穆红艳;司芩;宫俐俐;仝威;王轩;李增才
目的:预致敏肾移植受者的增加已是目前肾移植成功的重大影响因素.观察人类白细胞抗原氨基酸残基配型及新型免疫抑制剂治疗方案对预致敏患者肾移植术后急性排斥反应的治疗效应,寻找提高移植物存活率的佳方案.方法:选择2003-01/2005-08在首都医科大学附属北京友谊医院行肾移植手术的患者396例,患者均知情同意.分组:①预致敏组(n=32):即术前致敏患者.采用诱导治疗(抗淋巴细胞球蛋白100 mg/d,3~7 d)+三联免疫抑制剂维持治疗方案(他克莫司+霉酚酸酯+激素).②对照组(n=364):未致敏患者.采用三联免疫抑制剂维持用药方案.比较两组患者肾移植术后6个月内急性排斥反应发生率、移植肾功能延迟恢复发生率及移植肾/患者1年存活率,同时分析人类白细胞抗原氨基酸残基配型对移植肾急性排斥反应的影响.结果:396例患者全部进入结果分析.①两组患者肾移植术后急性排斥反应发生率差异无显著性意义(P>0.05).预致敏组患者移植肾功能延迟恢复发生率显著高于对照组(P<0.01).②两组患者1年存活率差异无显著性意义(P>0.05).预致敏组患者1年移植肾存活率低于对照组(P<0.05),如果去除患者死亡因素的影响,两组患者1年移植肾存活率差异无显著性意义(P>0.05).③预致敏组患者人类白细胞抗原氨基酸残基相配率高于对照组(P<0.05).预致敏组中氨基酸残基配型3-4错配患者的急性排斥反应发生率显著高于0-2错配患者(P<0.01),高度致敏患者(移植术前群体反应抗体>50%)急性排斥反应发生率显著高于低度致敏患者(群体反应抗体10%~20%)(P<0.01).结论:供受者之间良好的人类白细胞抗原氨基酸残基分型及采用新型免疫抑制药物治疗方案,对预防及减轻致敏患者移植术后急性排斥反应疗效确切,并可以缩短致敏患者等待移植手术的时间.
作者:唐雅望;杜林栋;田野;张玉海 刊期: 2007年第38期
目的:以病理活检结果为金标准,评估多普勒超声检查对移植肾排斥反应的诊断价值.方法:选择2003-01/2006-12在中国医科大学附属第一医院器官移植科行肾移植并在术后行超声检查的患者176例,均知情同意.①实验分组:根据术后移植肾功能分为2组,移植肾功能不良组78例,其中30例次行病理活检;移植肾功能正常组98例.②实验方法及评估:对患者移植肾行多普勒超声检查,参数选择峰收缩期流速、平均舒张期流速、阻力指数及血管显示率.血管显示率的评估标准(0~5级):0级为肾动脉及其远侧血管未显示;5级为肾各级血管均显示良好.以病理活检结果为金标准,分别选取阻力指数=0.7,0.75,0.8,0.85为诊断界值进行诊断试验.结果:169例患者进入结果分析,脱落7例.①峰收缩期流速、平均舒张期流速不呈正态分布,无法作为肾功能评价指标.30例次病理活检中共有28例次被确诊为排斥反应,急性排斥反应15例次,慢性排斥反应13例次.②肾功能正常组患者中血管显示率5级者占63.30%,4级者占36.73%.肾功能不良组患者中血管显示率4级者占41.03%,3级者占46.15%,2级者占10.30%,1级者占2.60%.③移植肾功能不良组患者阻力指数显著高于移植肾功能正常组(P<0.01).移植肾功能不良组患者移植肾功能恢复后阻力指数显著低于移植肾尚未恢复时(P<0.01),其中99%以上的患者△(阻力指数)≥0.20.④界值阻力指数=0.75的诊断试验的敏感性、特异性和准确性高,均达到100%.结论:当移植肾血管阻力指数升高至0.75以上,特别是同一患者自身对照升高超过0.2以上和或血管显示率低于4级,结合临床表现和生化结果,提示可能出现移植肾排斥反应.
作者:成东华;吴刚;刘树荣;石蕊;李桂臣;刘永锋 刊期: 2007年第38期
目的:观察自体脾组织大网膜内移植后,移植脾组织血管神经再生过程中血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体及神经肽Y表达的动态变化,分析自体移植脾组织血管神经生成规律.方法:实验于2004-09/2006-10在解放军第三军医大学基础部外科应用解剖与手术学教研室实验室完成.①选用Wistar大鼠70只,按随机数字表法分为7个时相组,每组10只.②行脾切除自体脾组织大网膜内移植,分别于术后7,14,30,60,90,120,180 d,采用免疫组化血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体、神经肽Y阳性神经纤维抗体染色方法,应用光镜、电镜、图像分析观测自体移植脾组织.结果:70只大鼠全部进入结果分析,无脱失.①自体脾组织移植术后7 d即有血管长入移植脾组织,180 d再生血管接近正常;术后30 d神经开始再生,180 d趋于正常.②术后7,14 d血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体阳性染色细胞密度迅速升高,60 d达高峰,随后逐渐降低;术后30 d出现神经肽Y阳性神经纤维.术后180 d血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体阳性染色细胞密度趋于正常;术后120,180 d神经肽Y阳性神经纤维广泛分布.结论:自体移植脾组织再生过程中移植脾组织再生血管神经来源于大网膜内的神经.自体移植再生脾组织内血管内皮细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子受体表达量早期开始升高,移植脾组织先出现血管再生,后出现神经再生.
