学术投稿

富碘中药海藻对甲状腺细胞凋亡及凋亡调控基因的影响

辛彩虹;高天舒;杨文学;李红梅

关键词:海藻, 甲状腺, 细胞凋亡
摘要:目的:通过观察富碘中药海藻对碘缺乏机体甲状腺滤泡上皮细胞凋亡,Fas,FasL,Bcl-2蛋白表达的影响,分析富碘中药过量对甲状腺损伤的机制.方法:实验于2006-03/09在辽宁中医药大学实验中心完成.①实验干预:选用健康鼠龄4周的Wistar大鼠150只.取120只喂低碘饲料建立缺碘大鼠模型,随机分为4组,每组30只:单纯高碘组喂含碘2 000μg/L的双蒸水;模型组喂等体积双蒸水;常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组分别灌胃海藻生药量13.5 g/(kg·d)和40.5 g/(kg·d).以其余30只大鼠为正常对照组:正常饮食,每日灌服等体积双蒸水.②实验评估:分别在给药0,7,28 d后取材.采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导原位缺口末端标记确定甲状腺滤泡上皮细胞凋亡细胞数.采用免疫组化方法观察甲状腺滤泡上皮细胞Fas,FasL,bcl-2表达.结果:大鼠150只均进入结果分析.①凋亡细胞数:给药后7 d,常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组低于模型组,差异有非常显著性意义(P<0.01).常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组低于单纯高碘组,差异有显著性意义(P<0.05).给药后28 d,正常对照组甲状腺滤泡上皮细胞凋亡细胞数低于其他4组,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05~0.01).常规剂量海藻组高于单纯高碘组,差异有显著性意义(P<0.05).②Fas,FasL,Bcl-2蛋白表达:给药7 d后,常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组Fas蛋白的表达低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05).单纯高碘组和3倍剂量海藻组FasL表达低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05).常规剂量海藻组Bcl-2蛋白表达高于模型组,差异有显著性意义(P<0.05).给药28 d后,单纯高碘组和3倍剂量海藻组Fas蛋白的表达低于模型组,差异有显著性意义(P<0.05).单纯高碘组、常规剂量海藻组和3倍剂量海藻组Bcl-2蛋白表达高于模型组,差异有显著性意义(P<0.05).结论:富碘中药海藻给药28 d可造成碘缺乏大鼠甲状腺细胞损伤,Fas,FasL,bcl-2可能参与诱导细胞凋亡.
中国组织工程研究杂志相关文献
  • 肾移植术后糖尿病的发病率及丙型肝炎在其发病过程中的作用

    目的:肾移植术后糖尿病已成为影响患者术后短期及长期存活率的一项严重并发症.总结肾移植术后糖尿病的发病率及独立危险因素,并分析丙型肝炎病毒感染在其发病过程中的可能作用.方法:选择2000-01/2004-01在首都医科大学附属北京友谊医院行肾移植,术后服用他克莫司的患者58例,均知情同意.实验分组:①预防组(n=15):移植术前处于术前免疫功能高危状态.他克莫司起始剂量为10~12μg/L.②治疗组(n=25):移植术后出现耐激素性排斥反应,需要抗体治疗.他克莫司起始剂量为10~15μg/L.③转换组(n=18):移植术后出现高血脂、顽固性高血压、慢性移植肾功能减退等情况,传统药物疗效欠佳,需将环孢霉素A转为他克莫司.他克莫司起始剂量为8~10 μg/L.进行随访观察,分析3组患者服用他克莫司1年内出现的肾移植术后糖尿病的发病率及丙型肝炎病毒感染的发病率.结果:58例患者全部进入结果分析.①58例患者中肾移植术后糖尿病的发病率为12.08%,服用他克莫司后出现肾移植术后糖尿病的平均时间为52 d;丙型肝炎病毒感染的发病率为15.52%,丙型肝炎病毒感染患者中肾移植术后糖尿病的发病率高于非丙型肝炎病毒感染患者(44.44%,6.12%,P=0.001).②丙型肝炎的发病率3组间差异无显著性意义(P>0.05);预防组及治疗组移植术后糖尿病发病率显著高于转换组(20%,16%,0%,P<0.05).③多变量统计分析结果显示,在肾移植术后2个月内服用他克莫司的患者,丙型肝炎病毒与他克莫司的剂量是导致肾移植术后糖尿病的独立危险因素;丙型肝炎病毒感染患者出现肾移植术后糖尿病的危险性比非丙型肝炎病毒感染患者高出8.3倍,他克莫司浓度每增加1μg/L,患者出现肾移植术后糖尿病的危险性将增加12%.结论:肾移植术后服用他克莫司的患者肾移植术后糖尿病的发病率与丙型肝炎病毒感染密切相关.

