刘瑞江；张业旺；于小凤；闻崇炜；徐秀泉
目的 从鲜蒜中分离纯化蒜酶,并研究其酶学性质、动力学特性以及临床常用溶剂对酶活力的影响,为今后进一步优化蒜酶的提取纯化工艺和临床应用提供必要理论参数.方法 采用盐析、超滤、冷冻干燥等方法提取纯化蒜酶,SDS-Page凝胶电泳法测定纯化蒜酶分子量,丙酮酸法和考马斯亮蓝G-250法测定蒜酶活力.结果 分离纯化所得蒜酶的分子量为97.88 KDa,纯度大于60%;蒜酶催化裂解天然蒜氨酸的适温度为35℃,适pH为7.00;随着温度的升高,蒜酶的稳定性下降;蒜酶在pH 6.5的缓冲体系中稳定;以天然蒜氨酸为底物测得米氏常数Km=2.139 mmol·L-1,大反应速度Vmax=41.67 U·mg-1(蛋白);临床常用溶剂0.9%氯化钠注射液、复方氯化钠注射液(含0.85%NaCl、0.03%KCl、0.033%CaCl2)对蒜酶具有显著的激活作用,而5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液(含5%葡萄糖、0.9%氯化钠)则较强的抑制了蒜酶活力,75%和95%乙醇具有强烈的杀酶作用.结论 蒜酶具有热不稳定性和pH不稳定性;其酶解反应选择在35℃和pH 7.00的缓冲体系中佳;而蒜酶溶解在pH6.5的缓冲体系中能较长时间保持稳定;临床常用溶剂中,含氯化钠的注射液(不含葡萄糖)对蒜酶活力有显著的激活作用,而含有葡萄糖的注射液强烈抑制蒜酶活力;75%和95%乙醇作为消毒液使用时也应避免其对蒜酶的杀伤作用.实验结果对进一步优化蒜酶的提取纯化工艺研究以及蒜酶的临床应用具有指导意义.
作者：曹红；袁耀佐；陈坚 刊期： 2009年第07期
目的 探讨扶正利湿活血中药复方水提物和醇提物对先天感染乙肝病毒(HBV)的鸭胚肝细胞乙型肝炎病毒(DHBV)的抑制作用.方法 荧光定量PCR技术对鸭胚尿囊液DHBV DNA分析筛选先天感染DHBV的阳性鸭胚,对DHBV阳性的鸭胚肝细胞原代培养;细胞接种后第3天分组加入不同剂量扶正利湿活血复方水提物和醇提物,共6 d,分别于药物干预前、药物干预第3天、第6天、停药第2天收集培养上清;辛酸钠法提取上清DHBV DNA,实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测分析血清DHBV DNA的含量.结果 水提物各剂量组组内不同时间点DHBV DNA载量相比无显著性差异(P﹥0.05),仅水提物低剂量组DHBV DNA载量显著低于相同时间点病毒对照组(P<0.05);醇提物中、低剂量组在给药后和停药后培养上清DHBV均明显下降(组间、组内比较均为P<0.01),扶正利湿活血复方醇提物高剂量组在给药后第3天时DHBV明显下降(组间、组内比较均为P<0.01),第6天时组内比较无明显下降(P>0.05),而在停药后第3天时组内与组间比较又均有显著性差异(均为P<0.01).结论 扶正利湿活血复方醇提物对鸭胚肝细胞中的DHBV有直接抑制作用,水提物在鸭体内可能不是通过直接抑制DHBV而起作用.
作者：刘汉平；何金洋；梁波 刊期： 2009年第07期
目的 应用血清药理学方法研究中药千里光抗金黄色葡萄球菌的作用及其机制.方法 从千里光中分离出黄酮类化合物,然后通过给小鼠灌胃制备千里光水浸液的含药血清和黄酮类化合物的含药血清.用扫描电镜观察各含药血清对金黄色葡萄球菌超微结构的影响,用同位素前体参入试验观察各含药血清对金黄色葡萄球菌生物合成的影响.同时设立生理盐水血清作为阴性对照.结果 与阴性对照血清相比,两种含药血清作用后的金黄色葡萄球菌,其形态和超微结构均发生明显的变化,菌体塌陷,细菌融合成团,呈现肿胀模糊等变化;其DNA,RNA 蛋白质和肽聚糖合成也均受到明显的抑制.结论 千里光的抗金黄色葡萄球菌作用机制可能是通过抑制细菌的DNA,RNA,蛋白质和肽聚糖的合成有关,其作用的有效成分可能是黄酮类化合物.
