泮结超;石君帆;丁建祖;漏磊君;宋广忠;杨明瑾;范超明
目的 建立一种快速检测结核杆菌对异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、吡嗪酰胺、喹诺酮类耐药的基因的方法.方法 应用Oligo 6.0设计12对引物、54条探针,构建多重聚合酶链式反应(multiplex polymerase chain reaction,多重PCR)结合反向斑点杂交膜芯片检测结核耐药基因的方法,并对52株结核杆菌临床分离株进行检测.结果 12对引物分4个反应管建立了同一条件下PCR反应体系,54条探针组成的膜芯片中包含36条野生型检测探针、16条突变型检测探针、阳性和阴性对照探针各1条;利用膜芯片检测结核杆菌耐药性的灵敏度为95.4% (41/43),特异度为100%,与药敏试验耐药种类的完全一致率为53.5% (23/43).结论 多重PCR联合膜芯片技术能有效地检测结核杆菌耐药基因,并有助于结核杆菌耐药性判断,具有灵敏度高、特异性好、简便、快速等优点,适合于基层应用.
作者:韦世录;何敏;何晓;蒙江明;王祖恩;银春莲;张志勇;仇小强 刊期: 2012年第04期
目的 探讨原花青素对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌组织损伤保护作用及其机制.方法 SD大鼠随机分为5组:对照组、糖尿病模型组、原花青素低、中、高剂量组.后4组采用小剂量链尿佐菌素30 mg/kg,制备Ⅱ型糖尿病大鼠模型.原花青素低、中、高剂量组分别按50、100、200 mg/kg灌胃12周.检测血糖及血脂,心功能状态;免疫组织化学法和western blot法测定心肌组织核转录因子(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、黏附因子-1(ICAM-1)和单核趋化蛋白-1( MCP-1)蛋白表达.结果 与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血糖及血脂明显增高(P<0.01),心肌组织中NF-κB、TNF-α、ICAM-1、MCP-1蛋白表达明显增加(P<0.05);与糖尿病模型组比较,原花青素中剂量组血糖、TG、TC、LDL明显降低(P<0.05),HDL明显提高(P<0.05);LVEDP[ (4.65±0.96) mmHg]明显降低(P<0.05),LVSP[( 125.58±5.65) mmHg]明显升高(P<0.05),NF-κB、TNF-α、ICAM-1、MCP-1蛋白表达分别为11.24、0.19、4.57、3.15明显减少(P<0.05).结论 原花青素对Ⅱ型糖尿病大鼠心肌有保护作用,其机制可能与降低血糖、血脂、抑制炎性反应有关.
作者:李飞;王国贤;康雅萍 刊期: 2012年第04期
目的 用不同种类、不同浓度的脂肪酸处理体外培养的3T3-L1成熟脂肪细胞,观察处理前后脂联素(adiponectin)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)基因mRNA的表达水平,及两者之间是否存在相互关系.方法 运用实时荧光定量PCR方法检测体外培养并诱导分化成熟的3T3-L1脂肪细胞经一定浓度脂肪酸处理后,脂联素及PPARγ基因mRNA的表达水平.结果 棕榈酸(PA)在低浓度(25μmol/L)时能明显上调脂联素及PPARγmRNA的表达,比对照组增加53% (P <0.05),其余浓度均呈表达下降;油酸(OA)和亚油酸(LA)则在浓度为25、50、100μmol/L时上调脂联素及PPARγ mRNA的表达,在50 μmol/L时上调作用为明显,随着浓度的继续增加脂联素表达下降,呈剂量依赖关系,浓度越高,表达越低.结论 油酸和亚油酸在一定浓度范围内上调3T3-L1脂肪细胞脂联素基因表达,棕榈酸则主要表现为抑制作用,但在很低浓度(25 μmol/L)时也上调脂联素表达;脂联素基因表达与PPARγ基因表达相关.