    作者:孙雯;张磊;唐雅望;杜林栋;田野 刊期: 2007年第38期

  • 冷缺血时间及血液相容性与移植胰岛细胞活性的关系

    背景:在胰岛移植过程中,胰岛细胞的数量和胰岛细胞的活性是非常重要的.胰岛细胞移植中玲缺血时间和组织相容性是关系胰岛细胞移植能否成功的关键问题.目的:观察冷缺血时间及血液相容性不同对于胰岛细胞数量和活性的影响.设计:观察性实验.单位:广西中医学院附属瑞康医院.材料:采用脑死亡自愿捐赠者的器官(已知血型和HLA配型),在其他器官切取后或同时进行胰腺的获取;血型相同、HLA配型相符的血液;HLA配型高致敏(错配3个以上位点)或群体反应性抗体>50%或淋巴毒阳性受者的血液;分离纯化后的胰岛细胞悬浊液,经过70μm的筛网滤过后,保留直径大于70μm的胰岛细胞,配置成浓度1.20×105L-1左右活性胰岛细胞悬浊液.方法:高渗枸橼酸盐嘌呤溶液经过腹主动脉原位灌注后,参照文献进行肝、肾、胰腺联合及分别切取.用于切取的时间:胰腺肾脏的联合切取、肝脏胰腺肾脏的联合切取方法平均需时15 min,肝脏、胰腺、肾脏的单独切取平均需时20 min,用于胰岛分离的胰腺12份,冷缺血时间2.5~8 h.冷却血时间在5 h以内的9份,温缺血时间0~3 min,消化的时间15±2.4 min.采用胶原霉P进行消化分离胰岛细胞,双硫腙、丫腚橙染色测定不同的冷缺血时间条件下活性胰岛细胞活性,分析体外胰岛细胞和血液与供受者的组织相容性和胰岛细胞存活的关系.主要观察指标:胰岛细胞活性率和血小板、中性粒细胞和单核细胞计数.结果:肝、肾、胰腺联合切取及各器官的单独切取顺利,在玲却血5 h以内胰岛细胞活性率都在80%以上,用于胰岛细胞移植的胰腺和其他器官的切取不会影响胰岛细胞的活性;人类胰岛暴露于未经抗凝的人类血中,胰岛将诱发一个迅速的血细胞消耗;进行血小板、中性粒细胞和单核细胞计数,HLA错配组和HLA匹配组与对照组比较血细胞都发生明显的消耗;加入肝素后血细胞计数与对照组比较差异明显(P<0.05),反应明显减轻.HLA匹配组和HLA错配组胰岛细胞体外培养24 h活性胰岛细胞数量较,差异明显(P<0.05).结论:在冷缺血时间<5 h的情况下获取的胰腺可以用于临床胰岛细胞的移植;血液相容性好能够明显提高胰岛细胞移植的成功率.

    作者:高宏君;梁泰生;杨欢;罗向东;吴佩钟;谭臻;梁芳芳 刊期: 2007年第38期

  • 延边地区汉族和朝鲜族居民脂肪分布与代谢异常的关系

    目的:了解延边地区朝鲜族和汉族居民的脂肪分布特征及其与血压、血脂及血糖的关系.方法:于2006-08-8/17在延边地区九龙和翁声社区随机选择40~60岁朝鲜族和汉族常住居民2 378名进行内脏脂肪率和体脂肪率以及血压、血脂、血糖等生化指标的检测.调查以健康体检形式进行,①内脏脂肪和体脂肪率测定采用日本TANITA株式会社生产的BC-600型体成分计测定,并且按其判定标准确定超过标准者[内脏脂肪率≥15%(男)、≥10%(女),体脂肪率(40~59岁)≥23%(男)、≥36%(女),体脂肪率(≥60岁)≥25%(男)、≥37%(女)].②取清晨空腹(禁食12 h)静脉血,采用日立-7600-010全自动生化分析仪测量血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖等指标.③高血压的诊断标准:收缩压≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)及或舒张压≥90 mm Hg.④血脂异常的诊断标准:总胆固醇≥5.72 mmol/L,三酰甘油≥1.7mmol/L,高密度脂蛋白胆固醇<0.90mmol/L(男)、<1.0mmol/L(女).⑤高血糖的诊断标准:空腹血糖≥6.1 mmol/L.结果:①汉族男性的内脏脂肪率和体脂肪率均值分别为(10.51±3.66)%和(22.70±4.85)%,朝鲜族男性分别为(9.16±3.81)%和(20.28±5.02)%,汉族均高于朝鲜族(P<0.01);汉族女性的内脏脂肪率和体脂肪率分别为(6.22±2.27)%和(35.31±5.65)%,朝鲜族女性分别为(5.88±2.19)%和(34.00±5.72)%,汉族均高于朝鲜族(P<0.01).②汉族男性的内脏脂肪率和体脂肪率超标率分别为12.1%和45.8%,朝鲜族男性分别为7.8%和28.6%,汉族均高于朝鲜族(P<0.05);汉族女性的内脏脂肪率和体脂肪率超标率分别为6.7%和47.9%,朝鲜族女性分别为3.8%和37.3%,汉族均高于朝鲜族(P<0.05).③Logistic逐步回归分析结果表明,内脏脂肪率与民族、性别、年龄、高血压、高三酰甘油血症和高血糖有密切关系;体脂肪率与民族、性别、高血压、高三酰甘油血症、低高密度脂蛋白血症和高血糖有密切的关系.结论:①延边地区汉族居民内脏脂肪率和体脂肪率平均水平及其超标率明显高于朝鲜族.②内脏脂肪率和体脂肪率均与民族、性别、年龄(体脂肪率除外)、高血压、高三酰甘油血症和高血糖相关.

