景元海；杨小玉；赵丛然；李恒；郭明峰；汪群；王强
背景:由于中枢神经损伤后局部微环境病理生理机制极其复杂,尤其急性期炎性反应及继发胶质瘢痕形成对有效轴突再生、局部神经细胞再生排列及局部干细胞增殖迁徙影响极大,成为早期阻碍神经修复的根本原因,故如何有效拮抗损伤区急性期炎性损伤因素,优化神经再生微环境是目前脊髓损伤修复的重要策略之一.目的:应用大鼠脊髓损伤模型,设计构建并筛选佳白细胞介素6受体α表达抑制shRNA腺病毒表达载体.设计:重复测量实验.单位:深圳市第二人民医院脊柱外科.材料:选用健康Wistar大鼠40只,雌雄不拘,鼠龄8～10周.兔抗鼠GFAP一抗购自Santa Cruz公司,siRNA构建真核表达质粒pGenesil(携带绿色荧光表达系统)购自武汉晶赛生物工程技术公司.方法:实验于2006-11在武汉同济医学院基础医学部免疫教研室开放实验室及深圳市第二人民医院医学实验中心完成.针对白细胞介素6受体α基因编码序列设计并合成三对9 bp茎环结构19 bp干扰序列特异性shRNA模板,体外构建带绿色荧光蛋白的重组腺病毒表达载体;并建立大鼠急性脊髓损伤模型,损伤后12 h局部注射编码shRNA重组腺病毒,通过实时荧光定量RT-PCR及Western blot技术,观察RNA干扰后损伤脊髓局部白细胞介素6R表达抑制效果,筛选佳抑制白细胞介素6R表达的腺病毒表达载体.主要观察指标:RNA干扰后损伤脊髓局部IL-6RRNA表达、蛋白表达水平抑制效果.结果:序列测定证实白细胞介素6R-shRNA重组腺病毒表达载体构建成功,通过实时荧光定量RT-PCR,Western blot技术筛选出佳白细胞介素6R-shRNA效应腺病毒表达载体,在mRNA及蛋白表达水平抑制白细胞介素6R基因表达效率分别为49%和56%.结论:构建并筛选成功的白细胞介素6R-shRNA效应腺病毒表达载体,在大鼠急性脊髓损伤模型中能高效抑制白细胞介素6R基因表达.
作者：高明勇；肖建德；李振宇；闫洪印；余铮；田长庆；陈扬；顾洪生 刊期： 2007年第32期
目的:观察牵张成骨修复颅骨缺损过程中硬脑膜组织力学性能的变化.方法:实验于2006-03/12在武汉大学人民医院外科实验室完成.①实验材料:选用健康清洁级山羊30只,18～24个月龄,体质量18～20 kg,性别不限,由武汉大学医学院实验动物中心提供(SCXK(鄂)2003-2004).②实验方法:将山羊单纯随机分为6组:7d组(牵张第7天),固定0,2,4,8周组,正常对照组,每组5只.取实验组山羊25只,切开颅顶,暴露颅顶区骨面,裂钻行10 mm×25 mm颅骨切开,仔细分离硬脑膜,移去骨块,形成骨缺损,建立颅骨缺损牵张模型.延迟7 d后开始牵张,牵张速率为0.8 mm/d,2次/d,每次0.4 mm,间隔12 h,总牵张距离10 mm.分别于牵张中(牵张第7天)、牵张结束当天(固定期第0周)、固定期第2,4,8周处死动物,处死后将各组动物沿牵张区外5 mm切取硬脑膜组织20 mm×30 mm.正常对照组5只动物不实施手术,取同样大小颅顶区硬脑膜组织.③实验评估:标本修整后分别沿牵张方向和垂直牵张方向切成长宽比为5:1的窄条形试件,浸入人工脑脊液直接送实验室,进行单向拉伸实验和拉伸蠕变实验,观察硬脑膜弹性模量和在相同载荷条件下应变值变化.结果:30只山羊全部进入结果分析.①不同时期两个方向硬脑膜组织弹性模量变化:不同时期两个方向硬脑膜组织弹性模量:沿牵张方向硬脑膜弹性模量在牵张期逐渐增加,至固定期第2周大,以后逐渐下降,至固定期第8周接近正常;在垂直牵张方向上,硬脑膜弹性模量值无明显变化.②不同时间硬脑膜在相同载荷条件下的应变值变化:当突然加载荷时有一初始变形,随后在该载荷作用下标本的变形随时间变形缓慢增加,但幅度很小.正常对照组初始应变值ε约为0.03,牵张中、末应变值变化与正常对照组一致,固定第2,4周ε增加,至第8周趋于正常.结论:硬脑膜组织在牵张过程中出现适应性改建,牵张成骨修复颅骨缺损对硬脑膜组织力学性能无不良影响.
