朱永朝；李芳；韩飞；梁雪云；刘晓明；李玉奎；魏军
目的 探讨过氧化氢(H2O2)预处理增强骨髓间充质干细胞(BMSCs)存活和抗凋亡能力的作用及机制.方法 分离、培养、鉴定小鼠BMSCs.观察不同低浓度H2O2处理BMSCs 48 h后细胞的增殖,以及SDF-1及其受体CXCR4、CXCR7的表达;其次,观察经50 μmol/L H2O2预处理BMSCs 12 h后,再经500 μmol/L H2O2作用,或同时加入CXCR7抗体作用48 h,用Hoechst33342染核观察BMSCs凋亡率,Western blot检测Bcl-2、Bax、CXCR4、CXCR7和信号通路Akt/mTOR关键蛋白的表达.结果 25、50 μmol/L H2O2能有效促进BMSCs增殖;50、100 μmol/L H2O2能显著上调SDF-1、CXCR4、CXCR7表达;50 μmol/L H2O2预处理干细胞能显著增强迁移能力,而CXCR7抗体能阻断此效应;50 μmol/L H2O2预处理干细胞可显著抑制500 μmol/L H2O2引起的损伤,凋亡细胞核由30.97％±3.71％降至16.23％ ±2.51％ (P＜0.01),但仍然显著高于对照组(4.67％±2.37％)(P＜0.01);同样,预处理能显著下调Bax、上调Bcl-2表达(P＜0.05),上调Akt/mTOR通路关键蛋白磷酸化,CXCR7抗体则阻断此效应.结论 H2O2预处理通过CXCR7受体活化Akt/mTOR信号通路增强干细胞存活和抗凋亡能力.
作者：张娅；陈民佳；朱明；徐祥；黄宏；邱伟；邢伟；郭韡；杨戎 刊期： 2016年第03期
miR-221/miR-222是近几年发现的一类广泛存在于真核生物中、长度约22个核苷酸、进化上高度保守、具有转录后负性调节作用的小分子非编码RNA[1],能够负性调节该基因的蛋白表达,进而参与多种重要的细胞传导途径和生理病理过程[1].本研究通过分析不同甲状腺组织miR-221/miR-222的表达,探讨miR-221/miR-222在甲状腺癌发病中的作用及可能机制.
作者：王俊；颜秉菊；罗英 刊期： 2016年第03期
长链非编码RNA(lncRNA)是一类新的非编码调节基因,目前研究发现lncRNA可以在3个方面调节基因表达.它的表达受遗传物质改变的影响,并在神经胶质瘤细胞增殖、凋亡,细胞侵袭,细胞分化,血管再生等方面起着一定作用.LncRNA可以作为神经胶质瘤诊断的生物学标志,并作为神经胶质瘤的治疗靶点及辅助神经胶质瘤的治疗.
作者：王一；李学民；柳琛 刊期： 2016年第03期
目的 探讨铁过载对体外原代培养的小鼠睾丸支持细胞(SC)的影响.方法 取原代分离培养小鼠睾丸SC纯化并鉴定,加入不同浓度(50、100、200 μmol/L)右旋糖酐铁注射液,培养至24、48和72 h后收集细胞,光学显微镜与流式细胞术鉴定铁过载,流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平,试剂盒检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和一氧化氮(NO)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,Western blot与免疫细胞化学检测闭锁蛋白(occludin)、雄激素结合蛋白(ABP)、转铁蛋白(TRF)、抑制素(INH)和波形蛋白(VIM)的表达.结果 与对照组相比,铁过载组细胞内ROS、MDA、NO与NOS的含量显著增高(P＜0.01),GSH含量、SOD和GSH-Px的活性显著降低(P＜0.01),occludin、ABP、TRF、INH和VIM蛋白的表达明显降低(P＜0.05).结论 铁过载可导致体外培养的睾丸支持细胞氧化性损伤并降低其功能.