    作者:方今女;周巍;金平锡;孙男;熊英环;尹思恩 刊期: 2007年第38期

  • 力竭性运动对大鼠血浆心钠素及心肌血供的影响

    目的:观察不同训练程度大鼠力竭性运动后血浆心钠素含量及心肌缺血情况,探讨力竭性运动对大鼠心脏内分泌以及心肌血供的影响.方法:实验于2006-10/12在武汉体育学院细胞与分子生物学实验室完成.选择SD大鼠16只,按随机数字表法分为3组,安静对照组(n=4)笼内生活,自由饮食;游泳力竭组(n=6)适应性喂养1周后进行一定的适应性游泳训练;长期耐力训练游泳力竭组(n=6)训练8周,6次/周.8周后,后两组大鼠进行力竭性运动,运动后取大鼠血浆,采用放射免疫法测定心钠素含量;取心肌组织,制作光镜切片,采用Nagar-Olsen特殊染色法检测心肌缺血情况.结果:16只大鼠全部进入结果分析.①在经过8周的运动训练后,游泳力竭组、长期耐力训练游泳力竭组大鼠血浆心钠素含量显著高于安静对照组(P<0.05,<0.01);长期耐力训练游泳力竭组大鼠血浆心钠素含量显著高于游泳力竭组(P<0.05).②游泳力竭组大鼠心肌组织缺血较为严重;而长期耐力训练游泳力竭组大鼠心肌组织与安静对照组相比,也有缺血现象发生,但没有游泳力竭组严重.结论:力竭性运动会造成大鼠心血管内分泌活性物质心钠素的失调,并造成心肌组织缺血;长期耐力游泳训练可以使大鼠心脏结构及功能产生一定的适应性改变.

    作者:刘霞;李伟;徐国栋 刊期: 2007年第38期

  • 中国人胚胎肝组织来源纤溶酶原kringle5基因的克隆与序列分析

    目的:分离、克隆和测定中国人纤溶酶原Kringle5功能区基因,为进一步研究其功能奠定基础.方法:实验于2002-06/2003-05在广州医学院金域医学检验中心完成.①实验材料:国人胚肝组织取自广州医学院第一附属医院的流产胚胎(取得家属同意,并经广州医学院第一附属医院伦理委员会批准).pET21a(+)载体购自Novagen公司,大肠杆菌BL21(DE3)为医学检验中心保存.引物均由上海生工合成.②实验方法:从国人胚肝组织中提取mRNA,用反转录-聚合酶链反应方法将人纤溶酶原Kringle5的cDNA扩增出来,克隆到pET21a(+)载体中测序.③实验评估:采用紫外分光光度仪和琼脂糖凝胶电泳分析胚肝组织总RNA的抽提结果;经琼脂糖凝胶电泳鉴定Kringle5的反转录-聚合酶链反应扩增结果;pET-Kringle5重组质粒的酶切鉴定;序列测定.结果:①胚肝组织提取总RNA结果:提取的总RNA经紫外分光光度仪测得A260nm/A280nm>1.8,A260nm/A270nm>1.2,表明无蛋白残留;电泳结果显示提取的总RNA有明显的28 S、18 S两条带,说明RNA基本完整.②Kringle5的反转录-聚合酶链反应扩增结果:人Kringle5 cDNA片段长为240 bp,加上引物设计的2个酶切位点,总长度为258 bp,聚合酶链反应产物长度与该长度一致,符合预期结果.③pET-Kringle5重组质粒的构建和酶切鉴定结果:用引物所带的限制性内切酶BamH I、Nde I双酶切,结果有250 bp左右条带出现.④序列测定结果:证实国人纤溶酶原Kringle5功能区基因被成功克隆,序列分析证实为该基因,未发现有基因突变或多态性现象,但第153位核苷酸与文献比较存在碱基替代现象,其组成的密码子由于遗传的简并性,所编码的氨基酸相同,并未造成氨基酸组成的改变.结论:中国人纤溶酶原Kringle5功能区cDNA基因编码序列与国外文献报道的相应序列可能存在碱基替代现象.

    作者:甘舜进;胡朝晖;曾征宇;燕启江;陈广南 刊期: 2007年第38期

  • 脑海马CA3区星形胶质细胞激活及环氧化酶2、核因子κB表达变化与雷公藤甲素的干预

    目的:观察雷公藤甲素对脂多糖诱导的海马内慢性炎症CA3区星形胶质细胞活化及相关因子的影响,为雷公藤甲素应用于临床治疗提供实验依据.方法:实验于2006-07/11在中南大学湘雅医学院人体解剖学教研室实验室完成.选用30只SD大鼠,按随机数字表法分为3组(n=10):①雷公藤甲素组:海马内注射脂多糖10μL制备海马慢性炎症模型后,腹腔注射雷公藤甲素20μg/kg,1次/d.②单纯脂多糖组:制备海马慢性炎症模型.③生理盐水组:海马注射10μL生理盐水.每组分别取术后7 d,14 d两个时间点(n=5),应用免疫组织化学染色结合图像分析方法观察海马CA3区注射部位胶质纤维酸性蛋白、环氧化酶2和核因子κB的表达变化.结果:①与生理盐水组比较,单纯脂多糖组可以引起海马星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白表达增加,胞体变大,突起粗大;神经元环氧化酶2表达增加,阳性产物位于细胞浆;神经元核因子κB免疫阳性产物表达增加,阳性产物位于细胞浆和细胞核内.②雷公藤甲素可下调脂多糖诱导的胶质纤维酸性蛋白、环氧化酶2及核因子κB的表达,同时逆转星形胶质细胞的形态变化.结论:雷公藤甲素可能通过抑制海马炎症反应过程中星形胶质细胞的激活以及环氧化酶2、核因子κB的表达发挥其抗炎和神经保护作用.