作者:郭光金;张坤;蒋登金;左艳芳 刊期: 2007年第38期
目的:观察早期限饲(出雏后两周隔天饲喂)对肉鸡脂质过氧化作用和抗氧化酶活性产生的长期影响,并通过与后期限饲(屠宰前两周隔天饲喂)比较,观察不同阶段限饲对肉鸡血清、肝脏、胸肌、腓肠肌丙二醛浓度、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响.方法:实验主要于2005-04/12在南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室完成.实验分组:选取1日龄健康快三黄商品肉鸡100羽随机分为2组,对照组60羽,早期限饲组40羽.饲养至50日龄,从对照组随机选取20羽作为后期限饲组.实验处理:①早期限饲组,1~14日龄进行隔日限饲,以后自由采食.②后期限饲组,1~49日龄自由采食,50~63日龄进行隔日限饲.③对照组,全程自由采食.实验评估:记录每周体质量,检测14日龄对照组、早期限饲组,63日龄对照组、早期限饲组和后期限饲组血清、肝脏、胸肌、腓肠肌丙二醛浓度、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性.结果:100羽实验动物均进入结果分析.①14日龄早期限饲组肉鸡血清、肝脏、胸肌和腓肠肌丙二醛浓度、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性与对照组相比差异无显著性.②63日龄时早期限饲组血清丙二醛浓度和谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著高于对照组(P<0.05),肝脏超氧化物歧化酶活性显著低于对照组(P<0.05);后期限饲组血清丙二醛浓度以及超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著高于对照组(P<0.05),而肝脏丙二醛浓度、胸肌超氧化物歧化酶活性显著低于对照组(P<0.05),腓肠肌各项指标与对照组相比差异无显著性.后期限饲组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于早期限饲组(P<0.05).后期限饲组肝脏丙二醛浓度显著低于早期限饲组,超氧化物歧化酶活性显著高于早期限饲组(P<0.05).结论:早期及后期限饲均能增强63日龄肉鸡体内整体水平脂质过氧化作用和抗氧化酶活性,早期限饲对肉鸡脂质过氧化作用和血清抗氧化酶活性的即时影响表现不明显,但其影响可以持续到后期.
作者:庄君英;夏东;杨晓静;许雪萍;倪迎冬;李晓;赵茹茜 刊期: 2007年第38期
目的:观察L-精氨酸对任意型移植皮瓣组织中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶2抑制因子表达的影响,分析L-精氨酸对移植皮瓣保护作用的途径.方法:于2005-06/09在武汉大学人民医院动物实验室完成取材、组织学和组织化学实验;2005-10/2006-02在武汉大学医学院人体解剖与组织胚胎实验室完成图像分析、照相和统计学处理.①实验材料和分组:取Wistar大白鼠79只,按随机数字表法分为3组:正常对照组(n=5),仅接受生理盐水处理,不形成皮瓣,只切开皮肤;皮瓣模型组(n=37),形成皮瓣,接受生理盐水处理;L-精氨酸干预组(n=37),形成皮瓣,接受L-精氨酸处理.②实验评估:肉眼观察皮瓣成活情况,利用HPIAS-2000多媒体彩色病理图像分析系统求出皮瓣平均成活面积率.应用光镜观察皮瓣组织学变化;用免疫组织化学SP法检测基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶2抑制因子抗原.比较各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均吸光度、阳性面积率并作统计学分析.结果:纳入85只大鼠,79只大鼠进入结果分析,皮瓣模型组和L-精氨酸干预组各有3只大鼠死亡.①术后7 d,L-精氨酸干预组皮瓣成活面积率显著高于皮瓣模型组(P<0.01).②术后24 h,72 h皮瓣模型组皮瓣组织中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶2抑制因子呈强阳性表达,L-精氨酸干预组呈弱阳性或阴性,正常对照组呈阴性.③皮瓣模型组皮瓣组织中基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶2抑制因子的平均吸光度及阳性面积率均显著高于L-精氨酸干预组和正常对照组(P<0.01).结论:外源性L-精氨酸可能通过抑制任意型移植皮瓣组织中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶2抑制因子的过度表达,提高任意型皮瓣的成活率.
作者:徐辉文;陕声国;张端莲 刊期: 2007年第38期
目的:分析α防御素3前体蛋白对于克雷伯菌和大肠杆菌的杀菌效果,为进一步研究人类α防御素3的杀菌机制提供依据.方法:实验于2005-11/2006-09在上海交通大学生命科学技术学院刘建华实验室完成.将α防御素3前体的编码基因克隆到载体pDEST17中,载体转化入大肠杆菌DE3细胞,通过体外诱导及亲和纯化的方法获得α防御素3前体蛋白.根据在不同蛋白浓度下生存下来大肠杆菌和克雷伯菌所占的比例以及导致50%,90%和99%细菌死亡(LD50,LD90和LD99)时人α防御素3前体蛋白浓度来判断前体蛋白的杀菌作用.结果:①在1 L培养基培养条件下,可获得纯化后α防御素3前体蛋白12 mg,复性效率为15%~20%.②蛋白浓度为5,10,15和30 mg/L时,克雷伯菌仔活率分别为50%,33%,10%和4%.蛋白浓度为10,20,30和45 mg/L时,大肠杆菌存活率分别为50%,10%,5%和1%.③克雷伯菌50%和99%致死率的蛋白质浓度为5和35 mg/L.大肠杆菌50%和99%致死率的蛋白质浓度为10 mg/L和45 mg/L.结论:重组纯化的人α防御素3前体蛋白具有有效杀灭大肠杆菌和克雷伯菌的作用.