作者:林杰义;张奕;罗玮;查龙应;毛丽梅 刊期: 2012年第04期
早产是当今围产医学研究的重要内容之一.国外报道的早产发生率一直居高不下,发展中国家早产的发生率为5%~25%,发达国家为5%~10%,中国为5%~15%[1].早产儿由于器官功能不成熟和免疫功能不完善,产生多种并发症,致使死亡率升高.据美国疾病预防控制中心统计,2005年美国早产儿死亡率约为18.3%,中国妇幼卫生监测也报道早产是近年来国内新生儿死亡的首要原因[2].尽管目前对早产的直接病因和发病机制已取得很大进展,但近年来早产发生率仍呈上升趋势.现对可能影响早产的相关因素进行综述,为积极预防和避免早产的发生提供科学依据.
作者:孙蓉;侯晓静 刊期: 2012年第04期
目的 探讨卵泡抑素(Fs)在人肺腺癌细胞中的表达及其作用.方法 免疫细胞化学染色检测肺腺癌细胞FS表达情况,细胞计数试剂盒测定细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 免疫细胞化学染色显示人肺腺癌细胞表达FS;40、50 ng/mL激活素A组肺腺癌细胞增殖[(吸光度值A分别为(0.49±0.07)及(0.42±0.08))明显低于对照组(0.62±0.09);如果预先用抗FS单克隆抗体中和内源FS后,10 ng/mL激活素A也能抑制肺腺癌细胞增殖(0.48±0.06),由其诱导的肺腺癌细胞凋亡率(24.8±6.7)%明显高于单独激活素A组细胞凋亡率(7.3±2.4)%.结论 肺腺癌细胞表达的FS有利于肺腺癌细胞生存,阻断FS分泌或其生物学作用对治疗肺腺癌可能具有重要意义.
作者:孙洋;陈芳芳;李继茹;李晨光;柳忠辉;崔雪玲 刊期: 2012年第04期
目的 探讨不同生活方式对肥胖人群高血压患病风险的影响.方法 通过多级抽样方法,随机抽取天津市18 ~ 80岁社区居民21 951人,调查其生活方式及健康状况.结果 社区居民平均年龄为(47.5±15.8)岁,其中男性10 689人,占48.7%;女性11 262人,占51.3%;吸烟率为29.4%(6 446人),饮酒率为28.3%(6 203人),高血压现患率为22.0% (4 797人),超重与肥胖率分别为34.8%(7642人)、10.0%(2 192人),被调查者高血压患病风险随BMI 水平上升而增高;各种生活方式中吸烟、盐摄入>6 g/d者患病风险较高;超重、肥胖者在吸烟、饮酒、盐摄人>6 g/d、不积极运动的情况下更易患高血压.结论 虽然肥胖人群有较高的患高血压病风险,但如果能采取戒烟、限酒、低盐摄入和积极运动的健康生活方式,患病可能性将会降低.
作者:王媛;郭剑;芦文丽;李永乐;万征 刊期: 2012年第04期
目的 探讨纳米氧化锌诱导血管内皮细胞( ECV304)凋亡与活性氧(ROS)的关系.方法 采用龙胆紫染色观察细胞吞噬效应;四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法测定细胞生长活性;琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡;紫外分光光度计测定超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量;荧光分光光度计测定ROS.结果 ECV304细胞可吞噬纳米氧化锌,实验组MTT值(0.85 ±0.04)、(0.56 ±0.03)、(0.51±0.05)、(0.45±0.044)与对照组(1.21 ±0.11)比较,差异有统计学意义(P<0.01);实验组ROS(33.14±0.38)、(35.82±0.61)、(54.13 ±0.24)、(68.81±1.24)均高于对照组(30.12±1.23);实验组SOD( 25.72±0.48)、(25.64±0.36)、(25.53 ±0.36)、(25.25±0.44)均低于对照组(26.39±0.40);实验组MDA含量均高于对照组(0.56±0.01);a-硫辛酸组细胞凋亡率明显降低.结论 纳米氧化锌可以抑制ECV304细胞的活性,通过ROS途径诱导细胞凋亡,产生细胞毒性.