    作者:李小红;简晓红;代玉桥;邓小华;罗学港;雷德亮 刊期: 2007年第38期

  • 肾小管泌氢功能检测在肾移植对抗排斥反应治疗效果中的应用

    背景:移植后的急性排斥是肾移植术后的主要并发症,也是导致慢性排斥反应和移植物失功重要的危险因素,因此,了解肾小管泌氢功能能否早期反映移植物的功能情况有重要意义.目的:观察肾移植患者术后肾小管泌氢功能,并进行监测,探讨其在移植物急慢性排斥中的作用.设计:病例-对照观察.单位:解放军济南军区总医院泌尿外科.对象:选择2000-05/2005-06解放军济南军区总医院泌尿外科连续实施肾脏移植26例患者,男16例,女10例;年龄21~58岁,平均35岁.原发病均为慢性肾小球肾炎,慢性肾功能衰竭,全部为尸肾移植.供受者均血型相同、淋巴细胞毒试验阴性.其中1例为第2次移植.所有患者对检测项目知情同意.方法:依据典型的临床表现,彩色多普勒超声及血流变化诊断患者排斥反应,16例患者未发生排斥反应为稳定组,10例发生排斥反应的患者为排斥组,排斥组根据排斥情况分为排斥前期、排斥期及恢复期.对所有患者术前及术后1周起每周1次,连续10周分别以化学清洁玻璃瓶留取晨起中段尿测定尿可滴定酸、NH4+和净酸水平评估肾小管泌氢功能.主要观察指标:两组患者尿可滴定酸、NH4+和净酸水平.结果:纳入患者26例均进入结果分析.排斥反应组排斥前期患者肾小管泌氢功能各检测值显示泌氢功能开始建立,并趋向正常,排斥期患者肾小管泌氢功能检测值均显示明显下降,与排斥前期及稳定组比较均有统计学显著性差异(P<0.01).恢复期患者排斥反应治疗后监测的结果显示泌氢功能恢复较快.肾小管泌氢功能总体连续观察结果显示总体恢复的不均衡性,大部分病例恢复时间从1~10周不等,平均恢复期限约6周,2例10周内未恢复,4例严重排斥者中3例治疗后泌氢功能恢复缓慢.结论:肾小管泌氢功能可弥补血清肌酐不能良好反映肾小管功能的不足,能在连续观察中对移植肾急性排斥反应的诊断,特别是对抗排斥治疗的效果判断和预后评估中作为有价值的指标.

    作者:刘少鸽;李香铁;郝俊文 刊期: 2007年第38期

  • 肾移植术后肾功能延迟恢复原因及术后血液净化的干预作用

    目的:分析肾移植术后常见并发症肾功能延迟恢复的诱因,并观察术后血液净化干预所发挥的临床效应.方法:选择1996-12/2006-12在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科明确诊断为肾移植术后肾功能延迟恢复的患者193例,其中接受尸肾移植192例,活体肾移植1例,均知情同意.根据患者的临床资料,分析术后肾功能延迟恢复的主要原因.除5例因术前安置腹膜透析管继续采用腹膜透析外,其余均选择血液透析治疗,其中35例穿插接受过连续性肾脏替代治疗或血液透析滤过,8例血浆置换2~5次.终止透析的标准为每日尿量>1 500 mL,血肌酐<300μmol/L.分析术后肾功能延迟恢复的原因,观察接受透析治疗后肾功能延迟恢复患者的临床疗效.结果:193例患者全部进入结果分析.①术后肾功能延迟恢复的病因:急性肾小管坏死89例(46.1%),术后早期低血压42例(21.8%),排斥反应37例(19.2%),动静脉吻合口狭窄9例(4.7%),尿路梗阻8例(4.1%),动脉过长扭曲5例(2.6%),环孢素A肾毒性2例(1.0%),髂内动脉粥样硬化斑块阻塞1例(0.5%).②术后肾功能转归:移植肾功能恢复正常者145例(75.1%);术后3个月血肌酐135~300μmol/L 29例(15.3%);>300μmol/L 15例(7.8%);因超急性排斥反应切除移植肾2例(1%),肺部重症感染死亡2例(1%).③术后接受血液透析次数:术后接受血液透析189例,透析1~5次移植肾功能恢复正常20例(13.8%);6~10次41例(28.3%);11~20次82例(56.6%);21~25次2例(1.4%);>25次44例,仅1例恢复正常(0.7%),其余43例患者带肾存活.结论:急性肾小管坏死、术后早期低血压和排斥反应是引起肾移植术后肾功能延迟恢复的主要原因.在肾功能延迟恢复患者确定以血液净化为主的方案后,绝大多数移植肾功能可以恢复.

    作者:陈锦;李黔生;叶锦;靳风烁;蒋小娟;朱恋;祝清清;肖乾燕 刊期: 2007年第38期

  • 肝移植术后神经精神系统并发症:3例回顾性分析及文献复习

    报告2001-03/2004-08在潍坊市人民医院肝胆血管外科收治的3例肝移植术后神经精神病发症患者,其中2例为谵妄样精神障碍,1例出现癫痫及肢体运动障碍,主要给与调整免疫抑制剂药物治疗、及时纠正水电解质紊乱及对症处理.观察术后患者预后情况,并对各病例诊治过程给予回顾性观察.病例1,男,54岁,乙型肝炎肝硬变并大肝癌.有高血压史15年,糖尿病史10年.2001-09-25行背驮式肝移植.术中、术后曾应用甲强龙1 000 mg冲击治疗.术后28 d因高胆红素血症,高钾血症,肝肾功能衰竭临床死亡.病例2,男,47岁,乙型肝炎,肝硬变并巨大肝癌,慢性结石性胆囊炎.有高血压史5年,糖尿病史2年.2001-12-26行背驮式肝移植.术后44 d时有明显的咳嗽、咳黄绿色痰,痰培养有曲霉菌属(50%),给与大扶康治疗效果可.至53 d时,出现嗜睡、精神委靡,54 d时出现神志不清,55 d时出现右侧偏瘫,逐渐昏迷,经脑CT检查证实为脑内出血,后死亡.病例3,男,59岁,乙型肝炎,肝硬化肝萎缩合并右肝小肝癌.2004-08-20日行原位改良经典式肝脏移植手术,无体外静脉转流.术后4 d突发性失语、逐步出现运动功能障碍,吞咽功能障碍,烦躁等情况,并有癫痫发作,经给予苯妥英钠、水合氯醛灌肠、鲁米那钠等治疗后,局灶型癫痫发作、烦躁等症状得到有效控制,但仍有失语、左侧偏瘫.术后5个月脑出血死亡.肝移植术后神经精神病发症发生率较高.而脑出血则是严重的并发症,死亡率很高.术中减少出血,维持血流动力学和内环境的稳定,避免大量的输血及输液对于预防该严重并发症的发生有重要的积极意义.