作者：李莉；赵昱；龚淼；王慧娟；高福禄 刊期： 2016年第03期
目的 建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的卵巢癌OVCAR3细胞系并研究CKS2敲除对卵巢癌OVCAR3细胞增殖的影响.方法 根据siRNA的原理设计2对靶向CKS2的shRNA序列,构建慢病毒表达质粒(pLVTHM/CKS2 shRNA重组质粒);先用pLV-tTR/KRAB-Red空载体制备慢病毒并感染OVCAR3细胞;在此基础上再用pLVTHM/CKS2 shRNA重组质粒制备慢病毒并感染上述OVCAR3细胞;对上述两次慢病毒感染的OVCAR3细胞,用强力霉素(DOX)处理72 h后,用real time PCR及Western blot检测CKS2 mRNA及蛋白的表达;用MTT法检测细胞增殖.结果 构建靶向CKS2的shRNA慢病毒表达质粒,包装出慢病毒并感染OVCAR3细胞;建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的OVCAR3细胞系,通过DOX诱导,可明显抑制该细胞系中CKS2在mRNA及蛋白水平的表达(P＜0.05,P＜0.01);CKS2敲除可明显抑制OVCAR3细胞的增殖.结论 建立稳定表达可诱导型CKS2 shRNA的OVCAR3细胞系,DOX诱导的CKS2敲除可明显抑制OVCAR3细胞增殖.
作者：董梦梦；孙倩玲；张灵芝；黄梦庭；卢红艳；张佳乐；袁成福 刊期： 2016年第03期
目的 探讨miR-30a在BMP9诱导间充质干细胞C2C12成骨分化中的作用.方法 BMP9条件培养基处理间充质干细胞C2C12诱导成骨分化,用real-time PCR连续检测miR-30家族成员的mRNA.用BMP9条件培养基作用Ad-mmu-miR-30a预处理的C2C12细胞,通过ALP染色和活性检测来反映早期成骨指标ALP的表达、分别在mRNA水平和蛋白水平检测中期成骨指标(OCN)的表达、用钙盐沉积来检测晚期成骨分化,用流式细胞术和MTT检测C2C12细胞的周期与增殖.后探讨miR-30a在BMP9诱导C2C12细胞成骨分化中的作用机制.结果 miR-30家族中,只有miR-30a在BMP9诱导C2C12细胞成骨分化中表达下调,miR-30a过表达后,通过靶基因Runx2使BMP9诱导成骨分化能力减弱,ALP的表达下降(P＜0.05),OCN蛋白水平和mRNA水平也都表达下调(P＜0.05),钙盐沉积受到抑制.结论 miR-30a可以抑制BMP9诱导C2C12细胞的成骨分化.
作者：李宝林；施琼；邓正华；温先勇；彭瑛；唐敏；刘靳波 刊期： 2016年第03期
甲状腺乳头状癌是由多种因素共同作用导致其发生、发展.解聚素-金属蛋白酶17(adisintegrin and metalloproteinase 17,ADAM17)是近被发现的一种具有蛋白剪切酶样作用的基因,研究表明在多种恶性肿瘤里呈高表达[1-2].为明确ADAM17在甲状腺乳头状癌中的表达及意义,本研究检测ADAM17在甲状腺乳头状癌组织及癌旁正常甲状腺组织中的表达情况,以期为将来临床应用提供理论依据.
作者：李晨浩；魏艳杰；田炜；陈建立；张国志 刊期： 2016年第03期
目的 研究miR-126基因敲减对小鼠胸腺细胞发育的影响,并初步探讨其意义.方法 观察miR-126基因敲减(KD)小鼠胸腺的体积、重量和细胞总数;Real-time PCR检测小鼠胸腺miR-126表达水平;HE染色观察小鼠胸腺形态学结构;FACS检测胸腺中淋巴细胞比例、核抗原Ki-67的表达以及细胞凋亡的变化;后,Western blot检测胸腺中磷酸化AKT(p-AKT)和磷酸化ERK1/2 (p-ERK)的表达.结果 WT和miR-126KD小鼠胸腺体积大小、重量以及细胞总数均无明显差异,但miR-126KD小鼠胸腺miRNA-126表达水平显著下调(P＜0.05).miR-126KD小鼠胸腺组织结构出现形态学异常.与WT小鼠相比,miR-126KD小鼠胸腺CD4+ SP细胞比例及细胞绝对数明显增加(P＜0.05),而CD4+ CD8+ (DP)细胞比例及绝对数则显著减少(P＜0.05),miR-126KD小鼠胸腺CD4+ SP细胞核抗原Ki-67表达显著增加(P＜0.05),且细胞凋亡明显减少(P＜0.05),而DP细胞Ki-67表达则明显减少(P＜0.05).后,miR-126 KD小鼠胸腺淋巴细胞中磷酸化AKT和磷酸化ERK1/2的表达水平明显下调(P＜0.05).结论 miR-126基因敲减可显著影响胸腺细胞特别是CD4+ SP细胞的发育,为后续进一步深入探讨miR-126对T淋巴细胞发育以及功能的影响提供重要的实验基础.
