(2.204%),角鲨烯(1.728%),维生素E(1.708%),油酸乙酯(1.490%),亚油酸(1.474%),亚油酸乙酯(1.417%),豆甾醇(1.208%),β-丁香烯(1.025%).结论 黄牛木根的脂溶性成分中,以醇类、倍半萜和酯类成分为主.

    作者:李晓霞;王祝年;王茂媛;王建荣 刊期: 2010年第06期

  • 杜仲糖类成分的气相色谱-质谱联用分析

    目的 研究杜仲的糖类成分,为杜仲开发利用提供实验依据.方法 提取杜仲的游离糖成分和多糖成分,用三氟乙酸将多糖水解,依次加入盐酸羟胺、吡啶和乙酸酐进行乙酰化反应,测定杜仲游离糖成分和多糖成分的GC-MS图,分析杜仲的糖类成分.结果 通过质谱分析,确定杜仲含有D-木糖、D-核糖、D-阿拉伯糖、D-木糖醇、D-呋喃葡萄糖,α-D-吡喃葡萄糖,β-D-吡喃甘露糖、葡萄糖醇、肌醇、纤维二糖、曲二糖和蔗糖等糖类成分.结论 杜仲中的糖类成分种类丰富,气相色谱和质谱联用技术能够有效地分析杜仲的糖类成分.

    作者:周正礼;李峰;李静文 刊期: 2010年第06期

  • 糖利平胶囊对2型糖尿病患者肺通气功能影响的临床研究

    目的 观察中药糖利平胶囊对2型糖尿病患者肺通气功能变化的影响,为建立2型糖尿病整体防治方案提供实验数据.方法 收集糖尿病患者40例,随机分为两组,治疗组给予西药降糖常规治疗加用中药糖利平胶囊,对照组给予西药降糖常规治疗,疗程6个月.于治疗前后检测糖化血红蛋白并测定肺功能.结果 ①治疗组与对照组治疗后HbA1c水平均较治疗前显著降低,(P<0.01);两组间治疗后比较HbA1c水平无显著性差异(P>0.05).②治疗后治疗组肺功能各项指标均数均高于对照组,其中VC、 FVC 、FEV1与对照组比较有显著性差异(P<0.05).结论 西药降糖常规治疗和西药降糖常规治疗加用中药糖利平胶囊,均可很好地降低2型糖尿病患者糖化血红蛋白,改善患者肺功能;加用中药治疗较单纯西药治疗可以更好地延缓患者肺功能损伤的发展,显示了中药多途径、多靶点的整体调节优势,为糖尿病临床整体防治方案的建立提供了方法和思路.

    作者:王海英;王德惠 刊期: 2010年第06期

  • 白花丹素的体外肝毒性研究

    目的 观察白花丹素在体外对4种肿瘤细胞的作用及其在体外对人胚肝细胞L-O2的毒性作用.方法 采用MTT法检测不同浓度白花丹素对肿瘤细胞和人胚肝细胞L-O2的毒性,比较其IC50值;采用紫外分光光度法测定白花丹素作用后肝细胞培养上清液中SOD,MDA,LDH值的变化.结果 白花丹素在体外具有较强抗肿瘤作用,同时对人胚肝细胞L-O2有一定的毒性作用.结论 白花丹素是优良的抗肿瘤药物,对肿瘤细胞有明显毒性作用,同时具有一定肝毒性,使用时应注意监测肝功能.

    作者:韦敏;刘华钢;刘丽敏 刊期: 2010年第06期

  • 冬凌草提取物对大鼠长期毒性的实验研究

    目的 观察连续灌胃给予冬凌草提取物对大鼠产生毒性反应.方法 冬凌草醇提物40,20,10 g/kg连续灌胃给药12周,观察给药期间大鼠的一般状况及可能出现的毒性反应,给药结束时测试大鼠血常规及凝血时间,血液生化指标,称脏器重量,计算脏器系数及病理组织变化.结果 3个给药组分别与对照组比较大鼠一般状况未见明显异常,各种血常规和血液生化指标、脏器系数及组织结构也均未见明显异常.结论 冬凌草提取物长期连续灌胃未见毒性反应,长期服用安全.