    作者:李春友;李森;付云强 刊期: 2007年第38期

  • 介入性超声在肝移植术后并发症诊治中的价值

    目的:通过对病例资料的回顾性分析,验证微创介入性超声技术在肝移植术后并发症诊断和治疗中的价值.方法:选择2003-04/2006-11在解放军八一医院应用介入性超声技术诊治原位肝移植术后并发症的患者64例,患者均知情同意.根据病变部位选择合适体位,局部麻醉后,彩超引导佳穿刺径路,用18G穿刺针或自动活检针对病灶进行细胞组织学穿刺活检.通过介入性超声下的影像学变化,对各种原位肝移植术后并发症作出评估诊断及治疗.结果:64例患者全部进入结果分析,无脱落.①超声引导下肝活检28例,穿刺成功率100%,其中排异反应16例.②彩色超声引导下诊断及介入治疗47例,其中腹腔出血3例,经皮经肝胆管引流4例,肝门部及膈下脓肿抽吸引流5例,胆漏置管引流4例,胸腹水置管引流5例,抽吸胸腹水26例.③误诊肝动脉血栓1例.④所有患者介入治疗后并发症症状均有不同改善,无复发.结论:介入性超声对正确诊断及治疗肝移植术后胸腹腔并发症具有重要的临床价值.

    作者:穆红艳;司芩;宫俐俐;仝威;王轩;李增才 刊期: 2007年第38期

  • 小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径干预对葡萄糖代谢的影响

    目的:观察小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径干预对大鼠术后葡萄糖代谢的影响,寻找解决术后胰岛素抵抗的方法.方法:实验于2005-01/2006-08在解放军第四军医大学第二附属医院中心实验室完成.实验分组:96只大鼠随机数字表法分为4组,正常对照组,L-硝基-精氨酸甲酯处理组,L-精氨酸处理组,L-精氨酸+L-硝基-精氨酸甲酯处理组,每组24只.实验干预:建立大鼠小肠部分切除模型,各干预组分别尾静脉注射1 mg/kg L-硝基-精氨酸甲酯、100 mg/kg L-精氨酸处理、0.5 mg/kg L-硝基-精氨酸甲酯+50 mg/kg L-精氨酸处理进行一氧化氮代谢途径干预.正常对照组只注射1 mL生理盐水.实验评估:①给药后2,8,12,24,48 h取血,测定血清中一氧化氮含量及血糖检测.②给药后24 h,48 h,1周后采用胰岛素敏感性实验计算每公斤代谢体质量每分钟代谢葡萄糖的量.结果:96只大鼠均进入结果分析.①血清一氧化氮含量:L-硝基-精氨酸甲酯处理组各时间点血清一氧化氮含量低于正常对照组(P<0.05),而L-精氨酸处理组各时间点血清一氧化氮含量高于正常对照组(P<0.05);L-精氨酸+L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性(P>0.1).②空腹血糖:给药后8,12,24,48 h L-硝基-精氨酸甲酯处理组高于正常对照组(P<0.05).给药后8,12,24,48 h L-精氨酸处理组低于正常对照组(P<0.05);L-精氨酸+L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性(P>0.1).③稳态情况下每千克代谢体质量每分钟代谢葡萄糖的量:L-硝基-精氨酸甲酯处理组显著低于正常对照组(P<0.05),而L-精氨酸处理组则显著高于正常对照组(P<0.05);L-精氨酸+L-硝基-精氨酸甲酯处理组与正常对照组比较差异无显著性(P>0.1).结论:小肠部分切除大鼠术后一氧化氮代谢途径在葡萄糖转运和胰岛素活性方面可能起着重要作用,提示其可能是解决术后胰岛素抵抗的一种方法.

    作者:杜锡林;包国强;赖大年;何显力;王化宁 刊期: 2007年第38期

  • 移植脾组织血管神经生成规律的动态观察

    目的:观察自体脾组织大网膜内移植后,移植脾组织血管神经再生过程中血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体及神经肽Y表达的动态变化,分析自体移植脾组织血管神经生成规律.方法:实验于2004-09/2006-10在解放军第三军医大学基础部外科应用解剖与手术学教研室实验室完成.①选用Wistar大鼠70只,按随机数字表法分为7个时相组,每组10只.②行脾切除自体脾组织大网膜内移植,分别于术后7,14,30,60,90,120,180 d,采用免疫组化血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体、神经肽Y阳性神经纤维抗体染色方法,应用光镜、电镜、图像分析观测自体移植脾组织.结果:70只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①自体脾组织移植术后7 d即有血管长入移植脾组织,180 d再生血管接近正常;术后30 d神经开始再生,180 d趋于正常.②术后7,14 d血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体阳性染色细胞密度迅速升高,60 d达高峰,随后逐渐降低;术后30 d出现神经肽Y阳性神经纤维.术后180 d血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体阳性染色细胞密度趋于正常;术后120,180 d神经肽Y阳性神经纤维广泛分布.结论:自体移植脾组织再生过程中移植脾组织再生血管神经来源于大网膜内的神经.自体移植再生脾组织内血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体表达量早期开始升高,移植脾组织先出现血管再生,后出现神经再生.

