学术投稿

中药五谷虫抗菌物质的分离纯化及抗菌机制的实验研究

王寿宇;张振;李旭东;吕德成

关键词:五谷虫, 二次免疫, 抗菌肽, 分离, 纯化, 抗菌机制
摘要:目的:分离纯化五谷虫的有效抗菌物质,同时研究五谷虫抗菌物质对大肠杆菌的杀伤作用,初步探讨其可能的抗菌机制.方法:将五谷虫与大肠杆菌共培养使五谷虫获得二次免疫.用DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换层析柱和sephacryls-200HR凝胶过滤层析柱分离纯化,浊度法检测,获得五谷虫抗菌物质.用荧光探针、琼脂糖凝胶电泳技术分析五谷虫的抗菌机制.结果:五谷虫粗提物浓度> 1.0 mg/mL时对大肠杆菌的抗菌效果较强,分子量在10KD左右.荧光探针技术示20 mg/mL的抗生素变化率为35.4%,50 mg/mL的抗生素变化率为40.0%,100 mg/mL的抗生素变化率为42.3%,2 mg/mL的粗提物变化率为1223.1%,80 mg/mL的粗提物变化率为1300.0%.琼脂糖凝胶电泳图示含2 mg/mL和80 mg/mL粗提物的泳道无质粒DNA条带.结论:用DE-AE-Sepharose Fast Flow离子交换层析柱和sephacryls-200HR凝胶过滤层析柱可以纯化得到有效的五谷虫抗菌成分,呈单一蛋白条带.其抗菌机制可能是破坏了大肠杆菌的细胞膜以及影响了质粒DNA的复制.
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    作者:张玉冬;侯玉芬;刘明;刘政;马春媚 刊期: 2013年第09期

  • 《外科正宗》学术思想总结

    明代著名外科医家陈实功在总结前人成就基础上,结合自己的临床经验写成名著《外科正宗》,其学术思想多有创新,自成一派.试将其对外科疾病诊断治疗过程中的学术特点进行总结,以期对今后研究有所裨益.

    作者:邓卫芳;裴晓华 刊期: 2013年第09期

  • 中医药与免疫的思考

    传统中医学与现代免疫学在基本理论、思维方式等多个方面有相似之处.以中医理论为指导,发挥中医药整体调节的优势,对于研究中医药的免疫作用及机理将是一个重要的研究方向.从神经、内分泌、免疫的角度来探讨中药的作用机制,符合中医学现代研究思路,必将促进中医学的推广和发展.

    作者:郭净;王菊勇;刘忠达 刊期: 2013年第09期

  • 海南省菊科植物资源及药理活性研究进展

    综述了海南省菊科植物资源的种类、化学成分以及药理活性的研究进展,并根据海南菊科植物资源研究面临的困难和问题,提出了海南省菊科植物的研究展望.

    作者:王丹;张影波;庞玉新;于福来;张新蕊;胡雄飞 刊期: 2013年第09期

  • 舒脑欣滴丸对急性缺血性中风患者血清补体C3、C4及炎症指标的影响

    目的:观察中药舒脑欣滴丸对急性缺血性中风患者血清补体C3、C4水平及炎症反应的影响.方法:急性缺血性中风患者随机分为对照组(神经内科基础治疗)和试验组(基础治疗+舒脑欣滴丸),观察两组患者治疗前及治疗14 d后NIHSS评分、血清补体C3、补体C4、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平.结果试验组患者NIHSS评分的下降值显著高于对照组,差别有统计学意义(P<0.01);试验组在降低血清补体C3水平和MMP-9水平方面均显著优于对照组,差别有统计学意义(均为P<0.01),但在降低血清补体C4和hs-CRP水平方面与对照组比较差别无统计学意义(P>0.05).结论:中药舒脑欣滴丸辅助治疗急性缺血性中风有利于改善患者神经功能缺损症状,在干预补体激活途径和炎症反应方面具有一定优势.

    作者:徐士欣;张军平;朱亚萍;徐媛媛;吕仕超;仲爱芹;郝雅文;翟昂帅 刊期: 2013年第09期

  • 不同职称中医师评判肾阳虚证的一致性

    目的:评价不同职称中医师对肾阳虚证诊断的一致性.方法:选择职称分别为主任医师、主治医师、医师的3名中医师,运用自编的肾阳虚证调查表对受试者作调查;采用Kappa统计方法分析3位医生的总体辨证结果及各项辨证因子的诊断一致性.结果:医师1和2、1和3、2和3对肾阳虚证诊断的一致性kappa值分别为0.66、0.42及0.57.3名医师诊断一致性较好的症状主要为腰痛酸软、四肢发冷、面目水肿、下肢水肿、五更泄泻、久病咳喘和夜尿频多.结论:不同职称中医师对肾阳虚证诊断的一致性较好,职称层次越接近,诊断一致性越好.