作者:韩雁;崔国权;董淑英;孙阔;王洋;王帅;王双青;廖元海 刊期: 2012年第04期
抑郁症患者是自杀的高危人群,长期追踪发现约15%的抑郁症患者终死于自杀[1].自杀意念是自杀未遂和自杀死亡者早期的心理活动,尽管自杀意念与自杀行为之间无必然的联系,但反映了个体某个时期的消极思想动态.中国对存在自杀意念的人群研究通常采用自陈量表[2-4],主要集中在流行病学、评估与诊断及其防御机制等方面研究,对其潜在人格层面的研究少见.主题统觉测验是投射测验,通过被试对模糊不清、结构不明确刺激的反应,分析、推断其潜在人格特点,与自陈量表比较,较少依赖病人的自我觉知[5].本研究于2007年10月- 2008年12月尝试采用主题统觉测验比较分析有无自杀意念抑郁症患者的潜意识人格特征,为抑郁症患者的自杀危险程度评价及早期干预提供依据.现将结果报告如下.
作者:蒋庆飞;胡美玉;张载福;徐秋萍;王卫平 刊期: 2012年第04期
双向凝胶电泳(two-dimensional gel eletrophoresis,2-DE)是目前比较蛋白质组学研究中常用蛋白质的技术,通过利用蛋白质的等电点与分子量特性将蛋白质分离,与质谱技术(mass spectrometry,MS)联用,已被广泛应用于分析细胞或组织样品中整体蛋白质表达的差异情况[1-2].然而实验操作过程中,双向凝胶电泳图谱中的蛋白质点的分辨率与重复性常常受到实验技术条件的干扰,因此,对实验条件进行优化以提高2-DE的稳定性与重复性成为了研究和探索的热点.本研究针对人肝癌细胞的实验操作过程,对细胞蛋白的提取、上样量及胶条的水化、第一向的等电聚焦等实验条件进行改良,建立优化双向凝胶电泳图谱的实验条件,提高所分离出蛋白质点的重复性与分辨率,为今后对人肝癌细胞比较蛋白质组学的进一步研究提供依据.
作者:韦艳;张海英;梁钢 刊期: 2012年第04期
鉴于纳米材料易于进入生物体内且已经进入生活环境,有关其生物安全性及相应毒理学研究日益受到关注[1-2].有关纳米材料环境暴露的致生物毒性,利用各种离体(in vitro)与在体(in vivo)生物体系已经证明了环境暴露确实存在安全性问题[3-5].秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)因为其对环境毒物暴露的高度敏感性而广泛应用于环境毒物暴露毒性评价分析[6-8).同时,基于模式动物的特点,也被广泛应用于环境毒理学相关研究[9],自2009年始也逐渐被应用于纳米材料暴露毒性评价以及相应纳米毒理学研究[8-9].本研究针对利用秀丽线虫进行纳米材料安全性评价研究进展综述如下.
