陈晓鹏;刘颖斌;彭淑牖;史良会
目的观察3种半离体体外肝手术方式对肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 SD大鼠随机分为对照组(A组)、单纯离断肝下下腔静脉手术组(B组)、单纯离断肝上下腔静脉手术组(C组)和联合离断肝上、肝下下腔静脉手术组(D组),每组各10只,手术后4、24 h分组收集血清和肝组织,分别进行血清谷丙转氨酶(ALT)监测、病理切片、免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测.结果 ALT随各组手术复杂程度和再灌注时间的增加而升高;病理切片见各手术组肝脏炎症反应随手术复杂程度和再灌注时间的增加而有所加重;B组术后4和24 h肝组织中过氧化物酶体增殖激活受体(PPAR)α的表达无明显变化,但术后24 h原癌基因B淋巴瘤-xL(bcl-xL)的表达强;C、D组肝组织术后4 h PPARα和bcl-xL的表达增加,术后24 h PPARα的表达明显强于4 h组,而bcl-xL的表达较4 h明显下降.结论 PPARα和bcl-xL参与体外肝手术后肝组织缺血再灌注损伤,两者的表达在一定程度上反应了肝细胞受损的程度.B组手术方式简单、对肝脏的损伤较小;C、D两组手术复杂,对肝组织的再灌注损伤较重.
作者:汪谦;李湘竑;侯景辉;陈俊任 刊期: 2005年第08期
目的探讨乙酰肝素酶(HPSE)mRNA在膀胱癌中的表达及其与肿瘤临床病理特征和血管生成的关系.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测42例膀胱癌及16例癌旁组织中HPSE mRNA的表达,应用免疫组织化学法检测膀胱癌组织的微血管密度(MVD),结合患者临床病理指标及预后进行分析.结果 42例膀胱癌中,HPSE mRNA阳性23例(54.8%),16例癌旁组织中表达阳性者2例(12.5%),两组差异有统计学意义(P<0.01);HPSE mRNA的表达与膀胱癌的病理分级、临床分期、肿瘤大小及淋巴结转移有相关性(P<0.05);术后生存3年以下者HPSE mRNA的表达阳性率87.5%,明显高于生存3年以上者之46.9%(P<0.05);HPSE mRNA表达阳性者MVD值为90.8±13.6,表达阴性者肿瘤MVD计数均值为65.8±6.6,两组差异有统计学意义(P<0.01).结论 HPSE在膀胱癌的生长浸润、侵袭转移和血管生成中发挥重要作用,可作为判断膀胱癌生物学行为和预后的客观指标.
作者:赵勇;金讯波;吕家驹;孙鹏;王慕文;蒋绍博 刊期: 2005年第08期
人Survivin 基因是经效应细胞蛋白酶受体(EPR-1)cDNA在人类基因组库的杂交筛选中分离出来的,因其具有抑制细胞凋亡和调节细胞有丝分裂的双重生物学特性受到关注[1,2].我们以Survivin SAO转染C6胶质瘤细胞,进一步观察对其bcl-2和bax 的影响及其相关性.
作者:赵启忠;王运杰 刊期: 2005年第08期
目的评价微创张力带固定法治疗横断型髌骨骨折的生物力学稳定性及牢固性.方法保留胫骨、股骨及完整膝关节新鲜成人尸体膝关节标本.制作髌骨横断骨折模型,采用微创或开放手术的张力带固定.膝关节屈曲36°位固定胫骨及股骨端将标本安装在MTS实验机上,通过牵拉股四头肌来拉伸和疲劳循环载荷来测试固定的稳定性.用线性传感器测量骨折分离距离,大于1 mm为固定失败.结果所有固定在500 N外加拉力作用下骨折分离距离均小于1 mm,大于固定后即可活动所需小294 N的限度.微创和开放手术在即时和疲劳后的生物力学差异无统计学意义(p>0.05).空心钉张力带的稳定性好(P<0.05).结论根据生物力学原则,微创张力带固定法治疗髌骨骨折能够满足骨折愈合所需的稳定性,允许骨折固定后即可活动和功能锻炼.
作者:李健;颜登鲁;张在恒;谭平先;赵卫东 刊期: 2005年第08期
目的尝试利用质谱技术对肝癌细胞表面自然呈递的MAGE-3表位进行检测和分析.方法肝癌细胞和肝细胞取自同1名男性肝癌患者,弱酸洗涤法分离肝癌细胞和癌旁无瘤肝细胞表面所有肽段;利用表位预测法挑选出HLA-A2限制的MAGE-3理论侯选肽;检测MAGE-3 mRNA的表达;肽混合物进行高压液相纯化分离和差异比较;筛选出含有肿瘤特异肽的组分进行串联质谱检定和定量分析;后检测患者体内是否有针对该表位的T细胞反应.结果 MAGE-3在肝癌细胞样品中表达阳性,在肝细胞中阴性;随后从肝癌细胞样品中检测出自然呈递的MAGE-3271-279表位抗原肽:FLWGPRALV(38-39拷贝/细胞),并从患者外周血中检测出针对该表位的特异性T细胞反应.结论本实验从肿瘤组织中检测出自然呈递的MAGE-3271-279表位,并揭示了该表位的潜在应用价值,同时也初步展示了质谱在肿瘤相关表位检测中快捷、准确的特点,而这些特点对于肿瘤相关表位的鉴定和肽疫苗的设计是非常重要的.
