程少文;应晓洲;安涛;赵志蓉;周英勇;彭磊
目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对膀胱癌T24细胞生长和裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制.方法 应用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测不同剂量As2O3(1、5、10 μmol/L)和5-氟尿嘧啶(5-Fu,4 μmol/L)对膀胱癌T24细胞生长的体外抑制作用;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测不同剂量As2O3(1、5、10μmol/L)和5-Fu(4μmol/L)作用后膀胱癌T24细胞细胞周期素(Cyclin) D1、p2l、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)表达;观察不同剂量As2O3对[10、20、30 mg/(kg·d)]和5-Fu[20.0 mg/(kg·d)]对T24细胞裸鼠移植瘤生长的体内抑制作用.结果 膀胱癌T24细胞给药48 h后,As2O3低(1μmol/L)、中(5μmol/L)、高(10 μmol/L)剂量组和5-Fu(4μmol/L)细胞抑制率分别为36.53%、67.44%、79.60%和80.90%.荷瘤裸鼠治疗实验以生理盐水组为对照,5-Fu,As2O3低、中、高剂量组的体内抑瘤率分别为54.5%、29.4%、38.8%、52.1%,说明As2O3对裸鼠T24细胞移植瘤的生长有抑制作用.RT-PCR及Western blot结果发现药物作用24 h后,不同剂量(1、5、10 μmol/L)As2 O3均明显降低Cyclin D1和bcl-2表达,p21水平未发生变化,bax表达明显上调.结论 As2O3能明显抑制膀胱癌T24细胞的增殖和裸鼠移植瘤的生长,其作用机制可能与影响细胞周期以及诱导细胞凋亡有关,其中涉及多种基因的调控.
作者:张士龙;东辛欣;武小强;陈国晓;张祥生;单磊 刊期: 2015年第03期
目前对于细胞、单一组织的深低温冷冻保存技术已经非常成熟并已进入临床应用[1],但对于复合组织仅成活远远不够,后期的感觉、运动功能的恢复更为重要,我们通过不同方法复温深低温冷冻的兔离断肢体,对比其神经纤维的组织学变化和施旺细胞活性.
作者:朱泽兴;张树明;赵艳东;樊凯彬;赵永军;李鸿江;李波;乔林 刊期: 2015年第03期
微小RNA(miRNA,miR)是一类内源性的非编码小分子RNA,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用[1].本研究旨在检测miR-19b在骨肉瘤组织中的表达,探讨其在骨肉瘤发生发展中的作用及临床意义.
作者:李祥;王敏;叶湛;王发圣;林金銮;林建华 刊期: 2015年第03期
目的 探讨脑膜瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,及其与血管新生及瘤周水肿(PTBE)的关系.方法 选取神经外科手术切除并经病理检查证实的人脑膜瘤液氮冻存标本84例,其中有瘤周水肿48例(水肿组),无水肿36例(非水肿组).另外取10例同期本院因颅脑外伤行标准骨瓣减压术的正常脑组织作为对照组.免疫组织化学及Western blot检测组织中VEGF的蛋白表达,通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测VEGF mRNA表达;免疫组织化学染色检测标本中CD34的表达并判定微血管密度(MVD),计算瘤周水肿指数(EI),并分析其与VEGF表达的相关性.结果 水肿组、非水肿组及对照组脑组织中VEGF蛋白表达量不同,分别为1.892 ±0.214、1.168 ±0.218、0.683±0.197,差异有统计学意义(P<0.05);水肿组、非水肿组及对照组脑组织中VEGF mRNA的表达量分别为1.232±0.257、1.002 ±0.132、0.702±0.198,差异有统计学意义(P<0.05).两两比较水肿组、非水肿组及对照组脑组织中MVD、VEGF蛋白和mRNA表达依次降低,差异有统计学意义(P<0.05);水肿组VEGF蛋白的表达与MVD及EI呈正相关(r=0.675、0.635,P<0.05).结论 脑膜瘤组织中VEGF的表达增加,可促进脑膜瘤新血管生成,影响PTBE的形成.