    作者:谭从娥;王米渠;冯文哲 刊期: 2013年第09期

  • 中蒙医温病学王氏连朴饮加滑石、黄芩与茵达日-4味汤体外抗轮状病毒、抗腹泻实验

    目的:明确王氏连朴饮加滑石、黄芩与茵达日-4味汤体外抗轮状病毒的机制及观察其抗番泻叶所致腹泻动物模型的效果,为临床应用提供科学依据.方法:实验一蒙药和中药对MA-104细胞(恒河猴胚胎肾细胞)的毒性作用,根据Takeuchi建立MTT(4,5二甲基噻唑-2,5-二苯基四唑溴化物)法检测药物的细胞毒性作用;药物对病毒感染的预防作用,用不同浓度的药物预先处理单层细胞2h后将100TCID50/0.1 mL(Tissue culture infective dose,半数组织培养感染剂量)的病毒每孔加入0.1 mL,吸附2h,弃病毒液,PBS(Phosphate Buffer Saline,磷酸盐缓冲液)洗涤2次,加细胞维持液培养,每天于倒置显微镜下观察细胞变化;药物对病毒的直接杀伤作用,将不同浓度的药物与100TCID50/0.1 mL的病毒液等量混合作用2h,再将其感染单层细胞,吸附2h后,弃上清,加入细胞维持液继续培养,每天于倒置显微镜下观察细胞变化;药物对病毒穿入细胞后的抑制作用,先用100TCID50/0.1 mL的病毒每孔0.1 mL感染细胞,吸附2h后,吸去病毒,加入不同浓度的含药维持液,每天于倒置显微镜下观察细胞变化.实验二复制番泻叶所致泄泻的小鼠模型,比较蒙药、中药与阿托品对腹泻的影响,通过计数湿粪,观察药物对腹泻的抑制程度.结果:蒙药的TC50(半数细胞毒性浓度)为2.76 mg/mL,中药的TC50为24.35 mg/mL,蒙药对MA-104细胞毒性明显大于中药;中药抗轮状病毒的主要作用方式为抑制病毒生物合成,但在阻断病毒吸附以及直接杀伤方面效果较差;蒙药能明显抑制轮状病毒复制,表现在阻断病毒吸附、直接杀伤以及抑制病毒增殖方面都有较好的效果,但细胞毒性较大;中药低剂量组和蒙药高剂量组抗腹泻效果优于其他组.

    作者:闫腾飞;韩雪梅;金星 刊期: 2013年第09期

  • 从脾胃论治肺胀

    肺胀是多种慢性肺系疾患反复发作,迁延不愈,导致肺气胀满,不能敛降的一种病证.临床表现为胸部膨满、胀闷如塞、喘咳上气、痰多、烦躁等.其病程缠绵,症状时轻时重,日久可见面色晦黯,唇甲青紫,心悸,脘腹胀满,肢体浮肿,甚或喘脱等危重症状.是常见病、多发病、危重病.通过学习四大经典并结合临床实践,认为肺胀临床表现每多虚实互见,寒热夹杂,主脏在肺,并与脾、肾、心密切相关,脾虚贯穿肺胀整个病程.临床常见外寒内饮、外寒内热、肺脾气虚、肺肾气阴两虚、肺心气阴两虚、阳虚水泛、痰蒙神窍7个证型.治疗主张祛邪顾脾胃、固本健脾胃、健脾以安肺、脾、肾、心.即从脾胃论治肺胀.

    作者:马丽佳;徐洪洁;曲妮妮 刊期: 2013年第09期

  • 清热消积方对SPC-A-1肺癌细胞及其诱导的HUVEC内皮细胞表达VEGF、bFGF的影响

    目的:研究清热消积方对SPC-A-1肺癌细胞及其诱导的HUVEC内皮细胞表达VEGF、bFGF的影响,并探讨其抗肿瘤血管生成的部分作用机制.方法:以不同浓度的清热消积方药液干预SPC-A-1肺癌细胞及其诱导的HUVEC内皮细胞后,采用双抗体夹心ELISA法分别检测两种细胞上清液中VEGF、bFGF的表达量.结果:经清热消积方药液干预后,该两种细胞的VEGF、bFGF表达量均出现不同程度的下降,且与药物浓度呈负相关,具有良好的浓度依赖性(P<0.05).结论:清热消积方抑制SPC-A-1肺癌细胞及其诱导的血管内皮细胞表达VEGF、bFGF,可能是其抗肿瘤血管生成的作用机制之一.