作者：周海孝；余墨声；胡静；戚孟春 刊期： 2007年第32期
目的:通过长骨干骨折脂肪栓塞综合征患者内固定植入物及其方式的合理选择,以大限度减少手术创伤及减少对骨折端的刺激,有效避免脂肪栓塞综合征的复发.方法:①对象:选择1998-02/2006-03唐山市第二医院创伤科收治长骨干骨折行内固定植入的脂肪栓塞综合征患者26例.②方法:采用非扩髓髓内钉固定股骨干、胫骨干中段骨折及多段骨折、微创经皮钢板内固定股骨干远端骨折及胫骨干远近端骨折、钢板固定肱骨干、桡骨骨折;术后早期进行系统的康复治疗;并接受随访.术后定期复查X线片,并观察材料及宿主反应.结果:①术后随访:16例患者术后随访12～24个月,10例患者随访25～108个月.②X线摄片评定骨折愈合结果:长骨干骨折髓内钉固定于术后10～17周临床愈合;微创经皮钢板固定,于术后9～19周临床愈合;钢板固定,于术后13～20周临床愈合.无髓内钉松动及断钉、断板等并发症,肌力5级,未发现脂肪栓塞综合征后遗症.③植入物与组织的生物相容性能评估:术后无切口感染、局部炎症反应、排异反应.结论:对于长骨干骨折的脂肪栓塞综合征患者,非扩髓髓内钉、微创经皮钢板及钢板3种内固定植入物及植入方式均可满足不同部位及类型长骨干骨折的需要,植入物与人体具有良好的生物相容性,不增加脂肪栓塞综合征复发率及后遗症.
作者：王宏伟；王晓敏；苏立新；李冀；贾庆灵；王志强 刊期： 2007年第32期
目的:总结微创经皮钢板置入内固定治疗胫腓骨骨折的技术操作特点,并观察材料及宿主反应.方法:2004-06/2006-10在济宁医学院附属金乡医院对18例胫腓骨骨折患者在微创手术下进行了手术置入内固定材料.男13例,女5例,年龄17～73岁.术后按Johner-Wruhs方法评价测试各大关节功能,分为优、良、中、差.全部病例进行临床随访.术前、术后1周、6周、3个月、半年及1年分别摄X线片与健侧对比测量患肢外观、成角、旋转和短缩情况,并观察材料及宿主反应.结果:①本组病例切口均顺利愈合,术后3～14 d出院.②全部获得随访,平均随访时间14个月;骨愈合时间3～10个月.③按Johner-Wruhs方法评价功能,优13例,良4例,中1例,差0例,以优良为满意标准,本组病例总体满意率94.4%.④术后1例出现跛行步态,中度疼痛,骨成角畸形15°,可能因为患者对不锈钢材料有排斥反应造成固定不牢所致.结论:微创经皮钢板置入内固定材料治疗胫腓骨骨折具有手术创伤小、骨折愈合快、功能恢复好的特点;内固定材料未出现特殊材料反应与宿主反应.
作者：徐海波；张普晟；王洪兵 刊期： 2007年第32期
背景:目前国内外学者对骨性翼腭窝局部解剖学和影像学作了一些研究,而有关骨性翼腭窝的断层解剖学研究尚缺乏.目的:在成人颅骨标本的冠状面和水平面上测量翼腭窝的有关孔距和径抖值,观察翼腭窝在相应切面上的形态.设计:重复测量设计.单位:成都医学院科研处.材料:实验于2006-03/2006-11在成都医学院人体解剖学教研室局部解剖实验室完成.选取中国成人完整无损干性颅骨30例(60侧),未分年龄、性别.方法:对30个(60侧)成人干性颅骨标本左右两侧的翼腭窝进行切片,其中15个行冠状面切片,另15个行水平面切片,观察测量翼腭窝在相应层面的形态和有关孔距和径值,并对所得结果进行统计学分析.主要观察指标:①在冠状面上测量:眶圆距(眶下裂低处与圆孔中心之间的距离);圆翼距Ⅰ(圆孔与翼管中心之间的上下垂直间距);圆翼距Ⅱ(圆孔出现处与翼管出现处之间的距离).②在水平面上测量:前后径(每层面上与腭骨垂直板相平行的翼腭窝前后壁间距大值);左右径(每层面上腭骨垂直板中点至翼腭窝前壁外后突出处和翼腭窝后壁前外突处连线的中点之距离).③分别在冠状面、水平面上观察:各层面上翼腭窝的形态.结果:①冠状面上,左右两侧翼腭窝的第1～6层70%(21侧)呈斜倒梯形,30%(9侧)呈斜四边形,第7～10层均表现为管形.右侧眶圆距平均值为(5.0±2.7)mm,左侧眶圆距平均值为(5.3±2.1)mm;右侧圆翼距Ⅰ平均值为(6.4±3.9)mm,左侧圆翼距Ⅰ平均值为(6.1±4.3)mm;右侧圆翼距Ⅱ平均值为(7.3±2.6)mm,左侧圆翼距Ⅱ平均值为(7.5±2.1)mm.②水平面上,左右两侧翼腭窝第一二层其前、后壁主要表现为凸面均向后的双弧形80%(24侧);第三四层主要表现为凸面相对的双弧形约66.7%(20侧);第五六层主要表现为管形60%(18侧);第7～10层则全部表现为管形.水平面上,第1～6层翼腭窝左右径大于前后径,第7～10层翼腭窝左右径约等于前后径.左右两侧样本间翼腭窝各层面径值差异不明显(P＞0.05).结论:骨性翼腭窝断层解剖学研究弥补了对其局部解剖的局限,为翼腭窝影像学及相关外科手术提供了可靠的解剖学依据.