作者：郭萌萌；胡燕；赵娟娟；陶弋婧；秦娜琳；郑静；徐林 刊期： 2016年第03期
白藜芦醇(Res)作为一种天然植物的提取物,毒性极低.近年研究表明Res可通过ATP结合盒(ABC)跨膜转运蛋白家族、信号传导通路、SIRT1、诱导凋亡等机制增强耐药细胞对化疗药物的敏感性,具有显著的逆转肿瘤多药耐药(MDR)的作用,为有效解决肿瘤MDR的问题提供新的思路.Res有望成为一种新型耐药逆转剂.
作者：郭玉楷；史敏；秦永亮；李永军 刊期： 2016年第03期
目的 探讨TGF-βRI和Fascin1的相互作用.方法 用免疫荧光证实TGF-βRI和Fascin1的共定位.用GST pull-down和Co-IP的方法验证TGF-βRI和Fascin1的相互作用及其相互作用的位点.结果 TGF-βRI和Fascin1能共定位.Fascin1与TGF-βRI相互作用,相互作用位点是Fascin1的氨基端和TGF-βRI的膜内区.结论 TGF-βRI与Fascin1存在相互作用,相互作用位点是Fascin1的氨基端和TGF-βRI膜内区.
作者：张俊文；杜延顺；米蕊芳；陈虹；刘福生；黄秉仁 刊期： 2016年第03期
目的 利用三维可视化触屏平台这一新技术在外科规范化教学中的探索,分析其特点和教学应用前景.方法 在住院医师规范化培训研讨会上,对广大教育者进行培训,内容是利用该平台展示外科教学案例并总结经验,通过评分表打分,每项5分为高评价,1分为低评价,后收集反馈进行统计分析.结果 参加本环节的受试者共106人,年龄24 ～ 65岁.培训前对于将三维可视化触屏平台引入临床教学持中立态度(3.41±1.44),培训后则明显考虑将本平台引入临床教学(4.25 ±0.84) (P ＜0.001).培训后大家觉得本平台能够很好地将复杂解剖清晰立体化,在平台上运用真实案例进行学习非常有助于临床教学,为改进住院医师的培养提供了有用信息,分值均在4.20以上.结论 三维可视化触屏技术的不断应用有助于培养外科住院医师良好的形象思维和诊断能力,将进一步影响今后的教学和诊断模式,协助规范住院医师的培训.
作者：蔺晨；赵峻；杨华；林国乐；陈适；罗林枝；郑华；张宇成；潘慧 刊期： 2016年第03期
“慕课”作为一种新型的在线教育模式,已经被广泛地运用在教学中.本文阐述医学人文现状探讨如何将“慕课”应用在医学人文教育中,分析并提出了在医学人文发展中可能遇到的挑战.通过“慕课”对现代医学人文教育的改革,让医学课程设置合理化及医学师生获得更多的优质资源进而促进了医学人文的发展,是值得进一步探讨的话题.
作者：史晓普；崔文香；程丽楠；崔香淑 刊期： 2016年第03期
HACE1不仅是一种重要的肿瘤抑制基因,通过介导细胞自噬、Rac1的泛素化等多种作用机制发挥重要的肿瘤抑制作用,而且还涉及到众多的生物学功能,在心脏保护、抗氧化应激和细胞学动力学等方面发挥着关键作用.HACE1基因表达下调或突变在人类多种恶性肿瘤的发生、侵袭转移等过程中扮演重要角色,且与预后密切相关.因此,HACE1可能成为肿瘤治疗的一个新靶标,为恶性肿瘤的治疗提供新的方向和机遇.
