学术投稿

抑制消减杂交(SSH)技术及在克隆基因方面的新进展

陆秋恒;罗志勇;胡维新

关键词:抑制消减杂交, 差异表达基因, 基因克隆
摘要:基因表达的变化是调控细胞生命活动的核心机制,分离并克隆差异表达基因已成为现代分子生物学研究的热点,亦是功能基因组学研究的重要内容之一.抑制消减杂交技术以其低假阳性率、高灵敏度等优点,被广泛应用于生物及医学领域中差异表达基因的克隆.
医学分子生物学杂志相关文献
  • Smads蛋白结构与功能的研究进展

    TGF-β家族成员与细胞膜上受体结合后,通过Smads蛋白,调节细胞核内特异的基因表达.从结构和功能上看,Smads蛋白可以分为3类.受体调节-Smads(R-Smads)作为具有Ser/Thr激酶活性的TGF-β受体-Ⅰ的底物,激活后通过MH2结构域,与共同介导的Smads(Co-Smads)相互作用形成异聚体,直接结合在目的基因启动子上,影响基因转录.而转录抑制Smads(I-Smads)能够拮抗R-Smads的生物活性.在细胞内,Smads蛋白通过与不同的转录蛋白或转录共调节因子相互作用,在不同类型的细胞内介导特异的基因表达.改变Smads蛋白的正常结构和功能常引起人体发生各种病变.

    作者:陈伟;付小兵;盛志勇 刊期: 2001年第06期

  • 瘦素受体基因与糖尿病

    瘦素受体基因(db基因)位于小鼠第4号染色体,人类为1p31表达瘦素受体.瘦素主要通过与瘦素受体结合,发挥调节能量平衡、代谢、饮食摄入、生长、生殖功能等重要作用.瘦素受体基因变异与糖尿病有一定联系.

    作者:叶林秀;徐焱成;朱宜莲 刊期: 2001年第06期

  • Ⅰ型胶原基因启动子研究进展

    Ⅰ型胶原由α1(Ⅰ)链(COL1A1)与α2(Ⅰ)链(COL1A2)组成,人COL1A1与COL1A2基因的启动子都已鉴定并克隆.调节转录的核因子有Sp1、NF-1、AP-1、CBF、NF-κB、C-myb、c-Krox、BFCOL1、Zf9、Sp3、Smads、TGP、Egr-1、TWIST与NP/NMP4等.在COL1A1和/或COL1A2基因启动子上已鉴定出TGFβ、糖皮质激素、TNFα、IFNγ与视黄酸等的应答元件.

    作者:伍严安;孔宪涛 刊期: 2001年第06期

  • CXCR4结构功能与HIV-1感染的分子生物学

    CXCR4又称融合素(fusin),是一个由352个氨基酸组成、分子量约39.7 kD的功能蛋白.近年来的研究发现,CXCR4与嗜T细胞性HIV-1的感染有关,其作用类似于嗜M细胞性HIV-1的辅助受体CCR5.因此,了解CXCR4的结构、功能与分子生物学特性成为深入了解HIV-1感染机制和疾病过程的一个重要基础.

    作者:张莉;郭葆玉 刊期: 2001年第06期

  • 原核生物转录起始的负调控

    原核生物转录起始是多个反应组成的动力学过程,每一个反应特别是其中一个或几个限速步骤往往成为转录因子的调节点.原核生物阻遏蛋白介导的负调控因启动子而异,包括抑制RNA聚合酶与启动子结合、抑制开放复合物形成、抑制启动子清空等多种机制.不同的阻遏机制与被调系统启动子自身的特性相适应.

    作者:毛晓华;徐蘅 刊期: 2001年第06期

  • 转录因子PU.1在髓系造血中的作用及研究进展

    目前研究证明,转录因子PU.1是骨髓基因的主要调控元件.PU.1的结构、表达调控等在骨髓造血中起重要作用.本文简要描述PU.1的结构,特异性的表达及调控,并着重描述PU.1在血细胞生成过程中作用的研究进展.

    作者:张渊;张军 刊期: 2001年第06期

  • p53家族新成员:p51

    p53是一种广谱的肿瘤抑制基因,其新家族成员p51具有同p53相似的DNA结合特性和相似的功能,同样可以转录激活p53基因的内源性靶分子,如细胞周期抑制基因p21、导致细胞凋亡和生长受抑.本文阐述了它的研究进展.

    作者:李波;傅敏庄 刊期: 2001年第06期

  • 抑制消减杂交(SSH)技术及在克隆基因方面的新进展

    基因表达的变化是调控细胞生命活动的核心机制,分离并克隆差异表达基因已成为现代分子生物学研究的热点,亦是功能基因组学研究的重要内容之一.抑制消减杂交技术以其低假阳性率、高灵敏度等优点,被广泛应用于生物及医学领域中差异表达基因的克隆.

    作者:陆秋恒;罗志勇;胡维新 刊期: 2001年第06期

  • CD28以外的T细胞协同刺激分子及其功能

    CD28是协同TCR诱导T细胞产生高水平IL-2,促进T细胞生存及防止T细胞凋亡的主要协同刺激分子,但并非所有T细胞均表达CD28,提示T细胞活化尚有其它协同刺激途径的存在.近研究表明,其它一些协同刺激分子,如4-1BB、OX40、ICOS、LFA-1等在不同的T细胞亚群和T细胞活化的不同阶段,呈现不同的表达和介导不同的生物学功能.

