孙玉娥；陆翠娥；雷艺珊；顾小萍；马正良
我们通过腺病毒干扰Girdin表达,观察Girdin对胰腺癌细胞Aspc-1侵袭和迁移的影响.一、材料与方法1.材料:人胰腺癌细胞株Aspc-1购自上海博谷生物科技有限公司;抗体购自美国Abcam公司;Tirzol购自美国Invitrogen 公司;反转录试剂盒购自日本TaKaRa公司;SYBR Green购自德国Roche公司;基质胶购自美国BD公司.2.方法:利用Girdin干扰腺病毒转染Aspc-1细胞,应用Western blot和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Girdin基因的蛋白和mRNA的表达水平,划痕实验检测细胞迁移,Transwell实验检测细胞侵袭能力.
作者：王盛；蔡则灵；吴凯；王武林；陈浩；雷亿群；喻春钊 刊期： 2018年第05期
食管癌是常见恶性肿瘤之一,尽管多学科治疗手段提高了食管癌的预后,但其病死率仍较高,因为食管癌淋巴结转移可首先出现在颈部至腹部,所以采取了扩大淋巴结清扫的策略;三野淋巴结清扫术(3FLD)建立于20世纪80年代的日本,定义为一种经胸食管切除术,其进行颈-胸-腹三野淋巴结清扫,目前其被全世界广泛接受.迄今为止,已经报道各种关于3FLD和二野淋巴结清扫术(2FLD)的对比试验,并且证明3FLD在预后方面优于2FLD.但是,在3FLD中出现众多术后并发症如喉返神经损伤和术后胃肠道功能紊乱.近来,食管癌术前治疗的功效得到报道,微创手术的重要性也正在得到验证.术前治疗和可行的手术方法相结合,其将在未来不断提高食管癌患者的预后.
作者：陶浩冉；杨嘉仪；潘雪凯；杨张朔；习一清；王昕；徐利华；孔繁政；吴洲清；陈家宽；谢伟；冯茂辉 刊期： 2018年第05期
人垂体腺瘤是腺垂体发生的良性肿瘤,腺瘤细胞兼具激素异常分泌和异常增殖的双重特点.人垂体腺瘤细胞的生物学行为受细胞内多条信号转导通路调控,这些信号通路彼此发生交叉通讯,构成复杂的调控网络,共同维持维持垂体腺瘤细胞激素异常分泌和增殖.本文旨在回顾调控垂体腺瘤激素异常分泌和细胞增殖的信号转导通路及其交叉通讯机制,分析信号网络中关键分子靶点的调控作用,为探索相关靶向治疗药物提供理论依据.
作者：雷霆；叶飞；王俊文 刊期： 2018年第05期
目的 观察双基因重组载体对乙醇作用下兔干细胞增殖与成骨活性的影响.方法 取第3代兔骨髓间充质干细胞(BMSCs),随机分为6组:(1)正常组:正常培养BMSCs,无基因转染;(2)模型组:无基因转染BMSCs;(3)无关序列组:10μl无关序列载体转染BMSCs;(4)沉默过氧化物酶体增殖子活化受体γ (siPPARγ)组:10μl siPPARγ基因载体转染BMSCs;(5)表达降钙素基因相关肽(exCGRP)组:10μl CGRP基因载体转染BMSCs;(6)双基因组:10μl双基因重组载体转染BMSCs.除正常组外,其余各组细胞给予终质量浓度0.09 mol/L乙醇.采用噻唑蓝(MTT)法检测BMSCs增殖,第14天检测各组细胞内碱性磷酸酶活性、层粘连蛋白、Ⅰ型胶原、培养基中骨钙素含量,并作碱性磷酸酶(ALP)染色.结果 双基因组细胞增殖明显,增殖曲线接近于正常组.细胞中ALP活性、层粘连蛋白、Ⅰ型胶原、培养基中骨钙素含量:双基因组数值高,分别为(18.593±2.350) U/L、(24.422 ±3.110) ng/ml、(5.951 ±0.650) μg/L、(5.836 ±0.630) ng/ml,显著高于模型组[(6.528 ±0.830) U/L、(9.422±1.250) ng/ml、(1.733±0.230) μg/L、(2.016 ±0.240) ng/ml]、无关序列组[(7.011±0.850) U/L、(9.693±1.260) ng/ml、(1.663 ±0.220) μg/L、(1.913±0.230) ng/ml],明显高于siPPARγ组[(13.536 ±1.710) U/L、(17.103±2.230) ng/ml、(3.486±0.410) μg/L、(3.686±0.420) ng/ml]、exCGRP组[(13.692 ±1.760) U/L、(17.185 ±2.240) ng/ml、(3.525±0.420) μg/L、(3.833±0.430) ng/ml]、正常组[(15.056±1.910) U/L、(18.528±2.430) ng/ml、(4.035±0.460)μg/L、(4.012±0.460) ng/ml],差异均有统计学意义(均P=0.000).模型组、无关序列组数值显著低于正常组,差异均有统计学意义(均P=0.000).siPPARγ组、exCGRP组数值略低于正常组,差异均无统计学意义:ALP活性(P=0.222、0.274),层粘连蛋白(P =0.362、0.390),Ⅰ型胶原(P=0.082、0.105),骨钙素(P =0.276、0.543).双基因组数值显著高于正常组,差异有统计学意义:ALP活性(P=0.031),层粘连蛋白(P=0.010),Ⅰ型胶原、骨钙素(均P =0.001);且明显高于siPPARγ组、exCGRP组,差异均有统计学意义:ALP活性(P =0.005、0.006),层粘连蛋白(P=0.003、0.003),Ⅰ型胶原、骨钙素(均P=0.000).ALP染色显示:双基因组中大量细胞胞质染色为深蓝色,且较正常组多.结论 双基因重组载体可以保持乙醇作用下兔干细胞正常增殖,显著促进成骨活性,优于单一基因作用.
作者：刘柯希；李劲峰；李月白；王义生 刊期： 2018年第05期
切口疝是腹正中切口术后常见并发症,早期促进切口愈合,有望降低切口疝发生率.腹白线主要由横行排列的胶原纤维构成,其间腱细胞数量少、活化困难.研究表明间充质干细胞(MSCs)可在骨形态发生蛋白(BMPs)的诱导下分化为腱细胞[1],但其分化通路存在争议.本研究旨在探讨BMP-12诱导MSCs向腱细胞分化作用及其机制.
作者：王栋；鲁生林；吴茸；王晶敏；侯洪伟；陶庆松；嵇振岭 刊期： 2018年第05期
目的 运用规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/Cas9基因编辑技术构建敲除趋化因子受体4 (CXCR4)基因的人脑胶质瘤U251细胞.方法 设计3对针对目标基因CXCR4的导向RNA(sgRNA),通过PX335质粒构建3组该基因的Cas9表达载体(CXCR4-sgRNA-1、CXCR4-sgRNA-2、CXCR4-sgRNA-3),测序验证后,将构建正确的载体CXCR4-sgRNA-1转染进至U251细胞,T7核酸内切酶Ⅰ (T7E1)酶切鉴定敲除效率,分离单克隆细胞5组进行培养,分别测序及蛋白印迹法鉴定其敲除效率和蛋白含量,获得稳定敲除阳性单克隆细胞.结果 测序验证CXCR4-sgRNA-1组载体构建成功,转染载体后U251细胞经聚合酶联反应(PCR)酶切鉴定敲除效率为48％,其2、3、4、5号单克隆细胞敲除效率分别为20％、40％、30％、20％.PCR产物连接T载体后测序,结果显示3组出现点突变,2号为A突变为G,4号为T突变为C和5号为A突变为G,而3号单克隆敲入38 bp碱基,确定为有意义的突变.2、3、4号单克隆细胞CXCR4蛋白表达量为0,敲除组CXCR4蛋白相对表达量较对照组明显降低(0比0.746±0.010,P=0.000),差异有统计学意义.免疫印迹结果说明敲除CXCR4基因的U251细胞株内无CXCR4蛋白的表达;测序比对得到有效的敲除细胞株.结论 通过CRISPR/Cas9系统高效地获得了靶向CXCR4重组质粒,并且筛选出稳定敲除CXCR4表达的U251细胞株.
