学术投稿

动脉移植BMSCs对脊髓缺血再灌注损伤大鼠脊髓细胞凋亡和caspase-9基因的影响

陈珊珊;金华

关键词:脊髓, 缺血再灌注, BMSCs, 移植, 凋亡
摘要:目的 探讨肾下腹主动脉移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺血再灌注损伤脊髓细胞凋亡、caspase-9表达及功能恢复的影响.方法 将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、移植组,每组8只.假手术组仅行手术操作;缺血再灌注组阻断肾下腹主动脉120 min后开放,恢复脊髓再灌注5 min后经动脉留置管推注1 mL培养基;移植组恢复再灌注5 min后推注100万BMSCs悬液1 mL.术后1、3和7d对大鼠进行BBB评分;用RT-PCR、Western blot 检测术后7d大鼠缺血节段脊髓内caspase-9基因和蛋白表达,TUNEL观察细胞凋亡.结果 缺血再灌注组和移植组大鼠BBB评分于术后1、3和7d均显著低于假手术组(P<0.01),移植组术后3、7 d BBB评分高于缺血再灌注组(P<0.01);移植组和缺血再灌注组损伤脊髓caspase-9 mRNA和蛋白表达水平较假手术组增加(P<0.01),缺血再灌注组增加更为显著(P<0.01).缺血再灌注组和移植组损伤脊髓内出现大量凋亡细胞,而移植组凋亡细胞数少于缺血再灌注组(P<0.01).结论 肾下腹主动脉移植BMSCs可通过抑制缺血再灌注损伤脊髓caspase-9表达,减轻脊髓局部细胞凋亡,改善其神经功能恢复.
基础医学与临床杂志相关文献
  • CMTM3表达下调参与肥厚性心肌病发病

    目的 探讨CMTM3在肥厚性心肌病患者的心肌组织中的表达情况及肥厚性心肌病的发病机制.方法 研究对象包括两部分:1)按每天15 mg/kg剂量腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌肥厚小鼠模型;2)2014年1月至2014年6月在阜外医院接受手术的肥厚性心肌病患者32例及3例正常心肌组织.使用半定量RT-PCR,real-time PCR及Western blot检测CMTM3在心肌组织转录和蛋白水平的表达.结果 1)在ISO诱导的心肌肥厚小鼠组织中,CMTM3 mRNA表达下调.2)在肥厚性心肌病患者病变的心肌组织中,CMTM3在转录水平和蛋白水平表达均下调.结论 CMTM3低表达致心肌组织增殖肥厚,可能参与了肥厚性心肌病发病.

    作者:徐飞;蒋知言;王欣;袁昕;凤玮 刊期: 2015年第07期

  • ATF4重组慢病毒抑制C2C12细胞增殖并促凋亡

    目的 构建人活性转录因子4(ATF4)慢病毒,探讨C2C12细胞成骨分化过程中ATF4基因慢病毒修饰对其增殖和凋亡的影响.方法 构建ATF4重组慢病毒载体质粒,然后与2个包装质粒共转入293T细胞中包装成ATF4慢病毒(LV-ATF4);用病毒感染C2C12细胞,并用流式细胞仪(FCM)检测BMP2诱导C2C12细胞分化时对其增殖凋亡的影响,免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的表达,电子显微镜观察凋亡细胞的形态学结构变化.结果 成功构建和包装了ATF4重组慢病毒.FCM检测结果表明,BMP2+ LV-ATF4处理组S期细胞(14.89%)低于BMP2+ LV-GFP组(30.64%) (P <0.05);BMP2+ LV-ATF4处理组细胞凋亡率(31.06%)高于BMP2+ LV-GFP组(11.39%)(P<0.05);凋亡相关蛋白的表达与FCM结果一致.结论 在BMP2诱导C2C12细胞成骨分化时,LV-ATT4慢病毒可促进C2C12细胞的凋亡,抑制其增殖.

    作者:夏飞;伍志盟;李美玲;邓莉;胡勤;郭风劲 刊期: 2015年第07期

  • 器官系统神经科学模块化教学初探

    神经科学是研究神经系统的综合性整合学科,人才的培养需要与之相适应教学模式.第四军医大学神经生物学教研室和人体解剖学组织胚胎学教研室联合开展模块化教学,采用理论、讲座、实验和PBL等多种方式,教师联合备课和穿插授课,探索适合神经科学的整合授课模式,提高了学员学习能力,也促进了教师授课能力和知识结构的提高.