作者:周立强;辜臻晟;张毅;刘建华 刊期: 2007年第38期
目的:了解原发性高血压心脏超声构型的分型与血浆儿茶酚胺水平的关系.方法:实验于2003-02/2005-07在泰安市中心医院完成.选择102例原发性高血压患者,采用超声心动图(Ganau标准)将患者分为:①正常构型组:左室质量指数及相对室壁厚度均在正常范围.②向心性重构组:左室质量指数正常,但相对室壁厚度增加.③向心性肥厚组:左室质量指数与相对室壁厚度均增加.④离心性肥厚组:左室质量指数增加但相对室壁厚度正常.另选择50名年龄相当的健康查体者做为正常对照组.高血压患者停用降压药2周,所有受检者实验前1 d禁用烟、酒、茶及咖啡,禁食12 h,于清晨采静脉血10 mL,以高效液相色谱法检测其血浆中的肾上腺素及去甲肾上腺素含量.结果:152名研究对象全部进入结果分析.向心性重构组、向心性肥厚组和离心性肥厚组的肾上腺素水平、去甲肾上腺素水平均高于正常对照组及正常构型组(P分别<0.01),而且向心性重构组>正常构型组,向心性肥厚组>向心性重构组,离心性肥厚组>向心性肥厚组(P<0.05或0.01).结论:原发性高血压患者血浆肾上腺素、去甲肾上腺素水平的升高促进了左室构型的发展.
作者:杜振兰;张海东 刊期: 2007年第38期
目的:从伦理学角度探讨器官移植面临的困境,探索相应对策.方法:为实现研究目标,首先进行了文献检索,全面系统地回顾、分析、总结上世纪80年代以来国内外有关器官移植的相关技术、政策资料、法律法规及其效果评价等方面的研究成果.登陆国际互联网站和专业期刊网站全文数据库,搜索国家媒体的有关报道及社会学、卫生法学、医学、医学伦理学等领域的相关研究成果.与从事多年器官移植技术工作的专家以及从事多年卫生法学、医学伦理学教学工作的教授进行深入交流和探讨,结合国内器官移植技术的实际情况进行分析.结果:器官移植技术的开展与人们的传统观念、道德、伦理发生冲突,使得该技术的广泛应用陷入诸多困境.活体供者、尸体供者、胎儿供体、死刑犯供体、受体的伦理困境、异种器官移植的伦理困境以及卫生资源分配的困境制约着器官移植医学的发展.结论:应尽快建立器官捐献的激励机制;坚持器官分配的效用和公正原则;确定符合国情的器官移植发展速度和适宜的规模;建立长效的宣传教育机制;建立全国性的或者区域性的器官移植调配中心或网络;建立健全的法律保障机制.
作者:王莲花;杨宣;孙建萍 刊期: 2007年第38期
目的:通过对病例资料的回顾性分析,验证微创介入性超声技术在肝移植术后并发症诊断和治疗中的价值.方法:选择2003-04/2006-11在解放军八一医院应用介入性超声技术诊治原位肝移植术后并发症的患者64例,患者均知情同意.根据病变部位选择合适体位,局部麻醉后,彩超引导佳穿刺径路,用18G穿刺针或自动活检针对病灶进行细胞组织学穿刺活检.通过介入性超声下的影像学变化,对各种原位肝移植术后并发症作出评估诊断及治疗.结果:64例患者全部进入结果分析,无脱落.①超声引导下肝活检28例,穿刺成功率100%,其中排异反应16例.②彩色超声引导下诊断及介入治疗47例,其中腹腔出血3例,经皮经肝胆管引流4例,肝门部及膈下脓肿抽吸引流5例,胆漏置管引流4例,胸腹水置管引流5例,抽吸胸腹水26例.③误诊肝动脉血栓1例.④所有患者介入治疗后并发症症状均有不同改善,无复发.结论:介入性超声对正确诊断及治疗肝移植术后胸腹腔并发症具有重要的临床价值.