作者：黄书岚；刘宇航；王辉；汪超甲 刊期： 2018年第05期
目的 观察半乳糖凝集素-1(Galectin-1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达,并探讨其对甲状腺乳头状癌增殖、迁移和侵袭的影响.方法 选择123例在我院进行甲状腺手术治疗的患者作为研究对象,采用免疫组织化学法检测手术切除组织中Galectin-1和Galectin-3表达,分析两种蛋白诊断甲状腺良性病变组织、甲状腺乳头状癌组织的价值.以甲状腺乳头状癌细胞株TCP-1作为研究对象,沉默Galectin-1基因表达,比较未沉默和沉默Galectin-1后TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力.结果 Galectin-1和Galectin-3诊断甲状腺乳头状癌的敏感度、特异度、阳性似然比和阴性似然比分别为94.1％和96.8％、29.406和0.061、94.7％和81.9％以及5.199和0.072.Galectin-1诊断甲状腺乳头状癌的特异度显著高于Galectin-3(x2=8.453,P=0.004),两者诊断甲状腺乳头状癌的敏感度差异无统计学意义(x2=0.253,P=0.617).未转染TPC-1细胞株和仅转染脂质体TPC-1细胞株在转染12、24、36、48、72 h时的570 mm波长处吸光度(A570)值显著高于干扰Galectin-1基因的TPC-1细胞[未转染TPC-1细胞株t=2.470、4.478、8.860、17.539,P=0.019、0.000、0.000、0.000;仅转染脂质体TPC-1细胞株t=3.471、3.527、7.580、20.270,P=0.001、0.001、0.000、0.000].染TPC-1细胞株和仅转染脂质体TPC-1细胞株划痕直线大宽度显著低于敲除Galectin-1基因的TPC-1细胞(P=0.000).Transwell小室侵袭实验结果显示,未转染TPC-1细胞株和仅转染脂质体TPC-1细胞株侵袭细胞数量显著高于敲除Galectin-1基因的TPC-1细胞(P=0.000).结论 Galectin-1能够促进甲状腺乳头状癌增殖、迁移和侵袭.
作者：张建祥；马艳梅；邱新光；李建华 刊期： 2018年第05期
目的 观察纳布啡预处理联合超声引导下椎旁神经阻滞用于胸腔镜下肺癌根治术患者镇痛,探讨纳布啡预处理联合超声引导椎旁神经阻滞的优化效果.方法 选取行胸腔镜下肺癌根治术患者60例,年龄40～70岁,体重55 ～ 80 kg,美国麻醉医师协会评分标准(ASA)分级Ⅰ级或Ⅱ级,TNM分期Ⅰ期或Ⅱ期,采用随机数字表法,将患者以随机数字表法随机分为3组(n=20):对照组(A组)、纳布啡预处理组(B组)、纳布啡预处理+罗哌卡因组(C组).入室后C组在局麻下行超声引导术侧胸T4、T7和T9三点靶向横突根部阻滞,每点注入0.5％罗哌卡因10 ml,确定阻滞平面后开始麻醉诱导.于全麻诱导前3 min于B、C组静脉注射纳布啡20 mg,A组静脉注射等容量生理盐水.采用瑞芬太尼和异丙酚双通道靶控输注维持麻醉.于麻醉诱导前5 min时(T0)、手术开始后1h时(T1)、术毕时(T2)、术毕24 h时(T3),取中心静脉血样,检测T0～T3血浆去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)及皮质醇(Cor)浓度及T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+水平和CD4+/CD8+比值.记录术中丙泊酚用量、瑞芬太尼用量及麻醉恢复期血管活性药使用率.结果 与T0时比较,A组T2时CD3+:50.6 ±6.0、CD4+:28.4 ±6.2和CD4+/CD8+:1.3±0.1降低,T3时CD3+:40.5±5.1、CD4+:27.3 ±6.4和CD4 +/CD8+:1.8±0.3降低,B组T2时CD3+:54.4 ±6.0、CD4+:32.5 ±6.9降低,T3时CD3+:52.3 ±5.7、CD4+:38.7 ±7.6降低,C组T2时CD3+:63.3±7.5、CD4+:38.2 ±7.0降低,T3时CD3+:60.4±7.4、CD4+:42.5 ±7.4降低(P=0.000);与A组比较,B组、C组T2、T3时CD3+、CD4+细胞水平升高,B组T2时CD4+/CD8+:1.9±0.1,T3时2.1±0.2升高,C组T2时CD4+/CD8+:2.2±0.2,T3时2.2±0.2升高(P=0.000);与B组比较,C组T2、T3时CD3+、CD4+细胞水平和CD4 +/CD8+比值升高(P=0.000).与A、B组比较,C组T1 ～ T3 NE、E和Cor浓度及术中丙泊酚用量、瑞芬太尼用量、麻醉恢复期血管活性药使用率降低;与A组比较,B组T1～ T3 NE、E和Cor浓度及术中丙泊酚用量、瑞芬太尼用量、麻醉恢复期血管活性药使用率降低.结论 纳布啡预处理联合超声引导下椎旁神经阻滞可改善胸腔镜下肺癌根治术患者细胞免疫功能.