作者:王惟;武秋立;李隐侠;叶波平;王大勇 刊期: 2012年第04期
目的 了解中国居民残疾患病现状及其影响因素,为降低残疾患病率提供参考依据.方法 利用2006年第二次全国残疾人抽样调查数据,计算中国居民残疾患病率,分析社会、经济、人口环境的变化对残疾发生的影响以及各类因素作用的方向和强度.结果 中国居民残疾患病率为6.39%,不同性别、年龄、民族、文化程度、婚姻状况、居住地、就业状况、职业、家庭人均年收入、省人均国内生产总值(GDP)居民残疾患病率均不同(P <0.001);多元Logistic回归分析结果表明,年龄(OR=1.043)、女性(OR =0.586)、在城市居住(OR=0.899)、不识字/文盲(OR=4.585)、小学文化程度(OR=2.743)、中学文化程度(OR=1.416)、在婚(OR =0.394)、离婚(OR=1.139)、丧偶(OR =0.412)、有工作(OR =0.304)、第Ⅰ类职业(OR =0.707)、第Ⅱ类职业(OR =1.160)、第Ⅲ类职业(OR=0.800)、第Ⅴ类职业(OR=1.092)、第Ⅶ类职业(OR =0.773)、第ⅧII类职业(OR =0.809)、第Ⅸ类职业(OR =0.562)、第Ⅹ类职业(OR =0.522)、家庭人均年收入(OR=1.000)是中国居民残疾患病的主要影响因素;大似然值变化幅度大的因素依次为年龄、性别、在婚、不识字/文盲、家庭人均年收入、丧偶、有无工作、小学文化程度、第Ⅸ类职业、中学文化程度、第Ⅹ类职业、居住地、第Ⅶ类职业、第Ⅷ类职业、第Ⅱ类职业、第Ⅰ类职业、离婚、第Ⅴ类职业、第Ⅲ类职业.结论 人口年龄结构的老化为残疾发生的主要影响因素,教育水平的普遍提升会降低残疾发生的危险性,职业残疾风险的类别差异提示了工伤致残预防的重要性和优先级,宏微观经济环境对残疾发生具有间接影响作用.
作者:张蕾;郑晓瑛;陈功 刊期: 2012年第04期
目的 了解北京市男男性行为人群( MSM)的人类免疫缺陷病毒(HIV)、梅毒及单纯疱疹病毒Ⅱ型( HSV-2)的感染情况及影响因素.方法 2009年8-12月在北京市招募962名MSM进行一对一问卷调查,静脉取血进行HIV、梅毒和HSV-Ⅱ检测.结果 在调查的962人中,近6个月有91.27%( 878/962)的人发生过肛交性行为,平均与3(范围1 ~413)名男性发生过性行为,有74.60%( 655/878)在近1次发生性行为时使用了安全套,49.66%(436/878)近6个月在与男性肛交时每次都使用安全套;HIV感染率为6.34%( 61/962),梅毒感染率为17.67%(170/962),其中活跃期梅毒感染率为9.88%(95/962),HSV-2特异性IgG抗体阳性率为5.30%(51/962);多因素Logistic回归分析显示:与HIV、活跃期梅毒、HSV-Ⅱ感染有统计学意义的因素分别是:非北京市户籍、近6个月与男性发生过性行为的人数>3人和活跃期梅毒;大专以下学历、HIV阳性和HSV-2阳性;年龄>25岁、大专以下学历、近6个月与男性发生过性行为的人数>3人、近6个月与男性发生过无保护性行为、活跃期梅毒.结论 北京市MSM人群HIV、梅毒及HSV-2感染率较高,应进一步加强有效的宣传教育和行为干预.
作者:高彦杰;于明润;李书明;张政;李东亮;闫莉;姜桂艳;肖冬;罗凤基;阮玉华;邵一鸣 刊期: 2012年第04期
目的 建立用于检测黄病毒属的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法.方法 从GenBank中检索黄病毒属代表株的全基因序列,通过DNAstar进行序列比对和blast进行保守序列搜索和分析,用Beacon Designer 7.0软件进行引物和TaqMan探针设计,以乙脑毒株MB090509 RNA为模板,优化反应条件并应用于现场蚊虫标本检测.结果 确定黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR反应条件为:45℃15 min,95℃10 min,95℃10 s→54℃45s,40次循环,引物和探针终浓度为200 nmol/L.灵敏度为常规RT-PCR方法100倍,检出限2.9×10-3噬斑形成单位(PFU)/mL,与甲病毒属、东南亚十二节段RNA病毒属、布尼亚病毒属均无交叉反应.从161份现场蚊虫标本中检测出11份阳性标本,经病毒分离、测序均被证实为乙脑病毒.结论 本研究建立的黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有广泛应用价值.