作者：刘卫华；李鑫；马大军；刘亚国；王伦安 刊期： 2007年第32期
目的:观察小檗碱对转基因小鼠胰岛β细胞株胰岛索受体和胰岛索样生长因子1受体mRNA表达的影响.方法:实验于2005-09/2006-10在华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所完成.①实验材料:培养NIT-1细胞,在低糖(5.5 mmol/L)和高糖(11.1 mmol/L)环境下,分别加入0,1,3,10,30 μmol/L的小檗碱和1 μmol/L的格列苯脲,0 μmol/L小檗碱组为空白对照组.②实验评估:培养24 h后,采用四甲基偶氮唑盐法检测小檗碱NIT-1细胞增殖抑制作用;逆转录-聚合酶链反应测定NIT-1细胞胰岛素受体和胰岛素样生长因子1受体mRNA表达.结果:①四甲基偶氮唑盐法检测发现,不同浓度小檗碱(1～30 μmol/L)与NIT-1细胞作用24 h后,小檗碱组吸光度值比空白对照组低,随着小檗碱浓度的增加,吸光度值逐渐从0.356±0.061降低至0.162±0.014,而且在各组之间有显著性差异.②在低糖及高糖环境下,与空白对照组相比,小檗碱能促进NIT-1细胞胰岛素受体mRNA的表达(低糖环境:0.27±0.04,0.49±0.02;高糖环境:0.22±0.04,0.42±0.03;P＜0.01),但仍低于格列苯脲组(低糖环境:0.75±0.22;高糖环境:0.78±0.01;P＜0.01);而且随着小檗碱浓度的升高,NIT-1细胞胰岛素受体mRNA表达的增加更为明显,分别从0.49±0.02增高至0.68±0.44及从0.42±0.03增高至0.71±0.01.与空白对照组相比,小檗碱组胰岛素样生长因子1受体mRNA的表达无明显改变.结论:小檗碱促进胰岛素分泌,其作用机制可能与促进胰岛β细胞胰岛素受体mRNA表达有关.
作者：余渊；陆付耳；冷三华；徐丽君；王开富；董慧 刊期： 2007年第32期
目的:观察经皮椎体内注入骨水泥(聚甲基丙烯酸甲酯)治疗脊椎骨质疏松压缩性骨折的疗效.方法:自2005-06/2006-06吉林大学中日联谊医院骨科及大庆龙南医院骨科对35例40个椎体的骨质疏松压缩性骨折患者使用经皮椎体内注射骨水泥,行椎体成形术.成形材料:美国KYPHON公司生产的骨水泥,生产准许号:(GB/T19001-2000和YY/T0287-1996).结果:35例患者均参加随访6个月.术后均未出现骨水泥外漏、脊髓或马尾神经损伤等并发症.35例患者中5例出现穿刺部位局部疼痛,服用镇痛药物后均缓解.疼痛完全消失25例,占71.4%;明显缓解8例,占22.6%;轻度缓解2例,占6.0%;无缓解0例.15例患者在术后72 h内均能下床活动.术后未再发生压缩性骨折及疼痛.结论:经皮椎体注入骨水泥可以有效改善椎体骨质疏松压缩性骨折患者疼痛症状,随访6个月未出现充填剂不良性宿主反应,临床疗效较好.
作者：景元海；杨小玉；赵丛然；李恒；郭明峰；汪群；王强 刊期： 2007年第32期
目的:了解兔屈趾肌腱Ⅱ区伤口愈合过程中转化生长因子β1受体在不同时间和部位的表达情况.方法:实验于2004-09/2005-07在青岛大学医学院附属医院动物实验中心完成.①实验材料:清洁级成年新西兰大白兔42只,体质量4.0～4.5 kg,雌雄不拘.②实验干预及分组:36只成年新西兰大白兔左前中趾Ⅱ区屈趾深肌腱被完全切断并修复为实验组,分别于1,7,14,21,28,56 d获取肌腱,每个时间点6只;另取6只兔,不损伤和修复屈趾肌腱做对照组.③实验评估:用Western blot和免疫组织化学技术分析两组转化生长因子β1受体的表达差异.结果:①Western blot发现实验组切断修复后的肌腱转化生长因子β1受体蛋白的上调,主要集中在腱鞘、腱外膜和沿肌腱切口处,在14 d达到高峰至56 d才明显降低;对照组只见极少的受体表达.②免疫组织化学染色结果与Western blot是一致的.结论:肌腱损伤修复后,肌腱和腱鞘转化生长因子β1受体的表达明显增加,在术后14 d达到高峰,56 d开始降低,这种受体上调可能为屈指肌腱术后瘢痕形成的生物学调节提供新的途径.