    作者:陈培丰;金莹祺;潘磊 刊期: 2013年第09期

  • 运动区久留针对局灶性脑缺血大鼠VEGF的影响

    目的:观察运动区久留针对局灶性脑缺血模型(MCAO)大鼠脑组织中血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法:随机选取66只Wistar雄性大鼠采用改良线栓法建立局灶性脑缺血大鼠模型,43只大鼠复制成功模型后随机分为模型组(14只)、久留针组(14只)、短留针组(15只),并设假手术组(14只)进行对照研究,选取大鼠运动区进行针刺治疗,久留针组留针10h,短留针组留针30 min,每天1次,治疗2周,模型组及假手术组不作针刺治疗.利用免疫组化法检测VEGF的原位表达,荧光定量RT-PCR法检测VEGF mRNA的含量.结果:与模型组比较,久留针组脑组织中VEGF mRNA的含量升高,同时VEGF蛋白原位表达增高(P<0.05).结论:运动区久留针能促进梗塞区VEGF mRNA的含量及其蛋白的表达.

    作者:包烨华;曾友华;王延武;王翀敏;楚佳梅 刊期: 2013年第09期

  • 黄芪提取物对局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠行为学及脑组织中NO含量的影响

    目的:探讨黄芪提取物对局灶脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法:采用MCAO(大脑中动脉阻塞法)制备局灶性脑缺血动物模型,然后将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、黄芪提取物组(AST组,80mg·kg-1)、尼莫地平组(0.5 mg·kg-1),用药后,观察药物对脑缺血引起的神经功能缺损症状以及脑组织内NO含量的影响.结果:黄芪提取物组不仅能减轻大鼠的神经功能缺损症状;通过治疗后,各治疗组大鼠大脑皮质神经元病变有一定程度的改善.结论:黄芪提取物对脑缺血再灌注损伤有一定保护作用,其作用机制可能与降低NO浓度,达到减少对脑组织的刺激而产生作用.

    作者:朱慧渊 刊期: 2013年第09期

  • 从脾论治间歇期及慢性期痛风的理论探讨

    脾虚证是间歇期及慢性期痛风重要的病机.中医治疗间歇期及慢性期痛风,应以健运脾胃为本,祛湿泄浊为标,以期达到维持血尿酸稳定,减少痛风性关节炎发作的目标.

    作者:谢志军;李海昌;陈学智;范永升;温成平 刊期: 2013年第09期

  • 山药超微粉和饮片量效关系研究

    目的:通过对山药超微粉体外溶出度和药效学研究确定其量效关系.方法:采用浆法测定山药超微粉体外溶出度,以尿囊素为指标用HPLC测定药物累积溶出率;结合体外溶出度及药效学实验确定山药超微粉的量效关系.结果:溶出度实验显示山药超微粉体外累积溶出率相与普通粉相当,显著高于临床煎煮也.药效学实验表明山药超微粉各剂量在提高环磷酰胺所致的免疫低下均有显著疗效,各剂量间呈现出量效关系,且超微粉1/6剂量与临床煎煮剂量疗效相当.结论:饮片经超微粉碎后体外溶出度较临床煎煮浸膏其有效成分溶出得到显著提高,同时增强药效,提示临床可减少用药剂量.

    作者:闾红燕;黄绳武;张志荣;高全平 刊期: 2013年第09期

  • 运用肾络理论论治肾小球硬化

    运用络病理论,结合络脉结构功能理论诠释肾络的内涵及肾络病证的核心病机演变,从结构、功能、病机病程、临床表现探讨肾络病证与肾小球硬化的相关性,认为肾小球硬化的病因病机为肾络虚滞及肾络瘀阻,辨证治则为络虚则补之、络阻则通之.

    作者:吕静;庞立健 刊期: 2013年第09期

  • 金樱子总黄酮对高脂血症大鼠血脂的影响

    目的:研究金樱子总黄酮对高脂饲料喂食所致高血脂大鼠血脂的影响.方法:将大鼠随机分为正常对照组、高脂模型组、阳性对照组、以及金樱子总黄酮高、中、低剂量组,每组10只.除正常对照组给予普通饲料外,其余各组给予高脂饲料喂食8周造成大鼠高脂血症.测定各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)以及高密度脂蛋白(HDL-C)的含量,及肝组织脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)活性.结果:金樱子总黄酮可显著降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C含量,身高肝组织HL和LPL活性.结论:金樱子总黄酮可改善高脂血症大鼠脂代谢紊乱,可能与其提高机体脂代谢能力有关.