作者:赵卫平;陈谦学 刊期: 2015年第03期
目的 观察荷载肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体基因的溶瘤腺病毒ZD55-肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(TRAIL)联合吉西他滨(Gemcitabine)对膀胱癌T24细胞移植瘤的抑制作用.方法 T24细胞以2×106个(0.2 ml)接种于裸鼠右腋皮下,建立裸鼠膀胱癌T24细胞移植瘤模型,分别给予ZD55-TRAIL[转染倍数(MOI)=10]联合Gemcitabine(4.0g/L)、ZD55-TRAIL(MOI=10)、Gemcitabine(4.0 g/L)、磷酸盐缓冲液(PBS)各10μl连续瘤体内注射3d.每周测量裸鼠肿瘤生长体积,免疫组织化学法检测T24细胞移植瘤组织TRAIL、早期区1A基因(E1A)蛋白表达,原位末端标记法(TUNEL)检测移植瘤细胞凋亡.结果 ZD55-TRAIL联合Gemcitabine能显著抑制肿瘤的生长,干预9周后ZD55-TRAIL联合Gemcitabine、ZD55-TRAIL、Gemcitabine、PBS处理组肿瘤平均体积分别为(129.0±8.3)、(1760.6±83.3)、(1 129.3±73.2)、(2 501.0±221.8) mm3,各组差异有统计学意义(P<0.01).免疫组织化学表明,ZD55-TRAIL联合Gemcitabine高效表达TRAIL、E1A蛋白.TUNEL表明:ZD55-TRAIL联合Gemcitabine、ZD55-TRAIL、Gemcitabine、PBS处理组细胞凋亡率分别为(85.8±5.6)%、(61.4±3.8)%、(44.0±3.8)%、(15.8±3.2)%,表明ZD55-TRAIL联合Gemcitabine能有效诱导肿瘤细胞凋亡.结论 ZD55-TRAIL联合Gemcitabine可协同抑制膀胱癌T24细胞移植瘤的生长.
作者:孙方浩;毛立军;魏晋;陈伟;娄禄;陈家存 刊期: 2015年第03期
目的 检测非小细胞肺癌(NSCLC)及癌旁组织中微小RNA(miRNA,miR)-1260b的表达,探讨miR-1260b在肺癌发生发展中的临床意义.方法 收集非小细胞肺癌组织和癌旁组织,通过miRNA芯片筛选出癌组织和癌旁组织之间的差异表达的miRNA,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)进行扩大样本检测,验证差异miRNA在肺癌组织和癌旁组织的表达.结果 通过miRNA芯片实验筛选出差异表达的miRNA经扩大样本验证,采用循环阈值(ΔCt)对miR-1260b在肺癌和配对癌旁组织中的表达水平进行定量分析,ΔCt值分别为10.04±1.43和10.97±1.17;与对应的癌旁组织比较,82.2%的病例中miR-1260b表达升高(2-ΔΔCt值>1),只有18.8%的病例显示miR-1260b在肺癌组织的表达下降(2-ΔΔCt值<1),差异有统计学意义(P<0.05).此外,肺癌组织中miR-1260b的表达水平与患者年龄,性别、肿瘤分化程度和临床分期无明显正相关.结论 miR-1260b在非小细胞肺癌组织的表达水平高于对应的癌旁组织,可能与非小细胞肺癌的发生发展相关.