作者：张才龙；夏长所 刊期： 2007年第32期
目的:扫描电镜观察正常兔膝关节表面的结构,为研究关节软骨表面结构提供正常参照.方法:实验于2001-01/09在四川省骨科医院完成.日本大耳白兔8只,10～12个月龄,雌雄各半,体质量(3.5±0.2)kg.通过扫描电镜对8只实验兔股骨髁、胫骨髁的软骨表面进行观察,其中4个髁用锐器划伤.结果:纳入日本大耳白兔8只,均进入结果分析.每个正常髁的表面都显示有大量的浅坑,有锐器划伤的髁则出现了垄沟及隆突.软骨表面在高倍镜下呈现一种均匀多孔状结构.结论:软骨表面唯一呈现的结构是浅坑,垄沟和隆突可能是标本的采集、制作过程中形成的赝象.
作者：戴国钢；刘波；罗小兵；彭雪梅 刊期： 2007年第32期
目的:观察血管内皮生长因子在口腔扁平苔藓上皮细胞中的表达.方法:①实验材料:选择2005-01/2006-03在泰山医学院附属医院经临床与病理检查确诊的7例口腔扁平苔癣患者口腔黏膜损害标本,所有患者此前均未经任何治疗,无其他系统性疾病,伴有系统性疾病者不纳入研究范围.②实验方法:分离上皮层和固有层后,体外培养口腔扁平苔癣上皮细胞,提取总RNA和蛋白质,另取5例来源于本科手术切除的正常口腔黏膜作为对照,患者知情同意.③实验评估:以逆转录-聚合酶链反应检测口腔扁平苔癣和正常口腔黏膜上皮细胞血管内皮生长因子mRNA的表达,蛋白免疫印迹检测血管内皮生长因子蛋白质的表达水平.结果:①正常口腔黏膜上皮细胞和口腔扁平苔癣的上皮细胞均表达血管内皮生长因子4种亚型:血管内皮生长因子121、血管内皮生长因子145、血管内皮生长因子165和血管内皮生长因子189.其中血管内皮生长因子121、血管内皮生长因子165和血管内皮生长因子189 mRNA在口腔扁平苔癣上皮细胞水平明显高于正常口腔黏膜上皮细胞的表达,差异具有显著意义(P＜0.01).②蛋白免疫印迹发现口腔扁平苔癣黏膜上皮细胞血管内皮生长因子蛋白质水平较正常口腔黏膜上皮细胞表达增加(P＜0.01).结论:血管内皮生长因子mRNA和蛋白质在口腔扁平苔癣上皮细胞中表达增高.
作者：张古泉；龙跃州；邢在臣；杨明峰；贾玉生 刊期： 2007年第32期
目的:调查广东省各地区人群腰臀比,分析其特点.方法:以2000年广东省参加全国成年人体质监测的20～59岁8个年龄段(每5岁为1个年龄段)的31 145名成年男女的原始测量数据为样本,以依靠腰围和臀围派生出来的腰臀围比值作为评价指标,与中国2000年国民体质监测统计数据中相应年龄段的成年人统计数据进行比较;另外按照广东省地域特点将广东省成年人分为东部地区、中部地区、西部地区3个组别,比较不同地域人群腰臀比特点.结果:2000年广东省参加全国成年人体质监测的20～59岁的31145名成年人全部进入结果分析,无脱落.①广东省成年女子20～35岁各年龄段人群腰臀比百分数均低于全国成年女子相应年龄段(P＜0.01),35～54岁各年龄段与全国水平相当,55岁后迅速增长超过全国水平(P＜0.01).②广东省成年男子20～40岁各年龄段人群腰臀比百分数均低于全国成年男子相应年龄段(P＜0.01),40岁以后腰臀围比值迅速增长,与全国同年龄段成年男子相当.③广东男性45岁前腰臀比百分数无地区差异,中部地区男子从40岁开始腰臀比百分数明显低于东部地区(P＜0.01),西部地区男子则从45岁开始低于东部地区(P＜0.01),中、西部地区之间差异无显著性意义(P＞0.05).④成年女子腰臀比的地区差异比较明显,20～34岁,45～49岁年龄段各地区间存在两两差异(P＜0.05～0.01);35～44岁,东、西部地区人群女子腰臀比百分数高于中部地区(P＜0.01);55～59岁,东部地区人群女子腰臀比百分数高于中、西部地区(P＜0.05).结论:①35岁之前广东省成年人腰臀比值均低于全国成年人,广东省成年女子55岁以后腰臀比值迅速增长超过全国水平.②45岁前广东成年男子腰臀比无地区差异,成年女子在任何年龄段均存在腰臀比差异,可能与地域间工作人口流动有关.
