学术投稿

紫外交联实验筛选HCV RNA结合蛋白的应用

张景霞;苏海霞;李端;闫永平;门可;卢娟;王安辉

关键词:紫外交联, 凝胶迁移, RNA结合蛋白
摘要:目的选择一种用于筛选与丙型肝炎病毒(HCV)RNA核心区结合的细胞蛋白质分子较佳方法.方法用体外转录的方法制备地高辛标记(DIG)-HCV RNA;从HepG2细胞中提取细胞蛋白质分子.分别用紫外交联实验(UV)和凝胶迁移实验(EMSA)筛选HepG2细胞中可与HCV RNA结合的蛋白质分子.结果 2种实验方法均可检测到细胞蛋白质分子与HCV RNA结合,但凝胶迁移实验结果所见DIG-RNA信号比较弥散,而紫外交联实验的结果可见比较清晰的RNA-结合蛋白条带.结论紫外交联实验是用于筛选HCV-RNA结合蛋白的首选方案.
中国公共卫生杂志相关文献
  • 一起变形杆菌引起的食物中毒调查

    2003年8月29日,沈阳市某酒店承办的婚宴发生了一起食物中毒,接到报告后,我们进行了调查.现将调查结果报告如下.

    作者:胡志红;刘军;张智;姜春英 刊期: 2006年第03期

  • 青蒿琥酯拮抗小鼠中暑内毒素血症的作用

    中暑是环境高温和/或剧烈体力活动时,因热的作用而引起的一组急性热致疾病,预防和控制中暑及其并发症是医学研究的重点,中暑内毒素血症就是其中要克服的难题.青蒿琥酯是近来发现具有抗外源性内毒素血症的新药物[1~3],但其在中暑领域的应用还处于探讨阶段.本文通过建立中暑内毒素血症的动物模型[4],观察青蒿琥酯抗中暑内毒素血症的作用.结果报告如下.

    作者:罗炳德;谭庆;张培;邹飞;万为人;郭进强 刊期: 2006年第03期

  • 脑组织铅的氢化物发生-原子吸收光谱法测定

    目前,测定铅的常用方法包括石墨炉原子吸收法、双硫腙分光光度法、微分电极溶出法、极谱法、氢化物发生-原子荧光光谱法等[1].本文采用流动注射氢化物发生-原子吸收光谱法,测定大鼠脑海马组织中的铅含量,并探讨该方法的佳检测条件,以期建立一种灵敏度高、准确度及重现性好、操作简便的铅测定方法.

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  • 被动吸烟对仔鼠学习记忆功能影响及干预效应

    目的研究小鼠孕期被动吸烟对其子代学习、记忆功能的影响,并探讨不同抗氧化剂对吸烟危害的改善作用.方法建立被动吸烟模型,设立对照组、吸烟组和抗氧化剂干预组;吸烟染毒3个月后产子代,利用小鼠在方型水迷宫中学习、记忆能力的变化,通过组间对照评价吸烟组和抗氧化剂干预组的不同影响结果,及干预在子代中的改善作用.结果各干预组子代的游泳成绩均随学习时间的增加而提高,吸烟组子代提高的速度慢;水迷宫测试第1,4,8和12 d,吸烟组小鼠子代的潜伏期明显高于对照组子代;测试12 d时,维生素E(VE)干预组潜伏期与吸烟组比较明显降低;由达标后的结果分析可见,被动吸烟组子代小鼠的错误次数与对照组比较有增高趋势.结论胚胎期被动吸烟使小鼠学习记忆功能下降,通过抗氧化剂的干预可能得到改善.

    作者:姜丽娜;栗学军;李君文;刘基芳 刊期: 2006年第03期

  • 枸杞多糖对人前列腺癌细胞生长影响

    目的观察枸杞多糖对体外培养的雄激素非依赖型人前列腺癌PC-3细胞存活率、细胞周期及其凋亡的影响.方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测枸杞多糖对PC-3细胞作用的时间效应和剂量效应,并计算细胞生长抑制率;流式细胞仪观察枸杞多糖处理PC-3细胞后细胞周期以及细胞凋亡的改变.结果枸杞多糖对PC-3细胞的增殖有明显的抑制作用,抑制率可达87.84%,且呈剂量-效应和时间-效应关系;流式细胞仪分析显示,枸杞多糖可影响该细胞周期并引起细胞凋亡,凋亡率高达40%.结论枸杞多糖对人前列腺癌PC-3细胞的生长有明显抑制作用,其机制可能是通过诱导人前列腺癌细胞凋亡和影响其生长周期而实现.

