刘贤兵；蔡晨莉；陈传辉；张伟
目的:探讨大鼠肺成纤维细胞体外培养及急性炎症模型建立的方法.方法:采用胰酶消化法、差速贴壁法,分离、纯化肺成纤维细胞,然后采用H-DMEM培养液进行细胞培养.采用免疫荧光法对所分离的细胞进行鉴定.采用脂多糖(LPS)干预建立成纤维细胞体外急性炎症模型,实验分组:空白组、0.1 μg/mL LPS组、1μg/mL LPS组、10 μg/mL LPS组,并利用细胞增殖/毒性检测试剂(MTT)在干预后3、6、9 h分别测定吸光度(OD)值.结果:成纤维细胞体外培养24 h后,镜下可见组织块周边有长梭型细胞爬出,72 h后生长迅速,4d接近融合.经免疫荧光测定,肺成纤维细胞波形蛋白(vimentin)阳性,CD31阴性.在干预后各时间段中,1 μg/mL LPS组测得的OD值高于其他各组,在1μg/mL LPS组中,干预后6h测得的OD值高于其他各时间段,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:该法可以体外培养出大鼠肺成纤维细胞,用浓度为1 μg/mL的LPS干预体外培养的成纤维细胞6h能建立较为合理的急性炎症模型.
作者：朱天琦；郑声星 刊期： 2012年第02期
木村病(kimura's disease,KD)又称嗜酸性淋巴肉芽肿(eosinophilic hyperplastic lymphogranuloma,ELG),是一种罕见的、病因未明的、多累及头颈部软组织及浅表淋巴结的慢性肉芽肿性病变.现将就诊于本科的1例表现为双侧腹股沟淋巴结肿大的KD病例报告如下,并结合文献进行复习.
作者：许跃明 刊期： 2012年第02期
目的:探讨血浆脑钠肽(BNP)在评估慢性阻塞性肺疾病急性加重(AEC0PD)合并肺心病患者治疗效果中的价值.方法:选取AECOPD合并肺心病失代偿期急诊入院患者共50例,分别统计患者在AECOPD合并肺心病失代偿期(失代偿期组)、AECOPD合并肺心病代偿期(代偿期组)及慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期(稳定期组)血浆BNP水平及心脏结构指标包括肺平均动脉压(PASP)、右室内径(RDVD)、右室流出道内径(RVOT)及左心室射血分数(LVEF)变化.结果:与失代偿期组比,代偿期组患者血浆BNP水平、PASP、RDVD、RVOT值均减低(P＜0.05),LVEF增加(P＜0.05);与代偿期组比,稳定期组患者血浆BNP水平、PASP、RDVD、RVOT值减低(P＜0.05),LVEF增加(P＜0.05).相关性分析结果显示,血浆BNP水平与心脏结构指标均有良好的相关性,其中与PASP、RDVD、RVOT呈正相关,相关系数为0.913、0.860、0.867(P＜0.05),与LVEF呈负相关,相关系数为-0.891 (P＜0.05).结论:血浆BNP水平变化对AECOPD合并肺心病患者的疗效评价具有重要的指导意义.
作者：刘贤兵；蔡晨莉；陈传辉；张伟 刊期： 2012年第02期
目的:提高输尿管阴性结石伴肾中、重度积水的诊治水平.方法:对55例CT明确诊断为输尿管阴性结石的患者,行输尿管镜下钬激光碎石治疗.结果:55例均成功解除梗阻,其中52例为一次性碎石成功,3例结石逆行入肾盂,再行B超定位下体外冲击波碎石(ESWL)术.结石排尽率达90.11％.未出现感染性休克、输尿管离断、黏膜袜状撕脱等严重并发症.术后随访半年,无复发.结论:输尿管镜下钬激光碎石术是治疗输尿管阴性结石伴肾中、重度积水的理想方法之一.