作者：周泉；周北云；李稚 刊期： 2007年第32期
目的:创面微环境中许多细胞都能不同程度的产生活性氧等自由基.观察氧化应激对大鼠真皮成纤维细胞生物学行为的影响,有利于认识创面愈合的机制.方法:实验于2005-09/2006-03在上海市烧伤研究所完成.①实验材料:体质量为200～220g的清洁级雄性SD大鼠,由中科院上海动物实验研究所提供.②实验方法:取SD大鼠背部皮肤组织,消化分离表皮真皮,剪成0.1 cm×0.2 cm真皮块,置于含体积分数为0.10 FBS的DMEM培养瓶中,在37 ℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中培养,每周换液2次.约7～10 d后,成纤维细胞逐渐从真皮块中迁移出来,并且大量增殖,待原代培养成纤维细胞生长融合成片,用0.05%胰酶-EDTA消化,用含体积分数为0.10 FBS的DMEM终止消化,离心后,按1:3分装传代.取对数生长期的成纤维细胞,培养24 h后,分别以20,50,100,150 μmol/L H2O2干预成纤维细胞,另设空白对照(不加H2O2)及凋零组(只加Hank's液不加细胞).③实验评估:采用MTT法观察细胞活力,流式细胞仪观察细胞凋亡,荧光探针DCFH-DA进行活性氧检测,脂质过氧化物测试盒测试细胞丙二醛含量.结果:①MTT法观察细胞活力:随着H2O2浓度增加,成纤维细胞活力明显降低,各H2O2干预组吸光度值均较空白对照组低(P＜0.01).②流式细胞仪测定细胞凋亡:与空白对照组相比,20 μmol/L H2O2干预组细胞凋亡无明显变化,100 μmol/LH2O2干预组细胞凋亡明显升高(F=47.78,P＜0.01).③细胞内活性氧的测定:与空白对照组相比,20,100 μmol/L H2O2干预组细胞活性氧产生明显升高(F=166.557,P＜0.01,P＜0.01).④细胞内脂质过氧化物测定:与空白对照组相比,20 μmol/L H2O2干预组细胞脂质过氧化产物丙二醛含量无明显变化,100 μmol/L H2O2干预组细胞脂质过氧化产物丙二醛含量明显升高(F=5.756,P＜0.01).结论:氧化应激能导致大鼠真皮成纤维细胞细胞活力下降,凋亡增加,抗氧化治疗可以作为难愈性创面的治疗策略.
作者：杨国志；王润秀；林源；陆树良；梁自乾；刘达恩；葛奎；乔亮；宋振强；黄飞 刊期： 2007年第32期
背景:有报道1型糖尿病可导致骨再生与修复障碍,局部注射成纤维细胞因子2可明显促进骨折愈合,但其对2型糖尿病的影响尚不十分清楚.目的:观察重组人成纤维细胞生长因子2和可溶性肿瘤坏死因子Ⅰ型受体蛋白联合治疗2型糖尿病引起的骨再生及其修复障碍的作用.设计:随机对照实验.单位:中南大学湘雅三医院骨科.材料:选择雄性Zucker糖尿病大鼠(ZDF/Gmi-fa/fa)20只,10周龄,购自美国查尔斯河实验室.重组人成纤维细胞生长因子2购自美国Orquest公司,可溶性肿瘤坏死因子Ⅰ型受体蛋白购自美国Amgen公司.方法:实验于2006-09/11在中南大学湘雅三医院中心实验室完成.①实验分组:将20只大鼠随机分为对照组和治疗组,每组10只.②实验方法:检测大鼠体质量,血糖、尿糖和尿酮.1周后,接受左胫骨中上段低能截骨,安置外延长固定架.第2天起开始胫骨延长0.2 mm/次,2次/d,共14 d.期间治疗组大鼠接受截骨处血肿内重组人成纤维细胞生长因子225 μg/kg注射1次,可溶性肿瘤坏死因子Ⅰ型受体蛋白8 mg/kg皮下注射隔日1次,共14 d;对照组仅接受载体和生理盐水注射.③实验评估:测定血液生化指标、胫骨延长间隙中新生骨量及增殖细胞数量.主要观察指标:两组血液生化指标、胫骨延长间隙中新生骨量及增殖细胞数量比较.结果:纳入大鼠20只,全部进入结果分析.①两组血糖、尿糖、尿酮、血清胰岛素和骨钙素比较,差异不明显(P＞0.05).②治疗组大鼠左胫骨延长间隙内新生骨的面积、密度和骨内膜成骨、骨膜成骨均明显高于对照组(P＜0.05～0.01).治疗组大鼠的胫骨牵引间隙中的纤维间区和初始骨基质前沿增殖细胞核抗原阳性细胞及百分比均明显多于对照组(P＜0.05～0.01).结论:2型糖尿病可引起骨再生与修复障碍,重组人成纤维细胞生长因子2和可溶性肿瘤坏死因子Ⅰ型受体蛋白联合治疗可促进成骨细胞增殖,加快牵引成骨速率,有利于2型糖尿病合并骨折的愈合障碍.
