凋亡调控基因Survivin、Caspase-3在神经母细胞瘤中的表达及意义

梁旭东；王家祥；王振宇

关键词：神经母细胞瘤, 基因, 半胱氨酸蛋白酶类, 免疫组织化学

摘要：目的探讨Survivin、Caspase-3在神经母细胞瘤中的表达及意义.方法共收集郑州大学医学院存档石蜡标本45例,其中神经母细胞瘤26例,神经节细胞瘤9例,正常肾上腺组织10例;26例神经母细胞瘤按不同因素分成若干组别.运用原位杂交、免疫组化及TUNEL法检测各组织间Survivin、Caspase-3的表达及细胞的凋亡情况.结果Survivin在神经母细胞瘤组中的表达明显高于神经节细胞瘤组及正常组(P＜0.01);并且其表达高低与神经母细胞瘤的年龄、临床分期及病理分型有关(P＜0.001);Caspase-3及凋亡指数则与神经母细胞瘤的组织分型、临床分期及病理分型有关(P＜0.05).直线相关分析:神经母细胞瘤中Survivin与Caspase-3呈负相关(r=-0.702,P=0.005),Survivin与凋亡指数呈负相关(r=-0.696,P=0.000);而Caspase-3和AI在三种组织中均呈正相关(r=0.888、0.989、0.958,P均=0.000).结论Survivin表达与神经母细胞瘤的恶性度有关,主要通过抑制Caspase-3来抑制凋亡,可作为一种新的神经母细胞瘤临床诊断及判别预后标志物,在调控神经母细胞瘤的凋亡方面扮演了一个关键的角色;Caspase-3高表达则可以显著诱导神经母细胞瘤凋亡,有助于神经母细胞瘤的良性进展.这些研究为临床治疗神经母细胞瘤提供了一条新思路.

中华小儿外科杂志相关文献

宫腔镜诊治幼女阴道疾患12例报告

幼女出现阴道疾患时,由于年龄及身体发育的特殊性,不能按常规窥视阴道,给诊断和治疗带来困难.2000年4月～2002年11月我院采用宫腔镜诊断和治疗12例幼女阴道疾患,效果满意,现介绍如下.

作者：张丽；徐春琳；孙秀芝刊期： 2003年第06期
单侧隐睾对侧睾丸损害机制的实验研究

目的神经分子水平方面探讨单侧隐睾鼠对侧睾丸损害的机制.方法30只SD雄性大鼠,分为对照组(A组)、隐睾组(B组)、隐睾加生殖股神经(GFN)切断组(C组).每组各10只.免疫组化技术观察降钙素基因相关肽(CGRP)阳性细胞的神经分布;生物素-dUTP/酶标亲和素测定法检测睾丸生殖细胞凋亡;透射电镜观察Sertoli细胞的超微结构;化学比色法测定丙二醛(MDA)的含量.结果A组睾丸中含有大量CGRP的神经细胞.术后90 d,与A组比较,B组对侧睾丸CGRP明显降低,MDA升高,细胞凋亡增加(P＜0.01),Sertoli细胞有缺血性改变.C组的这种损害减轻(P＜0.01).结论单侧隐睾鼠对侧睾丸的损害是通过隐睾GFN传入到交感神经,反射性引起对侧睾丸CGRP降低,睾丸缺血缺氧,氧自由基升高,生殖细胞凋亡增加所引起的.

作者：朱保平；郑新民；李世文；胡礼泉刊期： 2003年第06期
儿童颅骨骨膜窦

目的探讨儿童颅骨骨膜窦的诊断、治疗方法及疗效.方法回顾分析我科1997～2002年收治的7例颅骨骨膜窦病例,其中男5例,女2例,年龄3个月～16岁,平均年龄4.5岁.病变位于颞部3例,额部2例,顶部1例,枕部1例.均行头颅CT和/或MRI检查,其中近1例采用三维头颅CT扫描.手术方法采用切除颅外肿块,用骨蜡及生物蛋白胶封堵骨孔.结果7例患儿术前均获影像学确诊,术后随访6个月～5年,无肿块复发.结论CT、MRI能显示儿童颅骨骨膜窦的特性,三维头颅CT扫描更能清晰显示骨孔缺损部位,指导手术.对中小型且颅内无明显血管畸形病例,采用手术切除颅外肿块,骨蜡及生物蛋白胶封堵骨孔的方法,效果满意.

