学术投稿

介绍一种原位PCR检测方法

金燕燕;王伟

关键词:原位杂交技术, 细胞原位检测, 细胞定位, 单拷贝, 高亲和力, 方法, 外源性, 生物素, 卵白素, 检测目, 组织, 连接, 扩增, 标记
摘要:原位PCR就是将PCR的高效扩增与原位杂交的细胞定位相结合,在组织细胞原位检测单拷贝或低拷贝的特定DNA或RNA序列[1].作者介绍一种原位PCR方法是利用卵白素与生物素间的极高亲和力,通过一段外源性DNA片段,来达到连接标记NTPs的目的,再通过原位杂交技术来检测目的DNA.具体方法如下.
浙江临床医学杂志相关文献
  • 原发性小肠肿瘤87例临床分析

    目的 探讨原发性小肠肿瘤的诊断与治疗.方法 回顾性分析1993年6月至2004年7月诊治的87例原发性小肠肿瘤的资料.结果 原发性小肠肿瘤发病男女之比1.8∶1,50~60岁为发病高峰,良、恶性肿瘤之比1:4.8.主要临床表现为腹痛、消化道出血、贫血、恶心、呕吐.30例十二指肠肿瘤中,20例(66.7%)术前确定病变部位;57例空回肠肿瘤中,17例(29.8%)术前确定病变部位.十二指肠肿瘤手术切除率76.7%(23/30),空回肠肿瘤手术切除率98.2%(56/57).结论 小肠肿瘤术前确诊率仍较低,新的诊断方法尚未成为常规,手术切除是小肠肿瘤的有效治疗.

    作者:付斌;赵宏 刊期: 2006年第11期

  • 口服大蒜预防老年人口腔肠道真菌感染临床疗效观察

    随着广谱抗生素的广泛应用,且不断升级,杀死机体内的敏感菌,破坏微生态平衡,给真菌生长繁殖创造了条件,临床上真菌感染的患者日益增多,尤其是老年患者免疫力低下,极易造成真菌的第二重感染,而目前也尚无有效的预防真菌感染的护理措施.本科于2005年2至12月期间,对应用抗生素的老年患者,同时口服大蒜以预防口腔和肠道真菌感染,取得了较好的效果,现报告如下.

    作者:杨宇红;沈小玲 刊期: 2006年第11期

  • 牙科诊疗机构器械消毒方法及效果分析

    口腔器械在临床使用过程中,直接接触患者的唾液,甚至血液,污染严重.若消毒不彻底,可成为传播疾病的重要途径[1].为了解本区牙科诊疗机构口腔器械消毒灭菌方法使用情况及实际消毒效果,探讨实用、高效的消毒灭菌方法,制定消毒灭菌管理规范.作者于2004年11月至2005年2月对辖区34家牙科诊疗机构常用口腔器械进行消毒效果调查.现将结果报告如下.

    作者:杨淑清;陈慧;应郁敏;周惠珍;何纯定 刊期: 2006年第11期

  • 乙肝病毒抗原抗体的若干研究状况

    上世纪70年代前根据流行病学情况,将病毒性肝炎分为传染性肝炎和血清性肝炎两型.由于病原不明,研究一直停滞不前,直到Blumberg发现了乙型肝炎病毒表面抗原以后,才于70年代初将前者改称为甲型肝炎,后者改称为乙型肝炎,并认为胃肠外传染是乙型肝炎唯一的传播途径.现就乙型肝炎病毒抗原抗体的若干研究作一叙述.

    作者:刘水渠 刊期: 2006年第11期

  • 预注麻黄碱对硬膜外麻醉腹部手术患者血压的影响

    由于硬膜外麻醉使所阻滞区域交感神经亦致传导阻滞,血管扩张,在术中造成患者血压骤然下降.本组在手术前预注麻黄碱对手术患者血压的影响进行了观察,现报告如下.