作者：张挚；孙丽炜；梁丽敏；张义轩 刊期： 2018年第05期
目的 观察鞘内注射Mas相关基因受体C(MrgC)高选择性激动剂牛肾上腺素髓质8-22 (BAM8-22)对骨癌痛小鼠痛行为的影响.方法 雄性C3H/HeJ小鼠50只,8～ 10周龄,体重18～22 g,随机分为5组(n=10):假手术Sham组(S组)、癌痛模型组BCP组:分为人工脑脊液对照组(B0组)和BAM8-22组(B1、B2、B3组).BCP组(B0 ～ B3组)小鼠右侧股骨远端骨髓腔接种含有2×105个NCTC 2472纤维肉瘤细胞的20μl α-MEM,建立骨癌痛模型;S组小鼠骨髓腔注入不含NCTC 2472细胞的20μl α-MEM.在接种肿瘤细胞后第14天S组和B0组鞘内注射5μl人工脑脊液,B1～B3组分别鞘内注射溶于人工脑脊液的BAM8-22 0.8 nmol/5μl、2.4 nmol/5μl、8.0 nmol/5μl,连续给药7d,1次/d.各组于首次给药前0.5h及每次给药后2h检测小鼠的自发抬足次数(NSF)、机械性缩足反射阈值(PWMT).结果 与S组[(1.80±0.20)次、(1.87±0.22)g]比较,BCP组接种后7～21 d时NSF[(14.67±2.65)次]显著增多(P=0.000),PWMT[(0.42±0.22)g]显著降低(P=0.002);与B0组[(12.38±1.12)次、(0.48±0.22)g]及14 d给药前[(12.65±1.10)次、(0.46 ±0.19)g]比较,给药后2h,B2[(7.28 ±0.82)次、(1.01±0.13)g]和B3组[(4.18±1.02)次、(1.38±0.12)g]NSF显著减少(P=0.012、0.011、0.001、0.001),PWMT显著增高(P=0.027、0.025、0.013、0.009),且B3组比B2组对痛行为学的改善更显著(P =0.007、0.031);B1组[(12.03±1.22)次、(0.51±0.16)g]给药后痛行为学无明显变化(P =0.096、0.074、0.527、0.474).结论 鞘内注射BAM8-22能够剂量依赖性改善骨癌痛小鼠的痛行为学反应.
作者：孙玉娥；陆翠娥；雷艺珊；顾小萍；马正良 刊期： 2018年第05期
目的 探讨鬼臼毒素纳米制剂的理化性质,通过实验评价其抗人胶质瘤U251细胞的作用.方法 通过透析法制备鬼臼毒素载药聚合物胶团,应用细胞毒性实验、肿瘤细胞摄取实验、6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞凋亡效应评价其疗效.结果 鬼臼毒素聚合物胶团的半数抑制浓度(IC50)值在24、48、72 h时分别为(7.18±0.82)、(5.71±0.18)、(2.57±0.12) μg/ml,明显低于游离鬼臼毒素,细胞摄取率约为游离鬼臼毒素的2倍,鬼臼毒素聚合物胶团作用后的U251细胞有明显的细胞凋亡的形态学改变.结论 鬼臼毒素纳米制剂能够有效抑制人胶质瘤U251细胞的增殖.