作者:穆红艳;司芩;宫俐俐;仝威;王轩;李增才 刊期: 2007年第38期
目的:观察腺苷A1受体激动剂和A2受体激动剂对体外培养乳鼠心肌细胞缺氧/再给氧损伤的影响.方法:实验于2005-09/2006-06在辽宁医学院药理实验室完成.生后2~4 d的SD大白鼠乳鼠260只,以培养的大鼠乳鼠心肌细胞为模型,在造成心肌细胞缺氧/再给氧损伤模型后,观察分别给正常含糖含氧的Hanks液组,缺氧+腺苷A1受体激动剂再给氧组,缺氧+腺苷A1受体激动剂+腺苷A1受体拮抗剂再给氧组,缺氧+腺苷A2受体激动剂再给氧组,缺氧+腺苷A2受体激动剂+腺苷A2受体拮抗剂再给氧组对心肌细胞活力及心肌细胞搏动频率的影响,以及对心肌细胞培养液上清中乳酸脱氢酶含量的影响.结果:腺苷A1受体激动剂可以明显增加心肌细胞的活力,显著提高心肌细胞的搏动频率,使心肌细胞的搏动频率在缺氧/再给氧后明显恢复,还可以使心肌细胞培养液上清中乳酸脱氢酶的含量明显降低.并且这种保护作用可以被腺苷A1受体拮抗剂所拮抗.腺苷A2受体激动剂和A2受体拮抗剂对培养的心肌细胞缺氧/再给氧损伤无明显影响.结论:腺苷受体激活对培养的心肌细胞缺氧/再给氧损伤有保护作用,其保护作用可能是通过激动腺苷A1受体途径来实现的.
作者:杨育红;王洪新 刊期: 2007年第38期
背景:有研究表明,大负荷的运动训练可造成自由基的生成急剧增加这些内源性自由基生成增多以及由此导致的组织细胞及亚细胞的脂质过氧化加强,使组织细胞的结构和功能受损,从而导致运动能力下降.睡眠剥夺也可造成机体氧自由基增加.目的:观察不同睡眠剥夺时间后急性力竭运动大鼠血清丙二醛、谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶活力的变化.设计:随机对照动物实验.单位:湖南师范大学体育学院运动人体科学实验室.材料:选用30只健康雄性10周龄SD大鼠,体质量(220±13)g,清洁级,由湖南农业大学实验动物服务部提供.方法:实验于2006-04/05在湖南师范大学体育学院运动生物化学实验室完成,随机摸球法将大鼠分为5组,空白对照组,单纯运动组,剥夺睡眠24 h组,剥夺睡眠24 h组,剥夺睡眠72 h组,每组6只;空白对照组大鼠正常睡眠、不运动;单纯运动组大鼠正常睡眠、急性力竭运动后处死;剥夺睡眠24,48,72 h组大鼠分别在剥夺睡眠24,48,72 h,进行急性力竭运动后处死.大鼠睡眠剥夺模型采用的是轻柔刺激法;单纯运动组和睡眠剥夺后力竭运动组大鼠依据Bedford建立的大鼠运动模型方案进行运动:跑台坡度为10°,速度为19.3 m/min,所有运动大鼠至力竭(力竭标准:运动末期,大鼠先后滞留跑道后1/3处达3次以上,各种刺激驱赶均无效,停跑后体征表现为呼吸急促,神情倦怠,腹卧位,对刺激反应迟钝,捕捉时,逃避反应较运动前减弱).各组大鼠于实验后麻醉处死,将血液取出,自然凝固后离心,取上清检测丙二醛、谷胱甘肽的含量及超氧化物歧化酶活性.主要观察指标:大鼠血清的丙二醛、谷胱甘肽含量和超氧化物歧化酶活力的变化.结果:纳入大鼠30只均进入结果分析.①单纯运动组丙二醛含量高于空白对照组[(4.37±0.26),(3.35±0.14)μmol/L,P<0.01].剥夺睡眠24,48,72 h组丙二醛含量分别为(4.89±0.20),(5.15±0.12),(7.29±0.42)μmol/L,均高于单纯运动组,其中睡眠剥夺72h组高于其他睡眠剥夺组,差异有统计学意义(P<0.01).②单纯运动组的谷胱甘肽含量低于空白对照组[(83.33±1.73),(93.16±2.44)mg/g,P<0.01],剥夺睡眠24 h组谷胱甘肽含量为(94.98±1.69),高于单纯运动组(P<0.01),剥夺睡眠48,72 h组谷胱甘肽含量分别为(79.89±2.16),(72.38±3.19)mg/g,低于单纯运动组(P<0.05,0.01),睡眠剥夺各时间组差异均有统计学意义(P<0.01).③单纯运动组超氧化物歧化酶活力低于空白对照组[(4.59±0.21),(5.21±0.11)mkat/g,P<0.01],剥夺睡眠24,48,72 h组超氧化物歧化酶活力分别为(5.03±0.15),(3.95±0.19),(3.27±0.31)mkat/g,均低于单纯运动组(P<0.01),但睡眠剥夺48 h和72 h的超氧化物歧化酶明显低于空白对照组(P<0.01);睡眠剥夺各时间组差异均有统计学意义(P<0.01).结论:睡眠剥夺能够引起大鼠血清氧化应激损伤;随着睡眠剥夺时间的加长并做力竭运动使大鼠血清的氧自由基产物堆积越多,清除氧自由基能力越差,对机体的损伤明显.