作者：刘振东；钟杰林；徐诣；苗杰 刊期： 2007年第32期
目的:骨形态发生蛋白与骨延长关系的报道很少.为观察其对于牵拉骨再生延长区骨愈合的作用,将重组人骨形态发生蛋白2经皮注射到兔胫骨延长区,行组织学验证.方法:实验于2004-06/2005-03在吉林大学基础医学院实验动物中心完成.①实验材料:雄性日本大耳白兔30只;重组人骨形态发生蛋白2(由美国哈佛医学院分子骨科中心Oliver博士馈赠).②实验干预及分组:制作日本大耳白兔延长区骨再生不良动物模型24只,行快速延长,2次/d,1 mm/次,2 mm/d,共延长10 d,共2 cm.将兔子随机分为2组,每组12只.对照组,延长结束后延长区注射醋酸盐缓冲液;重组人骨形态发生蛋白2组,延长结束后延长区注射醋酸盐缓冲液溶解的重组人骨形态发生蛋白2.③实验评估:延长结束后2周、4周时2组各取4只兔,麻醉后处死,进行延长区拍摄X射线片及延长区骨标本组织学光镜检查.结果:术中兔死亡及针道处骨折6只,24只进入结果分析.①延长区X射线片评价:延长结束后2周和4周时,显示重组人骨形态发生蛋白2组新生骨痂明显多于对照组,延长结束后4周时重组人骨形态发生蛋白2组髓腔开始形成.②延长区组织学观察结果:延长结束后4周时,对照组延长区周新生软骨、骨增多,融合成片,出现编织骨.重组人骨形态发生蛋白2延长区软骨细胞吸收矿化,转化为编织骨,并逐渐向皮质骨改建塑形.结论:牵拉骨再生延长结束后,延长区经皮注射重组人骨形态发生蛋白2,经间接X射线及组织学直接验证,对延长区骨愈合有促进作用.
作者：徐鹏；王丹辉；李长胜；张新 刊期： 2007年第32期
目的:观察骨髓基质干细胞与异种脱蛋白松质骨复合修复尺骨缺损的可行性.方法:实验于2006-01在辽宁医学院附属第一医院外科实验室(省级重点实验室)完成.①实验材料:取12月龄健康杂种犬18只,体质量(15.0±2.2)kg.②实验方法:将所有动物的双侧尺骨制备成中断20 mm骨-骨膜缺损模型,骨髓基质干细胞与脱蛋白松质骨于体外复合培养后,将其植入其中16只犬的右侧缺损处作为实验组,左侧植入单纯脱蛋白松质骨作为对照组,另2只犬不植入任何材料为空白组.③实验评估:在4,8,12周分别行大体标本、扫描电镜和组织学观察,比较3组骨缺损修复的能力.结果:纳入健康杂种犬18只,均进入结果分析.4周时实验组支架材料部分吸收,植入物表面有纤维骨痂形成,对照组支架材料少量吸收,植入物表面有少量骨样组织形成;8周时,大体标本及组织学观察,实验组中的支架材料已完全降解,骨缺损部分修复,对照组中植入物两端少量新骨形成,材料中为纤维骨样组织;12周时,实验组骨缺损完全修复,对照组植入物两端有新骨包绕,与骨端连接紧密.12周时空白组骨缺损未修复.结论:利用体外扩增培养的骨髓基质干细胞与异种骨组合,具有较强的骨传导和骨诱导活性.