作者:李静;李丽琴;许丽敏;沈琦斌;李鸿伟;平金良;马志红;钟婧;黄惠莲 刊期: 2015年第03期
目的 检测大肿瘤抑制基因1(LATS1)在人胃腺癌组织的表达,探讨LATS1过表达对胃癌细胞增殖和转移的作用及其分子机制.方法 免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测LATS1在30例人胃腺癌及癌旁组织的表达.利用慢病毒载体构建稳定过表达LATS1的胃癌SGC-7901细胞株,Western blot检测LATS1、增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平.噻唑蓝(MTT)法和Transwell实验检测LATS1过表达对胃癌细胞增殖和转移的影响.结果 与癌旁组织(1.53±0.63)比较,LATS1 mRNA在胃腺癌的表达量约为0.41±0.12,其蛋白在胃腺癌组织的阳性表达较低(30.0%比60.0%,P<0.05).体外实验显示,LATS1上调表达能减少PCNA和MMP-2蛋白的表达,并抑制胃癌细胞增殖活性.与对照组[(90.25±10.33)个]和空载组[(87.20±8.40)个]穿过小室的细胞数比较,LATS1组胃癌侵袭转移细胞数[(43.33±6.33)个]明显减少(P<0.01).结论 LATS1在人胃腺癌组织低表达,其过表达能抑制胃癌细胞的增殖和侵袭潜能.
作者:陆雯雯;张靖;张瑞;夏丽琼;朱金水 刊期: 2015年第03期
目的 探讨细胞色素B在胃癌发生发展中的作用.方法 收集经病理证实为胃癌的手术患者12例胃癌组织,其中淋巴结转移标本6例,无淋巴结转移标本6例.应用Western blot检测两组胃癌组织凋亡相关因子B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)的表达水平,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白表达水平.结果 与无转移组比较,有转移的胃癌组织中促凋亡因子bax表达降低(有转移组∶无转移组=0.55∶1.00,P<0.05),而抑制凋亡因子bcl-2表达增加(有转移组∶无转移组=1.32∶1.00,P<0.05),细胞凋亡水平下降(活化的Caspase-3表达有转移组∶无转移组=2.86∶3.35,P<0.05);有转移的胃癌组织MAPK通路活化水平明显较无转移组降低(P<0.05).结论 胃癌转移与线粒体细胞色素B表达水平下降,从而抑制MAPK通路磷酸化,导致细胞凋亡减少有关.
作者:鲁力;熊治国;柳玉均;叶啟发 刊期: 2015年第03期
胃癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤,幽门螺旋杆菌(H.pylori)感染与胃癌密切相关,早在1994年H.pylori就被国际抗癌联盟列为Ⅰ类致癌物[1].微小RNA(miRNA,miR)在多种疾病中扮演着重要角色,尤其在肿瘤发生发展中的作用机制已成为当前研究的热点[2].现对miRNA在H.pylori相关胃癌中的作用进行综述.
作者:魏育才;郭继武;张磊;李玉民 刊期: 2015年第03期
目的 探讨肝癌患者血清及癌组织中微小RNA(miRNA,miR)-200a表达及与预后的关系.方法 选取郑州人民医院及郑州大学附属肿瘤医院肝胆外科行手术治疗的肝细胞肝癌患者95例,利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)技术检测肝癌患者血清及肿瘤组织中miR-200a表达,并分析miR-200a表达与临床病理特征及患者预后的关系.结果 肝癌患者血清中miR-200a相对表达量为4.57±1.36,低于对照组的5.98±0.62,差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者正常肝组织、癌旁组织及肝癌组织中miR-200a表达量分别为2.67 ±0.31、1.73±0.15和0.68 ±0.11,差异有统计学意义(P<0.05),两两比较,miR-200a表达量:肝癌组织<癌旁组织<正常肝组织,差异均有统计学意义(P<0.05);肝癌患者血清中miR-200a表达量与甲胎蛋白(AFP)水平、分化程度、是否转移、TNM分期有关(P<0.05),肝癌患者肝癌组织中miR-200a表达量与分化程度和是否转移有关(P<0.05);高表达组5年累积生存率为63.7%,低表达组5年累积生存率为41.9%,高表达组患者术后生存明显好于低表达组患者(x2 =4.711,P<0.05).结论 miR-200a在肝癌患者血清和肝癌组织中均呈低表达,是重要的抑癌基因,与肿瘤恶性程度密切相关,并可影响患者预后.