    作者:王文挺;邝芳;罗层;邢俊玲;徐晖;胡三觉 刊期: 2015年第07期

  • 以人类脑计划为契机探索构建医学研究生神经生物学课程新体系

    近年来脑科学研究迅猛发展,各个国家相继推出“人类脑计划”.神经生物学作为脑科学研究的主干学科承载着对脑的结构和功能进行综合研究的重任.神经生物学研究生教育是培养脑科学领域高水平、高素质专业人才的重要途径,合理的课程设置是实现良好培养目标的重要环节,将直接影响所培养研究生的学术水平、创新能力及科研道德素养.本文结合第四军医大学神经生物学教研室近两年的实践经验,构建了一套集科学道德、理论教学、实验过程及技能培训于一体的全方位的神经生物学研究生课程新体系,为培养高素质的创新型人才奠定了坚实的基础.

    作者:罗层;王文挺;解柔刚;徐晖;邢俊玲 刊期: 2015年第07期

  • 临床医学毕业考试之客观结构化临床考试的实施效果调查

    探讨北京协和医学院毕业考试过程存在的问题,对考生进行问卷调查.问卷从考试的必要性、设计、组织及实施、标准化病人的表现、考核临床综合能力的效果、对今后学习的帮助、考试的公平性合理性客观性、及考试存在的问题和建议等方面进行了调查,客观结构化临床考试是一个相对公平、有效的临床技能综合评估方式,得到师生的认可,但在具体组织和实施方面需要更加关注专业性和细节性,建立客观结构化临床考试标准化流程.

    作者:涂文记;杨萍;潘慧;高小惠;管远志;赵峻 刊期: 2015年第07期

  • 过表达钙周期蛋白S100A6对子宫内膜异位症在位内膜间质细胞生物学行为的影响

    目的 探讨过表达钙周期蛋白S100A6对子宫内膜异位症(EMs)在位子宫内膜间质细胞生物学行为的影响.方法 体外培养EMs在位子宫内膜间质细胞,将慢病毒载体和表达S100A6的重组慢病毒Lv-S100A6分别处理在位内膜间质细胞,设对照组,用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell观察细胞迁移,流式细胞仪观察细胞凋亡.结果 Lv-S100A6组细胞的增殖活性明显高于干预组以及对照组(P<0.05).Lv-S100A6组细胞的迁移数明显高于干预组以及对照组(P<0.05).Lv-S100A6组细胞凋亡率为2.99%,明显低于对照组的13.48%和干预组的14.40% (P<0.05).结论 通过上调细胞中S100A6的表达水平能增加EMs在位子宫内膜间质细胞的增殖能力,促进细胞的迁移并抑制细胞的凋亡.

    作者:刘泽群;曹青;陈美红;张晓玲 刊期: 2015年第07期

  • 上调miRNA-205增强鼻咽癌细胞系CNE1的增殖和黏附

    鼻咽癌是发生在鼻咽黏膜的一种恶性肿瘤,具有高度侵袭和转移的特性.鼻咽癌的发病涉及多个癌基因与抑癌基因的共同参与,通过癌基因和抑癌基因之间相互作用的失常,导致细胞的恶性增殖产生癌变,进而发生癌症.

    作者:尹中普;孙晓 刊期: 2015年第07期

  • 肠源性TPH1、LRP5表达及血清5-HT水平与雄性大鼠增龄性骨量丢失相关

    目的 观察不同月龄SD雄性大鼠十二指肠TPH1、LRP5表达水平及血清5-HT水平,分析其在增龄中的变化及增龄性骨量丢失的相关性.方法 分别选取2、6、12、15和18月龄大鼠各6只,共30只,按照月龄分组以模拟增龄性模型.分别用RT-PCR法、Western blot法检测十二指肠TPH1和LRP5的mRNA和蛋白表达,用ELISA方法检测血清5-HT水平,双能骨密度仪测定大鼠离体股骨骨密度.结果 十二指肠TPH1 mRNA和蛋白表达及血清5-HT水平随年龄的增长而增加,与增龄性骨量丢失呈负相关性(P <0.001).结论 肠源性5-HT及其关键合成限速酶TPH1表达在增龄性骨量丢失中发挥着重要作用,可能成为老年性骨质疏松潜在治疗干预靶.