作者：顾硕；鲍南；金惠明；施诚仁刊期： 2003年第06期
婴儿结肠-结肠逆行肠套叠一例

急性肠套叠是由于肠蠕动紊乱或肠管局部器质性病变致一部分肠管连同肠系膜套入邻近肠腔引起的肠梗阻,其发生率占成活新生儿的1.5‰～4‰.男孩多于女孩.1岁以下占65%.发病原因不明.成人肠套叠90%可找到器质性病变,而小儿肠套叠90%以上为特发性.肠套叠分型:①回盲型50%～60%;②回结型30%;③回回型10%～15%;④结结型2%～5%.顺行的结结型肠套叠发生率很低,而逆行的、特发性的结结型肠套叠则极为罕见.

作者：王丽亚；张晓茹；张鹏举；毕月斋刊期： 2003年第06期
Ⅲ-Ⅳ型尿道下裂的治疗

我们采用游离包皮内板分Ⅱ期尿道成形,治疗Ⅲ、Ⅳ型尿道下裂,获得比较满意的效果,现报道如下.

作者：姜忠；江布先；张虹刊期： 2003年第06期
供肝缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨一氧化氮(NO)、细胞内游离钙离子等在肝移植缺血再灌注损伤中的变化和作用机制.方法实验选用18只狗,分为二组,供体组(n=9),受体组(n=9).肝移植的方法采用经典的背驮式.观测指标包括①肝脏功能指标:胆汁生成量、血ALT(肝组织的获取分别于开腹后、门静脉再灌注前、再灌注开始后半h时、再灌注后2 h、6 h、12 h切取肝脏组织病同时检验血中ALT含量及胆汁流量;②肝细胞活性及功能:肝细胞含水量、肝细胞内游离钙含量、肝细胞的凋亡、肝组织的NO测定,以上各项测定在不同时期有不同的变化,但再灌注6 h时均达到高峰.结果①细胞含水量:肝脏含水量在低温灌注时仅略有升高,与术前无显著性差异;再灌注各时间段与术前、低温灌注比较具有显著性差异(P≤0.01).而再灌注各时间段之间无显著性差异(P＞0.05),再灌注6 h时,肝脏含水量达到高峰.②肝细胞内游离钙[Ca2+]i含量:缺血再灌注时均发生显著性升高(P≤0.01).在再灌注6 h时[Ca2+]i荧光强度达到高峰,且与其他再灌注时间段有显著性差异(P≤0.01).[Ca2+]i在缺血再灌注2h和6h与其他时间段有显著性差异(P＜0.05).③肝细胞凋亡:缺血再灌注时均发生显著性升高(P≤0.01).在再灌注6 h时细胞凋亡率达到高峰,且与其他再灌注时间段有显著性差异(P≤0.01).细胞凋亡率在缺血再灌注各时间段之间也都有显著性差异(P≤0.01).④肝组织NO生成:肝脏NO于低温灌注时已显著升高,再灌注0.5 h、2 h继续升高;6 h达到高峰,12h已明显下降低于低温灌注时NO的量,但未达到术前水平.每组与术前比较均有显著性差异(P≤0.01).再灌注0.5 h、2 h、6 h时与其他时间比较均有显著性差异(P≤0.05),而0.5 h、2 h、6h之间无显著性差异(P＞0.05).他们之间的变化密切相关.结论从试验结果看,胆汁分泌是观测肝功能直观指标,ALT可以作为观察肝脏损伤的客观指标.再灌注后出现ALT持续增加,说明在缺血再灌注中肝脏存在着明显、持续性的损害.再灌注过程中所产生的内源性NO的变化与[Ca2+]i、细胞含水量和细胞凋亡成平行关系,但NO在肝脏缺血再灌注时,所起的作用是积极、还是消极的,有待进一步试验证实.本试验再灌注过程中,NOS的持续增加,是由依赖钙离子的cNOS增加,还是i-NOS增加也有待进一步免疫组化检验确定.