作者：王耿焕；沈和平；金成胜；黄嬛；蒋小红；褚正民；王翊飞 刊期： 2018年第05期
目的 观察肝再生磷酸酶(PRL)-1和PRL-3在膀胱尿路上皮癌细胞株中的表达及其在膀胱癌侵袭转移中的作用.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫细胞化学法检测PRL-1和PRL-3在BIU-87和T24细胞株种的表达,采用博伊登室(Boyden chamber)体外侵袭性实验计算BIU-87和T24细胞株穿膜情况.结果 BIU-87和T24细胞株中PRL-1 mRNA的相对表达量分别为0.772±0.037和0.304±0.033,差异有统计学意义(t=20.930,P=0.000);PRL-3 mRNA的相对表达量分别为0.828±0.039和0.298±0.038,差异有统计学意义(=21.494,P=0.000).PRL-1mRNA和PRL-3 mRNA在BIU-87和T24细胞株中的表达均呈正相关(r=0.941、0.997,P=0.017、0.000).BIU-87和T24细胞株中PRL-1蛋白相对表达量分别为7.000±1.870和4.400±1.140,差异有统计学意义(t=2.654,P=0.029);PRL-3蛋白分别为8.200±0.836和5.200±1.303,差异有统计学意义(t =4.330,P=0.003).PRL-1和PRL-3在BIU-87和T24细胞株中的蛋白表达均呈正相关(r=0.958、0.942,P=0.010、0.017).Boyden chamber体外侵袭实验显示,BIU-87细胞株穿越Matrigel膜的细胞数为(148.800±6.418)个,T24细胞株为(102.200±6.340)个,差异有统计学意义(t=11.549,P=0.000).结论 PRL-1和PRL-3膀胱尿路上皮癌细胞株中呈高表达,这可能在膀胱尿路上皮癌侵袭转移中起重要作用.
作者：刘昌伟；许长宝；赵兴华；郝斌 刊期： 2018年第05期
目的 探讨Notch信号通路在肝癌(HCC)细胞侵袭迁移中的作用机制.方法 分别用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测肝癌细胞株HepG2和非肿瘤肝细胞株HL-7702中Snail和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的mRNA和蛋白表达;Westem blot检测NICD蛋白的表达;200 pmol小干扰RNA(siRNA)-Snail和5μmol/L DAPT分别处理HepG2后,RT-PCR和Westem blot 检测Snail和E-cadherin的mRNA和蛋白表达;Transwell小室检测各处理组细胞的侵袭、迁移能力.结果 HepG2中Snail mRNA和蛋白的表达均高于非肿瘤肝细胞株HL-7702(0.11±0.06比0.08±0.02、0.46±0.06比0.21±0.04),差异有统计学意义(P =0.021、0.032),E-cadherin mRNA和蛋白的表达低于HL-7702(0.47±0.11比0.83±0.05、0.17 ±0.03比0.25±0.06),差异有统计学意义(P =0.012、0.004).与siRNA阴性对照组比较,siRNA-Snail组Snail mRNA(0.76±0.13比0.25±0.06,P=0.031)和蛋白(0.81±0.24比0.27 ±0.08,P=0.024)表达显著降低,E-cadherin mRNA(0.33±0.06比0.85±0.18,P=0.015)和蛋白(0.14 ±0.02比0.52 ±0.07,P=0.031)的表达显著上调,细胞侵袭(93.42±12.33比39.66±8.33,P=0.011)、迁移(375.66±65.21比98.52±12.76,P=0.008)能力均明显下降.HepG2中NICD蛋白的表达明显高于HL-7702(0.26±0.04比0.11±0.02),差异有统计学意义(P=0.004).与NT组比较,Notch信号通路特异性γ-分泌酶抑制剂(GSI)抑制剂DAPT能够降低NICD蛋白的表达(0.22±0.05,0.12 ±0.02,P=0.020),说明DAPT能够有效抑制Notch信号通路的活化.DAPT能有效抑制Snail mRNA(0.56±0.08比0.23±0.05,P=0.004)和蛋白(0.72 ±0.06比0.27±0.04,P=0.030)的表达,上调E-cadherin mRNA(0.21±0.03比0.54±0.06,P=0.011)和蛋白(0.32±0.07比0.77 ±0.08,P =0.021)的表达,同时能够抑制肝癌细胞的侵袭(87.33±9.33比32.21 ±6.63,P=0.008)、迁移(384.23±43.33比78.31±9.33,P=0.012).结论 Notch信号通路在肝癌侵袭迁移过程中起重要作用,其作用机制是通过调控Snail/E-cadherin来实现的.