    作者:胡庭毅;张健;陈潇;蔡枭;熊科 刊期: 2015年第07期

  • MOOCs在医学教育领域中的现状分析和展望

    目的 分析医学教育领域中慕课课程(MOOCs)现状和展望发展趋势.方法 检索PubMed、CNKI、Google Scholar和Coursera等网络资源,以MOOCs和医学教育为关键词,总结MOOCs在全球医学教育领域中与医学生、医学考试和新型医学教育方法的融合现状.结果 全球范围内仅有很少的医学院校的医学专业课程与MOOCs相融合的案例,在理论和实践层面的探索均少有报道.结论 医学教育需要从MOOCs的崭新角度全方位进行认识和推动.

    作者:梁乃新;杨华夏;李琦;赵峻;潘慧 刊期: 2015年第07期

  • 二甲双胍激活AMPK通路减轻饱和脂肪酸诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性反应

    目的 观察二甲双胍对饱和脂肪酸(SFA)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性反应中炎性因子的影响及探讨其可能机制.方法 SFA干预RAW264.7巨噬细胞建立体外炎性反应模型;实验分为对照组、SFA干预组、二甲双胍+ SFA干预组、AMPK抑制剂Compound C+二甲双胍+SFA干预组;实时定量PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA的表达,ELISA法检测TNF-α和IL-6蛋白的分泌,Western blot分析腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)的磷酸化水平.结果 与对照组比较,SFA干预组RAW264.7巨噬细胞TNF-α、IL-6 mRNA表达及蛋白分泌水平均显著升高(P<0.05);与SFA组比较,二甲双胍+SFA干预组TNF-α、IL-6 mRNA表达水平及蛋白分泌水平均降低(P<0.05),而细胞AMPK的磷酸化水平增强(P<0.05);与二甲双胍+SFA干预组比,Compound C+二甲双胍+SFA干预组TNF-α、IL-6 mRNA表达及蛋白分泌水平均升高,AMPK磷酸化水平降低(P<0.05).结论 二甲双胍激活AMPK降低饱和脂肪酸诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性因子TNF-α、IL-6的分泌.

    作者:杨蕾;李蓉;李岱;敬媛媛;杨利;陶安阳;周庆菊;赵红燕 刊期: 2015年第07期

  • 男性不育患者Y染色体微缺失与性激素水平相关

    目的 分析Y染色体微缺失模式及与性激素水平之间关系,为男性不育患者的诊断与治疗提供依据.方法 使用多重PCR技术对798例男性不育患者进行15个序列标签位点的Y染色体微缺失检测,使用电化学发光技术检测性激素,同时检测100名男性作对照.结果 789例男性不育患者中共发现40例Y染色体微缺失,其中27例为无精子症患者,12例为严重少精子症患者.Y染色体常见缺失区域为AZFc,常见缺失模式为SY254+SY255.AZF区缺失不育患者组FSH水平明显高于无AZF区缺失不育患者组及男性对照组(P<0.05).结论 AZFc区为Y染色体常见的缺失区域,SY254+ SY255为常见缺失模式,FSH水平在AZFc微缺失患者中水平明显升高.

    作者:汪明;乔斌;李雯;李艳 刊期: 2015年第07期

  • LNAzyme特异性阻断丙肝病毒5'-NCR/C基因表达

    目的 探讨针对HCV 5'-NCR/C双靶基因位点的锁核酸核酶对病毒基因复制与表达的特异性抑制作用.方法 实验分对照组和实验组.对照组分别为空白对照组和脂质体对照组.实验组分别为单靶区NCR组、单靶区C组和双靶区NCR/C组.半乳糖配体介导转染HepG2.9706细胞,用荧光定量PCR检测细胞培养液中HCV mRNA表达;化学发光技术检测细胞培养液中荧光素酶基因表达;荧光显微镜系统检测细胞内荧光蛋白表达;四甲基偶氮唑蓝法检测细胞代谢.应用SPSS 19.0统计学软件分析.各组间比较采用重复测量方差分析的SNK检验和Kruskal Wallis H检验.结果 加入锁核酸核酶后,对HCV RNA的复制均显示有较强的抑制作用(F=77.50,P<0.05),单靶区NCR组、单靶区C组和双靶区NCR/C组的平均抑制率分别为62.12%、61.39%和75.37%;对荧光素酶的表达有抑制作用(F =48.65,P<0.05),平均抑制率分别为66.49%、65.06%和73.30%.给药后24、48和96 h,HCV mRNA的平均抑制率分别为52.36%、66.81%和75.05%;荧光素酶的平均抑制率分别为53.02%、62.98%和79.45%;细胞内的荧光蛋白表达阳性细胞数均较对照组明显减少(P<0.05).结论 针对5'-NCR/C基因位点的LNAzyme能特异性抑制丙型肝炎病毒的复制与表达,且双基因靶位优于单基因靶位.