    作者:郭光金;张坤;蒋登金;左艳芳 刊期: 2007年第38期

  • 腺苷受体激活对体外培养心肌细胞缺氧再给氧损伤的保护效应

    目的:观察腺苷A1受体激动剂和A2受体激动剂对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/再给氧损伤的影响.方法:实验于2005-09/2006-06在辽宁医学院药理实验室完成.生后2~4 d的SD大白鼠乳鼠260只,以培养的大鼠乳鼠心肌细胞为模型,在造成心肌细胞缺氧/再给氧损伤模型后,观察分别给正常含糖含氧的Hanks液组,缺氧+腺苷A1受体激动剂再给氧组,缺氧+腺苷A1受体激动剂+腺苷A1受体拮抗剂再给氧组,缺氧+腺苷A2受体激动剂再给氧组,缺氧+腺苷A2受体激动剂+腺苷A2受体拮抗剂再给氧组对心肌细胞活力及心肌细胞搏动频率的影响,以及对心肌细胞培养液上清中乳酸脱氢酶含量的影响.结果:腺苷A1受体激动剂可以明显增加心肌细胞的活力,显著提高心肌细胞的搏动频率,使心肌细胞的搏动频率在缺氧/再给氧后明显恢复,还可以使心肌细胞培养液上清中乳酸脱氢酶的含量明显降低.并且这种保护作用可以被腺苷A1受体拮抗剂所拮抗.腺苷A2受体激动剂和A2受体拮抗剂对培养的心肌细胞缺氧/再给氧损伤无明显影响.结论:腺苷受体激活对培养的心肌细胞缺氧/再给氧损伤有保护作用,其保护作用可能是通过激动腺苷A1受体途径来实现的.

    作者:杨育红;王洪新 刊期: 2007年第38期

  • 糖尿病大鼠卵巢组织中细胞色素C、线粒体Ca2+变化与灵芝孢子粉的干预

    目的:以卵巢组织中细胞色素C、线粒体Ca2+和性激素水平为观察指标,观察灵芝孢子粉对2型糖尿病大鼠卵巢组织的保护作用.方法:实验于2006-06/08在佳木斯大学黑龙江省小儿神经康复重点实验室完成.①实验对象:Wistar雌性大鼠50只,随机分为对照组10只,2型糖尿病模型组20只,灵芝孢子粉组20只.②实验方法:大鼠禁食16~18 h,自由饮水,模型组及灵芝孢子粉组大鼠经尾静脉一次性按25 mg/kg注射2%链脲佐菌素,正常对照组尾静脉注射等量柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液.正常饮食喂养2周后,进行糖耐量试验,模型组和灵芝组以糖耐量异常者保留,余去除,并改喂高脂高糖饮食,灵芝孢子粉组另加灵芝孢子粉[250 mg/(kg·d)]持续10周,实验结束前一天再次做糖耐量试验.③实验评估:实验结束后,各组动物均禁食12 h,乙醚吸入浅麻醉,内眦静脉取血待测血清胰岛素.解剖出卵巢,待测线粒体细胞色素C、线粒体Ca2+含量.结果:选用Wistar雌性大鼠50只,结果分析数量每组8只.①葡萄糖耐量试验:实验开始及实验12周时,模型组大鼠均表现出糖耐量异常的变化(P<0.05),1 h血糖增高显著(P<0.05)达到高峰,2 h血糖仍较高;对照组大鼠30 min血糖达到峰值,2 h血糖基本恢复正常.②血清胰岛素和卵巢性激素水平:模型组血清胰岛素明显升高(P<0.05).而灵芝孢子粉组与对照组比较差异无显著性.模型组雌二醇含量明显降低(P<0.05),卵胞刺激素含量、睾酮含量明显升高(P<0.05),而灵芝孢子粉组与对照组比较差异无显著性.③胞浆细胞色素C、线粒体细胞色素C、线粒体钙变化:模型组卵巢组织胞浆细胞色素C含量明显升高(P<0.05),模型组卵巢组织线粒体细胞色素C含量明显降低(P<0.05),模型组卵巢组织线粒体钙含量明显降低(P<0.05);而灵芝孢子粉组与对照组比较差异均无显著性.结论:灵芝孢子粉可降低糖尿病大鼠血清胰岛素、卵巢组织卵胞刺激素、睾酮、胞浆细胞色素C含量,调节卵巢组织雌二醇、线粒体细胞色素C、钙含量,对糖尿病大鼠卵巢组织具有一定保护作用.