作者：李庆军；周进学；杨楠木；展翔宇；王征征；陈勋；朱瑞利；韩风；黄涛 刊期： 2018年第05期
目的 探讨Nutlin3和JQ1在骨肉瘤细胞中是否具有协同的抗骨肉瘤作用.方法 采用1.0μmol/L Nutlin3单药,0.5μmol/L JQ1单药以及两药联合处理骨肉瘤细胞,通过细胞计数试剂盒(CCK-8)细胞活性检测、协同效应分析、流式细胞仪检测凋亡和Western blot实验,检测Nutlin3 和JQ1两种药物的协同抗骨肉瘤效应,并探讨其分子机制.结果 CCK-8结果显示,在SJSA-1细胞株中,Nutlin3和JQ1单药均能够一定程度的抑制骨肉瘤细胞活性,半数抑制浓度(IC50)值分别为3.7 μmol/L和1.0 μmol/L;但两药联合处理后抗癌效果显著提高,IC50值减低至0.12 μmol/L;采用联合作用指数研究表明在携带有野生型p53的SJSA-1骨肉瘤细胞中CI值为0.18,在p53缺失的Saos-2骨肉瘤细胞中CI值为0.94,表明两个抗癌制剂具有高度协同作用,且这两种新型抗癌制剂的协同作用依赖于p53的活性.流式细胞仪检测凋亡发现1μmol/L Nutlin3和0.5μmol/L JQ1单药分别诱导15％和37％的细胞发生凋亡,两者联合能够诱导80％的细胞发生凋亡,显著高于单药的凋亡作用(P=0.000),表明两者联合能够诱导大量骨肉瘤细胞发生凋亡.Western blot结果显示Nutlin3和JQ1联合应用能够激发半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3高度活化,导致PARP绝大部分裂解,促进了凋亡信号的活化;同时也发现,Nutlin3和JQ1联合应用能够促进p53的表达升高.结论 新型抗癌制剂Nutlin3和JQ1具有明显的协同抗骨肉瘤作用,这种协同作用具有p53依赖性.
作者：张翼；时程程；张华鹏；王海涛；殷力 刊期： 2018年第05期
目的 建立并经鉴定可用来监测贴壁细胞生长和细胞染色过程的基于芯片组装而成的无透镜显微镜组件系统.方法 通过将样本放在一个厚1 μm Si3N4基层在一个5兆像素、CMOS成像元件平面和2.2μm像素尺寸的MEMS巢式芯片上.采用样品与成像元件平面间的距离的变化,使直径≥15 μm的细胞成像.这套组件被用以培养和监测胆管癌细胞TFK-1的生长形态(2 d),并监测细胞的色素染色.结果 TFK-1细胞在培养0、24、48 h后,经组件拍摄的TFK-1细胞生长及细胞染色过程图像无论是静止细胞,还是成三角状伸展的细胞边缘影像,与4×物镜放大倍数的显微镜成像质量相当.结论 这套手提式的、经济方便的无透镜成像组件很适合用以集成一套基于细胞研究的芯片实验室系统.
作者：张剑；张伟；杨杰；邹声泉；王兵 刊期： 2018年第05期
目的 观察表皮生长因子(EGF)联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对胃癌裸鼠移植瘤的疗效,探讨其作用机制.方法 建立裸鼠胃癌SGC7901细胞株移植瘤模型.分为对照组、EGF组、化疗组及EGF+化疗组.观察比较各组成瘤及肿瘤抑制率,检测各组细胞核增殖抗原(Ki-67)的表达及肿瘤干细胞标志物CD133阳性细胞比例.结果 EGF+化疗组肿瘤抑制率明显高于化疗组,肿瘤抑制率分别为70.9％与44.0％,EGF+化疗组与化疗组肿瘤Ki-67表达分别为(44.58±8.38)％和(35.25±4.67)％,EGF+化疗组处于增殖期的肿瘤细胞增加,EGF+化疗组肿瘤干细胞标志物阳性比例明显高于化疗组,分别为(7.34±0.92)％和(4.21±0.65)％.联合治疗组与对照组及化疗组比较差异均有统计学意义(P =0.000、0.039、0.011).结论 EGF可增强5-Fu对胃癌细胞的敏感性.机制可能与EGF诱导处于静止期肿瘤细胞增殖相关.