    作者:陈军民 刊期: 2006年第11期

  • 计算机管理在医院供应室的应用

    随着信息技术的发展,计算机管理在我国医疗系统中已全面普及应用,并取得了满意效果.本院供应室与计算机中心合作开发了供应室管理系统软件,并于2003年5月起实际运用,现报道如下.

    作者:斯彩予 刊期: 2006年第11期

  • CDKs在大肠癌中的表达及意义

    目的 探讨细胞周期依赖性蛋白激酶(CDKs)在大肠癌中的表达及临床意义.方法 收集79例手术切除的大肠癌标本,同时取距癌灶5cm以外的癌旁组织及10cm以外的正常组织,采用免疫组织化学方法(链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶法,SP法)检测癌组织、癌旁组织及正常组织中CDKs的表达.结果 79例标本癌组织中CDKs表达的阳性率均明显高于癌旁组织及正常组织,差异有显著性(P<0.01).CDKs的表达与患者组织学类型之间均存在程度不同的统计学联系(P<0.05),此外CDK2的表达与患者年龄、肿瘤大小之间;CDC2与患者浸润深度、肿瘤大小之间;CDK4与患者年龄之间均存在统计学联系(P<0.05).结论 CDKs的过表达是大肠癌发生的早期事件,是影响大肠细胞正常细胞周期的重要途径之一.

    作者:闫竞一;朱冠保;兰升红;姚建高;张启瑜 刊期: 2006年第11期

  • 髌骨纵行骨折漏诊7例分析

    髌骨纵行骨折是一种较少见的骨折类型,好发于青壮年男性.由于髌骨的解剖位置以及纵行骨折面分离不大,所以在常规的正侧位检查中容易漏诊.作者自2002年6月至2005年6月共发现漏诊7例髌骨纵行骨折,现分析如下.

    作者:徐亦生;高智琴;朱文良;占鸣 刊期: 2006年第11期

  • 祛风清热合剂质量标准的研究

    祛风清热合剂由蔓荆子、赤芍、银花、粉葛根、姜半夏、车前子等12味中药组成,具有祛风活血、清热明目的功效,用于角膜炎、病毒性角膜炎、虹膜炎等.为有效控制本制剂质量,采用薄层色谱法对其方中赤芍进行了定性鉴别,并应用高效液相色谱法对该制剂中赤芍的有效成分芍药苷进行了定量研究.结果表明采用本定性定量方法,可较严格地控制本制剂的内在质量.

    作者:叶宓曚;徐凌 刊期: 2006年第11期

  • CT导引下腰神经根周围抗炎治疗坐骨神经痛探讨

    目的 探讨CT引导下经皮穿刺治疗腰椎间盘突出引起坐骨神经痛的疗效.方法 CT、MR检查发现有腰椎间盘突出伴明确临床体征90例,CT引导下经皮穿刺至相应椎间孔附近注射得宝松、维生素B12和利多卡因混合药,使药液均匀分布椎管内硬膜外.结果 CT引导下经皮穿刺注药成功率100%.经3个月随访观察,在1、2、3个月止痛有效率分别为92.21%、87.77%、80.00%.结论 CT引导治疗腰椎间盘突出引起坐骨神经痛是一种安全、可靠、有效的新疗法,其远期疗效有待进一步观察.

    作者:王林友;童国海;宋琦 刊期: 2006年第11期

  • 肺癌微转移研究进展

    肺癌转移是肺癌的恶性标志和特征,也是导致患者治疗无效和死亡的主要原因,这与肺癌患者早期即存在的全身微转移有关.常规病理检查漏诊的微小转移病灶,通常为几个恶性细胞或直径<2mm的转移灶.某些被认为可根治的早期肺癌病灶转移可能已发生于手术前,常规CT、MR乃至PET亦不易检测到,但其它技术可能检测出转移至淋巴结、骨髓等处的微小转移灶,说明已非早期.微转移还导致了临床对TNM分期的下调,若进行准确分期,合理规范治疗,则可提高患者生存率.肿瘤微转移是分子诊断及分子分期的重要依据,是指导治疗的重要参考.