    作者:邓益斌;农乐根;梁祚仁;覃羽华 刊期: 2015年第07期

  • 贵州地区汉族人群GDF5基因单核苷酸多态性与成人终身高的关系

    目的 探讨生长分化因子5(GDF5)基因rs143383、rs143384、rs6060369和rs224331位点单核苷酸多态性(SNPs)与贵州地区汉族人群成人终身高的相关性.方法 对贵州地区1 069例汉族健康体检者进行体格检查及问卷调查,收集抗凝血标本并提取DNA.用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)方法检测GDF5基因的SNPs,并分析其与身高的相关性.结果 成年女性中,GDF5基因rs143383、rs143384、rs6060369和rs224331基因型分布可分别解释身高变异的1.4%、0.9%、1.1%和1.0%(P<0.05);在GDF5基因rs143383和rs143384位点,携带GG基因型的个体平均身高均为高,分别比AG和AA基因型个体高1.7 cm (P<0.01)、2.3 cm (P<0.05)和1.6 cm (P<0.05)、2.1 cm(P<0.01);在GDF5基因rs6060369位点,携带CC基因型的个体平均身高分别比CT和TT基因型个体高1.7 cm (P<0.05)和2.2 cm (P<0.01).但是在成年男性中未发现GDF5基因上述SNPs位点与身高的相关性.结论 GDF5基因单核苷酸多态性与贵州地区成年汉族女性身高有关,GDF5基因可能是影响中国汉族成人女性身高个体差异的基因.

    作者:赵甜;朱惠娟;龚凤英;李乃适;单广良;潘慧;班博 刊期: 2015年第07期

  • 法舒地尔抑制AngⅡ诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖

    心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)主要由心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFb)的过度增殖、大量合成和分泌基质蛋白及胶原纤维所致.近来发现RhoA/ROCK信号通路与多种心血管疾病,如慢性心力衰竭、高血压和动脉粥样硬化等密切相关[1],但其在CFb增殖及心肌纤维化中的作用还缺乏深入研究.法舒地尔(Fasudil,Fas)是唯一应用于临床的Rho激酶特异抑制剂,临床发现其可改善高血压及心力衰竭患者的心功能.

    作者:郭冰冰;路明;李文杰 刊期: 2015年第07期

  • 光动力疗法对子宫内膜癌Ishikawa细胞系细胞周期和凋亡的影响

    目的 探讨光动力疗法(PDT)对子宫内膜癌Ishikawa细胞系细胞周期及凋亡的影响.方法 以四甲基吡啶卟啉(TMPyP)为光敏剂的PDT处理Ishikawa细胞,显微镜观察细胞形态;细胞计数试剂盒CCK-8检测细胞的存活率;流式细胞术检测细胞周期;使用Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞术检测细胞的凋亡;蛋白免疫印迹法检测Bcl-2、NF-κB P65及磷酸化NF-κB P65的表达.结果 PDT可以改变Ishikawa细胞的形态,降低细胞存活率(P<0.05),并与光敏剂TMPyP的浓度和激光能量密度有关;PDT引起细胞S期阻滞(P<0.05),诱导Ishikawa细胞发生凋亡(P<0.05),降低Bcl-2蛋白的表达和NF-κB P65的磷酸化水平(P<0.05).结论 PDT可能通过下调Bcl-2、NF-κB的活性引起Ishikawa细胞S期阻滞和细胞凋亡.

    作者:宗丽菊;王颉;刘洪丽;冯进波;张友忠 刊期: 2015年第07期

  • 癌症的分子生物学(第4版)

    在全球范围内,癌症都是极大危害人类生命和健康的一类重大疾病.因而,长期以来,针对癌症的研究始终是生命科学和医学领域的热点和重点.随之而来的是,关于癌症的教科书、参考书、专业书等琳琅满目,汗牛充栋,极其丰富,不易选择.