作者：高增法；吴永娜；李汛 刊期： 2016年第03期
目的 利用小干扰RNA(siRNA)技术沉默肺腺癌细胞肺耐药相关蛋白基因(LRP),探讨其对肺腺癌紫杉醇耐药株(A549/TXL20)紫杉醇(TXL)敏感性的影响.方法 逐步增加药物浓度法建立A549紫杉醇耐药细胞株(A549/TXL20),用小干扰RNA技术沉默LRP在A549/TXL20细胞中的表达,以MTT法检测紫杉醇对A549/TXL20细胞的半数抑制浓度(IC50);以qPCR检测细胞中LRP mRNA的表达,Western blot检测细胞中LRP蛋白的水平,裸鼠腋窝皮下注射转染后的A549/TXL20细胞,建立裸鼠移植瘤模型,观察LRP靶向siRNA对人肺腺癌耐药细胞株A549/TXL20移植瘤耐药的影响.结果 肺腺癌紫杉醇耐药株(A549/TXL20)对紫杉醇的敏感性明显增强(P＜0.01),A549/TXL20细胞中LRP mRNA及蛋白表达显著增加(P＜0.01);siRNA沉默A549/TXL20细胞LRP基因后,与空白组和空质粒组比较,LRP mRNA及蛋白表达均被抑制(P＜0.01);小干扰RNA可提高荷瘤裸鼠对紫杉醇的敏感性.结论 siRNA可有效沉默A549/TXL20肺腺癌耐药细胞株LRP基因的表达,提高耐药的肺腺癌细胞对紫杉醇的敏感性.
作者：张善锋；王志举；崔景彬；张艳杰；张文瑾 刊期： 2016年第03期
目的 探讨孕中期超敏C反应蛋白(hsCRP)水平与妊娠期糖尿病(GDM)发病及血糖有关指标的相关性.方法 纳入GDM孕妇725人,糖耐量正常孕妇935人,详细记录受试者孕前体质量、身高、血压,于孕24 ～ 28周检测hsCRP、血糖、胰岛素水平.分析孕中期hsCRP水平与血糖和胰岛素水平及GDM发生的相关性.结果 GDM组的孕中期hsCRP水平明显高于糖耐量正常(NGT)组(P＜0.01).hsCRP水平升高是GDM发病的独立危险因素(P＜0.05).空腹血糖与hsCRP水平正相关(P＜0.05),50 g糖后1h血糖与hsCRP水平正相关(P＜0.05),100 g OGTT后1、2和3h血糖与hsCRP水平正相关(P＜0.05),糖化血红蛋白(HbA1c)与hsCRP水平正相关(P＜0.05),空腹真胰岛素与hsCRP水平正相关(P＜0.05),100 g OGTT后1、2和3h真胰岛素与hsCRP水平正相关(P＜0.05),HOMA-IR与hsCRP水平正相关(P＜0.05).结论 孕中期hsCRP水平升高能明显增加GDM的发病风险,可作为GDM诊断的指标之一.
作者：赵丽丽；李伟；平凡；马良坤；聂敏 刊期： 2016年第03期
目的 探索神经肽P物质(SP)对高氧暴露早产鼠肺组织的作用及与丝裂原活化蛋白激酶家族(MAPKs)信号传导机制的关系.方法 将早产鼠随机分为常氧组、常氧+ SP干预组、高氧组和高氧+SP干预组;实验第3、7及14天时,观察肺组织病理改变;测肺湿/干重;放免法测肺组织中SP的含量;分别采用硫代巴比妥酸法、亚硝酸盐法和二硝基苯甲酸法检测丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)水平;TUNEL法检测肺组织凋亡细胞;Western blot法检测MAPKs蛋白含量.结果 高氧暴露后肺组织损伤,湿/干重增加,SP含量降低,MDA含量增加SOD和GSH-Px含量降低(P＜0.05),凋亡细胞增多,并随着高氧暴露时间延长改变越明显,SP干预后肺损伤有所改善,湿/干重回降,MDA含量降低,SOD、GSH-Px含量增加(P＜0.05),TUNEL阳性细胞减少;高氧组细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)及P38激酶(P38)蛋白表达明显高于空气组(P＜0.05),且随时间的延长变化增大,而SP干预后ERK蛋白表达越加增强(P＜0.05),JNK、P38蛋白表达明显减弱(P＜0.05).结论 高氧可引起早产鼠肺组织氧化损伤;SP可通过干预MAPKs的表达从而保护氧化应激状态下肺组织.