作者：周青英；李宏；黄启敏；孙学斌 刊期： 2012年第02期
目的:探讨使用不同剂量人绒毛膜促性腺激素(hCG)对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)的结局及对卵巢过度刺激综合征(OHSS)发病率的影响.方法:回顾性分析2007年6月至2011年6月在本中心接受IVF-ET的患者319例,采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)/重组FSH (rFSH)/hCG长方案促排卵,按hCG用量分为A组(hCG用量:3 000 U)和B组(hCG用量:5 000 U).观察两组获卵数目以及IVF结局等.结果:A、B两组的获卵数、成熟率、受精率差异均无统计学意义(均P＞0.05),临床妊娠率分别为42.95％和46.47％(P＞ 0.05),中重度OHSS发生率分别为4.69％和5.88％(P＞0.05).结论:超促排卵过程中减少使用hCG剂量对IVF-ET结局无明显影响.
作者：陈霞；赵军招；王佩玉；吴永根 刊期： 2012年第02期
学科建设是高校发展的主线、龙头,是高校实现人才培养、科学研究和社会服务的重要途径.经过几十年的发展,地方医学院校对学科建设的重视程度、投入力度不断增强,学科建设取得的成效也日益增多.“十二五”时期,如何结合学科的特殊性,适应新形势的变化,正视自身的问题,更好更快地发展学科,是地方医学院校建设发展中需要思考的重要问题.
作者：郑飞中 刊期： 2012年第02期
目的:探讨自发性脑出血患者较长时间应用甘露醇是否会加重血肿周围水肿的严重程度.方法:82例自发性脑出血患者出血量均大于3 mL,并于发病24 h内及发病后4～7d行头颅CT扫描.将所有病例根据甘露醇应用情况分为甘露醇治疗不满3d组与甘露醇治疗满3d组,比较两组血肿周围水肿程度的差异有无统计学意义.结果:甘露醇治疗不满3d组血肿周围水肿严重程度为(21.7±12.7) mL,与甘露醇治疗满3d组血肿周围水肿严重程度(27.7±17.8)mL比较,两者差异无统计学意义(P=0.158).结论:对存在颅高压的自发性脑出血患者连续较长时间(＜7 d)应用甘露醇脱水降颅内压,无明显扩大水肿的作用.
作者：吴悦欣；周成业；王小同 刊期： 2012年第02期
目的:观察高糖环境下肾小球系膜细胞白细胞介素18 (IL-18)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的变化及其相互关系.方法:将HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞分别培养在正常葡萄糖(NG组:葡萄糖浓度为5.5 mmol/L)和高糖浓度(HG组:葡萄糖浓度为25 mmol/L)环境中,荧光定量PCR检测各组IL-18和TGF-β1 mRNA的表达量,而后分组加入不同浓度的IL-18(浓度分别为1、10、50、100 ng/dL)和IL-18抗体(浓度为100 μg/dL),荧光定量检测TGF-β1 mRNA的表达量.结果:与NG组比较,HG组细胞IL-18、TGF-β1表达增加,TGF-β1表达水平随IL-18浓度增高而增加,用IL-18抗体阻断IL-18后TGF-β1的表达受到抑制.结论:高糖可导致IL-18、TGF-β1表达升高;TGF-β1表达升高依赖于IL-18,且有剂量依赖性;阻断IL-18可抑制TGF-β1的升高.
作者：潘晓燕；龚小花；杨丽娟；沈飞霞 刊期： 2012年第02期
目的:研究氮磷比(N/P值)对非病毒基因载体聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)介导骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7,BMP-7)基因转染骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,MSC)的影响,优化PEI/DNA复合物制备参数,为其应用于骨组织工程提供实验基础.方法:制备不同N/P值的含BMP-7基因的PEI/DNA复合物,测定复合物的粒径、Zeta电位以及PEI保护DNA抵御DNA酶消化的能力,检测复合物对MSC细胞的毒性以及转染表达BMP-7蛋白量.结果:当N/P值在3-30范围时,形成微粒粒径稳定在100 ～ 150 nm;当N/P值在5～ 30范围时,Zeta电位稳定在30 ～ 40 mV.当N/P值＞3时,随着PEI的增加,PEI对DNA的保护功能增强.当N/P值为7～10时,可以获得高的基因转染效率.当N/P值大于10时,细胞毒性明显增加.结论:N/P值为7～ 10时,含BMP-7基因的PEI/DNA复合物细胞毒性小,转染效率高.