作者:龚哲;尚闯;单国用;刘兴安 刊期: 2015年第03期
目的 观察脑创伤后抗凋亡因子生存素(Survivin)的表达变化及其与内源性神经再生的相关性,探讨Survivin蛋白在促进创伤后内源性神经再生中的作用及其机制.方法 健康成年雄性C57BL/6小鼠80只,随机分为假手术组和创伤组(TBI组).在创伤(或假手术)后的12 h,1、2、5、7、14 d(n=6)取打击(或假手术)侧的海马,进行Western blot分析.进一步用免疫荧光双染的方法观察Survivin在不同类型细胞的表达(n=4).结果 Survivin蛋白在创伤后1d表达开始增高(42 003.15,P<0.05),2d时到达高峰(90 403.34,P<0.01),持续至第7天开始下降.小鼠打击侧海马齿状回颗粒细胞下层的Survivin+、溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU+)和双皮质素(DCX+)细胞均明显增加;绝大多数的Survivin+细胞呈现BrdU+,一部分Survivin+细胞呈现DCX+.结论 脑创伤后Survivin基因被激活,蛋白表达量明显增高;Survivin蛋白在受伤侧海马的神经干细胞和未成熟神经元中呈现高表达,与神经源性细胞的增殖有相关性.
作者:张琳;颜荣;刘晓智;赵玉军;陈镭 刊期: 2015年第03期
白发作为临床常见的一种毛发色素障碍性疾病,虽不会引起严重躯体机能障碍,但对患者的外貌、自信心和社会认同度有极大的负面影响.临床中为常见的白发类型是老年性白发和过早性白发[1],其发病机制尚未完全清楚.现就白发发生机制的研究进展进行综述.
作者:陈超越;苗勇;胡志奇 刊期: 2015年第03期
胆道系统的解剖变异是导致腹腔镜胆囊切除术(LC)胆管损伤、术中术后胆漏等并发症的重要原因.了解胆囊位置的解剖变异、熟悉胆囊管与肝总管的汇合方式、掌握与之相适应的手术技巧,无疑对提高LC手术质量、防止手术并发症具有重要意义.现将2000年以来我院13例异位胆囊患者的临床资料及处理经验报道如下.
作者:陶桢;夏国兵;裴斐 刊期: 2015年第03期
目的 观察褪黑素对人增生性瘢痕成纤维细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 组织块法分离培养原代人增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB),取第4代细胞分成4组:对照组、褪黑素(Melatonin) 10-3mmol/L组、褪黑素受体拮抗剂(Luzindole)1mmol/L组、Luzindole1 mmol/L+ Melatonin 10-3 mmol/L组,分组培养48 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR,SYBR Green)检测细胞裂解液CTGF、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA表达;细胞爬片免疫荧光细胞化学方法分析CTGF、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)含量;酶联免疫吸咐试验(ELISA)法检测细胞培养液CTGF、COL-Ⅰ、Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)含量.结果 10-3 mmol/L褪黑素降低增生性瘢痕成纤维细胞CTGF、α-SMA mRNA表达及CTGF、COL-Ⅰ的含量(P<0.05),但COL-Ⅲ没影响.对照组、褪黑素组、Luzindole组、Luzindole+褪黑素组CTGF和α-SMA mRNA分别为0.1294±0.006 1、0.086 9±0.003 1、0.1235±0.008 1、0.123 2±0.0094(F=30.130,P <0.01)和0.1347 ±0.0042、0.0847±0.003 1、0.128 9±0.002 6、0.128 2±0.004 1 (F=168.500,P<0.01);CTGF和COL-Ⅰ荧光细胞化学相对表达量为0.0135±0.0003、0.0084±0.0003、0.0126±0.0005、0.012 5±0.0004 (F=140.750,P <0.01)和0.0127±0.0008、0.0086±0.0004、0.0120±0.0009、0.0120±0.000 8(F=24.240,P<0.01);CTGF和COL-Ⅰ细胞培养液浓度(ng/L)为30.0569±1.2869、19.4254±0.924 5、26.673 8±0.9405、25.398 0±0.8478 (F=76.490,P< 0.01)和30.0445±1.1575、21.798 5±1.1260、26.5168±1.2923、25.459 4±1.705 7 (F=25.650,P< 0.01);COL-Ⅲ细胞培养液浓度(ng/L)为47.141 4±3.532 6、53.498 2±4.589 9、52.532 5±5.239 8、46.427 1±4.204 2(F=2.680,P<0.01).结论 褪黑素通过与受体结合,下调增生性瘢痕成纤维细胞CTGF、α-SMA mRNA表达,从而降低CTGF、COL-Ⅰ的含量.