作者:郭金金;孙肖红;燕清丽;方艳辉;杨鹏飞;魏莲;张晓龙;姚李四 刊期: 2012年第04期
目的 探讨白藜芦醇对高糖高脂饮食大鼠肾氧化损伤的保护作用.方法 大鼠分为正常对照组、高糖高脂组、白藜芦醇低、中、高剂量组,13周后处死大鼠,测定血糖血脂、肾组织氧化应激水平、抗氧化酶活性及肾脏过氧化物酶激活受体α (pPARa)、羟甲基戊二酸单酰辅酶A合成酶(HMGCS2) mRNA表达水平.结果 高糖高脂饮食13周后,高糖高脂组大鼠体重为(453.00±19.54)g,明显高于正常对照组(368.75±25.24)g和高剂量白藜芦醇组(400.40 +30.39)g(t =4.545、2.991,P<0.05);高糖高脂组大鼠肾脏总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(T-SOD)分别为(1.22±0.34)、(2.69±0.13)U/(mg·Pro),明显低于正常对照组的(0.27±0.03)、(2.43±0.07) U/(mg·pro)(t =3.491,P=0.003;t =2.793,P=0.011).结论 高糖高脂饮食大鼠肾内处于明显的氧化应激状态,白藜芦醇对高糖高脂饮食引起的氧化性肾损伤有保护作用.
作者:张嫦慧;彭晓琳;田翀;唐玉涵;丁世彬;郝丽萍;孙秀发;应晨江 刊期: 2012年第04期
目的 采用针对小鼠肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的siRNA真核表达载体,探讨其对小鼠成牙本质细胞样细胞MDPC-23中表达TRAF6的干涉作用.方法 将构建成功的2个针对TRAF6基因的siRNA真核表达载体( pSUPER-T和pSUPER-2T),通过脂质体介导瞬时转染MDPC-23细胞,RT-RCR和Western blot法检测其对转染后细胞中TRAF6的mRNA和蛋白表达干涉效果.结果 pSUPER-T和pSUPER-2T转染MDPC-23细胞后,RTRCR法显示2组TRAF6 mRNA表达下调、Westem blot结果表明2组TRAF6蛋白表达水平降低,其中pSUPER-2T转染组抑制TRAF6表达作用较强.结论 针对TRAF6的siRNA真核表达载体,在MDPC-23细胞中有效发挥了TRAF6表达干涉作用.
作者:李霞;肖明振;余擎;李卫星;王翔宇 刊期: 2012年第04期
目的 应用间隔区寡核苷酸分型(spoligotyping)方法分析甘肃省结核分枝杆菌临床分离株的分子型别特征.方法 用spoligotyping基因分型方法,对甘肃省兰州市肺科医院住院或门诊确诊患者分离的结核分枝杆菌进行分型,采用BioNumerics4.5软件进行聚类(cluster)分析,对聚类结果与国际间隔寡核苷酸分型数据库(SpolDB4)对比.结果 215株临床分离株被分成3个基因群22种基因型,其中成簇菌株形成11个基因型共204株,独特基因型菌株11株;北京家庭基因型结核分枝杆菌占86.51% (186/215),T4占4.19% (9/215)、H1占1.86% (4/215)、MANU占1.40%( 3/215)等基因型;Logistic多元回归分析结果表明,北京家庭基因型与患者性别、年龄、职业、抗结核治疗史、耐药、发病情况和菌种耐药性、来源地等均无关联.结论 甘肃省结核分枝杆菌临床分离株基因具有多态性,北京家族基因型结核分枝杆菌为该地区主要流行株,其他罕见的基因型结核分枝杆菌也值得重视.