作者：王大勇；张金哲；邱晓虹；王燕霞刊期： 2003年第06期
小儿先天性阴道斜隔误诊原因分析

目的探讨先天性阴道斜隔的病理解剖特点、临床表现及诊治要点,以避免发生诊治错误.方法对7例儿童先天性阴道斜隔综合征病例的临床表现进行回顾性分析,介绍了3例被误诊误治的经验教训,结合文献讨论其临床表现,诊断要点及治疗方法.结果7例出现症状时平均年龄11.4岁,手术年龄平均14岁.主要临床表现有进行性加重的痛经,经期延长或排脓性分泌物,双子宫、盆腔或阴道壁囊性肿块及孤立肾.4例术前获确诊,2例误诊为盆腔肿瘤行剖腹探查,1例误诊为急性阑尾炎切除阑尾.7例均经阴道行斜隔切除术治愈.结论双子宫双阴道伴隔后阴道、子宫腔及输卵管积血、同侧肾缺如为本病主要病理特点,直肠前方触及阴道后壁囊性肿块为本病重要体征.足够的斜隔切除术疗效良好.提高对本病的认识、正确选择必要的小儿妇科检查可避免误诊及误治.

作者：刘文旭；谢家伦；徐哲刊期： 2003年第06期
儿童脂肪母细胞瘤

目的儿童脂肪母细胞瘤是一种少见的软组织良性肿瘤,笔者目的在于回顾、分析其临床、病理特点.方法自1982～2001年上海新华医院小儿外科收治了9例手术病理证实的脂肪母细胞瘤,男4例,女5例,年龄平均4.33岁(6个月～11岁).复习他们的临床表现,实验室检查及影像学检查结果,外科处理及随访情况.结果临床上均表现为无痛性皮下软组织肿块.发生在颈部4例,上肢、腋肩4例,另1例在骶尾部.病损大径3.5～20.0 cm,全部作手术切除,2例复发(22.2%),随访6例(66.66%),平均随访期9.5年(1.5～17年).病理组织学特征为含原始间胚叶细胞和典型脂肪母细胞的良性肿瘤.结论脂肪母细胞瘤是一种少见良性软组织肿瘤,好发在体表浅部,本组70%在四肢,年龄＜3岁,占66.6%,手术是唯一治疗方法,复发率为22.2%.

作者：施诚仁；葛莉；严文波；张忠德刊期： 2003年第06期
慢性特发性假性肠梗阻二例

慢性特发性假性肠梗阻目前临床上报告还很少.笔者2001～2002年收治慢性特发性假性肠梗阻患儿2例.现报告如下.

作者：李严；黄明学；杨海平刊期： 2003年第06期
循证医学与小儿外科临床实践

循证医学(evidence-based medicine,EBM)是近几年迅速兴起的一门新学科,它的出现使临床医学研究和临床实践发生了巨大的变化,由经验医学向循证医学转变是临床医学的一场深刻变革,也是临床医学发展的必然趋势[1,2].

作者：王刚；吴荣德刊期： 2003年第06期
TrkA基因在神经母细胞瘤增殖及形态分化中的作用

目的观察酪氨酸激酶受体A(TrkA)基因抑制神经母细胞瘤生长、诱导其分化的可行性.方法利用脂质体转染法将TrkA cDNA重组质粒转染入人神经母细胞瘤(NB)SH-SY5Y细胞系中,应用RT-PCR技术鉴定转染后基因的表达,比较转染前后SH-SY5Y细胞的增殖率及细胞的分化程度.结果成功转染TrkA基因并在SH-SY5Y细胞中稳定表达,转染后SH-SY5Y细胞的增殖率较亲代细胞明显下降(P＜0.01),细胞的分化程度增加(P＜0.01).结论TrkA基因的高表达能有效抑制神经母细胞瘤的生长,并能促其向良性分化,为神经母细胞瘤的基因治疗提供理论依据.