作者:周迈;彭吉润;张华刚;钟朝辉;郭晏同;冷希圣 刊期: 2005年第08期
目的探讨T-cadherin分子表达对胶质母细胞瘤C6细胞增殖的影响.方法利用脂质体将pcDNA3和pcDNA3.T-cadherin表达质粒转染C6细胞,以克隆形成试验和细胞增殖试验研究T-cadherin表达对C6细胞增殖的影响.结果转pcDNA3.T-cadherin质粒的C6细胞形成的细胞克隆数显著少于转染pcDNA3载体质粒的C6细胞形成的克隆数,两者差异有统计学意义(P<0.01).转染后表达T-cadherin分子C6细胞的生长速度明显慢于转染空载体不表达T-cadherin的C6克隆(P<0.01),且T-cadherin表达水平与C6细胞增殖速度呈负要关.结论 T-cadherin分子表达显著抑制胶质母细胞瘤C6细胞的增殖.
作者:黄志勇;王克琼;陈孝平;吴在德 刊期: 2005年第08期
目的研究肝细胞生长因子(HGF)基因治疗对小鼠急性肝衰模型的治疗作用.方法构建人肝细胞生长因子(hHGF)表达载体,利用脂质体介导法在活体内转染肝细胞生长因子基因,利用荧光显微镜检测肝组织内绿色荧光蛋白(GFP)表达了解目的基因的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中人肝细胞生长因子的含量,通过观察小鼠急性肝衰模型的生存率、肝功能变化、肝组织病理改变来检测肝细胞生长因子基因对急性肝衰的治疗作用,通过检测肝组织中PCNA指数的变化了解肝脏的增殖能力的变化.结果荧光显微镜下可见肝组织内有绿色荧光蛋白的表达,转染人肝细胞生长因子基因后在血清中可检测到hHGF的表达,而且可持续1周以上,与对照组相比,转染hHGF基因组的生存率明显提高(40.0% vs 11.5%,P<0.05),血清ALT、TBi明显降低,肝组织中PCNA指数也明显升高.结论活体转染肝细胞生长因子基因可获得表达,而且肝细胞生长因子基因对急性肝衰小鼠有治疗作用.
作者:何勇;周峻;陈勇;李海民;赵青川;窦科峰 刊期: 2005年第08期
目的探讨脆性组氨酸三联体(FHIT)基因改变与脊索瘤发生的关系.方法应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学(SP)方法对18例脊索瘤和瘤旁正常组织FHIT基因RNA转录本和蛋白表达进行检测.结果 RT-PCR检测可见11例(61.1%)存在FHIT基因RNA转录本缺失,1例还同时含有正常和异常转录本.对其中2例进行测序,证实1例转录本缺失全部E5~E7外显子及部分E8外显子和部分E10外显子等2个片段;另1例转录本缺失全部E5~E9外显子及绝大部分E10外显子.脊索瘤中FHIT蛋白表达阳性百分比为55.6%(10/18),瘤周正常组织为100.0%(18/18),差异有统计学意义(P<0.05),FHIT蛋白在脊索瘤中表达减低.结论 FHIT基因表达缺失是脊索瘤发生的重要事件之一,可能与脊索瘤的发生机制有关.
作者:韩壮;王敏;吕刚;王太一;金春莲;富伟能 刊期: 2005年第08期
目的观察体外诱导骨髓间充质干细胞分化及肝纤维化形成环境中移植情况.方法首先行骨髓间充质干细胞提取、分离和培养,加入肝细胞生长因子(HGF,20 μg/L)和表皮生长因子(EGF,1.5 mg/L)诱导定向分化.肝纤维化形成的大鼠随机分成2组,每组10只.使用5-溴脱氧尿苷(BrdU)标记诱导的骨髓间充质干细胞,经门静脉向肝纤维化形成的SD大鼠肝脏移植,对照组用BrdU标记未经诱导的骨髓间充质干细胞.2周后通过免疫组织化学方法检测大鼠肝脏标记细胞的分布及BrdU+/ALB+细胞数量.结果体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化的细胞CK8及ALB表达阳性.移植2周后大鼠肝脏均可检测到BrdU标记细胞,与对照组相比诱导后骨髓间充质干细胞组BrdU+/ALB+细胞数较多,差异有统计学意义(P<0.05).结论经体外诱导骨髓间充质干细胞能分化为肝细胞,移植在大鼠肝纤维化形成环境中,白蛋白表达细胞数更多.