    作者:王奇;芦柏震;章红燕;何福根 刊期: 2013年第09期

  • 组织芯片宫颈癌中EGFR的表达及意义

    目的:探讨宫颈癌中表皮生长因子受体(EGFR)的表达特点及其对宫颈癌分子靶向治疗的潜在意义.方法:构建含有80例宫颈癌标本的组织芯片,EnVision免疫组化法检测宫颈癌及癌旁组织中EGFR的表达,并分析EGFR的表达与各种宫颈癌临床病理学特征的关系.结果:EGFR在宫颈癌旁组织中呈少量表达或不表达,在宫颈癌中的表达率为94.8%,明显高于癌旁组织(P<0.01).在宫颈癌的组织中EGFR的过表达,与不同年龄无统计学差异,而与不同肿瘤的大小、组织类型、病理分级、侵袭深度、淋巴结转移、临床分期之间的差异有统计学意义(P<0.05;P<0.01;P<0.05;P<0.01;P <0.05;P <0.05).结论:EGFR的表达参与宫颈癌的生长,侵袭和转移过程,检测宫颈癌中的EGFR,可作为宫颈癌预后,筛选高危转移患者的有效指标,并且值得进一步以它作为宫颈癌靶向治疗新的作用靶点.

    作者:周素英;张品南;潘丹;夏作利;陈艳梅;冯国飞;郭群 刊期: 2013年第09期

  • 中医药治疗幽门螺杆菌感染研究进展

    随着临床对胃肠病变研究的深入,幽门螺杆菌感染的根除治疗逐渐受到重视.西医传统三(四)联疗法的弊端的显现,推动学者们开始探索中医药疗法.将近年来中医药治疗幽门螺杆菌的相关研究进行了简要总结,从中医分型和中草药两大方面进行了论述,旨在为广大学者探索中医药疗法的新思路提供参考.

    作者:谢晶日;尤俊方;李贺薇 刊期: 2013年第09期

  • 多倍体与八倍体半夏中草酸钙晶体含量的测定

    目的:测定多倍体(十六倍体)半夏和八倍体半夏原球茎以及块茎中草酸钙晶体的含量.方法:采用高效液相色谱法,以0.5%磷酸水溶液为流动相,以草酸为对照品,测定多倍体半夏和八倍体半夏中草酸钙晶体的含量.结果:多倍体半夏原球茎和块茎中草酸钙晶体的含量分别为(2.799±0.017)%和(1.375±0.037)%,八倍体半夏原球茎和块茎中草酸钙晶体含量分为为(1.136 ±0.028)%和(1.924±0.05)%.结论:半夏原球茎和块茎中均含有较高含量的草酸钙晶体,与八倍体半夏相比,多倍体半夏块茎中的草酸钙晶体明显比八倍体半夏低.

    作者:潘平;李伟平;鲁光耀;吕迪;蒋福升;丁志山 刊期: 2013年第09期

  • 柴胡注射液诱导HepG2细胞凋亡的实验研究

    目的:探讨柴胡注射液诱导体外人肝癌细胞株HepG2凋亡的机制.方法:空白对照组(含10%小牛血清的1640培养液)、氟尿嘧啶阳性对照组(血峰浓度10 μg/mL),柴胡注射液6.25 mg/mL、12.5 mg/mL、25 mg/mL、50 mg/mL不同浓度实验组、柴胡注射液与氟尿嘧啶两药联合对照组比较.应用倒置显微镜、荧光显微镜观察细胞凋亡形态的改变;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;一步法TUNEL检测细胞凋亡率.结果:加入柴胡注射液12h后,与空白对照组相比,HepG2细胞形态发生显著变化,倒置显微镜下观察发现细胞体积缩小、变圆,胞浆量减少,并随着药物浓度增加,贴壁细胞逐渐减少,悬浮细胞增多,柴胡注射液联合氟尿嘧啶注射液组明显优于单药组;经柴胡注射液作用后的HepG2细胞,流式细胞直方图上均可见亚二倍体峰,且凋亡率随用药浓度的增大而增大;一步法TUNEL检测时,柴胡注射液作用12h后,细胞凋亡率均明显高于空白对照组.结论:柴胡注射液联合氟尿嘧啶可明显诱导HepG2细胞的凋亡,柴胡注射液中的有效成分可能是治疗肝癌的潜在药物.

    作者:唐婷婷;施贝德 刊期: 2013年第09期

中华中医药学刊杂志

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主管:中华人民共和国国家中医药管理局

主办:中华中医药学会 ,辽宁中医药大学