    作者:吴英杰;王淑秋;张亚光;康玉明;马小茹;刘君星;梁衍峰;王芳芳 刊期: 2007年第38期

  • 新生大鼠原代肝细胞四氯化碳损伤模型与叶下珠保肝活性成分的提取与初步分离

    目的:采用大鼠原代肝细胞四氯化碳化学性损伤模型,结合四甲基偶氮噻唑蓝比色法的体外药理模型,对传统中草药叶下珠的活性成分进行提取和初步分离,追踪叶下珠保肝护肝的活性单体成分.方法:实验于2006-05/12在浙江大学药学院中药开发及评价重点研究实验室完成.①制备新生大鼠原代肝细胞四氯化碳损伤的药理模型.②叶下珠提取物的制备:采用水、体积分数为0.95的乙醇对叶下珠活性成分进行回流提取.③活性成分的初步分离:依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取;应用AB-8大孔吸附树脂分步洗脱法,即体积分数为0.1~0.9的乙醇洗脱.④采用四甲基偶氮噻唑蓝比色法,通过保护率及增生指数,观察回流提取物、各萃取物及AB-8大孔树脂各洗脱部位对大鼠四氯化碳损伤原代肝细胞的保护作用.结果:①正丁醇萃取物对大鼠四氯化碳损伤原代肝细胞的保护率及其增生指数高于阳性对照槲皮素及其他各萃取物(P<0.05~0.01).②正丁醇萃取物中,体积分数为0.1,0.3,0.5的乙醇洗脱部分对大鼠四氯化碳损伤原代肝细胞具有保护作用,但体积分数为0.1的乙醇洗脱部分保护作用强,显著高于阳性对照槲皮素及其他各处理组(P<0.01),体积分数为0.1乙醇洗脱部分在剂量为200 g/L时,保护率为64.43%,增生指数达到2.952.结论:叶下珠保肝护肝的有效部位为正丁醇萃取物中AB-8大孔吸附树脂体积分数为0.1的乙醇洗脱部分.但叶下珠中保肝的有效单体成分还没有确定,有待进一步实验证明.

    作者:范适;左家哺;易诚;彭国平;杨华;石国荣;饶力群 刊期: 2007年第38期

  • 亲属活体肾移植18例报告

    目的:总结亲属活体肾移植的临床经验,以期提高该技术的安全性及疗效.方法:选择2005-11/2006-12解放军第一七五医院收治的亲属活体肾移植患者18例,均知情同意.受体均为慢性肾小球肾炎;供体年龄24~74岁,17例有血缘关系,另一例为妻子供肾.均行经腰开放手术取肾,左侧供肾15例,右侧供肾3例.术后受体采用环孢素A+霉酚酸酯+激素三联低剂量免疫抑制剂方案.结果:①所有供体在术后10 d左右出院,均无严重并发症且肾功能正常.②16例受体均在术后1~3 d内移植肾功能恢复正常,另2例因供肾迷走血管损伤在术后5 d左右血肌酐下降到200μmol/L,1个月左右稳定在160μmol/L.1例他克莫司仅服0.5~0.75 mg/d,于术后5个月出现急性排斥反应.1例术后2个月出现环孢素A急性肾毒性(血药浓度谷值为343μg/L).2例出现药物性肝炎.结论:亲属活体肾移植术较为安全,排斥反应少,结果满意.免疫抑制剂宜采用低剂量方案.

    作者:谢庆祥;韩聪祥;李金雨;林吓聪;赵力;黄宏伟 刊期: 2007年第38期

  • 人α防御素3前体蛋白对克雷伯菌和大肠杆菌的杀菌作用

    目的:分析α防御素3前体蛋白对于克雷伯菌和大肠杆菌的杀菌效果,为进一步研究人类α防御素3的杀菌机制提供依据.方法:实验于2005-11/2006-09在上海交通大学生命科学技术学院刘建华实验室完成.将α防御素3前体的编码基因克隆到载体pDEST17中,载体转化入大肠杆菌DE3细胞,通过体外诱导及亲和纯化的方法获得α防御素3前体蛋白.根据在不同蛋白浓度下生存下来大肠杆菌和克雷伯菌所占的比例以及导致50%,90%和99%细菌死亡(LD50,LD90和LD99)时人α防御素3前体蛋白浓度来判断前体蛋白的杀菌作用.结果:①在1 L培养基培养条件下,可获得纯化后α防御素3前体蛋白12 mg,复性效率为15%~20%.②蛋白浓度为5,10,15和30 mg/L时,克雷伯菌仔活率分别为50%,33%,10%和4%.蛋白浓度为10,20,30和45 mg/L时,大肠杆菌存活率分别为50%,10%,5%和1%.③克雷伯菌50%和99%致死率的蛋白质浓度为5和35 mg/L.大肠杆菌50%和99%致死率的蛋白质浓度为10 mg/L和45 mg/L.结论:重组纯化的人α防御素3前体蛋白具有有效杀灭大肠杆菌和克雷伯菌的作用.