作者：嵇晓利；刘劲松；徐海红；刘传通；张大风；麻健丰 刊期： 2012年第02期
目的:构建HBe( 385-420) -ecdCD40L融合基因真核表达载体,探讨其所翻译的融合蛋白设计的合理性.方法:采用分子生物学技术将HBe( 385-420)基因与CD40L胞外段(ecd)基因进行融合,构建融合基因的真核表达载体;应用生物信息学初步分析融合蛋白的物理化学性质、柔性、抗原性、亲水性、表位以及二级结构等.结果:成功构建真核表达载体.通过分析,HBe (385-420)、ecdCD40L两个基因连接之后亲水性和疏水性未受影响,融合蛋白未出现新的抗原性及表位,连接链( Linker)不影响蛋白质的二级结构及融合蛋白的空间构象.结论从生物软件分析结果可知重组体设计较合理,融合蛋白保留了HBe( 385-420)和CD40L胞外段的生物学活性,为进一步研究该基因奠定了基础.
作者：张欢；吴金明；陈娟；方红龙 刊期： 2012年第02期
目的:探讨低氧对小鼠骨骼肌离体线粒体膜通透性转换孔(MPTP)功能的影响.方法:雄性SPF级C57BL/6小鼠32只,随机分成低氧组和常氧组,每组16只.两组均用差速离心法分离线粒体.低氧组放入低氧环境中,常氧组置于空气中,30 min后用荧光分光光度计检测骨骼肌离体线粒体膜电位,酶标仪检测MPTP开放程度,ELISA法检测细胞色素C(CytC)含量,分光光度计法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽( GSH)、丙二醛(MDA)含量.结果:低氧组骨骼肌离体线粒体膜电位降低,差异有统计学意义(P＜0.05);MPTP开放增加,CytC含量增加,SOD活性降低,GSH含量降低,MDA含量增加,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:低氧可导致小鼠骨骼肌离体线粒体MPTP功能异常,促进MPTP开放、释放CytC,这可能与低氧导致的氧化应激有关.
作者：彭艳艳；孙丽娜；宋菁；金露；王小同 刊期： 2012年第02期
目的:探讨小儿阑尾脓肿合适的治疗方法,观察B超引导下穿刺引流及单纯药物保守治疗的效果.方法:回顾性分析我院2000年1月至2011年3月收治的阑尾脓肿148例,其中B超引导下穿刺引流治疗组12例,非手术治疗组136例,分析患儿住院时间、血常规、CRP恢复时间、B超复查结果及腹痛缓解时间等.结果:经B超引导下穿刺引流治疗见效快,微创,腹痛改善明显,体温下降快,短期内血白细胞、CRP等降至正常.非手术治疗小儿阑尾脓肿亦均获得较好的疗效.结论:小儿阑尾脓肿在诊断明确的前提下应根据患儿具体情况选择合适的治疗方案,当单纯药物治疗无效时,B超引导下穿刺引流可作为首选的治疗方法.
作者：戴丽娜；朱利斌；赵艳民；李仲荣 刊期： 2012年第02期
Hippius和Bengzon[1]于1966年首次报道了精神分裂症病人血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)升高.当时认为CK的升高是精神分裂症的生物学标志,是精神分裂症的内在表现,可能是精神分裂症的致病因素.这一现象的发现激起了精神病学工作者的浓厚兴趣.此后国内外学者纷纷开展了关于CK活性升高与精神疾病、抗精神病药物、精神障碍的各种临床状态等关系的研究,旨在明确在各种精神病过程中和各种治疗中CK升高的临床意义,探讨精神障碍病人肌酸激酶血症的病理生理机制及其预后.