    作者:江皓;马胜林 刊期: 2006年第11期

  • 定量聚合酶链反应在丙型肝炎病毒感染检测中的应用及临床意义

    近年许多实验表明,应用荧光定量聚合酶链反应(FQPCR)术检测丙型肝炎病(HCV-RNA)具有快速以及特异,灵敏度高等特点.这种方法对于丙型肝炎患者的早期诊断、治疗期间抗病毒药物的评价、受感人群的普查均有较高的实用价值.HCV-RNA定量检测在一定程度上可以反映肝脏炎症活动及肝损伤程度.本实验就对100份丙型肝炎分别进行HCV-RNA,抗-HCV,ALT检测,进一步探讨三者之间的关系.

    作者:潘克女;张永乐;任绪义;陈刚;刘宝根 刊期: 2006年第11期

  • CTA对颈动脉狭窄所致脑梗死的临床应用

    颅外颈动脉粥样硬化是脑梗死的主要发病原因之一[1].正确判断颈动脉狭窄的程度,对应用外科或介入方法治疗和预防脑梗死有着重要的意义.颈动脉血管造影术是判断颈动脉狭窄的金标准,但其作为创伤性检查方法,且费用较高,不易被患者接受.颈动脉超声检查和MR血管造影具有无创的特点,但在应用上有一定的局限性.多排螺旋CT血管造影(CTA)是近年发展起来的一种无创性检查.作者就2003年7月至2004年6月收集的30例患者应用多排螺旋CT血管造影评价颈动脉狭窄情况进行探讨.

    作者:张峻;钱琦 刊期: 2006年第11期

  • 数字化顺行和逆行静脉造影对下肢静脉疾病的诊断意义

    作者收集1999年8月至2004年7月本院155例176侧下肢静脉造影资料,分析两种方法在临床中的应用价值.1 资料与方法1.1 一般资料 155例中男87例,女68例;右侧64例,左侧70例,双侧21例;年龄19~77岁,平均47.9岁.病程3d~50年.表现为下肢浅静脉曲张56.89%,下肢肿胀37.93%,疼痛41.37%,色素沉着20.69%.

    作者:胡美春;吴晓明 刊期: 2006年第11期

  • 肺栓塞诊断的经验与误诊教训

    肺动脉栓塞(肺栓塞)是呼吸内科急症,临床上以往认为是少见病,随着认识和诊断技术的提高,肺栓塞在临床并不少见.较多的资料表明,肺栓塞不仅在西方、在我国也是一种比较常见疾病,且误诊率高、病死率居高不下,实属重要的医疗保健问题[1].本院1998年7月至2004年7月共收治了63例肺栓塞患者.在诊断中只因缺乏足够的警惕或检查手段,致使误诊、漏诊频多.国外报告生前确诊率仅10%~30%,凡能及时作出诊断及治疗的肺栓塞患者只有7%死亡,而没有被诊断的肺栓塞60%死亡,其中33%在发病后第1小时内迅速的死亡[1].因此肺栓塞的早期正确诊断十分重要.作者对63例患者进行了分析,现报告如下.

    作者:慈晓;林晓杰;张鸣华 刊期: 2006年第11期

  • ICU内肺炎克雷伯菌感染的危险因素与预防

    ICU内肺炎克雷伯菌感染为院内感染的重要致病菌之一,而且能产生超广谱β-内酰胺酶,临床治疗相当困难,因此控制和预防ICU内肺炎克雷伯菌感染十分重要.作者分析本院ICU 2001年5月至2004年10月30例肺炎克雷伯菌感染患者,对感染的危险因素和预防措施进行探讨,旨在减少医院感染的发生,提高重症抢救的成功率.