作者:安伟德;胡祥;曹亮;王金晶;刘巨超;李力;宋旭华;徐迎新 刊期: 2005年第08期
目的探讨肾静脉平面以上结扎大鼠下腔静脉(IVC)及应用川芎嗪后的肾功能及肾脏病理改变.方法分别在肾静脉平面以上结扎大鼠下腔静脉、肾静脉平面以上结扎下腔静脉并川芎嗪治疗,术后6、12、24 h、2、3、4、5、7 d检测血肌酐、尿素氮、24 h尿量及NAG酶并观察肾脏病理改变.结果肾静脉平面以上结扎大鼠下腔静脉后血肌酐、尿素氮、尿NAG酶升高,肾脏瘀血并见大量管型.术后第3天,肾脏恢复正常结构;术后第4天,血肌酐、尿素氮恢复正常;术后第5天,尿NAG酶恢复正常.肾静脉平面以上结扎下腔静脉并川芎嗪治疗术后第4天,血肌酐、尿素氮、尿NAG酶恢复正常,肾脏瘀血较轻.结论肾静脉平面以上结扎大鼠下腔静脉,可因双肾瘀血而影响肾功能,若同时加用川芎嗪则可保护肾脏功能.
作者:邱新光;郭学利;黄秀珍;范正军;赵春临;张谢夫;李红;吴阳;王子凡 刊期: 2005年第08期
Barrett食管是形成食管腺癌的主要危险因素,因而对Barrett食管的研究成为上消化道疾病研究的重点之一.目前在Barrett食管的发病机制、与食管腺癌的关系以及诊断、预防和治疗等多方面都取得了很大的进展.
作者:张逊;卢喜科;徐医军 刊期: 2005年第08期
目的探讨脂氧合酶抑制剂去甲二氢愈创木酸(NDGA)对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响.方法噻唑蓝(MTT)法绘制细胞生长曲线及检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率;倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞凋亡.结果 MTT法显示NDGA对MCF-7细胞生长增殖有明显的抑制作用(P<0.05),呈剂量和时间依赖效应;流式细胞仪结果显示NDGA阻滞细胞周期于S期,诱导细胞凋亡;在光镜和扫描电镜下,NDGA诱导细胞发生凋亡形态学变化,导致细胞表面超微结构的改变和凋亡小体的形成.结论 NDGA能够抑制MCF-7细胞的增殖,诱导细胞凋亡,为脂氧合酶抑制剂临床应用于乳腺癌提供了科学依据.
作者:刘焕涛;孙靖中;马榕;唐鲁兵 刊期: 2005年第08期
目的比较缺血时猫脑不同部位脑血流、氨基酸的变化并研究两者之间的关系.方法利用激光多普勒血流计,持续监测猫脑不同部位(颞叶、枕叶)在脑缺血时脑皮层表面的血流变化;利用微透析技术,测定相同位置细胞间隙中的氨基酸变化.结果在阻断猫大脑中动脉(MCA)后,颞叶和枕叶部位的脑血流迅速下降,分别为正常值的21.44%和23.61%,并在2 h内缓慢下降;微透析液中谷氨酸浓度迅速增加,可达到正常值的80余倍.结论缺血时猫颞叶和枕叶的脑血流与谷氨酸浓度变化相同,差异无统计学意义.
作者:张绍东;张淑珍;罗芳;翟晶;史广志 刊期: 2005年第08期
目的探讨纳络酮治疗急性重型颅脑损伤患者血浆内皮素(ET)含量变化及其临床意义,评价纳络酮治疗急性重型颅脑损伤的意义.方法观察了52例纳洛酮治疗急性重型颅脑损伤患者血浆ET含量在治疗前1 d、治疗后3、8 d及2周的变化,并且以46例颅脑损伤患者按常规治疗作对照组.结果颅脑损伤24 h内两组患者血浆内皮素较正常人均明显升高(P<0.05),伤后第3天、第8天两治疗组血浆内皮素较治疗前均明显下降(P<0.05),但纳络酮治疗组低于常规治疗组(P<0.05),治疗2周后两组ET水平基本恢复到正常水平.结论急性重型颅脑损伤患者血浆内皮素含量明显升高,与病情轻重相关,纳络酮治疗较常规治疗能更迅速地降低血浆ET水平.