作者：蔡威；王辉；滕莉；韩亮；何承志；程勇；王智辉；黄开禹；王向阳 刊期： 2018年第05期
目的 观察过表达细胞周期蛋白依赖性激酶2A(CDKN2A)基因对食管鳞癌细胞株TE-13增殖、迁移能力的影响.方法 采用脂质体转染法将已构建好的PcDNA3.1_CDNK2A及空载体质粒PcDNA3.1_neo分别转染人食管癌细胞TE-13,分为实验组(PcDNA3.1_CDNK2A_ TE-13),阴性对照组(PcDNA3.1_neo-TE-13)及空白对照组(只添加转染试剂).采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染前后CDKN2A mRNA表达水平;应用噻唑蓝(MTT)法检测转染后细胞的增殖能力;采用Transwell实验检测细胞的迁移能力.结果 实验组、阴性对照组及空白对照组CDNK2A mRNA相对表达水平分别为0.45 ±0.10、0.48±0.12及2.12±0.24,实验组显著高于阴性对照和空白对照组(F=200.500,P=0.000).实验组、阴性对照组及空白对照组吸光度值分别为0.71 ±0.08、1.05±0.09和0.97±0.08,差异有统计学意义(F=27.220,P=0.000).Tanswell结果显示实验组、阴性对照组及空白对照组穿过生物膜细胞分别为(156.8±23.1)、(166.9 ±28.4)和(162.1 ±30.3)个,差异无统计学意义(F=0.200,p=0.818).结论 CDKN2A基因表达能够显著抑制食管癌细胞的增殖,但对其迁移能力无明显影响.
作者：魏伦收；姚坤厚；索智敏；苏红 刊期： 2018年第05期
目的 观察核因子IA (NFIA)在胶质瘤中的表达及对胶质瘤生物学功能的影响.方法 采用免疫组织化学法检测49例胶质瘤组织和10例正常脑组织中NFIA的表达.使用RNA干扰技术处理胶质瘤U251细胞,采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和Western blot检测NFIA表达水平的变化,分别采用噻唑蓝法(MTT)、划痕实验及Transwell侵袭实验,检测敲低NFIA表达对胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的变化;Western blot检测相关蛋白表达变化.结果 免疫组织化学检测结果显示NFIA在胶质瘤组织中的表达明显高于正常脑组织.下调胶质瘤细胞中NFIA表达后:MTT实验显示阴性对照组(1.367 ±0.021)与空白对照组(1.330 ±0.046)细胞生长差异无统计学意义(P=0.500),NFIA干扰组(0.823±0.096)细胞生长明显减慢,与阴性对照组与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P=0.001).划痕实验显示NFIA干扰组细胞迁移距离(57.9±6.9) μm明显低于阴性对照组[(125.4±10.7) μm]和空白对照组[(111.5±5.9)μm],差异有统计学意义(P=0.001),Transwell实验显示RNA干扰组穿膜细胞数[(33.3±3.2)个]低于阴性对照组和空白对照组[(80.3±4.5)、(87.7±5.0)个],差异有统计学意义(P =0.001).Western blot结果显示,NFIA干扰组Ezrin蛋白相对表达(0.33 ±0.05)显著低于阴性对照组(1.08±0.08)与空白对照组(1.00±0.05),p21蛋白相对表达(1.02±0.08)显著低于阴性对照组(0.25±0.04)与空白对照组(0.29±0.03),差异均有统计学意义(P=0.001).结论 NFIA在胶质瘤组织中高表达,下调NFIA表达可抑制胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力.
作者：葛瑞祥；盛莉莉；沈军；江海波；钱冬喜；徐小琳；毛捷 刊期： 2018年第05期
本研究旨在观察载脂蛋白M(ApoM)在炎性反应中的作用.一、方法取野生型ApoM(ApoM+/+)及敲除型ApoM(ApoM-/-)小鼠腹腔注射生理盐水或脂多糖(LPS)处理1h,提取肝脏总RNA;采用磷酸盐缓冲液(PBS)或肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理ApoM过表达的EA.hy926细胞3h,提取总RNA,检测其24-脱氢胆固醇还原酶(DHCR24)及白细胞介素-1β(IL-1β)表达.数据用t检验及双因素方差分析,以P＜0.05为差异有统计学意义.