作者：李晖；刘丹平 刊期： 2007年第32期
目的:观察糖尿病大鼠视网膜细胞间黏附分子1表达及羟苯磺酸钙对细胞间黏附分子1表达的影响.方法:实验于2004-09/2005-02在山东医学高等专科学校实验室完成.①实验分组:雄性SD大鼠55只,随机选择10只为正常对照组,其余大鼠均腹腔注射链脲佐菌素,72 h后断尾取血测空腹血糖≥16.7 mmol/L者为造模成功,成模大鼠随机分为糖尿病模型组20只和羟苯磺酸钙治疗组20只.②实验方法:羟苯磺酸钙组大鼠给予羟苯磺酸钙120 mg/(kg·d)灌胃.其他两组大鼠灌胃等量生理盐水.③实验评估:12周后麻醉下处死动物,检测血糖、糖化血红蛋白水平;光镜下观察大鼠视网膜病理变化;以RT-PCR法检测细胞间黏附分子1 mRNA表达;Western blot法检测细胞间黏附分子1蛋白表达.结果:5只造模未成功弃之不用,余50只大鼠进入结果分析.①血糖:糖尿病模型组及羟苯磺酸钙治疗组血糖均高于正常组(P＜0.01).羟苯磺酸钙治疗后血糖有下降趋势但差异无统计学意义(P＞0.05).②糖化血红蛋白水平:糖尿病模型组高于正常组(P＜0.01).羟苯磺酸钙治疗组与正常组相比差异无显著性(P＞0.05).③细胞间黏附分子1 mRNA表达:细胞间黏附分子1 mRNA在糖尿病组表达强,羟苯磺酸钙组表达低于糖尿病组(P＜0.01).④细胞间黏附分子1蛋白表达:各组均有细胞间黏附分子1表达,糖尿病大鼠较正常大鼠表达增强,羟苯磺酸钙治疗后呈下降趋势.结论:糖尿病大鼠视网膜细胞间黏附分子1表达增强,羟苯磺酸钙对糖尿病大鼠视网膜具有保护作用,其保护作用机制可能与降低细胞间黏附分子1表达有关.
作者：李梅；胡建廷 刊期： 2007年第32期
目的:观察别嘌呤醇对兔心肌梗死后血浆和心肌细胞因子水平及心功能、心室重构的影响.方法:实验于2004-09/2005-06在南昌大学第二附属医院动物试验室完成.①分组和造模:18只新西兰大白兔随机分为假手术组、模型组和别嘌呤醇组,每组6只,后2组采用液氮冷冻法制造心肌梗死模型.②给药:术后别嘌呤醇组每日给予别嘌呤醇(广州彼迪药业有限公司)40 mg/kg,另2组给予等量安慰剂.③观察指标:梗死后4周进行超声检查和血流动力学测定;同时采用酶联免疫法检测各组血浆及心肌组织白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平;VG染色检测各组兔心肌间质胶原含量.结果:经补充后18只兔进入结果分析.①心脏超声检查结果:与假手术组相比,其他2组兔室腔明显增大(P＜0.01),室壁运动明显减弱,左室射血分数明显降低(P＜0.01);别嘌呤醇组和模型组相比,室腔明显减小(P＜0.01),室壁运动明显增强,左室射血分数明显升高(P＜0.01).②血流动力学检测结果:与假手术组相比,其他2组兔左室舒张末压显著升高(P＜0.01),左室收缩末压及左室内压上升/下降大速率显著降低(P＜0.01);别嘌呤醇组和模型组相比其左心室的舒、缩功能均等到明显改善(P＜0.01).③细胞因子检测结果:其他2组血浆及心肌组织和白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平都显著高于假手术组(P＜0.01),而别嘌呤醇组低于模型组(P＜0.01).④心肌间质胶原含量检测结果:模型组和别嘌呤醇组含或不含小血管视野胶原容积百分比都显著高于假手术组(P＜0.01),而别嘌呤醇组低于模型组(P＜0.01).结论:别嘌呤醇可以改善兔心肌梗死后血浆及心肌组织细胞因子水平,别嘌呤醇改善心功能和抑制心室重构可能与其降低细胞因子水平的作用相关.
作者：王曾庚；吴清华；刘燕娜；程晓曙；苏海；吴延庆；李菊香 刊期： 2007年第32期
背景:反义药物的研究仍然是当前生物医学领域较为活跃的热点之一,其具有高效特异的优势,作为基因治疗的途径已受到许多研究者的关注.目的:观察脂质体介导角蛋白14反义寡核苷酸对人角质形成细胞K14基因和蛋白表达及体外增殖活性的影响.设计:单一样本观察.单位:解放军第四军医大学西京医院皮肤科.材料:人表皮角质形成细胞、K14寡核苷酸基因片段(全硫代修饰,以上序列均由上海生工生物工程公司合成).反转录酶、TaqDNA聚合酶均购自Invitrogen公司,K14单抗购自Antibody公司,SABC试剂盒购自博士德.EPICS-PRO-FILEⅡ流式细胞仪(美国Coulter).方法:人表皮角质形成细胞原代培养,3～10代用于实验,利用脂质体将人工合成的正义、反义及错配K14寡核苷酸基因片段导人角质形成细胞,并设空白组作对照.应用流式细胞仪、反转录聚合酶链式反应和免疫组化方法检测反义寡核苷酸对角质形成细胞的细胞周期、K14基因和蛋白表达的影响.主要观察指标:寡核苷酸转染人角质形成细胞后对角质形成细胞增殖和K14表达的影响.结果:①反转录聚合酶链反应产物电泳显示:各组均出现特异的K14基因条带,反义组基因表达明显低于正义组、错义组和空白组.正义组、错义组和空白组K14/β-actin比值相近(P＞0.05);而反义组明显低于前述3组(F=47.554,P＜0.01).②免疫组化法检测K14蛋白表达:培养的角质形成细胞均表达一定水平的K14,加入反义寡核苷酸(ASODN)后,K14表达明显减少,20 μmol/L浓度的反义寡核苷酸即可显著抑制K14的表达;而对照细胞组K14的表达没有明显变化.③流式细胞仪检测DNA含量变化:经K14反义寡核苷酸处理细胞48 h,可见细胞处于G1期细胞比例明显上升(74.6%),S期细胞比例明显下降(19.4%),而正义组,错义组及空白组均无此变化.结论:反义寡核苷酸可特异地抑制K14的合成,从而抑制人角质形成细胞的增殖.