作者:刘文锋;罗荣保;汤长发;赵向勇;曾盛誉 刊期: 2007年第38期
背景:移植后的急性排斥是肾移植术后的主要并发症,也是导致慢性排斥反应和移植物失功重要的危险因素,因此,了解肾小管泌氢功能能否早期反映移植物的功能情况有重要意义.目的:观察肾移植患者术后肾小管泌氢功能,并进行监测,探讨其在移植物急慢性排斥中的作用.设计:病例-对照观察.单位:解放军济南军区总医院泌尿外科.对象:选择2000-05/2005-06解放军济南军区总医院泌尿外科连续实施肾脏移植26例患者,男16例,女10例;年龄21~58岁,平均35岁.原发病均为慢性肾小球肾炎,慢性肾功能衰竭,全部为尸肾移植.供受者均血型相同、淋巴细胞毒试验阴性.其中1例为第2次移植.所有患者对检测项目知情同意.方法:依据典型的临床表现,彩色多普勒超声及血流变化诊断患者排斥反应,16例患者未发生排斥反应为稳定组,10例发生排斥反应的患者为排斥组,排斥组根据排斥情况分为排斥前期、排斥期及恢复期.对所有患者术前及术后1周起每周1次,连续10周分别以化学清洁玻璃瓶留取晨起中段尿测定尿可滴定酸、NH4+和净酸水平评估肾小管泌氢功能.主要观察指标:两组患者尿可滴定酸、NH4+和净酸水平.结果:纳入患者26例均进入结果分析.排斥反应组排斥前期患者肾小管泌氢功能各检测值显示泌氢功能开始建立,并趋向正常,排斥期患者肾小管泌氢功能检测值均显示明显下降,与排斥前期及稳定组比较均有统计学显著性差异(P<0.01).恢复期患者排斥反应治疗后监测的结果显示泌氢功能恢复较快.肾小管泌氢功能总体连续观察结果显示总体恢复的不均衡性,大部分病例恢复时间从1~10周不等,平均恢复期限约6周,2例10周内未恢复,4例严重排斥者中3例治疗后泌氢功能恢复缓慢.结论:肾小管泌氢功能可弥补血清肌酐不能良好反映肾小管功能的不足,能在连续观察中对移植肾急性排斥反应的诊断,特别是对抗排斥治疗的效果判断和预后评估中作为有价值的指标.
作者:刘少鸽;李香铁;郝俊文 刊期: 2007年第38期
目的 观察经国产肌部封堵器介入封堵治疗室间隔肌部大缺损患者术后的心电图演变,并探讨演变与置入封阻器的关系.方法 患者男,20岁,体质量50 kg,心脏超声心动图示左心室增大,室间隔肌部缺损,缺损口直径8 mm,术前心电图示左前分支阻滞.选择φ12 mm长7 mm国产(先健科技)肌部封堵器,经操纵杆在X线透视下推送至左心室.术后行心电监护7 d,并每天记录心电图;青霉素360万U/d,共3 d;地塞米松10 mg/d,共5 d;口服阿斯匹林100 mg/d,维持6个月;术后1个月复查超声心动图及动态心电图.结果 术后1周内心电图出现了一系列动态演变,包括结性心动过速,左束支传导阻滞,右束支传导阻滞,室性心动过速等,经密切观察和地塞米松治疗恢复正常.术后1个月彩色多普勒超声心动图提示:心脏各腔室大小正常,封堵器位置固定良好无移位,无残余分流,主动脉瓣、三尖瓣无返流.结论 国产肌部封堵器介入治疗室间隔肌部大缺损术后1周内心电图出现了一系列动态演变,其中选择封堵器大小为关键.
作者:程应樟;吴清华;程晓曙;徐劲松;李菊香;胡建新;吴延庆 刊期: 2007年第38期
背景:经典的抗癫痫治疗药物苯巴比妥、苯妥英钠、地西泮等均具有抑制大鼠杏仁核的点燃效应,咪达唑仑是否有此效果尚不十分明确.目的:观察咪达唑仑对大鼠杏仁核点燃发作的抑制及其抗癫痫作用及对小鼠大电休克惊厥模型的影响.设计:分为3个小实验,分别检测咪达唑仑对杏仁核点燃、对自主活动、对惊厥发生率的作用,各小实验采用完全随机,组间对照或动物前后对照.单位:青岛大学医学院.材料:实验于2004-08/2005-03在青岛大学医学院附属医院综合实验室完成.选择雌性Wistar大鼠9只,体质量(250±10)g;昆明种小鼠120只,雌雄不拘,体质量(20±5)g,实验动物由青岛市药品检验所动物中心提供.咪达唑仑由徐州恩华药业生产(批号:20030706,5 g/L).方法:①电极埋置建立大鼠杏仁核点燃模型.随机取点燃大鼠9只,分别以0.25,0.5,1 mg/kg咪达唑仑腹腔注射,采用四道生物信号微机处理系统测定后放电时程和Racine's分级.②将60只小鼠随机分为生理盐水组,苯巴比妥(40 mg/kg)组,咪达唑仑0.5,1.0,1.5 mg/kg组,每组12只.腹腔注射给药,用XZC-4A小动物自主活动仪测定单位时间内的活动数(次数/5 min).③建立小鼠大电休克惊厥模型的影响,以及计数惊厥发生率.主要观察指标:咪达唑仑对大鼠后放电时程和Racine's分级、对小鼠自主活动次数和惊厥发生率的影响.结果:纳入大鼠9只和小鼠120只,全部进入结果分析.①咪达唑仑对大鼠杏仁核点燃发作的影响:咪达唑仑0.5,1.0 mg/kg腹腔注射后,后放电时程和Racine's分级均明显低于用药前(P<0.05~0.01);咪达唑仑0.25 mg/kg腹腔注射后,后放电时程低于用药前(P<0.05),Racine's分级差异不明显(P>0.05).②咪达唑仑对小鼠自主活动的影响:苯巴比妥组和咪达唑仑0.5,1.0,1.5 mg/kg组小鼠自主活动数均明显低于生理盐水组(P<0.01),咪达唑仑0.5 mg/kg组小鼠自主活动数高于苯巴比妥组(P<0.05).③咪达唑仑抗小鼠大电休克实验的结果:苯巴比妥组和咪达唑仑0.5,1.0,1.5 mg/kg组小鼠惊厥发生率均明显低于生理盐水组(P<0.05~0.01),咪达唑仑0.5 mg/kg组小鼠惊厥发生率高于苯巴比妥组(P<0.05).结论:咪达唑仑具有抑制杏仁核点燃的作用,抗癫痫作用显著,具有明确的抗惊厥和镇静作用.