    作者:周立强;辜臻晟;张毅;刘建华 刊期: 2007年第38期

  • 大鼠小肠移植早期应用趋化因子受体拮抗剂抑制移植物急性排斥反应

    背景:排斥反应的发生是导致小肠移植失败的主要原因,趋化因子RANTES及其受体介导的细胞免疫在急性排斥反应中具有重要作用.目的:观察小肠移植术后早期应用趋化因子受体拮抗剂Met-RANTES对排斥反应的免疫抑制作用及其与他克莫司的协同效应.设计:随机化完全区组设计,观察对照动物实验.单位:解放军第四五一医院普通外科、解放军第四军医大学西京医院胃肠外科实验室及解放军第四军医大学基础部电子显微镜中心.材料:实验于2003-09/2005-03在解放军第四军医大学西京医院胃肠外科实验室完成.以96只SD大鼠为供者,96只Wistar大鼠为受者,施行异基因节段性异位小肠移植.方法:移植后的大鼠以随机化完全区组设计分为4组(n=24):对照组、Met-RANTES组(200 μg/d)、他克莫司组(0.5 mg/(kg·d))及Met-RANTES+他克莫司组(Met-RANTES 200μg/d+他克莫司0.5 mg/(kg·d)).后3组均于移植术后腹腔注射给药,共7 d;对照组移植前后不作任何处理.术后观察移植大鼠的一般状况、存活时间以及免疫细胞浸润情况,并于移植术后3,5,7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=6)进行组织病理学检查,采用免疫荧光染色和激光扫描共聚焦显微镜技术对移植肠RANTES和CD4+,CD8+,CD25+ T淋巴细胞的表达进行连续定量测定.每组剩余6只大鼠作存活时间观察,观察期限为5周.主要观察指标:①各组大鼠移植术后存活时间.②各组大鼠移植肠的病理改变.③各组大鼠移植肠RANTES及T淋巴细胞亚群的表达.结果:移植术后96只Wistar受体大鼠全部进入结果分析.①Met-RANTES组、他克莫司组和Met-RANTES+他克莫司组大鼠平均存活时间显著长于对照组(P<0.01);Met-RANTES+他克莫司组大鼠存活时间长,与Met-RANTES组、他克莫司组差异均有显著性意义(P<0.01).②对照组全部死于急性排斥反应及感染,组织病理学检查显示移植后第3,5,7天分别符合轻、中、重度排斥反应.Met-RANTES组、他克莫司组和Met-RANTES+他克莫司组病理学检查无明显排斥反应征象.③对照组大鼠的移植肠RANTES表达在术后各时段均显著高于其他3组(P<0.01),其动态变化与急性排斥反应的进程成正相关;Met-RANTES组和Met-RANTES+他克莫司组大鼠移植肠RANTES、CD4+、CD8+和CD25+T细胞的表达均低于对照组(P<0.01).结论:Met-RANTES能明显抑制小肠移植急性排斥反应,有效保护移植肠功能,显著延长移植物的存活时间,并可增强小剂量(0.5 mg/(kg·d))他克莫司的免疫抑制作用.

    作者:杨建军;王为忠;付京;徐宏勇;王春梅 刊期: 2007年第38期

  • 前臂外侧皮神经与头静脉营养血管远端蒂复合移植皮瓣的应用解剖

    背景:前臂外侧皮神经营养血管皮瓣适合手部修复,但远端蒂血管缺少具体可操作性的描述,临床应用还比较困难.目的:探讨前臂外侧皮神经-头静脉营养血管远端蒂复合瓣和旋转点下移的解剖学基础.设计:单一样本观察.单位:解放军南京军区福州总医院军区临床解剖学研究中心.材料:实验于2004-01/05在解放军南京军区福州总医院军区临床解剖学研究中心实验室完成.选用30侧动脉灌注红色乳胶成人上肢标本(由解放军南京军区福州总医院军区临床解剖学研究中心提供).方法:以桡骨茎突为观测标志点,重点显微解剖:①前臂外侧皮神经-头静脉下1/3段的营养血管来源、分支分布及吻合.②前臂外侧皮神经-头静脉营养血管与桡骨膜血管的关系.③头静脉浅深交通支.主要观察指标:①前臂外侧皮神经-头静脉营养血管的来源、分支及吻合.②前臂外侧皮神经-头静脉营养血管与邻近骨、皮的血供关系.结果:①在前臂的下1/3段,前臂外侧皮神经-头静脉的营养血管来源:该营养血管来自:桡动脉穿皮支6~11支,外径(0.7±0.3)mm;掌浅支穿皮支2~6支,外径(0.5±0.3)mm;桡骨茎突返支穿皮支一二支,外径(0.8±0.1)mm;鼻烟壶穿皮支一二支,外径(0 6±0.2)mm.在距桡骨茎突上80~15.0 cm,桡动脉肌间隙骨皮穿支1~3支,起始外径(1.1±0.2)mm.骨膜支分布桡骨体部中下段的裸露区,皮支外径(0.8±0.2)mm.②在前臂的下1/3段,前臂外侧皮神经-头静脉的营养血管分布:前述穿皮支发皮支、筋膜支、皮神经-浅静脉营养血管,形成皮神经-头静脉血管链以及深、浅筋膜血管网.结论:前臂外侧皮神经-头静脉营养血管与肌、骨、皮营养血管同源,以桡动脉皮支为蒂前臂外侧皮神经-头静脉营养血管远端蒂复合瓣,旋转轴点在腕关节平面,可用于手部远处组织缺损修复.

    作者:庄颜峰;张发惠;张国栋 刊期: 2007年第38期

  • 聚合酶链反应技术检测后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA表达

    目的:聚合酶链反应方法检测后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA的表达.方法:实验于2006-06/2007-01在解放军总医院老年医学研究所完成.1日龄北京雏鸭6只经腿静脉注射上海麻鸭DHBV阳性血清(中国医学科学院提供)0.2 mL/只,感染7 d后处死动物取血分离血清并取肝组织,同时取同日龄正常鸭6只肝组织作为对照.聚合酶链反应技术检测肝脏、血清中鸭乙型肝炎病毒DNA及共价闭环状DNA的表达.结果:①血清斑点杂交显示模型制备成功,平均病毒吸光度值为0.62±0.12.②琼脂糖凝胶电泳显示,模型肝脏、血清中DHBVDNA均高表达,而共价闭环状DNA仅在模型肝脏表达,正常鸭DNA与共价闭环状DNA均不表达.结论:后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA高表达,可作为临床乙肝药物筛选模型.

    作者:耿淼;杨新波;鲁小杰;陈红艳;王建华;黄正明;李壮 刊期: 2007年第38期

中国组织工程研究杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:中国康复医学会,《中国组织工程研究与临床康复》杂志社