作者：施剑；叶素贞；黄汉津 刊期： 2012年第02期
目的:观察脑缺血再灌注后2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉(2-BFI)对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.方法:采用线栓法建立SD大鼠脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组和用药组(2-BFI 3 mg/kg).于再灌注24 h后断头取脑,用免疫组化染色法检测Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果:用药组Bcl-2阳性细胞数明显高于模型组(P＜0.01),Bax阳性细胞数明显低于模型组(P＜0.01).结论:2-BFI于脑缺血再灌注后立即给药能显著上调Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达.
作者：杨金龙；程朝辉；刘双；韩钊；侯圣陶 刊期： 2012年第02期
目的:评价生大黄联合液囊空肠导管早期肠内营养在胃癌术后治疗中的疗效.方法:分析22例胃癌术后应用生大黄联合液囊空肠导管早期肠内营养(观察组)及13例胃癌术后肠外营养(对照组)两组患者,检测术前及术后第8天总蛋白、白蛋白、前白蛋白和外周血总淋巴细胞计数,临床观察两组患者的肛门排气时间、住院日、不良反应和并发症.结果:两组总蛋白、白蛋白术后第8天与术前相比差异均无统计学意义(P＞0.05),观察组前白蛋白术后第8天与术前相比差异有统计学意义(P＜0.05),但与对照组比差异无统计学意义(P＞0.05),观察组外周血总淋巴细胞计数术后第8天与术前比差异有统计学意义(P＜0.05),但与对照组比差异无统计学意义(P＞0.05),两组肛门排气时间、住院日相比差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:生大黄联合液囊空肠导管早期肠内营养在胃癌术后能加快改善机体营养状况及免疫功能,促进胃肠道功能的恢复,有助于患者的康复.
作者：黄孝王；项海；吴伟；宋靖；项秉该；温江涛 刊期： 2012年第02期
目的:探讨沙眼衣原体主要外膜蛋白多表位(Ct MOMP168)重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Ct MOMP168免疫小鼠的有效免疫剂量,为体内免疫学效应的研究提供实验依据.方法:在重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/Ct MOMP168构建成功的基础上,抽提纯化质粒,分3个免疫剂量组,即50、100和150μg剂量组,同时设PBS对照组.肌肉注射免疫BALB/c小鼠3次,间隔2周,于免疫的0、2、4、6、8周分别尾静脉取血,分离血清,间接ELISA法检测小鼠血清中Ct MOMP多表位特异性抗体IgG的生成量,并于0、1、3、5、7周取小鼠阴道冲洗物,检测Ct MOMP多表位特异性SIgA的生成量,分别进行统计学分析.结果:3个不同免疫剂量组,血清特异性抗体IgG生成量于免疫第4周后均开始随免疫时间延长而逐步增加,150μg剂量组抗体IgG的生成水平高于其他剂量组(P＜0.05).免疫小鼠阴道分泌物中特异性抗体SIgA生成较快,免疫开始后1周,150 μg剂量组SIgA的产生水平高于其他组,7周后SIgA开始下降,但150 μg剂量组抗体水平仍高于其他剂量组(P＜0.05).结论:重组质粒DNA免疫小鼠的特异性抗体生成显示了剂量依赖关系,高剂量(150μg)免疫组小鼠血清特异性抗体IgG和阴道分泌性特异性抗体SIgA生成水平优势显著.
作者：饶品欢；石朝晖；李文姝；吕艳；陈向敏；朱珊丽；张丽芳 刊期： 2012年第02期
小脑后下动脉(posterior inferior cerebellar artery,PICA)动脉瘤约占颅内动脉瘤的0.5％～3.0％,是后循环常见的动脉瘤之一[1-2].PICA与脑干、后组颅神经关系密切,手术难度和风险比较高,术后常发生严重的并发症.2003年6月至2010年6月,本院神经外科采用血管内栓塞治疗21例PICA动脉瘤,效果满意.现将护理体会报告如下.