作者：张继红；张锦华；陈冬松；宓真；李爱敏刊期： 2003年第06期
肘后脂肪垫在儿童骨折中的应用

儿童肘关节创伤后在侧位X线片可见抬高的肘后脂肪垫影,通常暗示存在肘关节囊内骨折.应充分认识儿童的后侧抬高脂肪垫影在儿童肘关节存在骨折的应用价值,从而尽可能减少临床漏诊.我院1999年10月～2003年1月间,统计了38例具有肘关节创伤史,在X线片中没有明显骨折、而存在抬高脂肪垫影的儿童.随访结果证实:肘后抬高的脂肪垫征是儿童肘关节损伤后存在骨折的前兆.

作者：赵国志；刘奕蓉；马松立刊期： 2003年第06期
中国人先天性巨结肠RET基因突变家系研究

目的研究中国人先天性巨结肠(HD)与RET基因突变之间的关系.方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术及DNA测序,对RET基因第13外显子突变阳性HD患儿的家系作研究,并对另38例散发性HD和30例健康无便秘史儿童进行突变筛查.结果在家系1中,3例患儿均发现在RET基因碱基18974位插入G,导致框架移位突变.在家系2中,先证者在碱基18888位发生T→G的杂和性替代,导致Leu745Leu同义突变,其父亲为该致病突变的携带者,母亲正常.另38例散发性HD中,2例为突变阳性.结论中国人HD的发生与RET基因突变有密切关系,该基因突变是家族性HD重要的分子遗传学基础.

作者：管涛；李继承；李民驹；钭金法刊期： 2003年第06期
肛门直肠畸形伴发先天性巨结肠症二例

肛门直肠畸形(anorectal malforma-tion,ARM)伴发先天性巨结肠症(Hirschsprung's disease;HD)是十分少见的多发性消化道畸形,我科收治2例,报告如下.

作者：丁曙晴；陈永田；叶辉刊期： 2003年第06期
腹腔镜在小儿脾切除术中的应用

目的探讨腹腔镜在小儿脾切除术中的应用.方法2002年8月至2003年2月我院,采用经腹腔镜对3例患儿行脾切除,其中2例为遗传性球形红细胞增多症,男女各1例,年龄分别是5岁、8岁,另1例17岁女孩,为血小板减少性紫癜.从手术指征、术前准备、腹腔镜手术的关键步骤及术后恢复等方面进行总结.结果3例手术过程顺利,手术全程平均2.1 h,其中经腹腔镜切脾时间平均为1.1 h,将脾脏取出腹腔时间平均约1 h.术中出血5～60ml不等.术后次日下床活动,术后观察7～11d,血常规化验正常后出院.随访2～6个月,一切正常.结论经腹腔镜脾切除术具有创伤小、出血少、术后恢复快、腹部切口美观等优点,明显优于传统的手术方法.

作者：吴荣德；陈新国；于启海；王刚刊期： 2003年第06期
儿童脊髓纵裂手术治疗的并发症

目的研究脊髓纵裂手术并发症,提高手术疗效,提出预防措施.方法我院自1978年8月至2001年7月手术治疗脊髓纵裂患儿39例,6例出现不同程度并发症,发生脑脊液漏2例、神经损伤3例、硬膜外血肿1例.对6例并发症的原因、时间、治疗、预后、临床表现进行分析.结果6例并发症产生原因是由于术中硬膜的修补不完善、损伤及牵拉脊髓,止血不严密造成,经治疗预后较好.结论手术中熟悉脊髓纵裂解剖特点,显微操作,严密止血可避免并发症.