作者：张文平；张文书；王小丽；张瑞其；黄真 刊期： 2009年第07期
目的 研究海金沙根和根状茎提取液对糖尿病小鼠动物模型的降血糖作用.方法 将四氧嘧啶用NS配成0.02 g/ml,按200 mg/kg注射到小鼠腹腔;连续2 d用葡萄糖灌胃(2 g/kg),早晚各1次,以葡萄糖氧化酶法测空腹血糖,大于11.00 mmol/L为造模成功小鼠.将入选小鼠随机分为模型组、水提液组、醇提液组和降糖灵组(0.10 g/kg),另取20只正常小鼠为对照组(蒸馏水),灌胃1次/d,连续15 d,第16天用葡萄糖氧化酶法测空腹血糖.结果 水提液和醇提液组血糖显著降低.结论 海金沙根和根状茎水提液和醇提液对四氧嘧啶所致糖尿病模型小鼠有降血糖作用.
作者：吴颖；孔德平 刊期： 2009年第07期
目的 用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术分析远志Polygala tenuifolia Willd.及卵叶远志P.sibirica L.的遗传多样性.方法 反应总体积25 μl,内含10×PCR buffer 2.5 μl,dNTPs 2.0 μl,MgCl2 2.0 μl,引物1.0 μl,模板2 ng,Taq酶0.3 μl.扩增程序为:94℃预变性4 min,然后进行45循环:94℃变性15 s,36℃复性1 min,72℃延伸1.3 min,循环结束后72℃延伸4 min.结果 10个引物共检测到154个位点,平均每个引物扩增9.24条带,其中148条带表现为多态性,占总带数的94.3%;距离系数为24时,11个样品明显聚为远志居群和卵叶远志居群两类.结论 远志与卵叶远志具有丰富的遗传多样性,遗传聚类与其地理分布有一定的相关性.
作者：王光志；万德光 刊期： 2009年第07期
目的 建立同时测定亳菊提取物中木犀草素及芹菜素的反相高效液相色谱检测方法.方法 采用Restek Pinnacle Ⅱ C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,配制流动相为甲醇∶四氢呋喃∶0.3%H3PO4水溶液=42∶13∶56,在流速为1.0 ml/min,检测波长为350 nm,柱温为室温,进样量为10 μl的情况下建立测定方法.结果 木犀草素线性范围为3.99～99.75 μg/ml(r=0.999 6),平均加样回收率为105.9%,RSD=1.5%;芹菜素线性范围为4.095～102.375 μg/ml(r=0.999 6),平均加样回收率为103.7%,RSD=2.5%.结论 用该方法测定亳菊提取物中木犀草素及芹菜素的含量,具有分析时间较短,分离度高的特点.
作者：潘见；汪翔；杨毅；金日生 刊期： 2009年第07期
目的 通过Ames试验与彷徨试验对蒲葵子正丁醇提取物的致突变试验结果,比较两种试验的灵敏度.方法 对蒲葵子用正丁醇浸提,用Ames试验方法(掺入法)与彷徨试验方法,对TA100鼠伤寒沙门氏菌株进行致突变试验.结果 两种试验方法结果显示,蒲葵子正丁醇提取物在5～500 μg/ml剂量范围,以Ames试验方法与彷徨试验均检测出阳性结果,而在0.025 μg/ml与0.5 μg/ml剂量下,彷徨试验能检测出阳性结果,而Ames方法未检测出阳性结果.结论 在较低浓度时,彷徨试验能检测出Ames试验检测不出的阳性结果,表明彷徨试验灵敏度较Ames试验高.
作者：黄燕；钟振国；罗沛 刊期： 2009年第07期
目的 为探讨预防性关节内注射丹参注射液对关节粘连的影响.方法 将24只日本雄性大耳白兔随机分为3组,每组8只,分别为盐水对照组(A组)、玻璃酸钠对照组(B组)、丹参治疗组(C组).手术切开右后膝关节,搔刮髌上囊前壁,切除大部分髌上囊后壁滑膜和髌下脂肪垫,术毕用长腿管形石膏固定右后肢膝关节于伸直位.每只动物采用的药物品种及剂量分别是:A组注生理盐水0.3 ml、B组注玻璃酸钠0.3 ml、C组注丹参注射液0.3 ml,共4次.4周后空气栓塞处死动物,行关节活动度测量、关节腔行大体观察、髌上囊滑膜组织的组织学观察和总胶原含量检测.结果 关节活动度B、C组大于A组(P<0.01),B、C组之间差异无显著性(P>0.05);关节粘连计分B、C组均于小A组(P<0.01),B、C组之间差异无显著性(P>0.05);髌上囊前壁滑膜病变组织学计分B、C组均小于A组(P<0.01),B、C组之间差异无显著性(P>0.05);髌上囊前壁滑膜组织总胶原含量B、C组小于A组(P<0.01),C组小于B组(P<0.01).结论 丹参注射液关节内注射能有效预防关节粘连,且与玻璃酸钠的效果类似.