    作者:应晓薇 刊期: 2006年第11期

  • 血清胃蛋白酶原Ⅰ和幽门螺杆菌抗体IgG与老年人胃黏膜萎缩相关性研究

    目的 探讨血清胃蛋白酶原Ⅰ和幽门螺杆菌抗体IgG与老年人胃黏膜萎缩关系.方法 选取老年患者123例,慢性非萎缩性胃炎61例,慢性轻度萎缩性胃炎33例,慢性中-重度萎缩性胃炎29例,用ELISAA法定量检测血清PGI的浓度和幽门螺杆菌IgG.结果 在HP-IgG阳性和HP-IgG阴性患者中,慢性中-重度萎缩性胃炎组中血清平均PGI浓度明显低于慢性非萎缩性胃炎组和慢性轻度萎缩性胃炎组,差异有显著性.慢性非萎缩性胃炎组中血清平均PGI浓度与慢性轻度萎缩性胃炎组差异有显著性.同一组中的血清平均PGI浓度在HP-IgG阳性和HP-IgG阴性中差异无显著性.慢性非萎缩性胃炎、慢性轻度萎缩性胃炎和慢性中-重度萎缩性胃炎患者HP-IgG阳性率分别是65.57%、45.45%、51.45%,各组间HP-IgG阳性率差异无显著性.结论 无论有无HP感染,血清PGI水平与胃黏膜萎缩程度呈阳性线性关系.通过检测PGI浓度来评估老年人胃黏膜萎缩程度和对胃癌早期诊断.

    作者:杨俊;戴一扬;程家欣;陈新宇;程玲;于彭 刊期: 2006年第11期

  • 老年肺结核的CT诊断及价值(附86例分析)

    近几年,老年肺结核发病率呈逐年增多的趋势.作者通过对86例老年肺结核CT特点的分析,评价其在老年肺结核诊断中的作用.1 资料与方法1.1 一般资料 随机抽取本院2002至2005年期间有完整临床及CT资料的老年肺结核确诊患者86例,其中男54例,女32例;年龄65~82岁.临床表现:咳嗽、咳痰79例,血痰43例,低热盗汗57例,血沉加快42例,有3例无任何症状,在体检中发现.痰菌阳性61例,胸水找到结核杆菌17例,支气管镜活检证实9例.

    作者:冯志捷 刊期: 2006年第11期

  • 芍药不同部位芍药甙和苯甲酸的含量分析

    赤芍为毛莨科植物芍药或川赤芍的干燥根.白芍为毛茛科植物芍药的根经水煮后晒干而得.现代研究表明,白芍含芍药苷、芍药内酯苷、氧化芍药苷、苯甲酰芍药苷、苯甲酸、鞣质、挥发油、B-谷甾醇、脂肪油等成分.其中,有效成分芍药甙,具有镇静、解痉、抗炎、抗应激性溃疡病等方面的药效,且毒性较小;而苯甲酸为其有害成分[1-3].为考察赤、白芍及芍药不同部位中芍药甙和苯甲酸的含量差异,作者采用HPLC法对其进行定量分析,为芍药的产地加工与质量评价提供了科学依据.

    作者:宋俊英;曾晓艳 刊期: 2006年第11期

  • CT在真菌性鼻窦炎诊断中的价值

    目的 探讨CT在真菌性鼻窦炎诊断中的价值.方法 回顾性分析经手术、病理证实的30例真菌性鼻窦炎患者的临床表现、CT特征及术中所见.结果 CT征象:病变的窦腔内为不均匀的密度增高影,其中17例病变窦腔内呈不规则点状或片状钙化影,5例上颌窦内壁骨质吸收破坏,上颌窦口扩大11例,上颌窦骨壁增生硬化16例.CT诊断鼻窦炎27例,其中真菌性鼻窦炎23例,上颌窦占位性病变3例.结论 窦腔内散在点状、片状钙化的软组织充填是真菌性鼻窦炎CT诊断的主要征象.CT在真菌性鼻窦炎的诊断中具有重要价值.

    作者:徐红伟;李界;孙旭鸯 刊期: 2006年第11期

浙江临床医学杂志

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