作者：王敏；罗光华；张晓膺 刊期： 2018年第05期
目的 探讨术前外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)和单核细胞与淋巴细胞比值(MLR)对胶质母细胞瘤患者临床预后的影响.方法 共纳入经术后病理证实的初发胶质母细胞瘤患者200例,收集其临床资料及生存资料.采用Kaplan-Meier法分析1年和3年生存率,用Log-rank进行单因素生存分析.Cox模型比例风险评估行多因素分析.结果 高NLR组(NLR＞7.25)的总生存率(OS)和无进展生存率(PFS)(11.2个月和8.8个月)均低于低NLR组(14.7个月和12.3个月),两组差异有统计学意义(OS:P=0.027;PFS:P=0.030),MLR对胶质母细胞瘤患者临床预后差异无统计学意义(OS:P =0.082;PFS:P =0.063).单因素分析结果显示:肿瘤是否全切(OS:P =0.000;PFS:P =0.000)、术后是否放疗(OS:P =0.000;PFS:P =0.000)、术后是否化疗(OS:P =0.000;PFS:P =0.001)是影响胶质母细胞瘤患者临床预后的因素.多因素分析结果示:肿瘤未全切(OS:P=0.000;PFS:P=0.000)、术后未放疗(OS:P=0.011;PFS:P=0.010)及NLR＞ 7.25(OS:P =0.048;PFS:P =0.036)是影响胶质母细胞瘤患者临床预后的独立危险因素.结论 高的NLR预示着较差的临床预后;MLR对胶质母细胞瘤患者的临床预后无预测价值.
作者：白亚辉；张振宇；湛允波；刘宇；翟广 刊期： 2018年第05期
目的 观察美托洛尔对脓毒症大鼠血清肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核凶子-κB(NF-κB)的影响.方法 选取雄性SD大鼠40只,根据数字表随机分组法分为美托洛尔组(n=10)、模型组(n=10)、假手术组(n=10)、正常对照组(n=10),除正常对照组不给予建立脓毒症模型处理外,其余3组均给予盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症模型处理,假手术组开腹后不做任何处理,模型组制模后经尾静脉注射生理盐水,美托洛尔组于制模后2h经大鼠尾静脉以0.2 mg/(kg·h)速度给予冲击量0.05 mg的美托洛尔至CLP5 h.并分别于术后3、12、24h采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定4组大鼠血清cTnⅠ及TNF-α水平,采用免疫组织化学半定量法对NF-κB的变化情况进行观察,并取心肌组织制作病理切片观察各组大鼠心肌超微结构病理学的变化.结果 术后24 h,假手术组与正常对照组的cTnⅠ、TNF-α及NF-κB水平比较差异无统计学意义(P=0.058、0.124、0.063);美托洛尔组的cTnⅠ、TNF-α及NF-κB水平分别为(0.43 ±0.18) ng/ml、(18.29±2.13) pg/ml、(43.28 ±2.49) μg/ml,模型组为(0.68 ±0.14) ng/ml、(20.32 ±2.16) pg/ml、(51.37±2.61) μg/ml,与假手术组的(0.12 ±0.04) ng/ml、(5.54±1.17) pg/ml、(12.43±1.53) μg/ml,正常对照组的(0.10 ±0.01) ng/ml、(5.21±1.12) pg/ml、(11.38±1.65) μg/ml比较明显升高,但美托洛尔组cTnⅠ、TNF-α及NF-κB水平较模型组降低(P =0.042、0.056、0.003);且美托洛尔组中血清cTnⅠ与血清TNF-α呈正相关(r=0.895,P=0.000),血清cTnⅠ与血清NF-κB呈正相关(r=0.921,P=0.000);病理切片观察正常对照组与假手术组心肌超微结构未见明显异常,模型组心肌超微结构变化明显异常,而美托洛尔组心肌超微结构轻度变化.结论 美托洛尔作为一种β受体阻断药,对脓毒症大鼠具有减轻心肌损伤作用,其可能是由美托洛尔抑制大鼠血清中cTnⅠ、TNF-α及NF-κB的水平来实现的.
作者：叶发民；张静；孙荣青；李江；郭素萍；肖文涛；曹雪明；屈永生 刊期： 2018年第05期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