作者：段戡；袁长深；姚弘毅；刘宇翔；刘政治 刊期： 2009年第07期
目的 研究肝得安对小鼠实验性肝损伤的保护作用.方法 将60只小鼠随机分成6组(每组10只),分别是空白对照组,模型对照组和阳性药对照组、肝得安高(6 g/kg)、中(3 g/kg)、低(1.5 g/kg)剂量组.结果 肝得安可明显降低上述急性肝损伤模型小鼠血清ALT、AST活性及肝组织中MDA的含量,同时增高肝SOD的活性,且能改善肝脏病理损伤.结论 肝得安对小鼠实验性肝损伤具有保护作用.
作者：洪铁；杨振；王智文；郑友兰 刊期： 2009年第07期
小儿肘部骨折是骨关节系统的常见疾病之一,X线平片是儿童骨骼创伤的首选检查方法,大部分创伤可以诊断.我们搜集并回顾分析了80例小儿肘部骨折的X线资料,就其X线诊断时的注意事项作初步探讨.
作者：吴珊红 刊期： 2009年第07期
目的 研究黄芪多糖对小鼠免疫功能的影响.方法 采用ConA诱导小鼠淋巴细胞转化试验及迟发性变态反应试验测试黄芪多糖(Astragalus Polysaccharide APS)对小鼠细胞免疫功能的影响;采用抗体生成细胞检测及半数溶血值实验测试黄芪多糖对小鼠体液免疫的影响;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验测试黄芪多糖对小鼠非特异性免疫的影响.结果 黄芪多糖能明显提高小鼠的足跖肿胀度、脾脏生成抗体细胞数、半数溶血值及巨噬细胞吞噬功能,黄芪多糖对小鼠淋巴细胞增殖能力无明显影响.结论 黄芪多糖对正常小鼠的细胞免疫、体液免疫及巨噬细胞功能均有明显的增强作用.
作者：王庭欣；王庭祥；吴广臣；刘峥颢；夏立娅 刊期： 2009年第07期
目的 探讨黄芩苷对抗结核药物肝损伤的保护作用机制.方法 将60只小鼠完全随机分为6组,即正常对照组,肝损伤 (异烟肼+利福霉素钠) 组,联苯双酯组及黄芩苷高、中、低剂量组.给药8 d后,分别用光镜和电镜观察肝脏组织细胞病理学的改变情况,用免疫组织化学染色技术分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达情况.结果 黄芩苷能明显减轻肝细胞变性和坏死,炎症活动程度明显减轻(P<0.05 或P<0.01);TNF-α蛋白在黄芩苷组小鼠肝脏组织内为弱阳性表达(P<0.05 或P<0.01);黄芩苷3个剂量组间小鼠肝脏病理形态学及肝脏组织内TNF-α蛋白的表达均无显著性差异(P>0.05).结论 黄芩苷对抗结核药物肝损伤的保护作用可能与抑制TNF-α蛋白表达有关.
作者：王新华；金东岭；何红梅；张延霞；时志民；赵如同 刊期： 2009年第07期
目的 研究杜仲多糖(Eucommia polysaccharide,EOP)对环磷酰胺(Cyclophosphamide,CY)致毒性的保护作用,为杜仲的进一步开发和利用提供理论依据.方法 用CY造模.将实验小鼠平均分为6组,每组12只,生理盐水为阴性对照,Vc为阳性对照,EOP分别用高、中、低不同的剂量组灌胃给药,除空白组以外均腹腔注射CY,空白组注射生理盐水.连续注射和灌胃5 d,每天称量小鼠体重.末次给药禁食不禁水12 h后将小鼠眼球取血测MDA,SOD,然后将小鼠处死取胸腺、脾脏和肝脏分别计算其指数,另外取肝脏做成匀浆测GSH,GPT,左大腿股骨测其骨髓DNA含量.由以上指标分析EOP对CY致毒性的保护作用.结果 EOP能有效地保护CY所引起的小鼠毒性作用,相对于模型组,EOP组的体重下降减少,胸腺指数、脾脏指数、肝脏指数都有所升高;MDA降低,SOD升高,GSH升高,GPT升高;血象测定白细胞、红细胞、血小板均有所升高;骨髓DNA含量升高;其中高剂量组明显.结论 EOP对CY引起的毒性作用有一定的保护作用.