作者:文建强;金颖;田卫花;刘志广;吕冰;同重湘;万康林 刊期: 2012年第04期
目的 制备、纯化及鉴定抗鳙鱼小清蛋白单克隆抗体.方法 以重组鱼主要过敏原小清蛋白( parvalbumin)为抗原免疫BALB/c小鼠,融合免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤NS -1,半固体培养基法结合有限稀释法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,采用蛋白A亲和层析法获得纯化抗体,间接ELISA方法和western blot鉴定抗体效价和特异性以及与其他过敏源的交叉反应性;采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型.结果 共获得抗parvalbumin细胞株7株,1G1,1B5,1A5,2B9,1H4,1B7,1G3.1G1、1B7、1A5、1H4和1G3效价均高于1:400000,P/N >2.1;1B5效价高于1:200 000,2B9效价较低;Western blot检测表明所有抗体均能识别parvalbumin;抗体亚类为IgG1型,1G1,1A5,2B9,1H4,1B7特异性结合parvalbumin,与其他种类过敏原无交叉反应,1G3和1B5与虾和大豆过敏原有交叉反应性,P/N >2.1.结论 获得高效价抗体5株,发现parvalbumin与虾、大豆过敏原存在交叉反应性,为建立parvalbumin检测体系提供依据.
作者:张强;赵郭存;邹菊;刘志刚 刊期: 2012年第04期
目的 通过开展福建省结核病耐药监测点监测,了解结核病耐药状况,为制订结核病控制对策提供依据.方法 对福建省9个设区市的9个监测点2008年9月- 2009年8月门诊新登记涂阳患者分离的结核分枝杆菌复合群,采用WHO/IUATLD推荐的比例法进行异烟肼、链霉素、利福平和乙胺丁醇耐药性检测.结果 共1014例病例纳入监测分析,总体耐药率为19.8%,耐多药率为4.6%,其中初始耐药率为17.9%,初始耐多药率为3.4%,获得性耐药率为44.0%,获得性耐多药率为20.0%.结论 福建省结核病耐药监测点耐药率低于全国平均水平,但高于国际平均水平,今后仍要进一步加强耐药结核病的防治工作.
作者:梁庆福;陈求扬;赵永;魏淑贞;林建;林淑芳;郑金凤 刊期: 2012年第04期
目的 评价12种肿瘤相关抗原(TAA)微阵列在早期肺癌中的诊断价值.方法 采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测174例肺癌患者和92名正常人群血清中的12种TAAs的抗体水平,应用流行病学筛检试验的指标对TAAs微阵列的结果进行评价;用ROC曲线来确定佳的微阵列组合,并用受试者工作特征曲线(ROC)下面积来判断其诊断价值.结果 每种TAA的抗体水平在肺癌患者血清中的阳性率均高于正常对照组(P<0.05);单个TAA检测的灵敏度在12.6% ~27.0%;12种TAAs微阵列检测的灵敏度增加到72.4%,特异度达到91.3%,正确指数为0.637,阳性预测值为94.0%,阴性预测值为63.6%,ROC曲线下面积为0.819.结论 联合12种TAAs微阵列对肺癌具有较高的诊断价值,可提高肺癌的检出率,有助于肺癌早期诊断.
作者:陈俊林;王鹏;闫平平;柴玉荣;代丽萍;王凯娟;张建营 刊期: 2012年第04期
痛风是因嘌呤代谢障碍而导致血尿酸水平增高,和(或)因尿酸排泄减少而导致尿酸盐在组织中沉积的疾病[1-2].痛风患者除了药物治疗外,亦采取饮食控制,减少由饮食中摄取过多嘌呤物质,以达到控制病情的效果[3-5].菌类食品营养丰富,是不可多得的药食两用的食物来源.然而菌类食物中含有一定量的嘌呤,容易诱发痛风[6],因此对菌类食品中嘌呤的检测尤为重要.本研究通过探讨菌类食品的水解条件以及高效液相色谱分离条件,建立了菌类食品中的嘌呤测定方法,旨在为食品中嘌呤的检测提供参考.
作者:刘桂英;杨海斌;张加玲 刊期: 2012年第04期