作者:张雪娟;宋力;岳旺;刘然 刊期: 2007年第38期
目的:游离足趾移植是拇指Ⅱ类以上缺损再造术的首选.分析与Ⅱ趾移植相关的足部供血系统的血管走行、分支情况及变异程度,并提出临床应用中为保证手术成功而采取的相应对策.方法:对1978-03/2007-06天津医院手、显微外科收治的91例Ⅱ趾移植再造拇(手)指患者进行回顾性分析,所有病例均为Ⅱs~ⅢB类型拇指缺损,均为择期手术,对治疗方案知情同意.术中遇第一跖背动脉纤细型,采取足背动脉-足底深支-第一跖底动脉的第2套供血系统.当第一跖背动脉走行不定而误伤时,手术继续进行,完整切取Ⅱ趾后,进行第一跖背动脉吻合修复.注意第一跖背动脉至足趾的分支解剖特点,辨清与Ⅱ趾的关系,采取不同的手术对策.结果:91例拇指缺损患者获得了97.8%的成活率及优良的外形与功能恢复,移植术中Ⅱ趾的使用率是100%.Ⅱ趾的血供系统特点:①由足背动脉发出的第二跖背动脉很少见,足背动脉的弓状动脉分支也很少见.②第一跖背动脉起始、走行、口径虽不恒定,但是有章可循.③第一跖背动脉终末交通支及至Ⅱ趾的分支情况分为3型,各型对Ⅱ趾的血供也有其不同特点.结论:全面掌握与Ⅱ趾移植相关的足部供血系统的解剖特点,术中仔细游离并采取相应的处理方法,是保证手术成功的关键.
作者:陆芸;高广伟;陈克俊;张宝贵;阚世廉;孔令震 刊期: 2007年第38期
目的:分离、克隆和测定中国人纤溶酶原Kringle5功能区基因,为进一步研究其功能奠定基础.方法:实验于2002-06/2003-05在广州医学院金域医学检验中心完成.①实验材料:国人胚肝组织取自广州医学院第一附属医院的流产胚胎(取得家属同意,并经广州医学院第一附属医院伦理委员会批准).pET21a(+)载体购自Novagen公司,大肠杆菌BL21(DE3)为医学检验中心保存.引物均由上海生工合成.②实验方法:从国人胚肝组织中提取mRNA,用反转录-聚合酶链反应方法将人纤溶酶原Kringle5的cDNA扩增出来,克隆到pET21a(+)载体中测序.③实验评估:采用紫外分光光度仪和琼脂糖凝胶电泳分析胚肝组织总RNA的抽提结果;经琼脂糖凝胶电泳鉴定Kringle5的反转录-聚合酶链反应扩增结果;pET-Kringle5重组质粒的酶切鉴定;序列测定.结果:①胚肝组织提取总RNA结果:提取的总RNA经紫外分光光度仪测得A260nm/A280nm>1.8,A260nm/A270nm>1.2,表明无蛋白残留;电泳结果显示提取的总RNA有明显的28 S、18 S两条带,说明RNA基本完整.②Kringle5的反转录-聚合酶链反应扩增结果:人Kringle5 cDNA片段长为240 bp,加上引物设计的2个酶切位点,总长度为258 bp,聚合酶链反应产物长度与该长度一致,符合预期结果.③pET-Kringle5重组质粒的构建和酶切鉴定结果:用引物所带的限制性内切酶BamH I、Nde I双酶切,结果有250 bp左右条带出现.④序列测定结果:证实国人纤溶酶原Kringle5功能区基因被成功克隆,序列分析证实为该基因,未发现有基因突变或多态性现象,但第153位核苷酸与文献比较存在碱基替代现象,其组成的密码子由于遗传的简并性,所编码的氨基酸相同,并未造成氨基酸组成的改变.结论:中国人纤溶酶原Kringle5功能区cDNA基因编码序列与国外文献报道的相应序列可能存在碱基替代现象.