    作者:徐宁志 刊期: 2015年第07期

  • 血栓素受体参与子痫前期的发病

    目的 探讨血栓素受体(TPr)与子痫前期发病机制的关系.方法 用免疫组化和实时荧光定量PCR(real-time PCR)的方法检测36例子痫前期孕妇(病例组)和34例正常妊娠孕妇(对照组)胎盘中血栓素合酶(TXS)、血栓素受体(TPr)和非吞噬细胞氧化酶1(NOX1)的表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测胎盘TXA2的表达.结果 TXS和TPr蛋白主要表达在细胞滋养细胞、合体滋养细胞和绒毛血管内皮细胞的胞质中,NOX1蛋白主要表达在细胞滋养细胞、合体滋养细胞、绒毛血管内皮细胞及间质细胞的胞质中.子痫前期组胎盘TXS和NOX1蛋白、mRNA表达和TXA2表达均强于对照组(P<0.05).子痫前期TXA2表达与新生儿体质量呈负相关(P<0.01).TXA2表达与NOX1 mRNA表达呈正相关(P<0.05).结论 TXA2可能通过TPr通路导致胎盘产生过量ROS并向母体血液循环释放,参与子痫前期的发病过程.

    作者:胡继芬;何芳杰;陈丽红;吴建波 刊期: 2015年第07期

  • 黏蛋白-2与肠黏膜屏障损伤的研究进展

    黏蛋白-2(MUC2)是肠黏液层主要成分,覆盖于肠上皮细胞顶端,主要由杯状细胞分泌,在润滑肠道、为肠内抗菌蛋白及共生菌群提供黏附位点、抵御肠内致病菌及有害物质入侵等方面发挥着重要功能.近年来MUC2在肠道黏膜屏障损伤中的作用研究日趋受到学者重视,这也可能是肠黏膜屏障损伤的一个重要治疗突破口.

    作者:王娜;唐雪婵 刊期: 2015年第07期

  • 岩藻多糖抑制小鼠心肌梗死后的心脏重构

    目的 观察裙带菜提取物岩藻多糖对小鼠心肌梗死后心脏重构的影响.方法 将小鼠随机分为假手术组、心肌梗死模型组(采用冠状动脉左前降支结扎建立该模型)、低浓度或高浓度岩藻多糖处理组(心肌梗死术后每日灌胃给予200或500 mg/kg岩藻多糖处理).每日观察小鼠死亡情况,3周后采用超声心动图检测心功能,病理染色检测心肌梗死面积和,用RT-PCR检测心肌SOD、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)以及炎性因子TNFα、IL-1β和TGFβmRNA表达,Western blot检测eNOS信号通路相关蛋白.结果 岩藻多糖能明显改善心肌梗死小鼠的心功能(P<0.05)、减少梗死面积(P<0.05),提高生存率(P<0.05).与对照组相比,心肌iNOS和炎性因子TNFα、IL-1β及TGFβ mRNA表达明显下降(P<0.05),SOD mRNA的表达明显增高(P<0.05);岩藻多糖能激活eNOS信号通路.结论 岩藻多糖能减轻小鼠心肌梗死,其作用机制可能与其抗炎、抗氧化及激活eNOS信号通路有关.

    作者:王晓玲;陈曼华 刊期: 2015年第07期

  • 慢性乙型肝炎患者血清中sICOS和sPD-1升高及意义

    目的 检测慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中可溶性可诱导共刺激分子(sICOS)和可溶性程序性死亡蛋白1(sPD-1)的蛋白水平,并初步探讨其意义.方法 收集80例CHB患者和30例健康对照者外周血单个核细胞(PB-MCs)和血液上清.根据HBsAg和HBeAg测定值,将CHB患者分为HBeAg(-)和HBeAg(+)两组;并将HBeAg(+)组分为免疫耐受期和免疫清除期.用ELISA法检测以上研究对象外周血上清中sICOS和sPD-1蛋白浓度.用实时荧光定量PCR检测PBMCs中ICOS、PD-1和PD-1△ex3的表达.结果 与对照相比,sICOS在CHB患者中均增高(P<0.05);而sPD-1仅在HBeAg(+)组显著增高(P<0.01),其中免疫清除期比免疫耐受期患者增高更明显(P<0.05).CHB患者的sPD-1与AST呈正相关(P<0.01);且HBeAg(+)组的sPD-1与ALT呈正相关(P<0.01);CHB患者的sICOS与HBV-DNA呈弱的负相关性(P<0.05).活化前,两组CHB患者的ICOS mRNA表达水平均降低(P<0.05).结论 sICOS和sPD-1在CHB患者的血清中均异常增高,提示sICOS和sPD-1可能参与了CHB的发生发展.

    作者:王东生;杜琴;刘彦信;张国元;郑德先 刊期: 2015年第07期

基础医学与临床杂志

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主管:北京市科学技术协会

主办:北京生理科学会