作者：程斌；李勇；王坤正；张开放；王春生刊期： 2003年第06期
先天性巨结肠术后直肠周围假性憩室形成三例

先天性巨结肠是小儿外科较常见的消化道畸形之一,目前手术方式多样,各种术式的并发症亦较多,但关于巨结肠术后直肠周围因假性憩室形成所导致的肛周反复感染的报道却十分罕见,我院数十年来共收治3例,现报告如下.

作者：邢茂清；张金哲刊期： 2003年第06期
Gd-DTPA增强动态核磁共振和动态核素肾扫描评估幼猪正常和梗阻肾脏

目的Gd-DTPA增强动态核磁共振(MRI)和动态肾扫描评估猪正常和梗阻肾脏形态和功能的意义.方法用Gd-DTPA(0.1 mmol/kg BW)增强动态MRI评估4～7月大小幼猪(n=10)肾脏,其中正常对照组7例,单侧输尿管梗阻3例.分别对0.1～60min记录的肾脏影像进行分析并计算出肾皮质、髓质和肾盂的相对信号强度.MRI后用动态核素扫描对肾脏进行评估并对肾脏进行解剖学检查.结果使用Gd-DTPA后,对照组肾皮质、髓质和肾盂信号强度迅速增强,1 min后开始下降,肾盂明显可降至正常的44%,以后逐渐恢复.输尿管不全梗阻肾脏的变化明显较对照组慢.扫描肾图得到的肾功能信息和MRI一致,但后者能提供更清楚的形态变化.结论Gd-DTPA增强动态MRI除了提供更清楚的正常和梗阻肾脏形态变化外,还能提供详细功能变化信息.Gd-DTPA增强动态MRI能帮助鉴别输尿管不全梗阻.

作者：文建国刊期： 2003年第06期
自体组织工程生长板治疗长骨生长板损伤的实验研究

目的探讨自体组织工程生长板在治疗生长板损伤中的作用.方法自3周龄兔髂嵴处切取部分髂骨生长板软骨经机械剪切和Ⅱ型胶原酶消化后培养生长板软骨细胞,体外扩增后接种到同种异体脱钙骨基质(DBM)上,混合培养一周后,植入兔自体右侧胫骨上端内侧生长板缺损处(A组),分别设单纯DBM植入(B组)及单纯破坏即生长板破坏后无任何植入物(C组)作为对照组,左侧胫骨不作处理.术后动态X线摄片测量下肢短缩及成角畸形改变,通过组织切片HE染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色观察自体组织工程生长板在体内的转归.结果术后第2周三组右侧胫骨均出现轻度畸形,A、B组较C组为轻,但三者之间无显著差异(P＞0.05),此后B、C组兔右侧胫骨出现渐进性严重短缩及成角畸形,而A组右侧胫骨畸形则无明显加重,各时间点A组胫骨成角及缩短畸形与B、C组有显著差异(P＜0.05),术后第16周时组织切片显示,A组损伤区基本恢复正常生长板结构,Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性,而B、C组损伤区则由新生骨组织修复.结论自体组织工程生长板植入可有效防止急性生长板损伤后肢体畸形的发生,植入的组织工程生长板可产生柱状排列的结构,细胞可表达Ⅱ型胶原.

作者：罗卓荆；靳小兵；杨柳；兰丽锋刊期： 2003年第06期
儿童巨大胸腺囊肿突入后纵隔一例

患儿:男,10岁,因间断发热4个月入院.入院前4个月曾分别出现高热、轻咳,体温39～40℃,均予抗感染治疗后好转,拍胸片发现左胸腔下部占位病变.体征:反应好,无缺氧症,双侧呼吸动度基本对称,左胸下部触觉语颤略增强,叩诊稍浊,右肺及左上肺呼吸音清,左下肺呼吸音弱,未闻及痰鸣音及罗音.心界不大,心音有力,律齐,心率90次/min.胸片示左肺中下野外带圆形致密影,边缘清楚,侧位病灶与脊柱影相重,未见液平面,提示肺囊肿合并感染.

作者：刘彩霞；唐伟椿；赵卫斌刊期： 2003年第06期