    作者:吴俊英;李柏青;张学光 刊期: 2001年第06期

  • ILK-整合素信号传导通路中的关键激酶

    胞外基质与细胞的相互作用主要由整合素介导.由整合素介导的机械和生化信号调控胞浆激酶、生长因子受体、离子通道的活性并控制胞内肌动蛋白细胞骨架的组装.众多由整合素介导的信号传导通路后可归于对细胞周期的调节、决定细胞存活或死亡、增殖或者退出细胞周期和分化.近年的研究发现,整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)在这些信号传导通路中具有关键作用.

    作者:赵勇;丁金凤 刊期: 2001年第06期

  • PACAP促PC12细胞突起生长的分子机制

    垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)具有广泛的生理功能.近年来的研究发现,PACAP具有重要的神经营养作用.PACAP可通过激活多条细胞内信号转导通路,促使PC12细胞突起生长,使其向神经元样细胞分化.本文综述了PACAP引起PC12细胞突起生长的信号转导通路,有助于深入了解PACAP神经营养作用的分子机制.

    作者:王丽梅;陈哲宇;路长林;何成 刊期: 2001年第06期

  • 人骨形成蛋白-2的结构与生物学活性

    人骨形成蛋白-2(human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2)是一种低分子量糖蛋白,属于TGF超家族成员,参与骨的器官发生、骨的形成与骨再生的过程,同时对神经系统、造血系统的分化发育也有调控作用.目前,hBMP-2的研究已经涉及发育生物学、遗传学、生物进化等多个领域,积累了大量研究结果.

    作者:张斌;陈苏民 刊期: 2001年第06期

  • 蛋白质组阵列技术的现状与展望

    蛋白质组就是展示一个细胞或组织或机体的全部蛋白质.目前双向凝胶电泳特别是固相pH梯度等电聚焦的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳,是分离阵列蛋白质组成分的核心技术,但仍存在诸多不足,通过改善蛋白溶解、阵列策略和蛋白斑点的探测技术,使蛋白质组阵列技术取得了进展.

    作者:詹显全;陈主初 刊期: 2001年第06期

  • 噬菌体展示文库及其应用

    近十几年来,噬菌体展示技术得到了迅速的发展.通过展示随机肽库可用来筛选与特殊靶分子相结合的配基;模拟非蛋白的配基;也可用作确定抗体表位的工具.展示蛋白;或其功能结构域的文库为我们提供了分析结构与功能关系的体系,并能产生具有改变结合位点或新的催化活性的蛋白.展示短的抗原决定簇的融合噬菌体为开发新的疫苗提供了基础,而表达抗体片段的文库则提供了一种产生单克隆抗体的方法.

    作者:高鹏;黄秉仁 刊期: 2001年第06期

  • Deoxyribozymes的研究进展

    具有RNA裂解活性的DNA分子称为脱氧核酶.它是经过体外选择技术经多次筛选获得的.脱氧核酶在切割与其互补的RNA底物分子时具有极高的特异性和切割效率,有望成为新的RNA灭活工具.

    作者:潘光锦;韩金祥 刊期: 2001年第06期

  • 内皮细胞抑制素的研究进展

    内皮细胞抑制素是一种新发现的特异的血管内皮细胞增殖抑制剂,它可以有效地抑制内皮细胞生长,对肿瘤血管形成具有强烈的抑制作用,在抗实体瘤方面有显著的效果,本文就它的发现、结构、生物学活性、作用机理及研究进展进行综述.

    作者:倪之嘉;潘卫;王元和;戚中田 刊期: 2001年第06期

  • 端粒与细胞分裂

    端粒与细胞分裂的新研究进展表明,端粒长度本身不能作为决定细胞分裂能力的指标.本文介绍了Blackburn提出的关于端粒功能的全新模型,在这一模型中以端粒的戴帽状态作为确定端粒是否具有功能的指标,端粒长度和端粒酶活性等因素对端粒功能的影响则通过其对端粒戴帽状态的影响来评价.这一模型可以很好地解释有关端粒与细胞分裂之间的关系,即无论端粒长短如何,只要处于戴帽状态细胞均可继续分裂,反之细胞则退出周期发生衰老和死亡.

    作者:张如刚;谢弘 刊期: 2001年第06期

  • 蛋白酪氨酸激酶DDRs的结构和功能研究进展

    盘状结构域受体酪氨酸激酶(discoidin domain receptor tyrosine kinases,DDRs)是一类受体型蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinases,RTKs),在哺乳类有两种,分别为DDR1和DDR2.它们在多种组织都有表达,DDR1在某些肿瘤组织中表达增高.DDRs在结构上有两大特点:一是胞外区有一盘状结构域(discoidin region,DR),二是胞外区有一长的邻跨膜区(justatransmembrane region,JR).多种胶原都是它们的配体.胶原与DDRs的结合可使DDRs发生延迟而持久的磷酸化,其中胶原与DDR2的结合可上调MMP-1表达.

    作者:王吉村;药立波 刊期: 2001年第06期

  • 整联蛋白信号与银屑病发病分子机制

    整联蛋白可激活酪氨酸激酶和维持生长因子的生物活性,实现细胞外基质-整联蛋白-细胞内的信号转导功能,调节细胞生长、分化、粘附等生理功能;在病理状态下,如银屑病整联蛋白表达异常,可介导角质形成细胞的过度增生、异常分化甚至炎症的发生.本文综述调节细胞基本行为的整联蛋白信号转导及其与银屑病分子发病机制的关系.

    作者:张学奇;杨森;张学军 刊期: 2001年第06期

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