    作者:姚会枝;李吉学;郑海娜 刊期: 2010年第06期

  • 金边瑞香不同提取物体内抗肿瘤作用的比较

    目的 比较金边瑞香不同提取物的体内抗肿瘤作用.方法 采用系统溶剂萃取法对金边瑞香进行提取及初步分离,利用小鼠皮下移植性肿瘤模型观察不同浓度金边瑞香不同提取物的体内抗肿瘤作用.结果 金边瑞香醋酸乙酯提取物、正丁醇提取物和总浸膏对荷S180瘤小鼠的肿瘤生长均有抑制作用,20 g/(kg·d)金边瑞香剂量组抑瘤率分别达到39.90%,48.56%,46.15%.金边瑞香各提取物对小鼠的胸腺指数和脾脏指数无明显影响.结论 金边瑞香正丁醇提取物为其抗肿瘤有效部位.

    作者:徐静;黎晓;李加林;陈水亲;宋涛;吴小云 刊期: 2010年第06期

  • 脑通复方对血管性痴呆大鼠海马尼古丁受体的影响

    目的 观察脑通复方制剂对拟血管性痴呆(VaD)模型大鼠脑组织神经型尼古丁受体(Nicotinic acetylcholine receptors ,nAChR)的影响,分析脑通复方制剂改善血管性痴呆学习记忆能力的作用机制.方法 采用改良Pulsinelli四血管阻断(Pulsinelli's four-vessel occlusion, 4-VO)法复制大鼠血管性痴呆模型,脑通复方制剂治疗后观察学习记忆能力,Western-blot法测定脑组织神经型尼古丁受体蛋白水平.结果 脑通复方制剂可缩短实验大鼠逃避潜伏期,增加跨越平台次数,上调海马组织神经型尼古丁受体的表达.结论 脑通复方制剂可通过上调nAChR表达,从而改善血管性痴呆学习记忆能力.

    作者:肖雁;王晓亮;邓婕;闫秀明;黄勇;况时祥;官志忠 刊期: 2010年第06期

  • 动物油和维生素D3诱导小鼠动脉钙化研究

    目的 观察比较动物油和维生素D3与维生素D3单独诱导小鼠动脉钙化的特点,结合非诺贝特对钙化影响分析高脂与动脉钙化的关系.方法 SPF级KM小鼠64只,随机分为正常对照组、动物油+ 维生素D3模型组、维生素D3对照组和非诺贝特+ 维生素D3组.实验6周后处死小鼠,制作主动脉弓HE病理切片、Von kossa染色计算血管钙化面积百分比及ICP检测血管钙、磷含量.结果 维生素D3组小鼠主动脉中层明显钙化,血管钙化面积百分比和钙磷含量较正常组均显著升高,模型组小鼠钙化程度较维生素D3组加重,且在内膜处有类软骨细胞凸向官腔,血管钙化面积百分比和血管钙磷含量均显著升高,非诺贝特组小鼠钙化程度较维生素D3组未见减轻,血管钙含量显著高于维生素D3组.结论 动物油+ 维生素D3模型组小鼠可更好模拟临床血管钙化病变,高脂可加重动脉钙化.

    作者:康海仙;吴铁 刊期: 2010年第06期

  • 生脉饮与黄芩茎叶总黄酮合剂对病毒性心肌炎小鼠肿瘤坏死因子影响的研究

    目的 研究生脉饮与黄芩茎叶总黄酮合剂(以下简称生黄合剂)对病毒性心肌炎(VMC)小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨其治疗VMC的免疫调节机制.方法 Balb/c小鼠170只,随机分为正常组,生黄合剂治疗组、生脉饮组、抗病毒口服液组、病毒对照组.除正常组外其它各组腹腔接种柯萨奇病毒B组3型(CVB3)建立VMC模型,药物治疗组均灌胃给药,0.2 ml/10g,2次/d.给药10 d后,应用ELISA 检测血清中TNF-α的浓度,同时应用RT-PCR观测心脏组织中细胞因子TNF-α mRNA表达情况.结果 应用生黄合剂治疗VMC后,血清中TNF-α的浓度可显著降低,心脏组织中TNF-α mRNA表达显著下降.结论 生黄合剂通过调节细胞因子TNF-α mRNA的水平来发挥其对VMC有益的免疫调节作用.