作者:戴丽冰;谢有富;姚依村;刘思隽;徐家科;刘志河;沈雁 刊期: 2015年第03期
目的 观察在人甲状腺癌组织中是否存在具有干细胞特性的侧群(SP)细胞,同时比较SP细胞和非SP细胞在干细胞标志物Oct-4、三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)中的表达差异.方法 采用流式细胞分选技术分选出人甲状腺癌SP细胞和非SP细胞,采用Western blot来检测SP细胞和非SP细胞在Oct-4、ABCG2表达方面的差异.结果 人甲状腺癌中存在着具有干细胞潜能的SP细胞,实验组(未加入维拉帕米)分选出SP细胞含量为1.40%,对照组(加入维拉帕米)分选SP细胞含量为0.16%,差异有统计学意义(P<0.05).同时SP细胞高表达干细胞标志物Oct-4及ABCG2.结论 人甲状腺癌的起源与肿瘤干细胞密切相关,并且在甲状腺癌细胞株中存在着具有干细胞特性的甲状腺癌SP细胞.
作者:谭灿亮;黄晓萍;肖刚;李宁磊;于晓园;刘立新 刊期: 2015年第03期
目的 探讨瘦素(Leptin)基因-2 548 G/A多态性位点与非小细胞肺癌易感性及预后的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测162例非小细胞肺癌和200例正常者的基因型,收集整理病例的临床病理及预后资料,并进行统计学分析.结果 瘦素基因-2 548 G/A位点实验组中AA、GA基因型及A等位基因频率(AA:35.2%;GA:46.3%;A:58.3%)均分别高于对照组(AA:16.5%;GA:40.0%;A:41.7%),差异有统计学意义[比值比(OR)=5.009,95%可信区间(CI):2.758 ~9.097,P<0.01;OR=2.719,95% CI:1.615~4.578,P<0.01;OR=2.436,95% CI:1.804 ~ 3.289,P<0.01].Ⅲ+Ⅳ期的非小细胞肺癌中基因型为GA+AA的频率(58.3%)明显高于GG基因型(33.3%),同样在淋巴结转移患者中基因型为GA+ AA的频率(62.1%)明显高于GG基因型(40.0%),差异均有统计学意义(P<0.05).基因型为GA+ AA患者生存期[(37.7±1.1)个月]明显差于AA型患者[(45.9±2.9)个月],差异有统计学意义(x2=8.215,P<0.01).结论 瘦素基因-2 548 G/A多态性可能与非小细胞肺癌易感性有关,并且可能是非小细胞肺癌的不良预后因子.
作者:曹凤军;万国兴;俞远东;喻雄杰;狄全书;雷金华;邓守恒;陈萍 刊期: 2015年第03期
目的 探讨食管癌相关基因4(ECRG4)在食管癌中的抑癌功能及其机制.方法 构建ECRG4基因表达质粒pcDNA3.1-ECRG4,筛选ECRG4稳定转染细胞株.通过细胞增殖曲线和裸鼠移植瘤实验检测ECRG4过表达对食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠成瘤能力的影响;流式细胞仪检测ECRG4过表达对食管癌细胞细胞周期的影响;Western blot检测食管癌细胞中ECRG4过表达,细胞周期调控基因p53和p21蛋白表达的变化.结果 ECRG4基因过表达,食管癌细胞体外增殖和体内裸鼠移植瘤生长减缓,体内肿瘤生长抑制率为48.5%,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05);ECRG4基因过表达诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞,和空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);ECRG4基因过表达,导致食管癌细胞中p53和p21蛋白表达增加,与空载质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 ECRG4通过p53通路诱导食管癌细胞细胞周期G1期阻滞.