    作者:李卓能;罗琼;杨明亮;闫俊;庞雅琴;姜鸣 刊期: 2006年第03期

  • 环境雌激素对大鼠组织细胞DNA的损伤作用

    环境雌激素(Environmental Estrogens,EEs)广泛存在于生活和工作环境中,它可以模拟内源性雌激素的生理、生化作用,干扰体内的激素水平,影响雌二醇的代谢.动物实验和人群流行病学调查显示,环境雌激素对生殖发育、内分泌和免疫系统等均能产生危害[1].为了进一步探讨环境雌激素的遗传毒性,本研究采用彗星试验从体内、体外检测环境雌激素对大鼠组织细胞的DNA损伤作用.

    作者:王娟;张遵真;吴媚;车望军 刊期: 2006年第03期

  • 克拉玛依市性传播疾病漏报调查及干预效果

    为准确掌握克拉玛依市法定报告的性传播疾病(STD)实际发病情况,促进STD疫情工作规范化、法制化,为政府决策提供依据,本文对克拉玛依市医疗机构2000~2003年STD疫情报告情况进行漏报调查,并采取培训、考核、现场督导等措施进行干预.结果报告如下.

    作者:林彬;郭俊;曾克芬;薛亮;孟炜 刊期: 2006年第03期

  • 二氧化硫吸入致大鼠肺组织基因表达谱改变

    目的研究短期吸入二氧化硫(SO2)毒理作用的分子机制.方法采用Affymetrix基因芯片(RAE230A)技术,研究SO2短期(56 mg/m3,6 h/d,共7 d)吸入后大鼠肺组织基因表达谱的改变.结果与其相应的对照组相比,SO2短期吸入后表达上调的基因有31个,其中包括18个已知基因和13个新基因,而表达下调的基因有30个,其中包括19个已知基因和11个新基因.结论 (1)短期吸入SO2的大鼠肺基因表达谱与其对照组相比,氧化磷酸化相关的一些基因发生了变化,表明高剂量短期吸入SO2可能导致线粒体功能损伤;(2)与甲状腺激素有关的几个基因表达也发生了变化,表明SO2可能会造成甲状腺激素在体内生理过程的改变;(3)SO2可引起多种基因的表达发生改变,这意味着多种基因的表达是易变且不稳定的,在肺组织中可能存在着SO2诱发的表达不稳定型基因组.

    作者:孟紫强;秦国华 刊期: 2006年第03期

  • 不同抗性培育下家蝇乙酰胆碱酯酶活性变化

    目的探讨不同种类杀虫剂在不同施药方式下对家蝇的作用机制.方法分别在幼虫期和成虫期对家蝇施加杀虫剂,测量不同世代家蝇的半数致死量(LD50)并计算抗性指数,测量不同抗性水平下家蝇乙酰胆碱酯酶的活性.结果施加敌敌畏的2个品系家蝇乙酰胆碱酯酶(AChE)活性升高明显,施加高效氯氰菊酯的2个品系乙酰胆碱酯酶活性先升高后下降;幼虫期施加杀虫剂的品系抗性水平升高较快.结论乙酰胆碱酯酶是敌敌畏作用于家蝇的靶标;幼虫期施加杀虫剂抗性增加较快,因此,在家蝇的防治过程中应尽量避免在幼虫期施加杀虫剂.

    作者:徐欣;付荣恕;霍新北 刊期: 2006年第03期

  • 大连大学新生性健康知识调查

    目的了解大连大学2004年入学新生性健康知识情况,以便有针对性地进行引导和教育.方法采用问卷调查,用SPSS 10.0软件进行统计分析.结果大多数学生希望了解性知识;认为有必要开设性健康课程;多数学生不了解性病和避孕措施;学生获取性知识的主要途径不是来自于教师和课堂;相当一部分学生性观念较开放.结论学生渴望健康正确的性健康知识,学校有责任进行相关教育和引导.