作者:孙志香;黄志雄 刊期: 2005年第08期
目的研究在肝门部胆管癌(HCCA)中雌激素受体(ER)表达水平和微血管密度(MVD)的改变,探讨它们在HCCA中可能发挥的作用.方法使用免疫组织化学的方法检测HCCA组织中ER和CD34的表达情况.结果 ER的阳性率为66.7%,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).肿瘤组的MVD计数明显高于对照组(P<0.01).结论 ER可能通过影响血管的生成在HCCA的发生、发展中起重要作用,为诊断和治疗HCCA提供新途径.
作者:范正军;吴阳;张志永;李德旭;王陆林;谢志徵 刊期: 2005年第08期
目的通过观察肿瘤坏死因子(TNF)-α对肝星状细胞(HSC)形态和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨TNF-α在肝纤维化中的作用机制.方法采用体外培养大鼠肝星状细胞,加入TNF-α和TGF-β1,透射电镜观察肝星状细胞的形态学改变并应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测不同处理组HSC中CTGF的表达.结果 TNF-α、TGF-β1均诱导HSC中CTGF表达;10 μg/L浓度的TNF-α作用6、24和48 h后,检测到CTGF mRNA表达,而TGF-β1在1 μg/L浓度作用4 h后,即可诱导HSC中CTGF mRNA表达.结论 TNF-α诱导HSC中CTGF的表达可能参与早期肝纤维化的形成.
作者:陈伟锋;汪谦;张可飞;黄洁夫;徐鸿绪 刊期: 2005年第08期
腹腔镜能否应用于肿瘤外科一直存在争议,焦点之一是二氧化碳(CO2)气腹是否会促进肿瘤的生长和转移扩散.我们应用经直肠黏膜下接种建立直肠恶性肿瘤淋巴结转移动物模型对此进行观察,现将结果报道如下.
作者:付斌;赵宏 刊期: 2005年第08期
腹腔镜脾切除术目前取得了较好的效果.但对于巨脾患者则多进行手助腹腔镜脾切除术[1],完全腹腔镜脾切除术较少见.我们自2003年7月至2004年11月对7例巨脾患者进行了腹腔镜脾切除术.
作者:刘建华;吕海涛;刘三光;路文彦;刘润田;石运明 刊期: 2005年第08期
目的探讨葛根素对离体兔肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法应用离体肺缺血再灌注模型,将20只健康家兔随机分为2组,实验组将葛根素(100 mg/L)加入含前列腺素E1(PGE1)的低钾右旋糖酐(LPD)液进行肺灌注及保存,对照组则以含PGE1的LPD液灌注及保存,4 ℃保存12 h再灌注1 h后测定肺组织湿/干重比(W/D)及超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)活性;应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测肺凋亡细胞并观察肺组织结构变化.结果实验组肺组织W/D及MPO活性分别为(4.90±0.86)、(3.21±0.48) U/100 mg蛋白,明显低于对照组的(5.52±1.05)、(4.02±0.69) U/100 mg蛋白(P<0.05),SOD活性为(61.37±10.08) U/100 mg蛋白,则明显高于对照组的(50.85±11.40) U/100 mg蛋白(P<0.05),其细胞凋亡指数(AI)为6.25±0.72亦较对照组的7.96±0.61显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),肺组织病理变化较对照组轻.结论葛根素能减轻肺缺血再灌注损伤,其作用机制与抑制中性粒细胞聚集、清除氧自由基、抗氧化及抗细胞凋亡有关.
作者:耿庆;高尚志;乌达;张本固 刊期: 2005年第08期
目的观察含有微血管样结构的凝胶块植入体内后与体内血液循环的连通情况,以及血管内皮细胞生长因子(VEGF165)对凝胶血管化的影响.方法在纤维蛋白凝胶中以VEGF165诱导小鼠微血管内皮细胞(MVEC)形成微血管样结构,设无VEGF165为对照,将制作的凝胶块用有微孔的塑料薄膜包裹后植入小鼠肠系膜间,2周后取样进行组织学切片,苏木素-伊红(HE)染色和免疫组织化学染色,图像分析并测量血管化面积.结果凝胶植入2周见实验组凝胶周围有丰富的新生血管网经过塑料薄膜的小孔与凝胶内血管相连,对照组表面新生血管较少.组织学切片(HE染色)见VEGF组血管化总面积约为对照的50倍(P<0.01).实验组新生血管直径10~100 μm,分布于凝胶中心和周边部位;而对照组新生血管大直径<20 μm,主要分布于凝胶的周边.结论含微血管样结构的预制凝胶植入后能形成具有血流灌注的微血管网.纤维蛋白凝胶在此过程中充当了一种较为合适的细胞外基质的作用,而VEGF在这一过程中起到一种诱导、刺激和强化作用.
作者:徐迎新;吴仕和;阎锡蕴;宋旭华;尹太;王金晶;李荣 刊期: 2005年第08期