    作者:郭亚春;邢恩鸿;赵清策;黄群;石丽 刊期: 2010年第06期

  • 气相色谱质谱联用法分析比较莪术油和莪术残油成分

    目的 研究莪术油及莪术残油(莪术油提取榄香烯后的残余物)的成分差异,为进一步深入研究莪术残油提供理论依据.方法 运用气相色谱-质谱联用仪进行分析测定,结合计算机检索及相关文献对相关的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量.结果 分别鉴定出20,24,26个化学成分,并测定其相对百分含量.结论 广西莪术和温莪术莪术油的挥发性成分基本一致,某些成分含量差异较大,莪术残油与莪术油在化学成分上基本一致,各成分含量略有差别.

    作者:孙艳涛;张振秋;李想;刘姝畅 刊期: 2010年第06期

  • 威灵仙及柱果铁线莲种子表面特征比较

    目的 为准确鉴别威灵仙和柱果铁线莲种子提供依据.方法 采用扫描电镜法对威灵仙及柱果铁线莲的种子表面特征进行比较观察.结果 威灵仙及柱果铁线莲种子之间在表面结构特征上具有一定的差别.结论 威灵仙及柱果铁线莲种子的表面特征差异可以作为二者的鉴别依据.

    作者:王祥培;吴红梅;陈国仁;许士娜 刊期: 2010年第06期

  • 菱角皮中鞣质类成分研究

    目的 分离鉴定菱角皮中抑制肿瘤细胞活性的成分.方法 采用MTT法对菱角皮提取物抗肝癌HepG2细胞活性成分进行活性追踪,采用液-液萃取提取活性部位,采用反相C18柱层析和Sephadex LH20排阻层析分离活性成分,用核磁和质谱等方法确定化合物结构.结果 从菱角皮85%乙醇提取物中分离得到两个主要成分,经质谱和核磁数据分析鉴定其结构为1, 2, 6-三没食子酰-β-D-葡萄糖(1)和1, 2, 3,6-四没食子酰-β-D-葡萄糖(2).MTT法分析表明,这两个化合物在400 μg/ml测试浓度下对肝癌HepG2细胞分别有44.2%和30.4%抑制率.结论 化合物1和2为首次从菱角皮中分离得到,这两个化合物对肝癌HepG2细胞生长的抑制活性也为首次报道.

    作者:周光雄;吴志敏;杨政红;任先达;黄美燕 刊期: 2010年第06期

  • 对速效止泻胶囊微生物限度检查方法的探讨

    目的 建立速效止泻胶囊的微生物限度检查方法.方法 按照<中国药典>2005版微生物限度检查方法进行验证试验.结果 速效止泻胶囊对细菌中的金黄色葡萄球菌有很强的抑制作用,对枯草芽胞杆菌和白色念球菌有一定的抑制作用.结论 该品对细菌的计数方法应为低速离心-薄膜过滤法;霉菌及酵母菌计数方法应为稀释法;控制菌检查可采用常规法检验.

    作者:王翠蓉;丁艳霞 刊期: 2010年第06期

  • 沙苑子黄酮提取工艺研究

    目的 优选沙苑子黄酮提取工艺.方法 采用碱水、碱醇和乙醇提取,考察提取溶媒对沙苑子总黄酮提取的影响;采用石油醚脱脂后乙醇提取和直接乙醇提取,比较脱脂对沙苑子总黄酮提取的影响;并采用正交设计法优选乙醇提取工艺.结果 以乙醇为溶媒,提取所得总黄酮含量高;脱脂对提取有较大影响,脱脂后乙醇提取所得沙苑子总黄酮含量较高;乙醇提取佳工艺条件为乙醇体积分数80%,料液比为1∶16,提取时间为1.5 h,沙苑子粒度为40目.结论 优选出的提取工艺具有操作简便,可行性等特点.

    作者:刘银芳;吴文倩;刘春宇;顾振纶;郭次仪 刊期: 2010年第06期

时珍国医国药杂志

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