作者:甘舜进;胡朝晖;曾征宇;燕启江;陈广南 刊期: 2007年第38期
目的:了解延边地区朝鲜族和汉族居民的脂肪分布特征及其与血压、血脂及血糖的关系.方法:于2006-08-8/17在延边地区九龙和翁声社区随机选择40~60岁朝鲜族和汉族常住居民2 378名进行内脏脂肪率和体脂肪率以及血压、血脂、血糖等生化指标的检测.调查以健康体检形式进行,①内脏脂肪和体脂肪率测定采用日本TANITA株式会社生产的BC-600型体成分计测定,并且按其判定标准确定超过标准者[内脏脂肪率≥15%(男)、≥10%(女),体脂肪率(40~59岁)≥23%(男)、≥36%(女),体脂肪率(≥60岁)≥25%(男)、≥37%(女)].②取清晨空腹(禁食12 h)静脉血,采用日立-7600-010全自动生化分析仪测量血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖等指标.③高血压的诊断标准:收缩压≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)及或舒张压≥90 mm Hg.④血脂异常的诊断标准:总胆固醇≥5.72 mmol/L,三酰甘油≥1.7mmol/L,高密度脂蛋白胆固醇<0.90mmol/L(男)、<1.0mmol/L(女).⑤高血糖的诊断标准:空腹血糖≥6.1 mmol/L.结果:①汉族男性的内脏脂肪率和体脂肪率均值分别为(10.51±3.66)%和(22.70±4.85)%,朝鲜族男性分别为(9.16±3.81)%和(20.28±5.02)%,汉族均高于朝鲜族(P<0.01);汉族女性的内脏脂肪率和体脂肪率分别为(6.22±2.27)%和(35.31±5.65)%,朝鲜族女性分别为(5.88±2.19)%和(34.00±5.72)%,汉族均高于朝鲜族(P<0.01).②汉族男性的内脏脂肪率和体脂肪率超标率分别为12.1%和45.8%,朝鲜族男性分别为7.8%和28.6%,汉族均高于朝鲜族(P<0.05);汉族女性的内脏脂肪率和体脂肪率超标率分别为6.7%和47.9%,朝鲜族女性分别为3.8%和37.3%,汉族均高于朝鲜族(P<0.05).③Logistic逐步回归分析结果表明,内脏脂肪率与民族、性别、年龄、高血压、高三酰甘油血症和高血糖有密切关系;体脂肪率与民族、性别、高血压、高三酰甘油血症、低高密度脂蛋白血症和高血糖有密切的关系.结论:①延边地区汉族居民内脏脂肪率和体脂肪率平均水平及其超标率明显高于朝鲜族.②内脏脂肪率和体脂肪率均与民族、性别、年龄(体脂肪率除外)、高血压、高三酰甘油血症和高血糖相关.
作者:方今女;周巍;金平锡;孙男;熊英环;尹思恩 刊期: 2007年第38期
目的:通过观察鹰嘴豆异黄酮对糖尿病小鼠血糖及氧化-抗氧化效应的影响,探讨其降糖机制.方法:实验于2006-08/10在中国药科大学药理教研室动物实验中心完成.①选用清洁级昆明种小白鼠50只进行造模:小鼠以高糖高脂饲料喂养4周后,按25 mg/kg剂量一次尾静脉注射链脲佐菌素,注射7 d后血糖升高稳定、且随机血糖达16.7mmol/L以上者为造模成功.②随机将造模成功的小鼠50只均分为5组:高血糖模型对照组、二甲双胍治疗组、鹰嘴豆异黄酮提取物低、中、高剂量组,每组10只.在各组给予高糖高脂饲料的基础上,鹰嘴豆异黄酮提取物3个剂量组分别给予25 mg/kg、50 mg/kg、100 mg/kg的受试物,高血糖模型对照组和二甲双胍治疗组分别给予150 mg/kg的蒸馏水和二甲双胍,1次/d,连续4周.③给药2周末和4周末监测空腹血糖,实验结束时于空腹12 h后将小鼠处死,取血和肝脏组织,测定血清及肝组织中丙二醛含量及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性.结果:纳入50只小鼠均进入结果分析.①空腹血糖:给予鹰嘴豆异黄酮提取物2周后,高剂量组与二甲双胍治疗组小鼠血糖值显著低于高血糖模型对照组(P<0.05),且二者间差异无显著性;4周后,高、中剂量组均显著低于高血糖模型对照组(P<0.05),二甲双胍治疗组极显著低于高血糖模型对照组(P<0.01);高、中剂量组与二甲双胍治疗组间差异无显著性.②丙二醛含量:与高血糖模型对照组相比,中剂量组和二甲双胍治疗组血清和肝脏中丙二醛含量均显著降低(P<0.05),高剂量组呈极显著降低(P<0.01),且高剂量组血清中丙二醛含量显著低于二甲双胍治疗组(P<0.05).③超氧化物歧化酶活性:中、高剂量组和二甲双胍治疗组血清和肝脏中超氧化物歧化酶活性均高于高血糖模型对照组(P<0.05).④过氧化氢酶活性:中、高剂量组血清和高剂量组肝脏中过氧化氢酶活性高于高血糖模型对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.05),高剂量组血清和肝脏中过氧化氢酶活性均显著高于二甲双胍治疗组(P<0.05),而二甲双胍治疗组无论血清还是肝脏中过氧化氢酶活性与高血糖模型对照组相比差异无显著性(P>0.05).⑤谷胱甘肽过氧化物酶活性:中、高剂量组血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性均高于高血糖模型对照组(P<0.01);各剂量组肝脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶活性均高于高血糖模型对照组(P<0.01);二甲双胍治疗组血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著高于高血糖模型对照组(P<0.05),但肝脏中活性仍极显著低于3个剂量组(P<0.01).⑥给药后,模型鼠的血糖与血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性的相关系数分别为-0.940 3、-0.946 6和-0.950 3;与肝脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性的相关系数分别为-0.943 6、-0.935 6和-0.963 1.结论:①鹰嘴豆异黄酮提取物有显著的降血糖作用.②鹰嘴豆异黄酮提取物降血糖作用的机制可能与其提高抗氧自由基酶类的活性,保护机体组织免遭过氧化损伤有关.③鹰嘴豆异黄酮提取物在降低过氧化产物丙二醛含量、增强机体抗氧化能力方面的功能优于治疗糖尿病的常用药物二甲双胍.