作者：王红霞；董园园；李冬眉；黄佩雷 刊期： 2012年第02期
目的:比较3种胰岛素强化治疗方案对2型糖尿病的血糖控制作用.方法:68例2型糖尿病患者随机分为3组,21例采用一天两次注射预混胰岛素+二甲双胍或阿卡波糖方案(Mix组),21例实行三短一长多次皮下注射胰岛素方案(MDI组),26例接受胰岛素泵方案(CSII组),待血糖平稳后胰岛素泵方案组改为3+1方案.观察各组患者血糖达到目标值所需要的胰岛素剂量、时间、血糖波动幅度、低血糖的发生情况和胰岛素泵改成多次皮下注射胰岛素方案后达稳态水平所需的胰岛素剂量、时间及血糖波动.结果:①MDI组、CSII组达标时间、血糖波动小于Mix组.②治疗7d时MDI组与CSII组相比全天各时间点血糖水平差异均无统计学意义;而Mix组中餐后血糖明显高于MDI组与CSII组,睡前及夜间2:00血糖则明显低于MDI组.③CSII组低血糖发生率明显低于Mix组和MDI组.④CSII组改为MDI方案后胰岛素用量及血糖波动幅度无明显变化.结论:胰岛素泵和MDI治疗方案控制血糖的效应相似;一天两次预混胰岛素结合药物治疗可以减少胰岛素用量,但低血糖发生率相对较高,血糖波动幅度较大,中、晚餐后血糖控制欠理想.
作者：潘伟；沈飞霞；葛胜洁；邓慧慧 刊期： 2012年第02期
目的:评价NADPH-d的快速染色法在术中诊断先天性巨结肠(Hirschprung's disease,HD)及确定病变段肠管范围的优越性.方法:标本采自确诊HD患儿术中切除的结肠37例,其中男27例,女10例,平均年龄11.6个月.标本分狭窄段、移行段、扩张段,分别用NADPH-d的快速染色法与冰冻切片HE快速染色法进行配对比较研究.结果:NADPH-d染色法操作简单,易掌握,切片不需事先固定,无需水化、脱水等繁琐流程.冰冻切片HE染色法30 min出结果,NADPH-d法能在10 min内出结果,两者阳性率差异无统计学意义(P＞0.05).结论:NADPH-d染色法能在术中快速诊断HD并确定手术中切缘是否已达到正常肠管,且操作流程简单,阳性神经节细胞识别容易,较冰冻切片HE染色法有一定优越性.
作者：朱利斌；张普；黄婷；王永彪 刊期： 2012年第02期
目的:通过对大鼠出生后早期不同时间点心肌细胞有丝分裂指数和细胞周期进程相关基因表达水平的定量检测,确定大鼠出生后心肌细胞丧失分裂增殖能力的时间,为心肌细胞增殖研究奠定细胞学及形态学基础.方法:用qRT-PCR法检测出生后第1、4、7、10、14天,共5个不同时间点SD大鼠心肌细胞中细胞周期进程相关基因的mRNA表达水平.肌钙蛋白T(cTnt)和磷酸化组蛋白3(H3p)单克隆抗体对上述5个时间点的心室肌组织进行双重免疫荧光染色,同时用DAPI显示细胞核,荧光显微镜观察并拍照.结果:①大鼠出生后早期不同时间点心肌细胞有丝分裂指数差异有统计学意义(P＜0.05),生后第4天有丝分裂指数达到峰值.②心肌细胞周期进程相关基因Ccnd1、Ccna2、Ccnb1、Cdk1、CDk2和Cdk4的表达在生后第4天出现高峰,之后呈递减趋势;但是Cdk蛋白抑制基因Cdkn1a、Cdkn1b的表达一直呈递增趋势.结论:①大鼠出生后第10天心肌细胞逐渐丧失分裂增殖能力;②细胞周期相关基因的表达和有丝分裂指数在出生后第4天出现峰值可能与心肌细胞的多核化和肥大性生长有关.
作者：旷文安；黄伟聪；王珏；杨凯；郑哲；孙成超 刊期： 2012年第02期
温州医科大学学报杂志
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