    作者:王君;杜彩素;张天奉;王一侠;韩耀辉 刊期: 2006年第03期

  • 铅对脐带血造血细胞增殖影响

    目的探讨铅对造血细胞增殖分化的影响.方法采集脐血21份,同时检测脐血中铅水平以及采用Ficoll-Hypaque淋巴细胞分离液离心获取单个核细胞,在体外悬浮培养15 d,定期观察细胞增值情况.结果脐铅含量平均为(54.3±1.7)μg/L.从细胞生长密度随培养时间变化的趋势看,不同铅水平的细胞生长密度差异有统计学意义.高铅水平的单个核细胞群的扩增能力明显低于低铅水平组.铅对单个核细胞群增值和分化的抑制作用主要表现于培养初期,对于培养后期的细胞群,其抑制作用明显减弱.结论铅对各阶段造血细胞增和分化的抑制作用不同,其机制有待进一步研究.

    作者:邱亿腾;邹文霞;钟义富;李容汉;黄健红 刊期: 2006年第03期

  • 新开业练歌房空气质量卫生学调查

    为了解沈阳市沈河区卡拉OK厅开业时的空气卫生质量,我们于2004年5月对辖区内4家新开业的卡拉OK厅在开场前、中场、终场前30 min进行了环境和人群健康的现场调查.现将结果报告如下.

    作者:张佳颖 刊期: 2006年第03期

  • 北京市乙肝疫苗初免后3~12岁儿童加强免疫观察

    目的评价北京市儿童进行乙肝疫苗加强免疫接种后抗-HBs的应答反应水平.方法采取多阶段整群系统抽样选择已进行乙肝疫苗初免的3~12岁儿童,采用固相放射免疫(SPRIA)方法,检测血清HBsAg、抗-HBs和抗-HBc水平,其中抗-HBs<10 Iu/L者进行不同剂量的己肝疫苗加强免疫,观察加强免疫后的抗-HBs.结果 2 491名3~12岁儿童的抗-HBs阴性率为48.25%(CI%=35.15~64.26);对其中726名儿童进行己肝疫苗加强免疫后,接种2.5和5 μg疫苗的儿童抗-HBs的阳转率分别为90.6%和90.9%,GMT分别为85.69和87.59 Iu/L,(χ2=0.02,P=0.89;t=0.36,P=0.72).加强免疫后4~5周,平均抗-HBs的阳转率为92.8%,GMT为84.55 Iu/L;免后6~22周采血,平均抗-HBs的阳转率为86.66%,GMT为91.39 Iu/L,2个时间段的抗-HBs的阳转率差异有统计学意义(χ2=7.47,P=0.006).结论 3~12岁完成乙肝疫苗基础免疫的儿童,在抗体消失后给予一定剂量的乙肝疫苗进行加强免疫,其抗-HBs反应良好,表明机体存在对乙肝病毒有回忆反应,可能是维持乙肝疫苗长期保护效果的原因之一.

    作者:李阳桦;李辉;龚晓红;王富珍;刘立荣;王化勇;孙晓云;苏燕萍;韩庆英;张海燕 刊期: 2006年第03期

  • 食品标本处理方法对大肠埃希菌检出限影响

    目的研究快速、敏感、低成本的食品标本处理方法.方法在牛肉馅中接种不同浓度的大肠埃希菌O157:H7,经离心、过滤,去除PCR抑制剂,浓缩菌株,用煮沸法和酶/冻融法裂解菌株,制备模板DNA,通过PCR检测大肠埃希菌O157:H7志贺毒素基因以评价该处理方法的可行性.结果在未增菌条件下,PCR低能检测到103 CFU/g牛肉馅,增菌6h,低能检测1 CFU/g牛肉馅,整个检测过程只需要12 h.结论所采用的标本处理方法是一种灵敏、省时、低成本的方法,能显著地提高PCR检测食品标本中的大肠埃希菌O157:H7的灵敏度.

    作者:赵春燕;易世红;李凡 刊期: 2006年第03期

  • 云南省弥渡县新型农村合作医疗补偿机制研究

    目的调查云南省弥渡县新型农村合作医疗运行2年来的补偿机制,了解补偿方案与具体补偿情况的关系,为新型农村合作医疗的推广提供借鉴.方法收集县、乡两级合作医疗管理机构有关补偿情况的记录,并利用现有资料、通过个人访谈及集中小组访谈等方法了解试点的基本情况、补偿情况以及卫生服务情况等.结果 (1)实际补偿水平(29.32%)高于全国平均水平;(2)群众看病首选县级医疗机构,占全部参加合作医疗并就诊人群的60%以上;(3)补偿基金报销基本正常.结论应鼓励群众参与,加大对乡镇卫生院的投入,引导村民到乡镇级医疗机构就医,以合理有效地利用卫生资源.