作者:李晓燕;李林蔚;王文玉;高天慧;周云 刊期: 2015年第03期
目的 观察阿苯达唑(ABZ)壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)治疗感染多房棘球蚴小鼠的效果.方法 建立继发性感染多房棘球蚴小鼠模型,接种12周后将小鼠随机分为4组:阿苯达唑壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)组,阿苯达唑乳剂(ABZ-E)组,阿苯达唑片剂(ABZ-T)组,模型对照组,前3组小鼠均以75 mg/kg体质量的相应药物经口灌胃给药,模型对照组给予0.2ml生理盐水,每周3次,连续给药10周后,观察以下指标:(1)小鼠肝脏大体形态,称量囊湿重并计算抑囊率;(2)病理组织学观察;(3)高效液相色谱法(HPLC)测定小鼠血浆及肝组织匀浆中阿苯达唑亚砜(ABZ-SX)的浓度.结果 ABZ-CS-MPs治疗泡球蚴组织(E.m)明显钙化.各治疗组囊湿重分别为(0.114±0.030)、(0.247±0.086)、(0.582±0.145)g,与模型对照组的(1.273±0.198)g比较差异均有统计学意义(P<0.05).ABZ-CS-MPs抑制泡球蚴生长作用显著优于ABZ-E、ABZ-T组,3组抑囊率分别为:91.04%、80.60%、54.28%.苏木素-伊红(HE)染色显示:各组泡球蚴(E.m)组织有不同程度的变性,坏死,其中ABZ-CS-MPs组对E.m角质层及生发层损伤比其他治疗组严重.HPLC法结果显示:ABZ-CS-MPs组血浆及肝脏ABZ-SX浓度在各治疗组中高,与ABZ-T组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 经口灌胃ABZ-CS-MPs对小鼠泡球蚴有明显抑制作用,壳聚糖微球促进ABZ的经肠吸收,提高其血浆、肝脏药物浓度.
作者:阿卜来海提·麦提色依提;乔雷;王新春;吴向未;阿杜瓦一;孙红;彭心宇 刊期: 2015年第03期
目的 探讨影响尿道下裂预后的相关因素,比较各因素对手术成功率的影响.方法 分析我院收治276例尿道下裂患者的临床资料,统计患者的年龄、Duckett分型、阴茎下曲程度、是否首次手术、尿道皮瓣来源、手术分期、是否膀胱造瘘、术后留置尿管时间、手术时期、缝合方式、是否合并其他疾病、术者经验等进行资料收集,先对相关数据进行单因素分析,再进行Logistic回归分析.结果 单因素分析结果表明:Duckett分型(t=7.326,P<0.05)、阴茎下曲程度(t=6.107,P<0.05)、手术时期(t=3.639,P<0.05)、术者经验(t=3.154,P<0.05)是影响尿道下裂术后成功率的因素;多因素分析表明,Duckett分型是尿道下裂术后发生的独立危险因素[比值比(OR) =2.017,P<0.05].结论 Duckett分型是影响尿道下裂术后成功率的独立危险因素.
作者:周昆;李胜云;田静静 刊期: 2015年第03期
经肝动脉灌注化疗栓塞术(TACE)是原发性肝癌中晚期治疗应用广的一种姑息性方法[1-2].我们通过观察TACE前后肝功能的动态变化,探讨其与术后生存率的关系.
作者:戚诚;赵晓东;闫长青;刘博 刊期: 2015年第03期