作者:李燕;巫冠中;张巨松;麻浩 刊期: 2007年第38期
目的:长期冬泳运动是对外界应激刺激的一种适应,观察不同运动时间的冷水游泳对小鼠急性胃溃疡发生情况的影响.方法:实验于2004-04/08在河北师范大学体育学院运动人体科学专业实验室及河北师范大学生命科学学院细胞生物实验室完成,选用雄性小鼠53只,按随机数字表法分为5组,正常对照组、胃溃疡模型组、冷泳1 min组及冷泳2 min组各10只,冷泳力竭组13只.①游泳训练:正常对照组及胃溃疡模型组只抓取不游泳.其余各组均在4℃水中进行相应时间的游泳训练,每周训练6 d,1次/d,共进行12周.冷泳1,2 min组的训练时间分别为1 min/次,2 min/次;冷泳力竭组每次游泳的力竭标准为沉入水下10 s不能上浮.②模型制作:训练结束后各冷泳组及胃溃疡模型组制作无水乙醇型胃溃疡模型,正常对照组灌服等量生理盐水.1 h后麻醉处死各组小鼠,取胃,观察胃黏膜损伤情况,计算以下指标:a溃疡指数:点状出血为1分;线状出血长度<1 mm为2分,3~4 mm为5分;宽度>1 mm,分值×2.全胃分数的总和为溃疡指数.b溃疡抑制率=(模型组溃疡指数-运动组溃疡指数)/模型组溃疡指数×100%.取胃组织匀浆上清液,测一氧化氮及丙二醛含量.结果:实验过程中,胃溃疡模型组因病死亡1只;冷泳力竭组死亡5只,均为训练中溺水窒息死亡.①胃黏膜面大体形态:胃溃疡模型组小鼠的胃溃疡程度重;冷泳力竭组胃溃疡程度与胃溃疡模型组小鼠相近,黏膜损伤较重;冷泳1 min组、冷泳2 min组胃溃疡程度较轻.②胃组织溃疡指数、溃疡抑制率:冷泳1min组、冷泳2 min组小鼠的胃溃疡指数显著低于胃溃疡模型组(25.5±20.4,32.4±24.5,109.1±27.5,P<0.01),冷泳1min组、冷泳2 min组的溃疡抑制率分别为76.63%,70.30%.冷泳力竭组胃黏膜损伤严重,无法计算其溃疡指数.③胃组织一氧化氮、丙二醛含量:其他4组小鼠胃组织的一氧化氮含量均显著低于正常对照组(P<0.01).冷泳1 min组、冷泳2min组基本相近,差异无显著性意义(P>0.05),均高于冷泳力竭组(P<0.05)及胃溃疡模型组(P<0.01).冷泳力竭组与胃溃疡模型组相比,差异无显著性意义(P>0.05).冷泳力竭组、胃溃疡模型组小鼠胃组织的丙二醛含量差异无显著性意义(P>0.05),均显著高于正常对照组(P<0.01).冷泳1 min组、冷泳2 min组含量相近,差异无显著性意义(P>0.05),均显著低于冷泳力竭组(P<0.05)及胃溃疡模型组(P< 0.01).结论:①适量运动时间的冷水游泳能明显抑制小鼠无水乙醇型胃溃疡的形成.②力竭性冷水游泳运动对胃溃疡的形成无明显抑制作用.③在4℃水温中进行1次/d,2 min/次的强迫游泳,持续12周,能达到与1 min/次的冬泳小鼠模型相似的效果,也可以作为冬泳小鼠模型.
作者:李永霞;邢建辉;赵斌 刊期: 2007年第38期
目的:聚合酶链反应方法检测后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA的表达.方法:实验于2006-06/2007-01在解放军总医院老年医学研究所完成.1日龄北京雏鸭6只经腿静脉注射上海麻鸭DHBV阳性血清(中国医学科学院提供)0.2 mL/只,感染7 d后处死动物取血分离血清并取肝组织,同时取同日龄正常鸭6只肝组织作为对照.聚合酶链反应技术检测肝脏、血清中鸭乙型肝炎病毒DNA及共价闭环状DNA的表达.结果:①血清斑点杂交显示模型制备成功,平均病毒吸光度值为0.62±0.12.②琼脂糖凝胶电泳显示,模型肝脏、血清中DHBVDNA均高表达,而共价闭环状DNA仅在模型肝脏表达,正常鸭DNA与共价闭环状DNA均不表达.结论:后天感染鸭乙型肝炎病毒模型中共价闭环状DNA高表达,可作为临床乙肝药物筛选模型.
作者:耿淼;杨新波;鲁小杰;陈红艳;王建华;黄正明;李壮 刊期: 2007年第38期