    作者:唐松源;李迅;崔文龙;张开宁 刊期: 2006年第03期

  • 新型农村合作医疗综合评价指标体系测评分析

    目的对新型农村合作医疗综合评价指标体系分析和验证.方法采用相关和多元线性回归分析检验综合评价指标与内部指标间联系、信度分析和主成分因素分析,对综合评价指标体系进行评价.结果新型农村合作医疗综合评价指标同内部指标具有正相关,内部指标具有独立性,总体指标克朗巴赫α系数为0.8889,指标体系内容效度极好,主成分分析表明指标体系具有较好的结构效度.结论新型农村合作医疗综合评价指标体系的建立具有合理性、科学性和较好的信度与效度.

    作者:杜进林;李颖琰;王禄生 刊期: 2006年第03期

  • 烟台市10年预防控制结核病效益分析

    我国自1992~2001年实施世界银行贷款结核病控制项目,烟台市全面实施了该项目.为了解项目实施所带来的社会效益和经济效益,为今后结核病防治提供借鉴,现将项目运行10年来的结核病防治投入和产出分析如下.

    作者:高吉升;徐增芝 刊期: 2006年第03期

  • Nrf2-Keap1抗氧化系统研究进展

    Nrf2(NF-E2-related factor2)是细胞调节抗氧化应激反应的重要转录因子,生理状态下它与胞浆蛋白伴侣分子Keap1(Kelch-like ECH-associated protein1)结合使活性处于相对抑制状态.氧化应激源作用下,Nrf2与Keap1解偶连后转移入核,与抗氧化反应元件ARE(antioxidant response element)上GCTGAGTCA位点结合,启动ARE调控的第II相解毒酶及抗氧化酶基因表达,增加细胞对氧化应激的抗性.Nrf2缺失或激活障碍,可加重氧化应激源的细胞毒性,导致细胞功能障碍、凋亡甚至死亡.本文对Nrf2-Keap 1解偶连机制和Nrf2功能的新研究进展做一综述.

    作者:钟敏 刊期: 2006年第03期

  • 紫外交联实验筛选HCV RNA结合蛋白的应用

    目的选择一种用于筛选与丙型肝炎病毒(HCV)RNA核心区结合的细胞蛋白质分子较佳方法.方法用体外转录的方法制备地高辛标记(DIG)-HCV RNA;从HepG2细胞中提取细胞蛋白质分子.分别用紫外交联实验(UV)和凝胶迁移实验(EMSA)筛选HepG2细胞中可与HCV RNA结合的蛋白质分子.结果 2种实验方法均可检测到细胞蛋白质分子与HCV RNA结合,但凝胶迁移实验结果所见DIG-RNA信号比较弥散,而紫外交联实验的结果可见比较清晰的RNA-结合蛋白条带.结论紫外交联实验是用于筛选HCV-RNA结合蛋白的首选方案.

    作者:张景霞;苏海霞;李端;闫永平;门可;卢娟;王安辉 刊期: 2006年第03期

  • 黄曲霉毒素污染控制技术研究进展

    黄曲霉毒素(Aflatoxins,AFT)是常见的一类真菌毒素,广泛分布于土壤、动植物特别是花生、玉米等传统农作物中[1].AFT对人及动物肝脏组织有破坏作用,可导致肝癌甚至死亡[2].近年来,世界各国不仅纷纷制订了相应的AFT允许标准和法规,而且其允许上限均有进一步降低的趋势.这就对各农作物输出国的对外贸易乃至整个国民经济产生严重影响.如欧盟多次以AFT超标为由拒绝进口我国花生及其制品.而据世界粮农组织估计,目前世界范围内有25%的农作物受真菌毒素的污染,其中主要就是AFT.

    作者:胡娜;许杨 刊期: 2006年第03期

中国公共卫生杂志

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主管:中华人民共和国卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会