作者：田名洋；李青；郑兴惠；毕云霞；许峰；黄波 刊期： 2016年第03期
目的 麻醉专业住院医师规范化培训期间使用TIE模拟器行经胸超声心动(TTE)培训是否较传统视频授课效果更好.方法 用两种授课方法进行前瞻性随机对照研究,将42名麻醉专业住院医师(1～3年级)随机分为对照组(视频授课)(n=21)和试验组(TTE模拟器授课)(n=21).授课前行笔试(时间45 min).效果评估采用课后笔试及志愿者实体TTE操作考核.操作考核包括获取正确图像及质量、解剖结构识别、获取正确图像所需时间.结果 培训前笔试分数无统计学差异.培训后测试结果试验组优于对照组:培训后笔试(43.3％±10.8％ vs 52.6％±17.6％,P＜0.05),操作考核获取正确图像质量(0～25分)(7.7±5.1 vs 17.1 ±4.8,P＜0.001),解剖结构识别(0 ～ 25分)(11.0±7.3 vs 18.2±6.3;P=0.001).结论 表明麻醉专业规范化培训期间TTE培训中,TTE模拟器与传统视频授课相比,前者可以使住院医师更好的掌握实际操作TTE图像获取技术及解剖结构识别.
作者：娄智超；李旭；白冰；王静捷；于春华；赵晶；黄宇光 刊期： 2016年第03期
目的 探讨生长抑素Ⅳ型受体激动剂(NNC 26-9100)对异氟醚麻醉所致老年鼠学习记忆障碍的改善作用.方法 将20月龄老年SD大鼠随机分为4组(n=14):对照组、异氟醚组、异氟醚+药物组和单纯药物组.异氟醚+药物组和单纯药物组侧脑室注射NNC 26-9100,而对照组和异氟醚组注射等量溶媒.24 h后异氟醚组和异氟醚+药物组吸入2％异氟醚4h,而对照组和单纯药物组吸人纯氧4h.通过Morris水迷宫检测记忆能力、real-time PCR和Western blot检测中性内肽酶(NEP)和胰岛素降解酶(IDE)在海马区表达.结果 与异氟醚组相比,异氟醚+药物组大鼠第2天及第3天逃避潜伏期缩短(P＜0.05),目的象限探索时间延长(P＜0.05).各组海马区NEP和IDE在mRNA及蛋白水平两两比较均无显著差异.结论 生长抑素Ⅳ型受体激动剂(NNC-9100)可显著改善异氟醚麻醉所致老年鼠学习记忆障碍.
作者：易端；史成梅；郭向阳 刊期： 2016年第03期
帕金森病(PD)是中老年期高发神经退行性疾病之一,其特点是患者出现明显症状时不可逆转的神经变性已发生,治疗与预后均不理想.脑电图(EEG)是神经科学研究的重要内容与手段,能够以高时间分辨率连续记录全脑电活动,并被广泛应用于PD研究中.本文回顾EEG在PD临床研究中的应用,从非运动症状、运动症状研究和疗效评估3方面展开.后论述其临床应用优势,并讨论EEG的局限性及其应用展望.
作者：王培培；王静；陈昭燃；李俊发 刊期： 2016年第03期
目的 探讨转染shArtemis干扰质粒对人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤的影响.方法 将人肝癌细胞分为正常对照组、脂质体对照组、空质粒对照组和转染shArtemis干扰质粒实验组(shArtemis实验组);建立DNA损伤模型,分别用0.625、1.25、2.5、5.0和10.0 μg/mL的丝裂霉素C作用BEL-7402/5FU细胞24和48 h,MTT法检测细胞活性,Western blot观察磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)的表达;转染Artemis干扰质粒,检测Artemis、γ-H2AX表达;彗星实验检测DNA的损伤.结果 0.625、1.25、2.5、5.0和10.0 μg/mL的丝裂霉素C作用48h后肝癌细胞活力明显下降(P＜0.05);丝裂霉素C刺激细胞48 h后,γ-H2AX的表达量随着药物浓度的增加而增加;转染shArtemis干扰质粒后,γ-H2AX的表达量较正常对照组增加(P＜0.05);shArtemis实验组较正常对照组拖尾DNA量增加(P＜0.05).结论 丝裂霉素C能够诱导肝癌细胞损伤;转染shArtemis干扰质粒促进丝裂霉素C诱导的人肝癌细胞BEL-7402/5FU DNA损伤.
作者：张雪；李大玉；祝小波；范芳；刘云；李长福 刊期： 2016年第03期
基础医学与临床杂志
主管:北京市科学技术协会
主办：北京生理科学会