作者：陈玉欣；郑淑云；李巍；刘玉峰 刊期： 2007年第32期
目的:观察葛根素对去卵巢骨质疏松性骨折大鼠胰岛素样生长因子1表达的影响.方法:实验于2005-02/2006-01在解放军第四五四医院骨科和南京医学院完成.实验材料:葛根素购自中国生物药品鉴定所.SD雌性大鼠40只,8月龄,体质量(280±19)g,由南京医学院实验动物中心提供.实验方法:将大鼠用4%戊巴比妥钠40 mg/kg腹腔内麻醉,在无菌条件下行双侧卵巢摘除术,术后继续饲养2个月,借助骨折器建立股骨闭合性骨折模型.按随机排列表法分为对照组和治疗组,每组20只.治疗组术后给予灌胃20 mg/(kg·d)剂量的葛根素,对照组给予2 mL生理盐水处理.于骨折后第2周利用Western-blot和RT-PCR方法检测胰岛素样生长因子1蛋白与胰岛素生长因子1 mRNA表达,观察葛根素对胰岛素生长因子1表达的影响.结果:40只大鼠全部进入结果分析.①Western-blot检测胰岛素生长因子1蛋白:与对照组相比,治疗组胰岛素生长因子1蛋白表达明显升高(1.40±0.09,3.2±0.31,P＜0.05).②RT-PCR分析胰岛素生长因子1 m RNA表达:与对照组相比,治疗组胰岛素生长因子1 mRNA表达明显升高(12.3±2.09,23.1±1.32,P＜0.05).结论:葛根素可以通过调节胰岛素生长因子1的表达,从而可能加快去卵巢大鼠骨质疏松性骨折的愈合.
作者：周强；付庭斌 刊期： 2007年第32期
目的:不同牵引节奏对腰椎间盘突出症的治疗效果是否可以产生影响?分组比较其效果,以探索疗效更好、不良反应更少的牵引方法.方法:①对象:选择2005-10/2006-04山东省立医院门诊和病房以及济南华飞骨伤医院病房收治的腰椎间盘突出症患者220例,男116例,女104例;年龄(17～68)岁;病程1 d～3年.②分组:按随机数字表法将患者分为一维牵引慢牵快放组60例,一维牵引快牵慢放组60例,三维牵引慢牵快放组50例,三维牵引快牵慢放组50例.各组性别、年龄、病程均衡.③干预:各组患者在普通治疗的基础上施以不同牵引节奏的牵引治疗.一维牵引慢牵快放组和快牵慢放组:应用山东省医疗器械研究所生产的WQL-307型牵引床,牵放时间分别为3～5 s/0.5 s,0.2 s/1 s;三维牵引慢牵快放组和快牵慢放组:应用济南市华飞产业有限公司生产的C型电脑三维牵引床,牵放时间分别为3～5 s/0.5 s,0.2 s/1 s;各组牵引距离为40～60 mm,均牵引一两次,间隔不少于5 d.④评估:观察各组患者临床疗效及治疗前后口本骨科学会(JOA)总评分变化.结果:220例患者全部进入结果分析.①临床疗效:一维慢牵快放牵引组的总有效率优于一维快牵慢放牵引组(91.67%,78.33%,P＜0.05);三维慢牵快放牵引组的总有效率优于三维快牵慢放牵引组(96.00%,80.00%,P＜0.05).②治疗前后JOA总评分比较:一维慢牵快放牵引组前后差值与一维快牵慢放牵引组前后差值比较,差异有显著性(8.50±3.89,6.02±2.61,P＜0.05),三维慢牵快放牵引组前后差值与三维快牵慢放牵引组前后差值比较,差异有显著性(9.14±4.09,6.78±2.45,P＜0.05).结论:无论是一维牵引慢牵快放还是三维牵引慢牵快放的疗效都优于传统的快牵慢放牵引法.慢牵快放牵引法能使手法的颤压力更有效地传递到突出物上,在安全前提下可牵引距离更大,相应椎间隙加大,后纵韧带牵张力增加,更有利于突出物变位还纳.
作者：王海泉；孟迎春；范璞 刊期： 2007年第32期
中国组织工程研究杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社