作者：辛晓明；郭桂丽；王浩；陈美华；朱玉云；高允生 刊期： 2009年第07期
天然药物化学实验教学的主要目的是通过中药有效成分的提取、分离和鉴定等基本操作技能的训练,使理论与实践密切结合,培养学生分析问题和解决问题的能力,训练严格的科学的工作态度,并为药剂等后期课程和将来从事药剂专业岗位工作奠定基础.
作者：叶桂存；张元；叶根健 刊期： 2009年第07期
目的 探讨三叶香茶菜种子的发芽特性.方法 在不同温度、光照、pH值、水势、播深、发芽床、盐处理、贮藏方式下考察三叶香茶菜种子发芽特性.结果 三叶香茶菜种子在20～30℃条件下萌发率较高,其中在25℃下,萌发率达90.0%.种子的pH值适应范围较小,在pH值为4～6时,萌发率较高,为79.8%～82.3%.适萌发水势为-0.2 MPa,萌发率达90.5%,而适播深为0～2 cm,出苗率达84.3%.在不同的发芽床中,纸上(TP)处理的发芽率高,为91.3%.光照和赤霉素处理有利于种子的萌发;在冰箱和干燥器中保存,可以较长时间保持种子的活力.结论 三叶香茶菜种子适应性相对较低,但萌发率高,合适的贮藏方式可保持较长时间.
作者：梁子宁；阎志刚；王勤；朱意磷；吴庆华 刊期： 2009年第07期
小儿患支原体肺炎,症状往往不太典型,容易引起误诊,并且学龄前小儿肺炎支原体(M.pneumoniae,MP)感染有增加趁势,对MP感染者也不太重视检查白细胞.
作者：陈年发；段永强 刊期： 2009年第07期
目的 探讨何首乌饮抗大鼠卵巢组织衰老的机理,为抗女性性腺的衰老研究提供理论指导和实验依据.方法 将60只SD大鼠随机分为3组:正常组、模型组、预防组.采用D-半乳糖连续腹腔注射法制造雌性大鼠亚急性衰老模型,预防组在造模的同时以中药方剂何首乌饮灌胃.应用原位杂交方法检测各组大鼠卵巢组织胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)蛋白的表达,用RT-PCR方法检测各组大鼠卵巢组织胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)基因的表达情况.结果 何首乌饮明显抑制了衰老大鼠卵巢组织中IGFBP3基因表达的上调趋势(P＜0.05),且明显提高了衰老大鼠卵巢组织中IGF-Ⅰ蛋白的表达(P＜0.05).结论 何首乌饮通过影响衰老大鼠卵巢中细胞因子IGF-Ⅰ、IGFBP3的表达,起到抗大鼠性腺衰老的作用.
作者：张娜；李亚丽；高福禄 刊期： 2009年第07期
目的 比较研究山菍3种提取物对正常动物颈总动脉血压的影响.方法 以水提醇沉法分离得山菍总提物、纯化物和沉淀物;用正常猫、犬急性降血压实验,比较3种提取物对颈总动脉血压的影响.结果 山菍总提物和纯化物经十二指肠灌注给药,能使颈总动脉血压下降20%以上.结论 山菍水溶性提取物对正常动物血压有降压作用.
作者：林忠文；李茂；曾宪彪；党美琼；黄敏琪 刊期： 2009年第07期
目的 建立一种香草醛-硫酸比色法测定桔梗中总皂苷含量的方法,为桔梗的质量控制提供科学依据.方法 索氏提取器提取,大孔吸附树脂纯化,香草醛-硫酸比色法测定桔梗总皂苷含量.结果 比色法测定的线性方程为A=0.003 4C+0.006 4,相关系数为r=0.999 7,平均加样回收率为96.97%,RSD=1.51%(n=6).对不同来源桔梗中总皂苷含量进行测定,其含量范围为1.07%～3.76%.结论 该法测定准确,重复性好,可用于桔梗药材中桔梗总皂苷的含量测定,便于对桔梗药材进行质量评价.
作者：李妍；张崇禧；魏建和；许旭东；褚庆龙 刊期： 2009年第07期
目的 建立白术薄层色谱鉴别方法.方法 以白术内酯Ⅲ为对照品,正己烷-醋酸乙酯(3.5∶1)为展开剂,10%硫酸乙醇显色后在波长366 nm下检识.结果 白术药材薄层色谱中,在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点.结论 该方法准确、简便,可为白术的质量控制提供参考.
作者：叶燕；程雪梅；侴桂新 刊期： 2009年第07期
时珍国医国药杂志
主管:湖北省黄石市卫生局
主办：时珍国医国药杂志社
